肿瘤抑制候选基因4及Raf激酶抑制蛋白在不同级别卵巢浆液性腺癌中的表达

目的探讨肿瘤抑制候选基因4(TUSC4)及Raf激酶抑制蛋白(RKIP)在不同级别卵巢浆液性腺癌中的表达情况。方法收集经手术切除并经病理确诊的卵巢浆液性腺癌标本77例,其中卵巢低级别浆液性腺癌25例,卵巢高级别浆液性腺癌52例;另收集经手术切除并经病理确诊的卵巢浆液性囊腺瘤53例及卵巢交界性浆液性囊腺瘤23例;同时选取其他病因手术切除的正常输卵管组织25例及正常卵巢上皮组织25例进行对照。采用免疫组织化学方法对6组标本的TUSC4及RKIP进行检测,并对其阳性表达率进行比较分析。结果 TUSC4在正常卵巢上皮组织、卵巢浆液性囊腺瘤、卵巢交界性浆液性囊腺瘤及卵巢低级别浆液性腺癌、卵巢高级别浆液性腺癌、正常输卵管上皮组织的阳性表达率分别为80.0%、73.6%、60.9%、48.0%、32.7%和32.0%;TUSC4在卵巢低级别浆液性腺癌组织中的阳性表达率显著低于正常卵巢上皮组织(P<0.05);而正常输卵管上皮组织与卵巢高级别浆液性腺癌组织的TUSC4阳性表达率比较差异无统计学意义(P>0.05)。低级别浆液性腺癌组织中TUSC4的阳性表达率低于卵巢浆液性囊腺瘤(χ2=4.91,P<0.05)及正常卵巢上皮组织(χ2=5.56,P<0.05);正常输卵管上皮组织、卵巢高级别浆液性腺癌组织TUSC4的阳性表达率均低于卵巢交界性浆液性囊腺瘤(χ2=4.02、5.22,P<0.05)、卵巢浆液性囊腺瘤(χ2=12.27、17.63,P<0.01)及正常卵巢上皮组织(χ2=11.69、15.14,P<0.01)。RKIP在正常卵巢上皮组织、卵巢浆液性囊腺瘤、卵巢交界性浆液性囊腺瘤、卵巢低级别浆液性腺癌、正常输卵管上皮组织、卵巢高级别浆液性腺癌的阳性表达率分别为100.0%、84.9%、69.6%、64.0%、52.0%和13.5%。卵巢高级别浆液性腺癌组织中RKIP的阳性表达率显著低于正常卵巢上皮组织、卵巢浆液性囊腺瘤、卵巢交界性浆液性囊腺瘤、卵巢低级别浆液性腺癌、正常输卵管上皮组织(χ2=52.06、53.59、23.61、20.59、13.04,P<0.01);卵巢交界性浆液性囊腺瘤组织中RKIP阳性表达率低于正常卵巢上皮组织(χ2=8.91,P<0.01);正常输卵管上皮组织、卵巢低级别浆液性腺癌组织RKIP的阳性表达率均显著低于正常卵巢上皮组织(χ2=15.79、10.98,P<0.01)、卵巢浆液性囊腺瘤(χ2=9.65、4.36,P<0.05)。结论 TUSC4及RKIP均参与了卵巢低级别浆液性腺癌的发病过程,而RKIP亦参与了卵巢高级别浆液性腺癌的发生,且卵巢低级别浆液性腺癌与卵巢高级别浆液性腺癌可能存在不同的分子发病机制。

肿瘤抑制候选基因-7、叉头框转录因子M1、鳞状细胞癌抗原在食管癌中的表达及意义分析

目的探讨长链非编码RNA肿瘤抑制候选基因-7(LncRNATUSC7)、叉头框转录因子M1(Foxm1)、鳞状细胞癌抗原(SCC-Ag)在食管癌中的表达及意义。方法我院收治的78例食管癌患者,根据肿瘤分期分为早中期组(TNM分期Ⅰ~Ⅱ期)32例与中晚期组(TNM分期Ⅲ~Ⅳ期)46例,比较两组LncRNATUSC7、Foxm1、SCC-Ag表达水平,分析LncRNATUSC7、Foxm1、SCC-Ag表达水平与食管癌肿瘤分期的相关性以及对食管癌肿瘤分期评估效能。结果中晚期组LncRNATUSC7水平低于早中期组,Foxm1、SCC-Ag水平高于早中期组(P<0.05)。食管癌患者LncRNATUSC7水平与肿瘤分期呈负相关,Foxm1、SCC-Ag水平与肿瘤分期呈正相关(P<0.05);三项指标评估食管癌肿瘤分期的ROC曲线AUC分别为0.914、0.871、0.795,截断值分别为0.27、1.40、5.15 ng/ml。结论不同肿瘤分期的食管癌患者LncRNATUSC7、Foxm1、SCC-Ag表达水平存在明显差异,且三项指标可有效反映食管癌患者病情进展程度,可用于该病患者病情监测及治疗指导,临床应用价值较高。

