共表达IL-7/CCL19的新抗原反应性T细胞对小鼠肺癌的抗肿瘤研究

背景与目的新抗原反应性T细胞(neoantigen reactive T cell,NRT)具有抑制表达特异性新抗原的肿瘤生长的能力。然而,由于免疫浸润困难和肿瘤微环境的抑制,NRT在实体瘤中的治疗效果有限。本研究针对小鼠肺癌细胞设计出可以同时表达白细胞介素7(interleukin 7,IL-7)和趋化因子19(chemokine C-C motif ligand 19,CCL19)的NRT细胞(7×19 NRT),并对7×19 NRT细胞和常规NRT细胞的抗肿瘤效果差异进行了评估。方法针对小鼠Lewis肺癌细胞(Lewis lung carcinoma,LLC)进行了新一代测序和新抗原预测,制备了RNA疫苗,培养了NRT细胞,构建了编码IL-7和CCL19的逆转录病毒载体,转导NRT细胞并成功表达IL-7和CCL19,成功获得了7×19 NRT,并在小鼠体内外对其抗肿瘤效果进行了评估。结果7×19 NRT细胞通过分泌IL-7和CCL19显著增强T细胞的增殖和侵袭能力,在小鼠肺癌中实现了显著的抑瘤作用,延长了小鼠的生存期。经7×19 NRT治疗后,T细胞浸润肿瘤组织及肿瘤组织坏死显著增加。此外,7×19 NRT治疗与常规NRT治疗均安全。结论通过IL-7和CCL19的表达,NRT细胞的抗实体瘤能力显著增强,这是一种对NRT安全有效的基因修饰。

肿瘤抗原肽的HLA限制性确认和诱导反应性T细胞杀瘤能力评估

目的了解肿瘤抗原肽的HLA限制性以及其诱导的T细胞能否杀伤肿瘤细胞,探索无关供者来源细胞用于过继性抗肿瘤T细胞治疗。方法使用16个肿瘤抗原肽诱导18名无关供者外周血单个核细胞(PBMC)分化为反应性T细胞,并分析HLA型别;利用NetMHC数据库预测肽和HLA分子亲和力;选择HLA-A2限制性的肿瘤抗原肽诱导第二组17名无关供者的PBMC进行杀瘤实验,反应性T细胞作为效应细胞,T2细胞及肿瘤抗原肽同源的肿瘤细胞作为靶细胞,测量LDH(乳酸脱氢酶)释放量或者RTCA(实时无标记细胞分析仪)检测效应细胞杀瘤效率,比较HLA-A2+和A2-T细胞杀瘤效率。结果筛出和HLA-A2具有高亲和力的肿瘤抗原肽LM7,可诱导5/11 HLA-A2+为反应性T细胞,其中HLA-A2+纯合子则为3/3,而HLA-A2-者则为2/7。LM7诱导反应性T细胞杀伤肿瘤百分比A2+组明显强于A2-组(60.72±11.28 vs 47.2±4.46,P=0.03)。结论本研究显示NetMHC预测对于纯合子样品更有帮助,肿瘤抗原肽LM7具有HLA-A2限制性,可诱导部分HLAA2+PBMC分化为反应性T细胞,可杀伤肿瘤,应对供者进行HLA筛选并分析其细胞功能,其诱导的反应性T细胞可作为过继性T细胞抗肿瘤治疗的细胞来源。

FDA调查接受靶向BCMA或CD19的自体嵌合抗原受体(CAR)-T细胞免疫治疗后发生T细胞恶性肿瘤的严重风险

美国食品药品管理局(FDA)发布消息,已收到接受靶向BCMA或CD19的自体CAR-T细胞免疫治疗后患者出现T细胞恶性肿瘤(包括嵌合抗原受体CAR阳性淋巴瘤)的报告。这些报告来自临床试验和/或上市后不良事件(AE)。

FDA调查接受靶向BCMA或CD19的自体嵌合抗原受体(CAR)-T细胞免疫治疗后发生T细胞恶性肿瘤的严重风险

美国食品药品监督管理局(FDA)发布消息,已收到接受靶向BCMA或CD19的自体CAR-T细胞免疫治疗后患者出现T细胞恶性肿瘤(包括嵌合抗原受体CAR阳性淋巴瘤)的报告。这些报告来自临床试验和/或上市后不良事件(AE)。FDA已确定,T细胞恶性肿瘤的风险适用于目前批准的所有经基因修饰的靶向BCMA和靶向CD19的自体CAR-T细胞免疫疗法。接受过多种同类产品治疗的患者发生了T细胞恶性肿瘤。

