蛋白激酶CK2及其抑制剂在肿瘤多药耐药中的研究进展

肿瘤耐药性是临床上化疗失败的主要原因之一。蛋白激酶CK2是一种高度保守、具有广泛生物学活性的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,可磷酸化数百种底物。CK2的激活及过表达在肿瘤发生、发展及耐药过程中起到重要作用,并且CK2通过多种机制和信号通路参与耐药细胞中药物的外排、DNA损伤修复以及药物逃逸反应等,并调控耐药细胞中分子伴侣的活性。本研究主要对蛋白激酶CK2的结构功能及其在肿瘤多药耐药中的作用机制进行综述,并对CK2抑制剂在血液系统肿瘤、乳腺癌、胃癌、肺癌等多种实体瘤中的应用进行了探讨,为临床上开发新的肿瘤耐药分子标志物以及肿瘤的靶向治疗提供新的思路和治疗方案。

左西孟旦辅助治疗充血性心力衰竭的疗效及对肽素、sST2的影响

目的 观察左西孟旦辅助治疗充血性心力衰竭(CHF)的疗效及对肽素、可溶性致癌抑制因子2(sST2)的影响。方法 根据治疗方法不同将2021年11月—2023年10月武警河南总队医院收治的CHF患者70例分为常规组和研究组,各35例。常规组予以常规抗心力衰竭方案治疗,研究组在常规组基础上予以左西孟旦注射液,2组疗程均为14 d。比较2组临床疗效,治疗前后心功能指标、实验室指标,不良反应。结果 研究组总有效率高于常规组(94.29%vs. 74.29%,χ^(2)=5.285,P=0.022)。治疗14 d后,2组左室舒张末期内径、左室收缩末期内径小于治疗前,左室射血分数高于治疗前,且研究组小/高于常规组(P<0.05或P<0.01);2组血清肽素、sST2、白介素-6、超敏C反应蛋白、肿瘤坏死因子-α水平低于治疗前,且研究组低于常规组(P<0.05或P<0.01)。研究组不良反应总发生率(14.29%)与常规组(11.43%)比较,差异无统计学意义(χ^(2)=0.128,P=0.712)。结论 左西孟旦辅助治疗CHF患者的效果显著,能够改善患者的心功能,降低肽素、sST2和炎性因子水平,安全性较高。

利用受体配体亲和技术筛选黄芩中血管紧张素转换酶2和二肽基肽酶4抑制剂

目的筛选中药黄芩中血管紧张素转换酶2(ACE2)和二肽基肽酶4(DPP-4)抑制剂。方法以ACE2和DPP-4作为靶蛋白,利用受体配体亲和超滤和液质联用技术,对黄芩中与ACE2和DPP-4亲和的化合物进行筛选和分析,以筛选具有同时抑制ACE2和DPP-4的化合物。结果从黄芩中筛选出了5,7,2′,6′-4羟基黄酮、5,7,2′,5′-4羟基-8,6′-二甲氧基黄酮、白杨素-7-O-葡萄糖醛酸苷、黄芩素-6-O-葡萄糖醛酸苷、千层纸素A-7-O-葡萄糖醛酸苷、汉黄芩苷、白杨素、千层纸素A,可以同时亲和抑制ACE2和DPP-4,具有潜在的抗新型冠状病毒的作用。结论从黄芩中筛选出与新型冠状病毒肺炎有关的靶蛋白抑制剂,具备潜在开发价值。

