转移抑制蛋白1及上皮钙黏蛋白E在非肌层浸润性膀胱癌中的作用

目的探讨转移抑制蛋白1（metastasis suppressor protein 1,MTSS1）及上皮钙黏蛋白E（E-cadherin）在非肌层浸润性膀胱癌（non-muscle invasive bladder cancer,NMIBC）生长、凋亡及预后过程中的作用。方法回顾性分析NMIBC患者63例,取患者癌肿组织进行免疫组织化学分析,根据细胞学检查分为A、B、C、D组。A组：Ecadherin（＋）、MTSS1（-）;B组：E-cadherin（-）、MTSS1（＋）;C组：E-cadherin（＋）、MTSS1（＋）;D组：E-cadherin（-）、MTSS1（-）。比较不同临床特征间MTSS1及E-cadherin表达;以MTSS1及E-cadherin为因变量,以各临床指标为自变量,进行Cox回归分析。结果 C组1年复发率最低仅13.33%,5年生存率最高达93.33%;D组1年复发率最高达68.75%,5年生存率最低仅12.50%,A、B组患者1年复发率和5年生存率介于C、D组之间。复发者MTSS1和E-cadherin阳性表达高于未复发者,病理分级G3期MTSS1和E-cadherin阳性表达高于G1-G2期（P〈0.01）。Cox回归分析显示,复发和病理分级是MTSS1及E-cadherin阳性的危险因素,不同性别、年龄、进展情况、肿瘤大小、肿瘤数目间MTSS1和E-cadherin阳性表达差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 MTSS1与E-cadherin表达降低是癌细胞发生恶化的重要分子生物学基础,将成为NMIBC术后治疗和判断预后的新型靶向研究目标。

微小核糖核酸-31对大肿瘤抑制因子2及心肌细胞肥大的调控作用

目的:通过下调肥大心肌细胞中微小核糖核酸(miR)-31的表达,观察miR-31对大肿瘤抑制因子2(LATS2)及心肌细胞肥大的调控作用。方法:体外分离大鼠心肌细胞并连续培养10天,按干预条件不同将心肌细胞分为4组:空白对照组、单纯血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)干预组、miR-31抑制物慢病毒感染组、阴性病毒感染组。培养第8天实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测各组心肌细胞miR-31、LATS2及肥大基因心房钠尿肽(ANP)、β-肌球蛋白重链(β-MHC)表达。培养第10天心肌细胞荧光探针染色观察心肌细胞形态变化。蛋白免疫印迹(Western blot)检测LATS2蛋白表达变化。双荧光素酶报告基因质粒转染293T细胞并检测荧光素酶活性,鉴定miR-3l对LATS2的靶向作用。结果:与空白对照组相比,单纯AngⅡ干预组miR-31、心肌肥大基因ANP、β-MHC表达水平均显著上升(P<0.05),心肌细胞相对表面积明显增大(P<0.05),而LATS2基因及蛋白表达明显下调(P<0.05);与单纯AngⅡ干预组比较,miR-31抑制物慢病毒感染组miR-31、心肌肥大基因ANP、β-MHC表达明显下调(P<0.05),心肌细胞相对表面积减小(P<0.05),而LATS2在基因水平略有上升,蛋白水平则显著上调(P<0.05)。双荧光素酶报告基因检测显示TRAF6-3'UTR+miR-146b相对荧光素酶活性较TRAF6-3'UTR+miR-NC显著性下降(P<0.01),LATS2-3'UTR+miR-31相对荧光素酶活性较LATS2-3'UTR-NC+miR-31显著性降低(P<0.01),差异均有统计学意义。结论:下调肥大心肌细胞miR-31表达水平可一定程度逆转心肌细胞肥大,miR-31靶向作用LATS2参与调控心肌细胞的肥大。