青少年甲状腺乳头状癌组织中肿瘤抑制候选基因1基因启动子甲基化及其蛋白的表达

目的：探讨青少年甲状腺乳头状癌（PTC）肿瘤抑制候选基因1（TUSC1）基因启动子区域的甲基化状态及其与蛋白表达的相关性。方法选择40例青少年PTC及其对应的癌旁组织,分别取自2010年7月至2013年12月郑州大学第一附属医院甲状腺手术标本,均经病理证实。男12例,女28例；中位年龄14（10~18）岁。肿瘤淋巴结转移（TNM）分期Ⅰ~Ⅱ期13例,Ⅲ~Ⅳ期27例；病理分级Ⅰ级15例,Ⅱ级25例；淋巴结转移22例阳性,18例阴性。运用甲基化特异性聚合酶链反应（MSP）检测40例青少年PTC及其对应的癌旁组织中TUSC1启动子甲基化状态；采用 Western blot法检测 TUSC1蛋白的表达。结果40例青少年 PTC中, TUSC1启动子区出现甲基化的有24例（60%,24/40例）,在对应的癌旁组织中均未出现基因甲基化（0）,二者比较差异有统计学意义（χ2=34.28,P〈0.05）。青少年PTC中TUSC1启动子甲基化与TNM分期、病理分级及淋巴结转移有关（χ2=4.862、7.111、5.625,P均〈0.05）。 TUSC1蛋白表达的有12例（30%,12/40例）,在对应的癌旁组织中均出现TUSC1蛋白的表达（100%）,二者比较差异有统计学意义（χ2=14.118,P〈0.05）。青少年PTC中TUSC1蛋白的表达与TNM分期、病理分级及淋巴结转移有关（χ2=5.215、6.222、5.079,P均〈0．05）。TUSC1启动子甲基化与蛋白表达呈负相关（r=-0.84,P〈0．05）。结论 TUSC1启动子甲基化是基因失活的重要机制之一,TUSC1蛋白的表达与TNM分期、病理分级及淋巴结转移有关,在青少年PTC的发生及发展中起重要作用。

肿瘤抑制候选基因3在胃癌中的表达及其生物学功能

本研究探讨肿瘤抑制候选基因3（TUSC3）在胃癌组织中的表达并采用小干扰RNA（siRNA）技术下调胃癌细胞株中TUSC3的表达，探讨其影响胃癌细胞增殖、侵袭和转移的生物学功能。一、资料与方法1．病例资料：手术治疗的胃癌患者44例，术前未接受新辅助放化疗，平均年龄（56．8±18．3）岁，男26例，女18例，Ⅰ／Ⅱ期20例，Ⅲ／Ⅳ期24例，肿瘤位于贲门18例，幽门20例，位于胃体6例，术后证实区域淋巴结转移者30例。

