三阴性乳腺癌组织中雄激素受体、肿瘤抑制蛋白P53的表达及与预后的关系

目的 探讨雄激素受体(AR)、肿瘤抑制蛋白p53(P53)在三阴性乳腺癌(TNBC)组织中的表达及与患者预后的关系。方法 将52例女性TNBC患者纳入观察组,同期收治的50例女性非三阴性乳腺癌(NTNBC)患者纳入对照组,所有患者均经手术病理检查确诊。运用免疫组织化学法检测2组癌组织内的AR、P53表达情况;同时分析AR、P53的表达与TNBC患者临床病理特征的关系。随访3年,以Kaplan-Meier法分析AR、P53表达与TNBC患者预后的关系。结果 观察组的AR阳性表达率低于对照组,P53阳性表达率高于对照组,有统计学差异(P<0.05)。AR、P53的表达与TNBC患者的组织学分级、TNM分期、淋巴结转移有关(P<0.05),与年龄、绝经状态、肿瘤直径无关(P>0.05)。Kaplan-Meier结果显示:AR阴性表达患者的3年生存率[40.63%(13/32)]低于AR阳性表达[75.00%(15/20)],P53阳性表达患者的3年生存率[40.00%(16/40)]低于P53阴性表达[75.00%(9/12)],有统计学差异(P<0.05)。结论 TNBC患者的癌组织内的AR呈阴性表达,P53呈阳性表达,AR、P53的表达与患者的组织学分级、TNM分期、淋巴结转移联系紧密,且AR阴性表达、P53阳性表达患者生存率更低,预后更差。

PTEN基因与肿瘤抑制蛋白p53在子宫内膜癌组织中的表达及临床意义

目的探讨PTEN基因与肿瘤抑制蛋白p53在子宫内膜癌组织中的表达及其临床意义。方法 选取本院2013年7月-2015年6月的52例子宫内膜癌组织作为观察组,选取55例正常子宫内膜组织作为对照组,采用免疫组织化学技术检测两组的PTEN基因以及肿瘤抑制蛋白p53表达情况,并分析其与不同国际妇产科联盟（FIGO）分期、细胞分化程度及有无淋巴结转移的关系。结果 观察组的PTEN基因阳性表达率显著低于对照组,肿瘤抑制蛋白p53的阳性表达率显著高于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。PTEN基因的表达与FIGO分期、细胞分化程度及淋巴结转移有关（P〈0.05）。肿瘤抑制蛋白p53的表达与FIGO分期及淋巴结转移有关（P〈0.05）。结论 PTEN基因与肿瘤抑制蛋白p53在子宫内膜癌组织中的表达异常,其在肿瘤的发生、发展过程中起着重要作用。

肿瘤抑制因子p53/溶质载体家族7成员11蛋白调控铁死亡在缺血性脑卒中疾病中的研究进展

缺血性脑卒中是中老年人致残及死亡的主要原因,完善脑卒中的治疗方案并改善患者的生活质量已然成为当今医学研究的热点。铁死亡是最新研究发现的细胞程序性死亡,对脑缺血-再灌注的发病机制有重要的调控作用,肿瘤抑制因子p53(Tumor Suppressor Protein p53,P53)/溶质载体家族7成员11蛋白(Solute Carrier Family 7 Member 11,SLC7A11)是铁死亡过程中的重要信号传导通路,与缺血性脑卒中的生理病理息息相关,但目前关于此通路作用于缺血性脑卒中的机制仍需更多的循证医学证据。中药作为公认的多靶点治疗手段,是治疗缺血性脑卒中细胞铁死亡的一种手段,也对P53/SLC7A11信号传导通路发挥了关键的调控作用。但目前铁死亡参与缺血性脑卒中的作用机制未完全阐明,中药如何调控铁死亡相关信号通路尚处于探索阶段,随着相关研究的深入,中药作用于铁死亡信号通路的机制会更加清晰,中药复合提取物与中药活性物质可能是缺血性脑卒中铁死亡未来的研究方向和治疗前景。目前P53/SLC7A11信号传导通路研究以基础研究为主,随着研究的进展,应将基础研究与临床研究相结合,以期开展新药研发,为缺血性脑卒中提供新的治疗手段和途径。文章对P53/SLC7A11信号传导通路在缺血性脑卒中疾病中的调控过程以及中药对此信号传导通路所产生的效力进行综合性叙述,以期为缺血性脑卒中的临床治疗及预防提供新的策略。