p73基因多态性及蛋白表达与结直肠肿瘤关系的研究

目的探讨p73基因的多态性及蛋白表达与结直肠肿瘤发生风险的关系。方法血液标本分为3组,包括结直肠腺癌组、结肠腺瘤组、结肠未见明显异常组,各60例。采用PCR-RFLP方法检测血液标本p73基因多态性。组织标本分3组,分别取自结直肠腺癌病灶处、结肠腺瘤病灶处、结直肠腺癌患者的相应远离癌灶的正常黏膜组织,各30例,采用免疫组织化学方法检测肿瘤组织中p73蛋白表达情况。结果(1)p73基因多态性与结直肠腺癌、腺瘤的发生有相关性,且AT/AT基因型的人群易患结肠肿瘤。(2)p73蛋白表达与结直肠腺癌的发生、发展有相关性。结论p73基因多态性与结直肠癌的发生有相关性,且AT/AT基因型的人群易患结肠肿瘤。p73蛋白表达的增加或上调与结直肠癌相关。

熊果酸抗肿瘤机制研究进展

目的：总结国内外对熊果酸抗肿瘤机制的研究现状。方法：应用CNBI及中国期刊全文数据库检索系统，以“熊果酸、细胞凋亡、肿瘤”等为关键词，检索1979—01-01～2005-12—30相关熊果酸的文献。纳入标准：1）熊果酸对细胞周期影响的研究；2）熊果酸对凋亡相关基因Caspase蛋白表达影响的研究；3）熊果酸对凋亡相关基因Bcl-2／Bax、Fas／FasL和Survivin表达影响的研究。粗选有70余篇关于熊果酸方面的文章，根据纳入标准，精选42篇文献，最后纳入分析29篇文献。结果：熊果酸对结肠癌、黑色素瘤和胃癌等多种细胞系具有抑制作用，并诱导其凋亡。其机制可能是通过影响细胞周期及癌相关基因的表达而实现的。结论：熊果酸具有很好的抑制肿瘤生长作用，并且毒副反应小，来源丰富，有待开发。

膈下逐瘀汤对肝癌Bel-7402细胞增殖的抑制及其机制

目的:观察中药复方膈下逐瘀汤对肝癌Bel-7402细胞增殖的抑制及其相关机制。方法:实验于2005-09/2006-07在南方医科大学细胞生物实验室完成。膈下逐瘀汤(按《医林改错》方组成:五灵脂6g,当归9g,川芎6g,桃仁9g,丹皮6g,赤芍6g,乌药6g,延胡索3g,甘草9g,香附5g,红花9g,枳壳5g。均购自南方医院中药房)经研粉、煮沸、离心、过滤配成质量浓度为25,50,100,200mg/L的药液;顺铂配制成质量浓度为0.5,1.0,1.5,2.0mg/L的药液(作为阳性对照),均作用于Bel-7402细胞,并设空白对照(未加任何药物)。采用甲基噻唑基四唑(methyl thiazoly ltetrazolium,MTT)比色法检测膈下逐瘀汤各组对Bel-7402细胞生长的影响,用酶标仪测定培养细胞在600nm处吸光度值,并计算细胞抑制率,抑制率(%)=(实验组吸光度值-对照组吸光度值/对照组吸光度值)×100%。用蛋白印迹试验检测不同质量浓度药物作用48,72h时第10号染色体同源丢失性磷酸酶-张力蛋白基因蛋白的表达水平。结果:①中药复方膈下逐瘀汤对Bel-7402细胞增殖的影响:膈下逐瘀汤对肝癌Bel-7402细胞有明显的生长抑制作用,呈良好的剂量-效应关系。膈下逐瘀汤质量浓度在200mg/L时其48h细胞生长抑制率介于0.5mg/L顺铂组与1.0mg/L顺铂组之间(分别为41.27%,34.01%,47.49%);膈下逐瘀汤质量浓度在50,25mg/L时,其细胞抑制率明显低于顺铂组,72h细胞抑制率结果基本相同。②药物作用肝癌Bel-7402细胞48h后第10号染色体同源丢失性磷酸酶-张力蛋白基因蛋白的表达:第10号染色体同源丢失性磷酸酶-张力蛋白基因蛋白的表达增多,200mg/L膈下逐瘀汤组介于0.5mg/L顺铂组和1.0mg/L顺铂组之间。结论:中药复方膈下逐瘀汤抑制Bel-7402细胞的增殖机制可能是第10号染色体同源丢失性磷酸酶-张力蛋白基因表达增多的原因。