FDA调查接受靶向BCMA或CD19的自体嵌合抗原受体(CAR)-T细胞免疫治疗后发生T细胞恶性肿瘤的严重风险

美国食品药品管理局(FDA)发布消息,已收到接受靶向BCMA或CD19的自体CAR-T细胞免疫治疗后患者出现T细胞恶性肿瘤(包括嵌合抗原受体CAR阳性淋巴瘤)的报告。这些报告来自临床试验和/或上市后不良事件(AE)。

循环肿瘤细胞及糖类抗原125新型联用诊断模式在卵巢上皮性癌诊断中的价值

目的:探讨循环肿瘤细胞(CTCs)联合糖类抗原125(CA 125)对卵巢上皮性癌(EOC)的诊断价值。方法:选择2013年9月1日至2020年12月31日于北京大学第三医院收治经病理确诊的160例EOC患者和非癌对照(50例卵巢良性病变患者及40例健康成年女性)为研究对象。采用免疫磁珠分离法检测CTCs的表达,通过酶联免疫法检测CA 125的表达,并绘制受试者工作特征(ROC)曲线探讨两者诊断EOC的最佳组合方式。结果:①EOC患者与非癌对照时,CA 125>35 U/ml和CTCs阳性诊断EOC的敏感度分别为75.6%、79.4%,特异度分别为82.2%、91.1%。EOC患者与卵巢良性病变患者时,CA 125>35 U/ml及CTCs阳性诊断EOC的敏感度不变(仍分别为75.6%、79.4%),特异度均有所下降(分别为68.0%、86.0%)。②传统的并联试验诊断EOC的敏感度提高至95.0%,但特异度降低至58.0%;传统的串联试验诊断EOC的特异度提高至96.0%,但敏感度降低至60.0%。③定义CTCs及CA 125的新型联用诊断模式检出阳性为:CA 125≥90 U/ml或25 U/ml<CA 125<90 U/ml且CTCs阳性。采用新型联用诊断模式诊断EOC的敏感度为88.8%,特异度为86.0%。结论:CTCs或CA 125单独区分卵巢良恶性肿物时的敏感度均不高,且特异度偏低,特别是CA 125。传统的并联或串联试验不能提高EOC诊断效能;CTCs及CA 125新型联用诊断模式提高了EOC诊断的敏感度,同时保证了特异度没有降低。

嵌合抗原受体T细胞的肿瘤杀伤作用

近年来,嵌合抗原受体T(chimeric antigen receptor T,CAR-T)细胞免疫疗法在血液恶性肿瘤的治疗中取得了重要进展,但在实体瘤方面的应用并不理想。本文对CAR-T细胞的结构、杀伤功能进行了介绍,包括非经典免疫突触的形成、分泌细胞因子、分泌穿孔素和颗粒酶、Fas-FasL(factor associated suicide-Fas ligand)途径以及组成CAR结构成分的改变等杀伤肿瘤的主要机制,比较三种CAR细胞的特点,结合CAR-T细胞治疗实体瘤的挑战,对CAR-T细胞在肿瘤免疫治疗领域未来的研究方向进行了分析。

结直肠癌类器官的反应性T细胞受体筛选及功能鉴定

目的本研究通过建立基于结直肠癌(colorectal cancer,CRC)类器官模型以及CRC反应性肿瘤浸润淋巴细胞(tumor-infiltrating lymphocyte,TIL)扩增和分离,筛选肿瘤特异性T细胞受体(T cell receptor,TCR)并进行功能验证,为结直肠癌个体化过继性T细胞免疫治疗的临床转化提供技术平台和研究基础。方法通过体外3D培养技术构建结肠癌患者组织来源的类器官模型,并利用HE染色和免疫组化进行形态学和特征分子表达检测。随后,将CRC类器官与TIL共培养,通过流式细胞技术分选反应性TIL,通过单个T细胞受体基因克隆技术分析反应性TCR克隆特征。进一步通过细胞毒性实验对TCR功能进行验证。结果通过形态学、代表性分子(CK20和CDX2)表达水平验证了结直肠癌类器官与患者肿瘤具有高度相似性。成功筛选到CD137表达上调和IFN-γ分泌增加的结直肠癌反应性T细胞,其中TCR2-T展现出较好的肿瘤反应性和体外肿瘤杀伤功能。结论建立了基于CRC-Org的反应性TCR筛选和功能验证平台,为结直肠癌个体化T细胞治疗转化应用提供技术平台。