冬凌草甲素调节JAK2/STAT3/SOCS-1信号通路对糖耐量异常大鼠胰岛素抵抗的影响

目的探讨冬凌草甲素(Oridonin,Ori)对糖耐量异常(impaired glucose tolerance,IGT)大鼠胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)的影响及作用机制。方法采用高脂饮食喂养联合链脲佐菌素注射法构建IGT大鼠IR模型,大鼠分为正常组(CT组)、IGT模型组(IGT组)、Ori组(10 mg·kg^(-1)·d^(-1))、Ori+Colivelin(COL)组(10 mg·kg^(-1)·d^(-1)Ori+2 mg/kg COL),每组6只。血糖检测仪测定空腹血糖(FPG)、葡萄糖耐量试验(OGTT)2 h血糖(2 hPG),ELISA试剂盒测定空腹胰岛素(FINS)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),血液自动分析仪测定血清胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平,HE染色观察肝脏病理形态,Western blot验证附睾脂肪磷酸化(p)-激活Janus激活激酶2(JAK2)、JAK2、p-信号转导和转录激活因子3(STAT3)、STAT3、p-细胞因子信号传导抑制蛋白1(SOCS-1)、SOCS-1蛋白表达。结果与CT组比较,IGT组大鼠肝脏细胞肿胀,胞浆内可见大量大小不一的脂肪空泡,细胞核被脂肪空泡挤压偏位,且发生炎性细胞浸润,FPG、2hPG、FINS、HOMA-IR、TC、TG、LDL-C、MCP-1、TNF-α以及p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3、p-SOCS-1/SOCS-1蛋白表达水平升高,血清HDL-C水平下降(P<0.05);与IGT组相比,Ori组大鼠肝脏细胞胞浆内脂肪滴及空泡数量明显减少,细胞肿胀有所缓解,未见炎性细胞浸润,FPG、2hPG、FINS、HOMA-IR、TC、TG、LDL-C、MCP-1、TNF-α以及p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3、p-SOCS-1/SOCS-1蛋白表达水平下降,血清HDL-C水平升高(P<0.05);与Ori组相比,Ori+COL组大鼠肝脏脂肪变状况加剧,细胞肿大,血清FPG、2hPG、FINS、HOMA-IR、TC、TG、LDL-C、MCP-1、TNF-α以及p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3、p-SOCS-1/SOCS-1蛋白表达水平升高,血清HDL-C水平下降(P<0.05)。结论Ori对IGT大鼠IR的缓解作用可能与抑制JAK2/STAT3/SOCS-1信号通路激活有关。

存活素和细胞周期素依赖性蛋白激酶抑制因子2B在骨髓增生异常综合征诊断及患者预后评估中的临床价值研究

目的:探讨存活素(Survivin)和细胞周期素依赖性蛋白激酶抑制因子2B(P15INK4B)在骨髓增生异常综合征(MDS)诊断及患者预后评估中的临床价值。方法:选取MDS患者150例为观察组,另选取同期体检健康者150例为对照组,比较Survivin、P15INK4B阳性表达及mRNA相对表达水平。对观察组患者进行为期1年的预后随访,比较不同预后患者Survivin、P15INK4B mRNA相对表达水平。绘制受试者工作特征曲线(ROC)曲线分析Survivin、P15INK4B对MDS的诊断价值,以及对MDS患者不良预后的评估价值。结果:观察组Survivin阳性表达率及mRNA表达水平高于对照组,P15INK4B阳性表达率及mRNA表达水平低于对照组(均P<0.05)。150例MDS患者中50例病死,1年生存率为66.67%(100/150),病死组Survivin mRNA表达水平高于存活组,P15INK4B mRNA表达水平低于存活组(均P<0.05)。Survivin、P15INK4B对MDS均有较高诊断价值,两者联合检测的诊断价值更高(均P<0.05)。Survivin、P15INK4B对MDS患者不良预后均有较高评估价值,两者联合检测的评估价值更高(均P<0.05)。结论:MDS患者Survivin高表达,且与患者预后呈正相关;P15INK4B低表达,且与患者预后呈负相关;两者均可用于MDS的诊断及不良预后的评估,联合检测有更高的价值。