原发性肝癌癌组织肿瘤抑制因子候选基因1表达与病理特征的关系

目的观察原发性肝癌癌组织肿瘤抑制因子候选基因1(TUSC1)表达与病理特征的关系。方法纳入2016年10月至2018年10月于我院收治的78例原发性肝癌患者为研究对象,进行回顾性分析。采用实时荧光定量聚合酶链反应,检测癌组织TUSC1基因mRNA表达,并采用Western blot法检测TUSC1蛋白表达。根据TUSC1 mRNA检测结果,将其分为TUSC1 mRNA表达组(55例)及缺失组(23例);按TUSC1蛋白检测结果,将其分为TUSC1蛋白表达组(45例)及缺失组(33例)。观察原发性肝癌患者癌组织及癌旁组织中TUSC1 mRNA及其蛋白表达水平,分析原发性肝癌病理特征与癌组织中TUSC1 mRNA及其蛋白表达水平的关系,并观察TUSC1 mRNA表达与TUSC1蛋白表达的关系。结果原发性肝癌癌组织中TUSC1 mRNA及其蛋白表达水平显著低于癌旁组织(P<0.05)。TUSC1 mRNA及其蛋白表达与原发性肝癌患者性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤直径、肿瘤类型、HBsAg均无明显关系(P>0.05),但中晚期(TNM分期为Ⅲ、Ⅳ期)者TUSC1 mRNA及其蛋白阳性表达率显著高于早期(Ⅰ、Ⅱ期)者(P<0.05),高、中分化者TUSC1 mRNA及其蛋白阳性表达率显著低于低、未分化者(P<0.05),肝内转移者TUSC1 mRNA及其蛋白阳性表达率显著高于肝内无转移者(P<0.05),伴门静脉癌栓者TUSC1 mRNA及其蛋白阳性表达率显著高于不伴门静脉癌栓者(P<0.05)。原发性肝癌患者TUSC1 mRNA表达与TUSC1蛋白表达具有良好一致性(kappa为0.56)。结论原发性肝癌患者癌组织中TUSC1 mRNA及其蛋白表达水平下降,与患者TNM分期、分化程度、门静脉癌栓、肝内转移有关。

外周血DNA TUSC4基因缺失在大肠癌分子筛查及早期诊断中的应用

目的:探讨外周血DNA中肿瘤抑制候选基因4(tumor suppressor candidate4,TUSC4)缺失在大肠癌的筛查与早期诊断中的意义.方法:采集外周静脉血标本238例,分为结肠镜正常组(117例),腺瘤型息肉组(38例)和大肠癌组(83例),应用PCR法检测TUSC4基因表达及缺失情况.同时检测各组血浆CEA、CA19-9水平.结果:结肠镜正常组TUSC4阴性率14.5%,腺瘤型息肉组阴性率44.7%,大肠癌组阴性率77.1%,3组之间均有统计学差异(P=0.000).TUSC4阴性在诊断腺瘤型息肉的敏感度为44.7%(95%CI28.9%-60.5%),特异度85.5%(95%CI79.1%-91.9%),PPV为50.0%(95%CI33.2%-66.8%),NPV为82.6%(95%CI75.8%-89.4%).TUSC4阴性在诊断大肠癌的敏感度为77.1%(95%CI68.1%-86.1%),特异度为85.5%(95%CI79.1%-91.9%),PPV为79.0%(95%CI70.1%-87.9%),NPV为84.0%(95%CI77.4%-90.6%).TUSC4基因缺失与大肠癌发生部位、分化程度及Dukes分期无关.TUSC4阴性在诊断大肠癌时与CEA、CA19-9相比较,其特异度和PPV无统计学差异(P>0.05),其敏感度和NPV明显高于CEA和CA19-9(P=0.000).结论:大肠癌患者外周血DNA中TUSC4基因出现明显缺失,在诊断大肠癌时其敏感度明显高于CEA和CA19-9,在大肠癌的分子筛查和分子诊断中具有一定应用价值.

NAG7基因转染HNE1细胞后下调蛋白质的鉴定及其意义(英文)

NAG7基因是我室克隆的与鼻咽癌相关的肿瘤抑制候选基因 .将NAG7编码框的cDNA片段克隆至pGEM3.1(+ )的表达载体 ,经脂质体转染入HNE1细胞 ,经G4 18筛选 ,并运用PCR技术证实 .建立含NAG7基因稳定转染的细胞系 ,抽提细胞总蛋白质 ,双向凝胶电泳分离蛋白质 ,对表达下调的蛋白质点进行质谱分析 ,获得的肽质指纹经SWISS PROT数据库分析以鉴定蛋白质点 .鉴定出的 7个下调蛋白质包括纤溶酶原、收缩蛋白、Ras 相关蛋白Rab 36及ARF 相关蛋白等 .通过对蛋白质性质和功能的分析 ,发现这些蛋白质参与了细胞信号的转导、蛋白质的转运及细胞代谢等众多事件 .因此 。

乳腺癌TUSC1基因启动子的甲基化及其蛋白表达的相关性

为探讨乳腺癌中TUSC1基因启动子甲基化及其与蛋白表达的相关性。运用甲基化特异性聚合酶链反应及Western blot检测65例浸润性乳腺癌及其对应的癌旁组织中启动子甲基化及蛋白的表达。癌旁组织均未出现TUSC1基因启动子的甲基化,对应的乳腺癌组织中61.5%出现甲基化。癌旁组织TUSC1蛋白均表达,对应的乳腺癌组织29.2%出现蛋白表达。并且甲基化发生率与蛋白表达均与TNM分期及淋巴结转移有关(P<0.05)。TUSC1基因启动子甲基化是基因失活的重要机制之一,与乳腺癌的发生及发展有关。