嵌合型抗原受体T细胞在恶性黑色素瘤中应用进展

恶性黑素瘤细胞膜表达有多种生物标志物,可作为治疗靶点开发针对性的嵌合型抗原受体T细胞(CAR-T),CAR-T目前对恶性黑素瘤中GD2、HER2、CD70、Gp100、NYESO-1等靶点已表现出良好的疗效。本文旨在梳理恶性黑素瘤CAR-T靶点及临床进展,分析工程化T细胞的挑战与应对之策,以期CAR-T应用于恶性黑素瘤临床实践。

嵌合抗原受体T细胞治疗B细胞性急性淋巴细胞白血病的护理策略研究

探究嵌合抗原受体T细胞免疫疗法(chimeric antigen receptor T cell immuno-therapy,CAR-T)治疗B细胞性急性淋巴细胞白血病(B-cell acute lymphoblastic leukemia,B-ALL)的护理策略。急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)是一种临床常见的异质性很高的恶性血液病。CAR-T作为一种新兴的治疗方法,已经在B-ALL患者的治疗中表现出显著疗效。通过分析广东省第二人民医院接受CAR-T治疗的复发/难治性B-ALL患者的临床资料,对比采用规范化医疗及护理体系干预前后CAR-T治疗B-ALL的疗效及不良反应差异。结果显示,规范化医疗及护理体系干预对CAR-T治疗B-ALL的疗效无显著影响,但能够降低细胞因子释放综合征(cytokine release syndrome,CRS)的严重程度。研究发现,CAR-T治疗复发/难治性B-ALL疗效显著,通过规范化医疗及护理体系建设,能够增强医护人员CAR-T治疗全程管理能力,尤其是CAR-T细胞回输后相关并发症的早期观察、早期预防及早期处理能力,保障患者的治疗效果,降低不良反应发生率。

嵌合抗原受体T细胞治疗恶性肿瘤的研究进展

嵌合抗原受体T细胞(CAR T)在血液系统恶性肿瘤的治疗上取得了显著的成功,但能否同样程度的使实体瘤患者受益仍不确定。数百项临床试验正在积极探索多种肿瘤相关抗原,但在实体瘤CAR T研究中尚未发现类似CD19特性的抗原。此外,T细胞运输效率低下、免疫抑制性肿瘤微环境、抗原识别特异性欠佳以及缺乏安全控制也是影响CAR T细胞治疗恶性肿瘤的主要障碍。本文对CAR T在血液系统恶性肿瘤和实体瘤的研究进展及毒性反应进行回顾,讨论了CAR T在恶性肿瘤治疗中的疗效、挑战以及解决方案,旨在为研究人员克服相关障碍提供参考。

肿瘤精准靶向免疫治疗的关键:T细胞受体抗原筛选技术

过继性T细胞疗法在实体瘤治疗中展现了良好的前景,成为目前肿瘤治疗领域的一大研究热点。其中,TCR-T疗法主要通过T细胞受体(TCR)与抗原肽-主要组织相容性复合体(pMHC)的特异性识别,进而激活过继性T细胞的抗肿瘤免疫反应。因此,全面解析TCR所靶向的抗原信息有助于提高TCR-T疗法在临床应用中的有效性及安全性。然而,高效、高通量的TCR抗原筛选技术的缺乏限制了TCR-T疗法的发展。近年来,随着高通量测序技术、质谱流式细胞技术和计算生物学的快速发展,研究人员开发了多种TCR抗原筛选技术用于解析TCR及其特异性识别的抗原信息。本文从抗原定向筛选、TCR定向筛选以及双向筛选三方面对TCR抗原筛选技术进行归纳总结,系统介绍其优缺点,展望TCR抗原筛选技术领域的发展前景,为未来抗原筛选技术的开发提供了新思路。