生长分化因子-15和可溶性肿瘤发生抑制蛋白-2及半乳糖凝集素3在射血分数保留型心力衰竭患者中的表达及临床意义

目的探究生长分化因子-15(GDF-15)、可溶性肿瘤发生抑制蛋白-2(sST-2)和半乳糖凝集素(Gal-3)在射血分数保留型心力衰竭(HFpEF)患者中的诊断价值。方法选取2019年1月至12月在新乡医学院第一附属医院心血管内科就诊的HFpEF患者43例,同期于我院住院的经冠状动脉造影排除心血管疾病的患者纳入对照组35例,收集基线资料,ELISA试剂盒测定GDF15、Gal-3及sST-2水平,并对患者相关参数进行相关性分析及ROC分析。结果HFpEF组和对照组患者的性别、左心室射血分数(LVEF)及二尖瓣血流舒张早期与瓣环运动峰值速度比值(E/E’)比较,差异有统计学意义(均P<0.05),HFpEF组患者以女性居多;血清总胆固醇(TC)、氨基末端脑利钠肽前体(NT-proBNP)、Gal-3、sST2及GDF-15水平均高于对照组患者,差异有统计学意义(均P<0.05)。Spearman相关性分析显示,Gal-3与GDF-15、NT-proBNP和E/E’有正相关性(r=0.596,r=0.761,r=0.313,均P<0.05);sST2与GDF15和E/E’之间具有显著正相关性(r=0.514,r=0.446,均P<0.01);GDF-15与Gal-3、s ST2、NT-proBNP和E/E’有显著正相关性(r=0.596,r=0.514,r=0.696,r=0.388,均P<0.05)。ROC分析显示,GDF-15对于诊断HFpEF的AUC值为0.796(敏感度79.1%,特异度80.0%),Gal-3对于诊断HFpEF的AUC值为0.819(敏感度81.4%,特异度85.7%),sST-2对应的AUC值为0.663(敏感度81.4%,特异度48.6%)。结论GDF-15和Gal-3对于HFpEF有着较高的诊断价值,是HFpEF患者的良好诊断及预测因子。

双功能分子白介素-2-粒细胞-巨噬细胞集落生长因子促进树突状细胞在肿瘤免疫抑制环境中的活化效应

目的将本室构建与制备的双功能分子白介素-2-粒细胞-巨噬细胞集落生长因子(IL2-GMCSF)蛋白作用于肿瘤条件培养基(TCM)环境中的树突状细胞系(DC),检测其对DC细胞的活化,探讨其用于活化DC、进行抗肿瘤免疫治疗的可能性。方法制备小鼠黑色素瘤B16F10细胞系的TCM,用以培养DC2.4细胞,同时分别添加IL2-GMCSF、GM-CSF、IL-2、或IL-2与GMCSF组合使用。24 h后,检测DC2.4细胞的吞噬与增殖活性、细胞成熟表型、细胞因子分泌与信号通路活化。结果 DC2.4细胞具有未成熟DC的特征,在TCM培养条件下吞噬能力增强、但增殖活性显著受抑,TCM对DC成熟表型表面标志的表达有一定促进作用,并促进单核与DC来源的趋化因子(MDC),但抑制DC的IL-12分泌。与之相反,IL2-GMCSF主要借助其GM-CSF活性,促进DC2.4细胞的吞噬与增殖活性,并促进DC进一步成熟,且高表达IL-12与MDC。与GM-CSF相比,IL2-GMCSF可诱导更高的炎性NF-κB通路活化水平,而抑制调节性STAT3通路的活化。结论与GM-CSF单独作用相比,IL2-GMCSF可更好地促进肿瘤免疫抑制环境中的DC活化,有望成为有效的临床抗肿瘤治疗手段。

小鼠抗人肿瘤抑制素2(ST2)单克隆抗体的制备及应用

目的 制备针对人肿瘤抑制素2(ST2)的小鼠源性单克隆抗体,并进行功能和应用的初步鉴定。方法 用真核表达的重组人ST2分子免疫BALB/c小鼠,利用常规B细胞杂交瘤技术制备抗ST2单克隆抗体,并鉴定其在Western blot法、免疫组织化学染色和流式细胞术中的应用价值;建立检测可溶性ST2的夹心ELISA,检测热射病患者血清ST2水平;建立ST2萤光素酶报告基因检测系统,检测特异性抗体的中和活性。结果 获得38株分泌小鼠抗人ST2单克隆抗体的杂交瘤细胞株,克隆号分别命名XA325.1~XA325.38。初步筛选鉴定发现可以用于Western blot法、免疫组织化学染色,识别重组表达的纯化蛋白和细胞中表达的ST2;有2株可以应用于流式细胞术,识别细胞表面外源性转染表达的ST2;采用单抗XA325.16包被,搭配XA325.5标记生物素,可以建立检测血清中可溶性ST2的ELISA试剂盒,发现热射病患者血清ST2水平显著升高;XA325.5具有中和活性,可以阻断白细胞介素33(IL-33)的生物学效应。结论 制备小鼠抗人ST2的单克隆抗体,可用于多种免疫学检测技术,XA325.5中和活性抗体具有潜在的临床应用价值。