GLTSCR2对卵巢癌细胞迁移侵袭和p53通路的影响

目的探讨神经胶质瘤肿瘤抑制因子候选区基因2(GLTSCR2)在卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭中的生物学作用。方法GEPIA数据库分析卵巢癌组织中GLTSCR2的表达,实时定量PCR检测卵巢癌细胞(CAOV3、A2780、OVCAR3和SKOV3)中GLTSCR2的表达。分别转染pcDNA3.1(空质粒)和pcDNA3.1-GLTSCR(过表达质粒)至SKOV3细胞和OVCAR3细胞,分为SKOV3-NC组、SKOV3-GLTSCR2组(SKOV3细胞中过表达GLTSCR2)和OVCAR3-NC组、OVCAR3-GLTSCR2组(OVCAR3细胞中过表达GLTSCR2)。CCK-8法、划痕实验和Transwell实验分别检测卵巢癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力。Western blot检测p53、p-p53-Ser15和第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(PTEN)的蛋白表达。结果GLTSCR2在卵巢癌组织和细胞中表达下调。上调GLTSCR2表达后SKOV3-GLTSCR2组SKOV3细胞的增殖、迁移和侵袭能力低于SKOV3-NC组;OVCAR3-GLTSCR2组OVCAR3细胞的增殖、迁移和侵袭能力低于OVCAR3-NC组。另外,SKOV3-GLTSCR2组p53、p-p53-Ser15和PTEN的蛋白水平高于SKOV3-NC组;OVCAR3-GLTSCR2组p53、p-p53-Ser15和PTEN的蛋白水平高于OVCAR3-NC组。结论GLTSCR2可能作为抑癌基因,增强p53信号通路活性,抑制卵巢癌细胞的恶性增殖和迁移侵袭过程。

肿瘤抑制因子候选基因1在肝癌组织的表达及其临床意义

目的探讨肿瘤抑制因子候选基因1（TUSC1）在肝细胞肝癌患者中的表达及其临床意义。方法采用反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）及Western blot法检测TUSC1在58例肝细胞肝癌患者中的表达，分析其表达与患者临床生物学特征的关系。结果TUSC1 mRNA表达水平在肝癌中低于相应的癌旁组织表达量（0.31±0.02比0.98±0.03，P=0.002），并且TUSC1 mRNA的表达量与患者的分化程度、肝内转移及门静脉癌栓（PVTT）等病理因素差异有统计学意义（χ^2=17.030、15.730、18.770，P=0.002、0.001、0.001）。而Western blot结果显示，TUSC1在癌组织中蛋白表达量显著低于癌旁组织（120.21±12.35比1 000.31±30.12，P=0.001），其表达水平与患者的病理分化程度、肝内转移和门静脉癌栓明显相关（χ^2=4.613、4.650、6.470，P=0.032、0.031、0.011）。TUSC1 mRNA的表达与其蛋白表达具有明显的相关性（χ^2=10.084, P=0.001）。结论TUSC1在肝癌中表达降低，与患者病理分化程度、肝内转移和门静脉癌栓相关。