CA-125抗原、肿瘤抑制蛋白质p53、Ki-67抗原及抑癌基因p27蛋白作为卵巢癌病理辅助诊断指标的评价

目的评价CA-125抗原(CA125)、肿瘤抑制蛋白质p53(P53)、Ki-67抗原(Ki-67)及抑癌基因p27蛋白(P27)作为卵巢癌辅助诊断指标的临床意义。方法采用组织芯片微阵列技术检测所选免疫组化指标在96例卵巢癌和22例卵巢良性瘤组织中的表达,绘制受试者工作特征(ROC)曲线,并以病理诊断为金标准,比较单项和多项免疫检测指标联合检测的准确性。结果卵巢癌和卵巢良性瘤组织中CA125、P53、Ki-67、P27的阳性表达率比较,差异均有统计学显著意义(P<0.05)。P53、CA125、Ki-67、P27单项检测的AUC分别为0.730(P<0.01)、0.657(P<0.05)、0.617(P>0.05)和0.371(P>0.05);CA125+P53、CA125+P53+Ki-67、CA125+P53+Ki-67+P27联合检测使ROC曲线下面积(AUC)分别提高到0.773(P<0.01)、0.804(P<0.01)和0.824(P<0.01)。结论多个免疫组化指标联合检测均能不同程度地提高检测效能,优于任何单项检测。

肿瘤抑制蛋白质P53单克隆抗体的制备及其免疫活性分析

目的制备可特异性地识别肿瘤抑制蛋白质P53的单克隆抗体。方法应用重组人野生型P53蛋白为免疫抗原,采用经典的细胞融合技术制备单克隆抗体。亲和层析纯化抗体蛋白;ELISA测定抗体滴度。纯化的抗体作用于含有不同p53基因型的MDA-MB-231〔p53(mutant)〕和〔H1299,p53(null)〕肿瘤细胞系,Western印迹、免疫组化和免疫荧光染色法检测抗体与内源性P53蛋白的结合特异性。结果对筛选到的3株单克隆抗体1P15,2P37和3P40,进行了亲和层析技术纯化。SDS-PAGE结果显示,纯化后的3株抗体纯度均在90%以上;ELISA滴度测定结果显示,3株单抗的滴度均在1∶6000以上。免疫印迹结果表明,3株抗体在p53检测中具有较高的灵敏度,其中3P40的灵敏度最高,可以达到5 ng。Western印迹、免疫组化以及免疫荧光染色结果显示,抗体与细胞内源性P53蛋白的结合特异性,说明3P40可以特异性地结合细胞总蛋白提取物以及细胞中内源性P53蛋白,而在检测不表达P53蛋白的细胞系样品时,没有非特异性结合。结论成功制备3株对P53具有高亲和力的单克隆抗体,其中3P40的抗体滴度和灵敏度最佳。

p53Ψ蛋白是一种重要的肿瘤抑制蛋白

据Senturk S2014年7月29日Proc Natl Acad Sci USA，2014 Jul 29．）报道，美国科学家最新发现关于体内一种重要的肿瘤抑制蛋白p53的新功能，这个蛋白曾被称为“基因守护者”。当由于压力的因素致使健康细胞DNA损伤时．这种蛋白就会首先出来保护DNA，例如当机体暴露在有毒化学物质或强烈的太阳紫外线下时，如果损伤非常严重,p53就会启动细胞死亡或细胞凋亡预编程序。然而p53的突变体不再履行生命机能的作用，也就是说，它变成了大量不同种类癌症的推动者。