可溶性肿瘤发生抑制蛋白2和白细胞介素33联合检测在川崎病患儿心血管受损早期诊断中的应用

目的评估可溶性肿瘤发生抑制蛋白2(s ST2)及白细胞介素33(IL-33)在川崎病(KD)患儿心血管受损中的应用价值。方法选择湖南省人民医院儿科2013年12月至2017年1月入院的282例KD患儿,其中心血管受累组35例,心血管未受累组247例,另外随机选取50例健康儿童作为对照组。分别检测3组儿童的s ST2和IL-33血浆水平,分析KD患儿冠状动脉受损时s ST2、IL-33和常规炎性指标C-反应蛋白(CRP)、红细胞沉降率(ESR)、白细胞计数(WBC)的变化及相关性,对数据进行统计学分析。结果心血管受累组的s ST2和IL-33血浆水平明显高于心血管未受累组和对照组(P<0.05)。心血管受累组、心血管未受累组CRP、ESR和WBC显著高于对照组(P<0.05),但心血管受累组、心血管未受累组之间CRP、ESR和WBC差异无统计学意义(P>0.05)。静脉注射免疫球蛋白治疗后,心血管受累组s ST2、IL-33水平明显下降(P<0.05),而心血管未受累组s ST2、IL-33水平无明显变化(P>0.05)。Pearson相关分析显示,KD患儿的s ST2、IL-33水平均与超声心动图Z值呈正相关。Logistic回归分析显示,s ST2、IL-33均为KD患儿心血管损伤的独立危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析显示,s ST2、IL-33对KD心血管受损的预测具有较高的诊断价值。结论 KD患儿s ST2、IL-33血浆水平与心血管受损的程度相关,对s ST2和IL-33水平进行分析有助于评估KD患儿的心血管损伤程度及判断预后。

可溶性肿瘤抑制素2与射血分数中间值心力衰竭患者预后的关系

目的:探讨可溶性肿瘤抑制素2(sST2)与射血分数中间值心力衰竭(HFmrEF)患者预后的关系。方法:入组188例慢性HFmrEF患者,测定其血浆sST2浓度,随访1年,观察其全因死亡和心力衰竭(HF)再住院的发生与血浆sST2浓度的关系。结果:HFmrEF患者平均年龄为66岁,51%为女性,平均血浆sST2浓度为34.47μg/L。在随访1年周期内,31例患者(16%)死亡,58例患者(31%)因HF加重而再次住院。血浆sST2浓度越高,患者入组时心率越快,BNP和cTnI水平越高(P均<0.05)。随访1年发现,血浆sST2浓度越高,患者全因死亡和HF再住院发生率越高(分别为Log rank P=0.04,Log rank P<0.001)。通过Cox回归分析发现,血浆sST2浓度是患者全因死亡和HF再住院发生的危险因素(分别为P=0.026,P<0.001)。结论:HFmrEF患者的基线血浆sST2浓度是其1年内全因死亡和HF再住院事件发生的独立危险因素。