白藜芦醇对裸鼠移植性肝癌的抑制作用

目的:探讨白藜芦醇对裸鼠移植性肝癌的抑制作用。方法:利用HepG2细胞裸鼠移植瘤模型,研究白藜芦醇的体内抑瘤作用以及其对移植瘤微血管密度的影响。结果:白藜芦醇治疗组能不同程度抑制裸鼠肝脏移植瘤的生长,Res腹腔注射2周后,50mg/kgRes处理组瘤体显著小于生理盐水(NS)组和0.1%DMSO组且无明显的毒性反应;Res50mg/kg处理组MVD值(18.5±3.2)与对照组的MVD值(44.2±4.1)相比明显降低,差异有统计学意义。结论:Res可抑制人肝癌HepG2裸鼠移植瘤生长,降低移植瘤MVD,从而抑制肝癌的侵袭转移,对裸鼠的主要脏器无明显毒副作用。

PTEN蛋白表达与乳腺癌患者临床病理学特征相关性的Meta分析

目的评价PTEN蛋白表达与乳腺癌患者临床病理学特征的关联性。方法通过PubMed、Embase、Cochrane Library、中国知网（CNKI）及万方数据库检索所有已发表的关于乳腺癌患者组织中PTEN蛋白表达与临床病理学参数的相关性研究。应用RevMan 5.2软件进行分析,计算表达比值比（OR）和95%可信区间（CI）,并对研究文献进行异质性检验和偏倚评估。结果共28篇研究文献（3 172例患者）纳入Meta分析。PTEN在乳腺癌组织中的表达与患者的雌激素受体（OR=3.16,95%CI：2.01~4.97,P〈0.01）、孕激素受体（OR=2.27,95%CI：1.70~3.04,P〈0.01）、淋巴转移（OR=0.36,95%CI：0.27~0.49,P〈0.01）、临床分期（OR=2.59,95%CI：2.04~3.30,P〈0.01）和组织学分级（OR=2.19,95%CI：1.74~2.75,P〈0.01）均有显著相关性。结论 PTEN异常表达可能在乳腺癌的发生、进展、浸润及预后中起重要作用,是乳腺癌早期诊断和内分泌治疗中较有价值的分子标志物。

PIM-1基因沉默对前列腺癌细胞生长抑制作用的研究

目的:探讨RNA干扰(RNAi)沉默PIM-1基因表达对前列腺癌细胞体外生长的影响。方法:将RNAi重组质粒(PPIM1-shRNA-3)经脂质体介导转染前列腺癌PC-3细胞,用G418筛选稳定转染、PIM-1基因沉默的PC-3细胞。用空质粒载体(pRNAT-U6.1/Neo)稳定转染的PC-3细胞和正常培养的PC-3细胞作为对照,进行体外研究。利用细胞计数法分别检测3组PC-3细胞的增殖能力。利用流式细胞技术分别检测3组PC-3细胞的细胞周期及凋亡情况。结果:与两对照组PC-3细胞相比,PIM-1基因沉默组的PC-3细胞在培养48、72和96h的细胞计数显著减少(P<0.01),细胞周期中G1期细胞的比例显著升高,而S期细胞的比例显著降低(P<0.01),发生早期凋亡的细胞比例明显升高(P<0.01)。结论:PIM-1基因沉默可以使得PC-3细胞的细胞周期进程受阻,抑制细胞增殖,并诱发细胞凋亡。PIM-1可以作为前列腺癌基因治疗的有效靶点,具有潜在的临床应用价值。