热休克蛋白B1基因、肿瘤抑制蛋白p53基因多态性与焦炉作业工人染色体损伤的关联及其交互作用分析

目的：探讨热休克蛋白B1基因（HSPB1）启动子区多态性位点rs2868371和肿瘤抑制蛋白P53基因（TP53）基因多态性位点rs1042522与焦炉作业工人染色体损伤的关联及其交互作用。方法于2010年9—10月，选取武汉市某焦化厂1333名男性焦化厂工人作为调查对象，以其中在辅助车间、炉底、炉侧和炉顶等场所工作的工人作为暴露组，共949名；在办公室场所工作的行政、医务人员作为对照组，共384名。收集调查对象的人口学信息并采集外周静脉血5 ml，分别运用ELISA和胞质分裂阻滞试验测定其血浆苯并[a]芘二氢二醇环氧化物-白蛋白（BPDE-白蛋白）加合物的浓度和外周血淋巴细胞微核率，采用TaqMan探针技术和ABI Prism 7900HT型荧光定量PCR仪进行SNP分型检测，并计算频率比（FR）及其95%CI值。结果暴露组中，携带rs2868371 GG基因型者外周血淋巴细胞微核率为（3.52±2.67）‰，均低于携带GC、CC及GC＋CC基因型者[分别为（3.88±2.88）‰、（4.00±2.66）‰和（3.91±2.83）‰]（FR值分别为1.10、1.13、1.11，95%CI值分别为1.02~1.19、1.02~1.25、1.03~1.19），且rs2868371 C有明显的等位基因剂量-效应关系（P趋势=0.006）；携带rs1042522 CC基因型者微核率为（3.95±3.06）‰，均高于携带CG以及CG＋GG基因型者[分别为（3.63±2.61）‰、（3.66±2.61）‰]（FR值分别为0.87、0.90，95%CI值分别为0.83~0.96、0.84~0.97）。HSPB1 rs2868371和TP53 rs1042522对外周血淋巴细胞微核率水平存在交互作用（P交互=0.001）。年龄〉40岁（FR=1.07，95%CI：1.01~1.12）、工龄〉20年（FR=1.08，95%CI：1.02~1.14）、BMI≤24 kg/m2（FR=1.07，95%CI：1.01~1.13）、饮酒（FR=1.09，95%CI：1.02~1.16）以及高BPDE-白蛋白水平（FR=1.07，95%CI：1.01~1.13）者HSPB1 rs2868371 C等位基因与微核率的增加均具有等位基因剂量-效应关系（P趋势分别为0.023、0.013、0.029和0.020）；年龄〉40岁（FR=0.94，95%CI：0.89~0.99）、BMI≤24 kg/m2（FR=0.94，95%CI：0.88~0.99）以及饮酒（FR=0.94，95%CI：0.88~1.00）者TP53 rs1042522 G等位基因与微核率的降低均具有等位基因剂量-效应关系（P趋势分别为0.031、0.023和0.038）。HSPB1 rs2868371与年龄和工龄在影响外周血淋巴细胞微核率上存在交互作用（P交互值分别为0.030和0.013）。结论 HSPB1 rs2868371 C等位基因与焦炉工染色体损伤水平增加有关联，TP53 rs1042522 G等位基因与焦炉工染色体损伤水平降低有关联，且上述两个SNP位点在影响焦炉工的染色体损伤水平上具有交互作用。