SGLT-2抑制剂治疗STEMI患者PCI术后合并心力衰竭的效果观察

目的 探讨早期应用钠-葡萄糖协同转运蛋白2(SGLT-2)抑制剂联合标准治疗对ST段抬高型心肌梗死(STEMI)经皮冠状动脉介入(PCI)术后合并心力衰竭患者再住院的影响,为PCI术后早期新药干预提供循证依据。方法 采用回顾性队列研究方法,收集2019年1月至2023年1月新疆维吾尔自治区人民医院收治的STEMI PCI术后合并心力衰竭的患者。将以SGLT-2抑制剂联合标准治疗的78例患者纳入研究组,92例予以标准治疗者纳入对照组,比较2组患者治疗前后心功能变化、临床疗效以及心力衰竭再住院率。结果 治疗前后2组患者的左室舒张期内径、左室收缩期内径比较,差异均无统计学意义(P均> 0.05)。研究组治疗后B型利钠肽、左心室射血分数(LVEF)及治疗前后LVEF差值优于对照组,差异均有统计学意义(P均<0.05)。研究组与对照组因心力衰竭再住院发生率分别为15.4%和32.6%,差异有统计学意义(P <0.05)。多因素Cox回归分析显示,未服用SGLT-2抑制剂的标准治疗患者的因心力衰竭再住院风险比服用SGLT-2抑制剂的患者高1.235倍[HR(95%CI)=2.235(1.094~4.563),P <0.05]。结论 SGLT-2抑制剂联合标准治疗能降低STEMI PCI术合并心力衰竭患者因心力衰竭再住院风险。

2型糖尿病患者血清C1q肿瘤坏死因子相关蛋白5、脂联素水平与颈动脉粥样硬化关系研究

目的:探讨2型糖尿病(T2DM)患者血清C1q肿瘤坏死因子相关蛋白5(CTRP5)、脂联素(APN)水平与颈动脉粥样硬化(CAS)的关系。方法:选择T2DM患者96例为观察组,选择体检健康者108例为对照组。采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清CTRP5、APN水平。根据超声检查将T2DM患者分为CAS组和无CAS组,并比较两组一般资料及血清生化指标。分析T2DM患者发生CAS的影响因素,并进行相关性分析。结果:观察组血清CTRP5水平高于对照组,APN水平低于对照组(均P<0.05)。T2DM患者中,40例出现CAS,56例无CAS。CAS组患者年龄、空腹血糖(FPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、CTRP5水平较无CAS组升高,APN水平较无CAS组下降(均P<0.05)。HbA1c、TG、LDL-C、CTRP5为CAS发生的独立危险因素,APN是CAS的独立保护因素(均P<0.05)。血清CTRP5与HbA1c、TG、LDL-C水平呈正相关,血清APN与HbA1c、TG、LDL-C水平呈负相关(均P<0.05)。结论:T2DM患者发生CAS后CTRP5水平升高,APN水平下降,CTRP5为CAS发生的独立危险因素,APN为CAS发生的独立保护因素。

促甲状腺激素抑制疗法对甲状腺癌术后患者预后及癌周组织TIPE2、STAT3表达的影响

目的探讨促甲状腺激素抑制疗法(TSHIT)对甲状腺癌手术患者预后的影响,及对切除癌组织周围组织中肿瘤坏死因子诱导蛋白8样蛋白2(TIPE2)、信号转导子和转录激活因子(STAT3)表达的影响。方法选择88例甲状腺癌患者为研究对象。所有患者均行手术切除治疗,根据术后是否采用TSH抑制疗法将其分为对照组(47例)和观察组(41例)。对照组采用甲状腺激素替代疗法,观察组采用促甲状腺激素抑制剂疗法。比较2组患者入组前、入组3个月、6个月后切除癌组织周围组织中TIPE2阳性细胞表达率、STAT3表达阳性率情况,比较2组患者入组前、入组后3个月、6个月血清游离甲状腺激素(FT4)、血清游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)水平,比较2组患者入组后6个月、12个月、24个月、36个月肿瘤复发、转移率。结果 2组患者入组前年龄、性别、体重、体质量指数(BMI)、肿瘤病理类型、肿瘤分期、手术方式、血清FT3、FT4、切除肿瘤周围组织TIPE2、STAT3表达阳性率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。2组患者入组治疗3个月后、6个月后,观察组切除癌组织周围组织中TIPE2阳性细胞表达率高于对照组(P<0.05),STAT3表达阳性率明显低于对照组(P<0.05);入组3个月、6个月对照组患者甲状腺激素T3、T4均低于观察组(P<0.05)。入组6个月、12个月2组患者肿瘤复发率或(和)转移率比较,差异无统计学意义(P>0.05);入组24个月、36个月后,观察组肿瘤复发率或(和)转移率低于对照组(P<0.05)。结论 TSH抑制疗法对甲状腺癌手术患者术后甲状腺功能的稳定作用明显优于甲状腺激素替代疗法,并能有效抑制切除癌组织周围组织中STAT3的阳性表达率,提高TIPE2阳性细胞表达率。TSH抑制疗法对维持患者术后治疗效果,提高患者预后具有较高的临床价值。

