zeste基因增强子同源物2抑制剂GSK126对前列腺癌细胞的作用及机制

目的：探究zeste基因增强子同源物2（ EZH2）抑制剂GSK126对前列腺癌细胞增殖、凋亡及迁移的作用及机制。方法：以磺酰罗丹明B实验考察GSK126对PC-3和DU145细胞增殖的影响，以Annexin V／PI双染法考察GSK126对细胞凋亡的影响，以Transwell实验和细胞划痕实验观察GSK126对细胞迁移和侵袭的影响，以荧光定量PCR检测GSK126对肿瘤相关基因mRNA表达的影响，以蛋白质印迹法检测相关蛋白水平的变化。结果：GSK126仅在50．0μmol／L的高浓度剂量时能有效抑制PC-3和DU145细胞增殖，并促进其凋亡。经GSK126小、中、大剂量（5．0、20．0、50．0μmol／L）处理后，PC-3细胞划痕间距分别为（247．2±24．4）μm、（347．2±19．2）μm、（410．5±18．1）μm，与对照组（171．3±17．8）μm比较差异均有统计学意义（均P＜0．05），且呈一定的量效关系。 Transwell实验结果显示，每视野下侵袭的PC-3细胞数对照组为322．0±17．9，而经GSK126小、中、大剂量处理后分别为198．3±15．4、82．7±6．2、30．2±4．1，与对照组比较差异均有统计学意义（均P＜0．05）。 GSK126处理前列腺癌细胞后，与上皮细胞间质转化相关的E-cadherin基因mRNA表达量上升，N-cadherin、Vimentin基因mRNA表达量下降，但Snail、Fibronectin、VEGF-A基因的mRNA表达无变化。同时，蛋白质印迹法检测结果提示，E-cadherin 的蛋白表达量增加，而 VEGF-A 蛋白表达量无明显改变。DU145细胞上述实验结果相似。结论：GSK126能有效抑制PC-3细胞和DU145细胞迁移和侵袭，其机制与抑制上皮细胞间质转化相关。 GSK126可作为潜在的前列腺癌临床治疗用药。

尼古丁对PDLFs 细胞NF－κB和p53表达的影响

目的探讨尼古丁诱导人牙周膜成纤维细胞（PDLFs）凋亡的信号转导机制。方法用不同浓度的尼古丁作用PDLFs细胞24h后，测定NF—κB、p53、I-κB和Caspase3的基因表达水平。结果尼古丁作用于PDLFs细胞24h后，p53表达水平明显上调，而NF—κB表达水平明显下调，I—κB和Caspase3蛋白表达上调。尼古丁作用于PDLFs细胞24h后，NF－κB的表达水平随着尼古丁剂量的增加而呈逐渐下降（r=0．707、F=33．705、P〈0．01）；I-κB的表达水平随之增加（r=0．964、F=374．883、P〈0．01）。p53的基因表达水平随着尼古丁剂量的增加呈逐渐上调趋势（r=0．957、F=153．377、P〈0．01）。随着尼古丁剂量的增加Caspase3的基因转录逐渐增高（r=0．935、F=318．371、P〈0．01），同时Caspase3蛋白表达也逐渐增高（r=0．677、F=8．459、P〈0．05）。结论尼古丁诱导人PDLFs细胞凋亡是通过NF—κB和p53因子转录活化了Caspase3而激发了凋亡事件的发生。