放射控导的wt-p53蛋白正反馈基因环路对肺腺癌细胞周期、凋亡及放射敏感性的影响

目的研究体外环境放射控导的wt-p53蛋白正反馈基因环路对肺腺癌细胞细胞周期、凋亡率及放射敏感性的影响。方法采用直线加速器8MV-X线,400MU/min、4Gy、源皮距100cm的照射条件照射治疗组pE6R4-p53-EGFP/H1299转染细胞和对照组H1299(p53-/-)、pE6-p53-EGFP/H1299和pR4-p53-EGFP/H1299转染细胞,12h后收集各组细胞,流式细胞仪分析该环路在放射线诱导下对肺腺癌细胞周期和细胞凋亡率的影响;绘制细胞放射剂量-存活曲线,计算平均致死剂量(Do)值及放射增敏比(sensitive enhancement ratio,SER)。结果4Gy8MV-X线照射治疗组和对照组细胞后12h,治疗组细胞在照射后(75.13±1.42)%发生明显G0/G1期阻滞;照射后各组细胞凋亡率均高于照射前,照射后治疗组细胞凋亡率为(23.73±0.21)%,分别是对照组H1299(p53-/-)细胞[(4.17±0.12)%]、pE6-p53-EGFP/H1299细胞[(15.67±0.32)%]、pR4-p53-EGFP/H1299细胞[(9.23±0.15)%]的5.69、1.51倍和2.57倍。治疗组pE6R4-p53-EGFP/H1299细胞和对照组pE6-p53-EGFP/H1299、H1299(p53-/-)细胞Do值分别0.91、1.073、1.413Gy,根据Do值计算SER分别为2.63和1.34。结论放射可诱导wt-p53蛋白正反馈基因环路上调wt-p53蛋白表达,从而调控肺腺癌细胞发生显著G/G1阻滞,使细胞凋亡比例增加,显著提高了肺腺癌细胞放射敏感性。

槲皮素诱导肿瘤细胞P53非依赖的G2/M周期阻滞和凋亡

目的研究槲皮素对肿瘤细胞的增殖、周期和凋亡的影响。方法用槲皮素12.5,25,50和100μmol·L^(-1),分别作用于人肝癌HepG2和Hep3B细胞、人乳腺癌MDA-MA-231细胞、人结肠癌HCT116 p53野生型(HCT116 p53WT)和p53敲除型(HCT116 p53KO)细胞12,24和48 h。荧光显微镜观察细胞形态变化;MTT法测定细胞存活率;采用Hoechst33258染色观察细胞核染色质的变化;采用流式细胞术检测细胞周期的变化;Western印迹法检测胱天蛋白酶3和聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)蛋白水平的变化。结果槲皮素对肿瘤细胞增殖的抑制作用显著且呈浓度(rHepG2=0.972,P<0.01;rHep3B=0.959,P<0.01;rMDA-MB-231=0.979,P<0.01;rHCT116p53WT=0.983,P<0.01;rHCT116p53KO=0.980,P<0.01)和时间(rHepG2=0.974,P<0.01;rHep3B=0.956,P<0.01;rMDA-MB-231=0.959,P<0.01;rHCT116p53WT=0.971,P<0.01;rHCT116p53KO=0.988,P<0.01)依赖性,与细胞对照组相比,槲皮素处理组细胞数量明显减少。槲皮素诱导G_2/M周期阻滞(P<0.01);镜下观察见核染色质浓缩和碎裂等典型的凋亡特性(P<0.01)。Western印迹法结果显示,胱天蛋白酶3蛋白表达水平明显降低(P<0.05,P<0.01),活化的胱天蛋白酶3表达水平无显著变化,PARP表达水平明显降低(P<0.01),活化的PARP明显升高(P<0.01);在加入泛胱天蛋白酶抑制剂后,与槲皮素单独作用相比,胱天蛋白酶3和PARP蛋白表达水平升高,活化的PARP表达水平明显降低(P<0.05,P<0.01,P<0.05)。结论槲皮素能通过诱导P53非依赖性的G_2/M细胞周期阻滞和细胞凋亡,从而实现对肿瘤细胞增殖的抑制作用。

儿童遗传性肿瘤易感综合征和TP53基因种系突变

儿童遗传性肿瘤易感综合征是由于肿瘤相关基因的种系突变所导致的一类遗传性疾病,患者具有明显的肿瘤易感倾向.TP53基因的种系突变占到所有遗传性肿瘤的20%-30%,是最常见的肿瘤突变基因.通过对TP53基因的检测,可以帮助临床医师更好的对遗传性肿瘤患者及家庭成员进行管理.