冈田酸诱导SH-SY5Y细胞后tau蛋白磷酸化与PTEN蛋白水平的变化

目的研究冈田酸(OA)诱导SH-SY5Y细胞后tau蛋白磷酸化程度和PTEN蛋白水平的变化。方法40 nmol/L OA孵育SH-SY5Y细胞不同时间(0,3,6,12,18,24,36,48 h)后,倒置显微镜观察细胞的形态变化,免疫印迹检测各时间点tau蛋白ser396位点的磷酸化及PTEN蛋白水平的变化。结果SH-SY5Y细胞随OA孵育时间的延长逐渐出现细胞胞体变圆,突起回缩,悬浮生长至死亡。细胞tau蛋白ser396位点磷酸化水平于OA作用3 h开始升高,18 h达高峰,随后逐渐下降,48 h低于基础水平;而PTEN蛋白水平于OA作用3 h开始升高,6 h达高峰,之后逐渐下降,18 h开始低于基础水平。结论OA诱导SH-SY5Y细胞后tau蛋白磷酸化水平和PTEN蛋白水平均呈先上升后降低的变化趋势。

重组人抑癌相关蛋白核苷二磷酸激酶A的原核表达

目的 :为提高表达量 ,简化纯化工艺 ,获得可用于临床研究的重组人NDPK -A蛋白 ,构建带有 6×His纯化标签的原核表达载体 ,优化表达条件获得产物高表达并鉴定产物活性。方法 :将抑癌基因nm2 3-H1从质粒pBVNMH1中亚克隆于带有纯化标签的表达载体pQE4 0中 ;梯度变化表达条件获得产物高表达 ;镍离子螯合层析柱纯化目的蛋白 ;Westernblot鉴定产物的免疫原性 ;HPLC测定产物的激酶活性 ;鸡胚尿囊膜试验鉴定产物抑制血管新生的生物活性。结果 :pQE - 4 0中亚克隆的nm2 3-H1序列无误 ;目的蛋白最高表达量可达 4 9 6 % ;纯化的表达产物能与天然NDPK -A的多克隆抗体特异结合 ;酶比活为 4 72U/mg ;具有抑制鸡胚尿囊膜血管新生的活性。结论 :表达质粒pQE -nm2 3H1能高效表达重组人NDPK -A ,纯化工艺简便 ,产物活性与天然NDPK -A无异。

宫颈上皮内瘤样病变和宫颈癌中CD44v6和P63蛋白表达及其意义

目的探讨CD44v6和p63蛋白在宫颈上皮内瘤样病变(C IN)和浸润宫颈鳞癌(ICC)中的表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学方法,检测30例ICC、20例C IN和10例正常宫颈组织(NCE)中CD44v6和p63蛋白的表达水平,并结合临床病理特征进行分析。结果(1)在ICC组织中CD44v6蛋白表达阳性率为80.0%(24/30),明显高于C IN(35.0%,7/20,P<0.05)和NCE(30.0%,3/10,P<0.05)。(2)全部30例ICC和10例C IN中p63染色均为阳性。ICC分化程度越低,阳性细胞数越高、细胞的着色越深。NCE中仅基底层及上基层细胞阳性。(3)p63表达与ICC组织学分级和淋巴结转移相关(P<0.05)。结论CD44v6和p63可能参与了调控ICC的发生、发展过程,可作为ICC早期诊断指标,其高表达预示ICC预后不良。