H5Nx禽流感病毒交叉反应性CD4^(+) T细胞表位预测

【目的】评估预先存在的H5Nx交叉反应性免疫记忆,为人类H5禽流感病毒的防治和广谱疫苗的研发提供理论数据。【方法】利用生物信息学方法筛选人源H5Nx禽流感病毒与季节性流感病毒的共同保守的交叉反应性CD4^(+) T细胞表位,进一步分析保守表位嵌套CD8^(+) T细胞表位和B细胞表位情况以及在中国人群中的覆盖率。【结果】92.3%(513/555)的H5Nx CD4^(+) T细胞表位在季节性甲型流感病毒中具有交叉反应性,其中172个表位嵌套CD8^(+) T细胞表位和5个表位嵌套B细胞表位。这些表位与相应HLA-DRB1等位基因在全世界人群中的覆盖率为88.65%。【结论】由于反复接触季节性甲型流感病毒,人群中存在一定水平的的H5Nx交叉反应性免疫记忆,能够为H5Nx感染提供部分保护。

美国FDA向靶向BCMA或CD19的自体嵌合抗原受体(CAR)-T细胞免疫治疗类产品相关企业发送标签安全性内容变更通知函

美国食品药品管理局(FDA)发函要求企业修改靶向BCMA或CD19的自体嵌合抗原受体(CAR)-T细胞免疫治疗类产品标签的安全性内容,增加继发性恶性肿瘤相关风险提示。此类产品标签信息应包含以下内容:1.黑框警告,处方信息要点接受靶向BCMA或CD19的自体CAR-T细胞免疫治疗后出现了T细胞恶性肿瘤。

美国FDA向靶向BCMA或CD19的自体嵌合抗原受体(CAR)-T细胞免疫治疗类产品相关企业发送标签安全性内容变更通知函

美国食品药品管理局(FDA)发函要求企业修改靶向BCMA或CD19的自体嵌合抗原受体(CAR)-T细胞免疫治疗类产品标签的安全性内容,增加继发性恶性肿瘤相关风险提示。此类产品标签信息应包含以下内容:1.黑框警告,处方信息要点接受靶向BCMA或CD19的自体CAR-T细胞免疫治疗后出现了T细胞恶性肿瘤。2.黑框警告,处方信息接受靶向BCMA或CD19的自体CAR-T细胞免疫治疗后出现了T细胞恶性肿瘤。[见警告与注意事项]3.警告与注意事项-继发性恶性肿瘤,处方信息要点继发性恶性肿瘤:接受靶向BCMA或CD19的自体CAR-T细胞免疫治疗后出现了T细胞恶性肿瘤。

美国FDA向靶向BCMA或CD19的自体嵌合抗原受体(CAR)-T细胞免疫治疗类产品相关企业发送标签安全性内容变更通知函

美国食品药品管理局(FDA)发函要求企业修改靶向BCMA或CD19的自体嵌合抗原受体(CAR)-T细胞免疫治疗类产品标签的安全性内容,增加继发性恶性肿瘤相关风险提示。此类产品标签信息应包含以下内容:1.黑框警告,处方信息要点:接受靶向BCMA或CD19的自体CAR-T细胞免疫治疗后出现了T细胞恶性肿瘤。