p53蛋白在低剂量电离辐射诱导EL-4细胞适应性反应中的变化

目的:研究低剂量电离辐射诱导EL-4细胞适应性反应中p53 mRNA及蛋白的表达,为探讨低剂量电离辐射诱导细胞适应性反应的DNA损伤修复机制提供实验依据。方法:将EL-4细胞分为空白对照组,单纯照射组(其照射剂量分别为1 Gy、2 Gy和3 Gy),以及诱导适应性反应照射组(其照射剂量分别为75 mGy+1 Gy、75 mGy+2 Gy、75 mGy+3 Gy)。应用流式细胞仪和RT-PCR方法分别检测p53蛋白及mRNA水平表达。结果:单纯照射组p53蛋白水平较对照组显著升高(P<0.01),预先给予75 mGy照射诱导的适应性反应组其p53蛋白水平较单纯照射组则显著降低(P<0.01)。p53 mRNA水平表现出与p53蛋白表达相同的变化。结论:p53蛋白在诱导适应性反应照射组中低表达,说明其在低剂量电离辐射诱导适应性反应中可能起重要作用。

p14^(ARF)、p53蛋白表达与H101治疗鼻咽癌疗效的关系

目的:观察肿瘤组织p14ARF、突变型p53蛋白表达状态与E1B缺陷型腺病毒治疗鼻咽癌疗效的关系,探讨E1B缺陷型腺病毒(简称H101)基因治疗的作用机制。方法:应用免疫组织化学方法对36例H101治疗的晚期鼻咽鳞癌病例进行肿瘤组织p14ARF、突变型p53蛋白检测,分析肿瘤组织p14ARF、突变型p53蛋白表达与H101临床疗效的关系;结果:突变型p53和p14ARF蛋白在36例晚期鼻咽鳞癌中总阳性表达率分别为55.6%和44.4%;突变型p53+p14ARF+(即p14ARF蛋白无缺失)患者均无治疗有效病例;突变型p53+p14ARF-(即p14ARF蛋白有缺失)患者中有4例有效;结论:对于p53基因无突变的恶性肿瘤,p14ARF基因缺失可能是H101能在肿瘤细胞内有效复制并杀死肿瘤细胞的一个重要影响因素。

肝癌患者血清高迁移率族蛋白B1的表达及与p53和临床病理的相关性

目的探讨肝癌血清高迁移率族蛋白B1(HMGB-1)的表达及与p53的相关性和临床病理特征的关系。方法酶联免疫吸附剂测定法(ELISA)检测20例肝细胞癌、20例肝内胆管细胞癌患者和20例健康志愿者血清HMGB-1和p53表达。结果血清HMGB-1在肝细胞癌组[(83.8±17.4)ng/ml]和胆管细胞癌组[(95.9±21.4)ng/ml]的表达均高于健康对照组[(8.4±2.6)ng/ml],差异均有统计学意义(P<0.05);血清p53在肝细胞癌组[(251.0±45.6)pg/ml]和胆管细胞癌组[(267.8±47.4)pg/ml]的表达均高于健康对照组[(160.0±28.4)pg/ml],差异均有统计学意义(P<0.05)。HMGB-1和p53的表达在肝细胞癌组和肝内胆管细胞癌组血清中均呈正相关(r=0.660 3,P<0.05;r=0.614 2,P<0.05);血清HMGB-1和p53水平与患者年龄、性别、肿瘤大小和肿瘤数目无相关性(P>0.05),与肿瘤TNM分期、分化程度、淋巴转移情况相关(P<0.05)。结论肝癌血清HMGB-1的表达与p53具有相关性,二者共同影响肝癌临床病理。