卵巢浆液性肿瘤组织中转导蛋白β样1X相关蛋白1、睾素2表达对病人的预后价值

目的探究卵巢浆液性肿瘤组织中转导蛋白β样1X相关蛋白1(TBL1XR1)、睾素2蛋白表达水平及其与预后的关系。方法选取2015年4月至2017年4月南通大学附属肿瘤医院102例卵巢浆液性癌病人(恶性组),50例卵巢交界性浆液性肿瘤病人(交界组),48例卵巢良性浆液性肿瘤病人(良性组)。免疫组织化学法检测组织中TBL1XR1、睾素2蛋白表达。实时荧光定量PCR检测血清TBL1XR1、睾素2 mRNA表达水平。Kaplan-Meier分析TBL1XR1、睾素2蛋白不同表达情况与生存时间关系。Cox回归模型分析恶性组病人不良预后影响因素。受试者操作特征曲线(ROC曲线)分析血清TBL1XR1、睾素2 mRNA对恶性组不良预后预测价值。结果恶性组TBL1XR1、睾素2蛋白高表达率高于交界组,交界组又高于良性组(P<0.05)。恶性组、交界组、良性组血清TBL1XR1(2.27±0.58,1.41±0.37,1.06±0.13)、睾素2 mRNA表达水平(2.66±0.67,1.58±0.40,1.09±0.15)逐次降低(P<0.05)。FIGO分期为Ⅲ~Ⅳ期、淋巴结转移及组织学分级为高级别TBL1XR1、睾素2蛋白高表达率高于Ⅰ~Ⅱ期、淋巴结无转移及低级别(P<0.05)。生存分析显示,TBL1XR1、睾素2蛋白高表达组5年累积生存率分别低于TBL1XR1、睾素2低表达组(P<0.05)。Cox多因素回归分析,FIGO分期Ⅲ~Ⅳ期、淋巴结发生转移、组织学分级为高级别、TBL1XR1高表达、睾素2高表达是卵巢浆液性癌病人不良预后危险因素(P<0.05)。恶性组死亡病人血清TBL1XR1(2.65±0.61比1.82±0.54)、睾素2 mRNA表达水平(3.10±0.76比2.15±0.57)高于生存病人(P<0.05)。ROC曲线结果显示,血清TBL1XR1、睾素2 mRNA预测恶性组病人不良预后的曲线下面积(AUC)都为0.84;二者联合预测不良预后的AUC为0.94,优于TBL1XR1、睾素2 mRNA单独预测(Z=2.24、P=0.025,Z=2.17、P=0.030)。结论卵巢浆液性癌组织及血清TBL1XR1、睾素2均为高表达,与FIGO分期、淋巴结转移、组织学分级及不良预后密切相关,血清TBL1XR1联合睾素2具有较高的预后预测价值。