复方斑蝥胶囊对原发性肝癌脾虚血瘀证患者临床疗效、血清肿瘤标志物及T淋巴细胞亚群的影响

目的:探究复方斑蝥胶囊对原发性肝癌(PLC)脾虚血瘀证患者临床疗效。方法:选择2021年1月~2023年1月台州市中医院和桂林市中西医结合医院收治的PLC脾虚血瘀证患者82例为研究对象,随机分为对照组与观察组各41例。对照组行常规西医治疗,观察组在对照组基础上联合复方斑蝥胶囊治疗,对比两组疾病控制率、血管生成因子指标[血管内皮生长因子(VEGF)、血小板衍生生长因子(PDGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)]、肝功能指标[谷转氨基转移酶(ALT)、总胆红素(TBIL)、谷草氨基转移酶(AST)]、血清肿瘤标志物[癌胚抗原(CEA)、糖链抗原19-9(CA19-9)、肿瘤相关黏液抗原(CA242)]、T淋巴细胞亚群的影响。结果:对照组疾病控制率低于观察组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前,两组血管生成因子比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,两组PDGF升高、VEGF、bFGF降低,且对照组PDGF低于观察组、VEGF、bFGF高于观察组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前,两组肝功能指标比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,两组ALT、TBIL、AST均降低,且对照组高于观察组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前,两组肿瘤标志物比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,两组CEA、CA19-9、CA242均降低,且观察组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前,两组T淋巴细胞亚群水平比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,两组CD8^(+)下降,CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)升高,且对照组CD8^(+)高于观察组、CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)低于观察组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:PLC脾虚血瘀证患者采用复方斑蝥胶囊辅助治疗,可改善血管生成因子指标,控制肝功能指标,降低肿瘤标志物水平,调节其免疫功能。

欧盟提示CAR-T细胞疗法的继发性T细胞恶性肿瘤风险

欧洲药品管理局(EMA)近期就靶向CD19或BCMA的CAR-T细胞疗法(商品名分别为:Abecma、Breyanzi、Carvykti、Kymriah、Tecartus、Yescarta)的继发性T细胞恶性肿瘤风险发布致医务人员函(DHPC)。内容摘要:在使用靶向BCMA或CD19的CAR-T细胞疗法治疗血液系统恶性肿瘤后的数周至数年内曾出现继发性T细胞恶性肿瘤的报告,包括嵌合抗原受体(CAR)阳性恶性肿瘤。应终身监测患者是否出现继发性恶性肿瘤。

嵌合抗原受体T细胞治疗女性高发恶性肿瘤的研究进展和挑战

宫颈癌、卵巢癌、子宫内膜癌是临床常见的三种妇科恶性肿瘤,乳腺癌在女性群体高发。现有较为成熟的治疗方案如手术、放疗和化疗等对于晚期、转移性和复发性肿瘤治疗效果难有突破。嵌合抗原受体T(chimeric antigen receptor T,CAR-T)细胞疗法缘于治疗血液系统恶性肿瘤成效卓著而闻名于世。现将CAR-T疗法应用于女性高发恶性肿瘤方向的国内外研究现状、治疗过程需要解决的问题以及治疗后可能出现的不良反应进行综述。

芍药汤治疗湿热内蕴型溃疡性结肠炎疗效及对患者炎症因子和T淋巴细胞亚群的影响

目的:观察芍药汤治疗溃疡性结肠炎(UC)患者(湿热内蕴证)的临床疗效及对患者炎症因子和T淋巴细胞亚群的影响。方法:选择接受治疗的110例UC患者作为研究对象,掷硬币法分为两组,各55例。对照组采取美沙拉秦治疗,观察组在对照组基础上采取芍药汤治疗,两组均连续治疗3个月。治疗3个月时比较两组患者临床疗效;比较两组治疗前、治疗3个月时临床症状、Mayo、Geboes指数评分、炎症因子、T淋巴细胞亚群(CD4^(+)、CD8^(+)、CD4^(+)/CD8^(+))及肠道菌群水平;统计并比较两组治疗期间不良反应发生情况。结果:治疗后,观察组总有效率高于对照组(P<0.05);治疗后,两组主症、次症及总分低于治疗前,观察组低于对照组(P<0.05);治疗后,两组Mayo活动指数、Geboes指数评分低于治疗前,观察组低于对照组(P<0.05);治疗后,两组超敏C反应蛋白(hs-CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平低于治疗前,观察组低于对照组(P<0.05);治疗后,两组CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)高于治疗前,CD8^(+)低于治疗前,观察组CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)高于对照组,CD8^(+)低于对照组(P<0.05);治疗后,两组双歧杆菌、乳酸杆菌高于治疗前,大肠杆菌低于治疗前,观察组大肠杆菌低于对照组(P<0.05);观察组发生1例恶心,1例皮肤瘙痒,对照组未发生不良反应(P>0.05)。结论:芍药汤能够有效改善湿热内蕴证UC患者临床症状,促进肠黏膜愈合,降低机体炎症反应,提高免疫功能,恢复胃肠道菌群平衡,提升临床疗效。