肺癌组织中PTEN P63和P27蛋白的表达及意义

目的检测10号染色体同源丢失性磷酸酶-张力蛋白(PTEN)、P63和P27蛋白在肺癌组织中的表达,分析其与肺癌临床病理因素的关系。方法采用免疫组织化学S-P法检测PTEN、P63和P27蛋白在肺癌组织和正常肺组织中的表达情况。结果PTEN、P63和P27在肺癌组织中的阳性表达率分别为27.3%(18/66)、33.3%(22/66)和21.2%(14/66),与三者在正常肺组织中的阳性表达率90.0%、70.0%和70.0%比较差异有统计学意义(P<0.01)。PTEN和P63在高、中分化鳞癌及低分化鳞癌的阳性表达率分别为55.6%和0.0%(P<0.01)。PTEN和P63、PTEN和P27、P63和P27的共同阳性表达率分别为13.6%、6.1%和9.1%,PTEN与P63表达呈正相关性(P<0.01)。Cox多因素分析显示PTEN和P27在模型中呈负相关,患者的预后危险度相对较小,具有统计学意义。结论PTEN、P63和P27蛋白在肺癌组织中较肺正常支气管黏膜上皮表达率低,显示其失表达可能在肺癌的发生中起一定作用。PTEN和P63表达率在高、中分化鳞癌显著高于低分化鳞癌,显示PTEN和P63的表达与肺鳞癌的分化程度有关。PTEN和P63的表达呈正相关性,二者可能有协同作用。PTEN、P63和P27蛋白检测有可能作为诊断肺癌和评价肺癌恶性程度及预后的重要指标。

甲状腺乳头状癌和滤泡性癌中PTEN、P63、P53蛋白的表达与临床意义

目的:检测肿瘤基因PTEN、P63、P53蛋白在甲状腺乳头状癌和滤泡性癌中的表达及临床意义。方法:采用免疫组织化学染色EnVision二步法,对108例甲状腺病变组织中PTEN、P63、P53蛋白的表达情况进行检测、分析。结果:甲状腺乳头状癌和滤泡性癌中的PTEN的阴性率分别为36%和10%,两组之间存在显著性差异(P<0.05);两组之间的P63阳性率分别为56%和20%,主要为鳞化细胞阳性,两组之间无显著性差异(P>0.05);PTEN的阴性率和P63阳性率与患者的性别、年龄、转移与否、肿瘤大小无关。P53在甲状腺乳头状癌和滤泡性癌中未见表达。结论:PTEN失表达在甲状腺乳头状癌和滤泡性癌中不是频发于早期事件;PTEN的失表达可作为甲状腺癌预后的独立性因素。P63、P53在甲状腺乳头状癌和滤泡性癌的鉴别诊断及预后中缺乏指导性。

PTEN蛋白在肺癌中的表达及意义

目的:探讨肺癌中PTEN蛋白表达与临床病理特征的关系。方法:应用免疫组织化学PV-9000通用型二步法检测65例肺癌组织、10例癌旁肺组织、8例肺良性病变组织中PTEN蛋白的表达情况。结果:PTEN蛋白在肺癌中的阳性表达率为49.23%(32/65),在癌旁肺组织阳性表达率为90%(9/10),在肺良性病变组织阳性表达率为100%(8/8),肺癌PTEN蛋白阳性表达率显著低于癌旁肺组织及肺良性病变组织(P<0.05)。PTEN蛋白表达与非小细胞肺癌的组织分化程度及有无淋巴结转移有关。结论:PTEN蛋白的表达缺失在肺癌发生中可能起重要作用,并可能影响肿瘤的分化和预后。

Kiss-1蛋白metastin在子宫内膜癌组织中的表达及其意义

[目的]探讨Kiss-1蛋白metastin在子宫内膜癌组织中的表达及其意义。[方法]采用免疫组化方法检测62例子宫内膜癌（观察组）、15例正常子宫内膜（对照组）标本中的Kiss-1蛋白metastin表达情况，并分析其临床意义。[结果]观察组Kiss-1蛋白metastin的阳性表达率为35．48％（22／62），显著低于对照组86．67％（13／15），其差异有统计学意义（P〈0.05）；Kiss-1蛋白metastin在子宫内膜癌中的表达与子宫内膜癌的临床分期、肌层浸润程度及淋巴结状态密切相关（P〈0．05）。[结论]与正常子宫内膜相比，Kiss-1蛋白metastin在子宫内膜癌组织中低表达，可能与metastin高表达可阻止子宫内膜癌的发生、发展进程有关，提示metastin是否表达可作为子宫内膜癌的分期和预后判断指标。