非小细胞肺癌中S100A2和p53蛋白的表达

目的研究S100A2蛋白和p53蛋白在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达,阐明其与肺癌发展及转移的关系。方法以15例正常肺组织为对照,采用免疫组织化学方法 (SP法)检测32例鳞癌、28例腺癌中S100A2、p53蛋白的表达水平。结果 S100A2蛋白在NSCLC中表达率为70.0%(42/60),在正常组织中表达率为20.0%(3/15)。p53蛋白在NSCLC中表达率为63.3%(38/60),在正常组织中表达率为26.6%(4/15)。肿瘤与正常组织表达差异有显著性(P<0.01)。S100A2蛋白在肺腺癌和肺鳞癌中的表达率分别为60.7%(17/28)和78.1%(25/32),差异无统计学意义。p53蛋白在鳞癌中表达率为78.1%(25/32),在腺癌中的表达率为46.4%(13/28),差异有统计学意义(P<0.05)。S100A2蛋白和p53蛋白在Ⅰ期患者中表达率分别为43.7%(7/16)和12.5%(2/16),Ⅱ、Ⅲ期患者中的表达率为79.5%(35/44)和81.8%(36/44),差异有统计学意义(P<0.05)。p53蛋白表达率低分化组为79.1%(19/24),中、高分化组为52.7%(19/36),差异有统计学意义(P<0.05)。有淋巴结转移组和无淋巴结转移组的S100A2蛋白阳性表达率分别为82.75%(24/29)、58.06%(18/31),有淋巴结转移组高于无淋巴结转移组,差异有统计学意义(P<0.01)。有淋巴结转移组和无淋巴结转移组的p53蛋白阳性表达率分别为82.76%(24/29)、45.16%(14/31),有淋巴结转移组高于无淋巴结转移组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 S100A2蛋白和p53蛋白在有淋巴结转移、TMN分期高的肺癌组织中表达显著增加,p53蛋白在不同分化程度的NSCLC中表达有差异,分化程度低的肿瘤p53蛋白表达增高。提示S100A2和p53蛋白可作为判断肺癌生物学行为的重要参考指标。

热水诱导慢性萎缩性胃炎大鼠胃黏膜组织p53和增殖细胞核抗原蛋白的表达

背景:慢性萎缩性胃炎(CAG)属胃癌癌前状态,高热饮食是CAG发生的危险因素之一。目的:观察热水诱导CAG大鼠胃黏膜组织中p53和增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白的表达,探讨长期高热饮食与CAG和胃癌的可能关系。方法:以55℃蒸馏水灌胃建立大鼠CAG模型。分别于灌胃第8、12、24、32和65周取腺胃组织,光学显微镜下观察胃黏膜组织学改变;采用免疫荧光技术标记p53和PCNA蛋白,行激光扫描共聚焦显微镜观察。结果:热水灌胃组第24周时胃黏膜开始出现萎缩改变。温水灌胃组各时间点胃黏膜均未见p53和PCNA蛋白表达。热水灌胃组第24周时胃黏膜细胞核中即可见p53蛋白绿色荧光和PCNA蛋白红色荧光表达,第32周和65周时表达更为明显。免疫荧光双标记时可见两种蛋白共表达。结论:热水灌胃可致大鼠CAG并引起胃黏膜癌相关基因p53和PCNA蛋白表达增强,可能与胃癌的发生有关。

受体型蛋白酪氨酸磷酸酶O及P53在胃癌中的表达及其与预后的关系

目的检测受体型蛋白酪氨酸磷酸酶O(PTPRO)、P53蛋白在胃癌组织中的表达,分析其与临床病理特征及预后的关系。方法回顾性分析2004年1月-2007年12月,在解放军总医院行D2根治术后并行氟尿嘧啶为主的辅助化疗4周期以上的Ⅱ-ⅢC期胃癌患者共61例,应用免疫组化法检测胃癌组织、癌旁组织和转移淋巴结中PTPRO蛋白表达,同时检测胃癌组织中P53蛋白表达,分析其与患者临床病理特征及预后的关系。结果 61例标本中,PTPRO在胃癌组织、癌旁组织、转移淋巴结中阳性率分别为65.6%、94.8%6、5.9%(P<0.01);P53在胃癌组织阳性率为36.2%;P53表达与PTPRO表达无相关性(r=0.169,P=0.20)。单因素分析显示,与临床分期晚、P53阳性的患者比较,P53阴性(P=0.022)、临床分期越早(P=0.000)的患者中位无病生存期(MDFS)越长(P<0.05);P53阴性(P=0.001)、临床分期越早(P=0.001)的患者中位生存时间(MST)越长(P<0.05)。多因素分析显示临床分期(P=0.001)、PTPRO蛋白表达(P=0.018)、P53蛋白表达(P=0.031)是影响胃癌术后患者DFS的独立影响因素,而临床分期(P=0.005)、PTPRO蛋白表达(P=0.014)、P53蛋白表达(P=0.033)、组织学分级(P=0.020)是影响其总生存期(OS)的独立影响因素。结论 PTPRO在胃癌组织中的表达显著减少。对于胃癌D2根治术后行氟尿嘧啶为主辅助化疗的患者,PTPRO和P53蛋白表达有望成为预测疗效的分子标记物。