晕清降压方介导JAK2/STAT3通路改善肥胖性高血压瘦素抵抗的实验研究

目的探讨晕清降压方对痰瘀互结型肥胖性高血压模型大鼠降压减重的影响及可能作用机制。方法60只SD雄性大鼠随机选取8只为正常对照组,其余大鼠采用小剂量链脲佐菌素+高盐高脂饲料喂养+慢性束缚应激构建痰瘀互结型肥胖性高血压模型,按随机数字表法将造模成功的40只大鼠分为模型组、替米沙坦组、晕清降压方低、中、高剂量组,每组8只。晕清降压方低、中、高剂量组分别予晕清降压方10、20、40 g/(kg•d)灌胃;替米沙坦组予替米沙坦片3.5 mg/(kg•d)灌胃;正常对照组与模型组予蒸馏水10 mL/(kg•d)灌胃,每日1次,连续给药4周。测定各组血压、体质量;酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清瘦素(leptin,Lep)、血清血管紧张素II(angiotensinII,AngII)水平。蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测下丘脑组织磷酸化Janus激酶2(phosphorylated Janus kinase 2,p-JAK2)/Janus激酶2(Janus kinase 2,JAK2)、磷酸化细胞信号传导与转录活化因子3(phosphorylated signal transducers and activators of transcription factor 3,p-STAT3)/细胞信号传导与转录活化因子3(signal transducers and activators of transcription factor 3,STAT3)、细胞因子信号传导抑制蛋白3(suppressor of cytokine signaling 3,SOCS3)蛋白表达;实时PCR法检测下丘脑组织血管紧张素II受体(angiotensin type 1 receptor,AT1R)、瘦素受体(leptin receptor,LepR)mRNA表达水平。免疫组化检测大鼠下丘脑LepR、AT1R蛋白表达水平。结果(1)与正常对照组比较,模型组体质量、血压显著升高(P<0.05);血清Lep、AngII含量显著升高(P<0.05);Western Blot显示p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3蛋白表达显著下降(P<0.05),SOCS3蛋白表达显著升高(P<0.05);实时PCR与免疫组化均显示LepR的表达下降(P<0.05),AT1R表达升高(P<0.05)。(2)与模型组比较,替米沙坦组体质量、血压均降低(P<0.05),p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3、SOCS3无统计学差异(P>0.05),实时PCR与免疫组化显示LepR表达无统计学差异(P>0.05),AT1R表达下降(P<0.05);晕清降压方低、中、高剂量组体质量、血压均降低(P<0.05),Lep、AngII血清含量水平降低(P<0.05);p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3蛋白表达升高,SOCS3蛋白表达下降(P<0.05);实时PCR与免疫组化显示LepR的表达升高(P<0.05),AT1R表达下降(P<0.05),且改善程度与中药浓度呈正相关。(3)与替米沙坦组比较,晕清降压方低、中、高剂量组体质量降低(P<0.05),晕清降压方高剂量组降压效果无明显差异(P>0.05);晕清降压方低剂量组Lep升高(P<0.05),晕清降压方高剂量组Lep降低(P<0.05),晕清降压方中剂量组Lep无统计学差异(P>0.05);晕清降压方低、中剂量组AngII升高(P<0.05),晕清降压方高剂量组AngII无统计学差异(P>0.05)。Western Blot显示晕清降压方低、中、高剂量组p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3蛋白表达显著升高(P<0.05),SOCS3蛋白表达降低(P<0.05),实时PCR与免疫组化显示晕清降压方低、中、高剂量组LepR均升高(P<0.05),而晕清降压方高剂量组AT1R无显著差异(P>0.05)。结论晕清降压方可减轻痰瘀互结型肥胖性高血压模型大鼠体质量、降低血压,其机制可能通过调节JAK2/STAT3信号通路,与降低血管紧张素II水平、改善下丘脑瘦素抵抗有关。

黄芩素通过调节M2型巨噬细胞来抑制肝细胞癌的增长机制

目的探讨黄芩素对小鼠肝癌细胞和小鼠巨噬细胞共培养的调控作用和抗肿瘤作用。方法体外实验将小鼠肝癌细胞H22和小鼠巨噬细胞RAW264.7,随机分为空白组和不同浓度梯度黄芩素给药组(5、10、20、40、80 mg·L^(-1)),CCK-8法检测细胞活性;两种细胞用6孔板的Transwell小室共培养48 h,随机分组成空白组,模型组,低、中、高黄芩素组(10、20、40 mg·L^(-1))并进行细胞划痕和侵袭实验,ELISA试剂盒检测TNF-α和IL-10因子水平,Western blot法检测CCNA2和相关蛋白表达水平。体内实验建立H22皮下瘤模型并随机分为空白、阳性、模型和给药组,统计小鼠脾脏、胸腺和肿瘤指数,IHC和Western blot法检测肿瘤组织CCNA2和巨噬细胞相关指标表达水平。结果不同剂量的黄芩素对H22有抑制效果,对M0型的RAW264.7无明显细胞毒性;共培养后M0型RAW264.7细胞形态发生改变,黄芩组TNF-α升高IL-10下降;黄芩素可抑制M2型巨噬细胞的侵袭和转移;黄芩素组的Arg1、p-p38/p38、p-stat3/stat3、N-cadherin、CCNA2明显下降,Inos和E-cadherin明显上升;给药组的CCNA2、CD206表达明显下降,CD86表达明显上升。结论黄芩素通过调控M2型巨噬细胞相关信号通路,来逆转M2型巨噬细胞极化和促癌功能,并抑制M2型巨噬细胞迁移和侵袭。