食管鳞癌患者血清中lncRNA-TUSC7、lncRNA-UCA1表达与血管生成拟态的关系及意义

目的探讨食管鳞状细胞癌(ESCC)患者血清长链非编码肿瘤抑制候选基因-7(lncRNA-TUSC7)、长链非编码尿路上皮癌相关基因1(lncRNA-UCA1)表达与血管生成拟态(VM)的关系及意义。方法回顾性分析2020年3月至2021年12月经该院确诊为ESCC的133例患者,按照是否形成VM将其分为有VM组76例及无VM组57例,实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测两组患者血清lncRNA-TUSC7、lncRNA-UCA1表达;分析lncRNA-TUSC7、lncRNA-UCA1表达与ESCC患者不同临床参数之间的关系;Spearman相关系数分析lncRNA-TUSC7、lncRNA-UCA1表达与VM生成之间的相关性;受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析联合lncRNA-TUSC7、lncRNA-UCA1检测对ESCC患者形成VM的预测效能。结果相比于无VM组,VM组患者lncRNA-TUSC7表达显著降低,而lncRNA-UCA1表达显著增高,差异有统计学意义(P<0.05);lncRNA-TUSC7与ESCC患者肿瘤分化程度、临床分期、淋巴结转移情况及是否发生VM具有密切联系(均P<0.05);lncRNA-UCA1与ESCC患者肿瘤分化程度、临床分期、淋巴结转移情况、浸润程度及是否发生VM具有密切联系(均P<0.05);Spearman相关系数显示,lncRNA-TUSC7与VM生成之间呈负相关(r=-0.782,P<0.001),而lncRNA-UCA1与VM生成之间呈正相关(r=0.766,P<0.001)。ROC曲线显示lncRNA-TUSC7、lncRNA-UCA1联合检测的曲线下面积显著高于单一检测(Z=2.428,P<0.05),灵敏度为89.40%,特异度为83.20%,对ESCC发生VM具有较高的诊断效能。结论通过定时监测ESCC患者lncRNA-TUSC7、lncRNA-UCA1表达能够对其是否合并VM做出有效评估,并对及时采取治疗措施预防奠定了可信的生物标志物基础,同时也为日后靶向治疗ESCC合并VM患者提供了可能的治疗靶点,具有较为深远的临床意义。

胶质瘤组织中TSSC1的表达及其对胶质瘤U87细胞生物学行为的影响

目的研究肿瘤抑制可转移候选基因1(TSSC1)在胶质瘤组织中的表达及其对胶质瘤U87细胞生物学行为的影响。方法采用Real time-PCR和Western blot检测80例胶质瘤(Ⅰ期25例,Ⅱ期32例,Ⅲ期15例,Ⅳ期8例)组织和瘤旁组织中TSSC1的表达,采用化学合成的针对TSSC1基因的2个小干扰RNA(siRNA-TSSC1-1和siRNA-TSSC1-2)下调该基因的表达,通过MTT和Transwell法分别检测TSSC1对U87细胞增殖、迁移和侵袭的影响。结果TSSC1在胶质瘤组织中的表达低于相应的瘤旁组织,同时在临床分期Ⅲ期、Ⅳ期中较Ⅰ期表达降低,将siRNA-TSSC1-1和siRNA-TSSC1-2转染入U87细胞后,U87细胞中TSSC1 mRNA和蛋白表达水平都明显降低,细胞增殖能力显著增强,细胞的迁移和侵袭能力显著增强。结论 TSSC1有望成为胶质瘤早期诊断和预测预后的生物分子标志物。

结直肠癌组织中lncRNA TUSC7与miR-1270表达的相关性及临床病理意义

目的:探究结直肠癌(CRC)组织中长链非编码RNA(lncRNA)肿瘤抑制候选基因7(TUSC7)与微小RNA-1270(miR-1270)的相关性及二者与CRC患者预后的关系。方法:lnCAR数据库检索lncRNA TUSC7在CRC和正常结直肠组织中的表达情况。选取2018年6月至2019年1月本院收治的130例CRC患者为研究对象,收集手术切除的CRC和癌旁组织,检测CRC和癌旁组织中lncRNA TUSC7、miR-1270表达水平;分析CRC组织中lncRNA TUSC7表达水平与miR-1270相关性;分析CRC组织lncRNA TUSC7、miR-1270表达水平与CRC临床病理特征和预后关系。生物信息学网站预测lncRNA TUSC7与miR-1270的关系。结果:lnCAR数据库分析显示,lncRNA TUSC7在CRC组织中的表达水平低于正常结直肠组织(P<0.05);qRT-PCR结果显示,CRC组织中lncRNA TUSC7表达水平低于癌旁组织(P<0.05),miR-1270表达水平高于癌旁组织(P<0.05);CRC组织lncRNA TUSC7、miR-1270表达水平与分化程度、淋巴结转移、浸润深度、TNM分期相关(P<0.05);生物信息学分析显示,lncRNA TUSC7与miR-1270存在靶向结合位点;CRC组织中lncRNA TUSC7表达水平与miR-1270呈负相关(r=-0.578,P<0.05);lncRNA TUSC7低表达组、miR-1270高表达组CRC患者累积生存率低于lncRNA TUSC7高表达组、miR-1270低表达组(P<0.05)。结论:CRC组织中lncRNA TUSC7表达下调,miR-1270表达上调,二者呈负相关,为临床诊治CRC、评估CRC患者预后提供新标志物。