大鼠外伤性视神经损伤后P53、Bax和Caspase3蛋白的表达

目的:探讨大鼠外伤性视神经损伤后不同时间点的视网膜神经节细胞(RGCs)病理形态学改变,P53、Bax和Caspase3蛋白表达变化及其与视神经损伤发生机制的关系。方法:成年雌性Wistar大鼠72只,随机分9组,每组8只,其中2组分别为正常组和假伤组,其余为实验组。实验组应用液压颅脑损伤仪建立大鼠视神经损伤动物模型,分别于伤后1、3、5、7、9、14、28d各处死8只,病理学观察RGCs的改变,免疫组化方法分析P53、Bax和Caspase3在视网膜中的表达变化。结果:视神经损伤后ldRGCs开始减少,14d内呈快速减少,14d后减少速度减慢,28d后趋于稳定;P53、Bax、Caspase3伤后表达较正常组和假伤组明显增加。结论:视神经损伤后RGCs数目减少是其视功能下降的重要病理基础,凋亡是RGCs的死亡机制之一,P53、Bax和Caspase3在RGCs凋亡发生中起重要作用。

胃癌患者血清P53蛋白与抗体检测的比较

目的比较胃癌患者血清P53蛋白与抗体检测的敏感性。方法采用间接ELISA法检测胃癌患者血清P53抗体,夹心ELISA法检测胃癌患者血清P53蛋白。结果胃癌患者血清P53蛋白阳性率为14.0%,抗体阳性率为32.0%,二者差异有统计学意义(P<0.05)。结论胃癌患者血清P53抗体的检测比P53蛋白的检测更敏感。

MDMX与CK1α对p53抑癌蛋白调节机制的研究进展

作为抑癌蛋白,p53参与了细胞内多种信号转导过程,并在细胞周期调控、细胞凋亡及衰老等过程中发挥了重要的作用。鼠双微基因(murine double minute,MDM)2和MDMX(又称MDM4,murine double minute 4)是p53两个重要的调控因子。其中,MDMX能够通过与p53蛋白的相互作用以及转录后修饰来调节p53蛋白功能。虽然MDMX与MDM2蛋白结构同源,但是由于MDMX缺少E3连接酶,因此无法介导p53蛋白的降解。然而,MDMX本身能够通过分子内部结构的折叠与展开,与p53蛋白相互作用后调节其活性。在该过程中,MDMX的主要分子伴侣——CK1α(casein kinase 1 alpha)通过磷酸化MDMX并干扰其分子内部结合,从而协同调节p53蛋白。因而,MDMX及CK1α对p53蛋白的调节是一个多步骤、多因素参与的复杂过程。本文拟就MDMX以及CK1α对p53蛋白的具体调节机制进行综述。

以p53为靶点的新型抗肿瘤化合物细胞筛选模型的构建与应用

目的构建含有p53蛋白结合位点的p21或survivin基因启动子区的荧光素酶报告基因重组质粒,并获得稳定转染的细胞模型用于抗肿瘤化合物筛选。方法将含有p53蛋白结合位点的p21或survivin启动子区序列连接到pGL4.17-basic载体上,分别获得报告基因重组质粒pGL4.17-p21和pGL4.17-survivin;将两种重组质粒分别转染A549细胞,经G418筛选获得稳定转染细胞株A549-p21和A549-survivin;对该细胞模型进行条件优化,并将可调节p53蛋白表达的多种抗肿瘤药物作用于稳定转染细胞,通过荧光素酶检测和western blot方法验证细胞模型用于药物筛选的可行性。结果成功建立了分别含有p21或survivin启动子报告基因的A549-p21和A549-survivin稳定细胞模型,多种抗肿瘤药物作用该细胞后能够通过调节p53蛋白表达而影响报告基因荧光素酶活性。结论构建的稳定转染细胞模型可以用于筛选以p53为靶点的抗肿瘤化合物。