PTEN调节神经样细胞微管相关蛋白tau的聚集及意义

目的观察体外诱导成人骨髓基质干细胞(BMSC)向神经细胞分化过程中,在第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源物基因(PTEN)调节细胞骨架中轴突标志分子微管相关蛋白tau(MAPT)分布及聚集的特征,并探讨其意义。方法从成人骨髓中分离基质干细胞,在体外经细胞因子诱导分化2周后成为神经样细胞,将未分化的BMSC作为对照组;应用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot方法研究MAPT的表达变化;经PTEN抑制剂BPV作用于该细胞后,用结合有荧光剂的鬼笔环肽直接染色细胞微丝肌动蛋白,并联合用免疫荧光细胞化学方法染色MAPT,在激光共聚焦显微镜下观察MAPT和肌动蛋白的定位及关联性。结果成人骨髓来源的基质干细胞经诱导分化后,MAPT的m RNA在分化1周和2周时相对表达水平为0.24±0.04和0.52±0.04,高于对照组BMSC的0.04±0.02(P<0.05)。MAPT蛋白表达水平分别为0.18±0.03和0.44±0.05,高于对照组0.06±0.04(P<0.05)。细胞染色后,经BPV作用后MAPT由弥散状态变为聚集状态,并分布于细胞一侧,神经样细胞开始出现极性。结论 BMSC来源的神经细胞分化成熟时,PTEN参与调节细胞骨架中轴突标志分子MAPT的转运和聚集,为神经细胞的轴突进一步生长提供物质支持。

侵袭性垂体腺瘤的蛋白表达研究进展

侵袭性垂体腺瘤的发生与发展是一个复杂的过程,多种蛋白表达发生了变化,并相互联系、相互影响。掌握垂体腺瘤的蛋白表达有助于判断其是否具侵袭性。本文即就侵袭性垂体腺瘤的癌基因相关蛋白、抑癌基因相关蛋白、基属基质蛋白酶及其抑制剂和肿瘤增殖动力学有关蛋白的表达进行综述。

大鼠肝癌发生过程中PTEN蛋白在卵圆细胞内的表达及意义

目的研究PTEN蛋白在大鼠肝癌发生过程中的表达与肝癌的关系。方法将60只SD大鼠随机分为实验组和对照组。用3’-甲基-4-二甲基氨基偶氮苯(3’-Me-DAB)诱癌,再分别用RT-PCR和Westernblot检测诱癌4～20周的大鼠卵圆细胞中AFPmRNA和PTEN蛋白的表达。结果PTEN表达的下调与癌症的发生过程相关,AFPmRNA的表达相对稳定。结论PTEN在肝癌发生过程中的表达逐渐降低可能与卵圆细胞的癌变相关。

高良姜素对肝癌细胞抑制作用的机制

肝细胞癌(HCC)病死率较高,尽管已有较多的治疗手段,但迄今为止HCC的临床治疗效果仍然欠佳,患者预后差。因此,临床上有必要寻找一种治疗HCC的新药以提高患者的生存率。介绍了一种新的抗肿瘤药物高良姜素,其可以通过抑制细胞增殖、促进凋亡、诱导自噬,以及抑制转移等途径发挥抗癌作用。除此之外,高良姜素还可抑制肝癌新生血管形成、逆转多药耐药以及加强药物的协同作用等。因此,认为高良姜素具有广阔的临床应用前景,期待更多的研究聚焦于高良姜素抗肝癌细胞的作用机制,为其临床转化应用提供充分的科学依据。

PI3K/Akt信号通路与肿瘤多药耐药性研究进展

磷脂酰肌醇3-激酶-蛋白激酶B（phosphatidylinosi tol-3-kinases/Akt,PI3K/Akt）信号通路广泛存在于人体细胞中,稳定的PI3K/Akt信号通路参与正常细胞生理活动的调节。在多种恶性肿瘤细胞内,PI3K/Akt信号通路则处于过度激活状态,常见原因包括第10号染色体同源丢失性磷酸酶基因突变、