前列腺素E2与腺苷协同抑制肿瘤浸润淋巴细胞活性的作用

肿瘤免疫过继治疗是近年来肿瘤免疫治疗的研究热点之一，主要是从肿瘤患者中分离免疫活性细胞，在体外进行扩增和功能鉴定，然后回输给患者。肿瘤浸润性淋巴细胞（TIL）是从肿瘤组织中分离出来的淋巴细胞，经离体培养，由IL-2诱导而成，具有特异性杀伤肿瘤的活性，其主要来源为手术切除所获得的实体肿瘤组织和浸润淋巴结等。

EZH2在肿瘤中的作用及其抑制剂的研究进展

Zeste增强子同源物2(enhancer of zeste homolog 2,EZH2)的高表达与肿瘤发生、发展、浸润、转移和临床不良预后密切相关。EZH2通过多梳抑制复合体2(polycomb inhibition complex 2,PRC2)依赖的H3K27甲基化或非组蛋白甲基化、不依赖PRC2的非组蛋白甲基化、直接的蛋白-蛋白相互作用等多种机制激活下游基因,在肿瘤相关基因的转录抑制和肿瘤发生发展调控中起着至关重要的作用。因此,EZH2被认为是一个很有前景的肿瘤治疗靶点。目前,针对EZH2的小分子抑制剂的开发和临床试验已成为一个突出的研究领域。本文综述了EZH2的功能及其调控机制,并重点介绍了热点抑制剂的最新进展,旨在为EZH2及其抑制剂的进一步研究和应用于各种癌症治疗提供参考。

血清信号转导抑制因子3、β防御素2对胸部创伤并发细菌感染诊断价值研究

目的探讨血清细胞因子信号转导抑制因子3(SOCS3)、β防御素2(HBD2)对胸部创伤并发细菌感染的诊断价值。方法选取自2021年7月至2023年12月收治的胸部创伤(包括以胸部创伤为主的多发伤)患者152例为创伤组,并根据其是否并发细菌感染分为感染组(n=53)和无感染组(n=99),另选取同期在本院进行健康体检的志愿者152例为健康组。采用酶联免疫吸附法检测血清SOCS3、HBD2水平;采用Pearson相关分析感染组血清SOCS3与HBD2水平的相关性;采用多因素Logistic回归分析(逐步向前法)影响胸部创伤患者并发细菌感染的因素;采用受试者工作特征曲线分析血清SOCS3、HBD2对胸部创伤患者并发细菌感染的诊断价值,并采用Z检验比较其曲线下面积(AUC)。结果创伤组血清SOCS3、HBD2水平明显高于健康组,差异有统计学意义(P<0.05)。感染组创伤严重程度评分(ISS)、机械通气时间明显高于无感染组,差异有统计学意义(P<0.05)。感染组血清SOCS3、HBD2水平明显高于无感染组,差异有统计学意义(P<0.05)。感染组血清SOCS3与HBD2水平呈正相关(r=0.579,P<0.05)。SOCS3、HBD2、ISS评分是影响胸部创伤患者并发细菌感染的因素(P<0.05)。血清SOCS3、HBD2联合诊断胸部创伤患者并发细菌感染的AUC为0.920(95%可信区间:0.878~0.961),SOCS3、HBD2单独诊断胸部创伤患者并发细菌感染的AUC分别为0.830(95%可信区间:0.763~0.897)、0.811(95%可信区间:0.741~0.881),二者联合诊断效能较SOCS3(Z=2.252,P=0.024)、HBD2(Z=2.615,P=0.009)单独诊断效能更高。结论胸部创伤并发细菌感染患者血清SOCS3、HBD2水平异常升高,二者联合诊断胸部创伤患者并发细菌感染的价值较高。