肿瘤环境影响抗感染CD8^+T细胞应答启动的初步研究

目的探讨肿瘤环境下,机体对非肿瘤来源的外来微生物抗原特异性CD8+T细胞应答的变化及其可能机制,为肿瘤患者免疫调节治疗提供理论依据。方法在建立小鼠荷瘤模型的基础上,尾静脉感染李斯特菌(OVA-Listeria Monocytogenes,OVA-LM),观察其生存曲线的变化;在荷瘤后感染小鼠模型中,通过流式胞内细胞因子染色和Pentamer染色技术检测小鼠抗OVA257-264表位特异性CD8+T细胞免疫应答的变化;通过标记CFSE的OT-Ⅰ细胞过继转移小鼠,观察体内抗原特异性CD8+T细胞增殖和抗原呈递情况;FACS分析荷瘤情况下小鼠脾脏CD11b+Gr-1+细胞及Treg细胞比例和数量变化。结果荷瘤小鼠感染OVA-LM菌后生存期明显缩短;荷瘤小鼠脾脏抗OVA257-264表位特异性CD8+T细胞免疫应答显著下调;抗原特异性CD8+T细胞增殖速率没有显著变化,但是细胞总数明显下降;荷瘤小鼠脾脏调节性T细胞比例未见明显变化,但CD11b+Gr-1+细胞显著上调。结论荷瘤小鼠抗感染CD8+T细胞免疫反应下降,其脾脏CD11b+Gr-1+细胞显著上调,提示肿瘤环境下脾脏CD11b+Gr-1+细胞升高可能是影响抗感染CD8+T细胞应答的重要因素。

肿瘤环境下人类脂肪间充质干细胞的旁分泌特征变化与肿瘤细胞侵袭的关系分析

目的分析肿瘤环境下人类脂肪间充质干细胞(AMSCs)的旁分泌特征变化与肿瘤细胞侵袭的关系。方法体外培养AMSCs,收集其上清液制备培养基培养HCT116细胞。利用Transwell培养板共培养AMSCs与HCT116细胞。通过检测穿透人工基底胶的能力对比两种培养条件下HCT116细胞侵袭能力的差异,同时采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测共培养后AMSCs旁分泌因子表达变化情况。结果根据检测穿透人工基底胶的能力结果显示,共培养的HCT116细胞侵袭能力明显强于AMSCs培养液培养的HCT116细胞。共培养条件下肿瘤环境影响了AMSCs旁分泌因子的表达,共培养条件下AMSCs细胞血管内皮生长因子C(VEGFC)、成纤维细胞生长因子10(FGF10)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)以及白细胞介素-10(IL-10)分泌量明显高于细胞培养,差异均具有统计学意义(t=8.692、7.593、7.298、8.356,P<0.05)。结论肿瘤环境下会影响AMSCs旁分泌因子的表达,增加HCT116细胞侵袭能力。

肿瘤环境下腺苷受体通路的免疫功能及临床意义

缺氧、慢性炎症等复杂的肿瘤微环境,诱发细胞高表达CD39、CD73等表面分子。上述分子基于自身催化活性,引发ATP大量降解与腺苷的局部蓄积。蓄积的腺苷通过激活A_(2A)、A_(2B)等受体,实现了广泛的免疫调控功能,主要表现为:T淋巴细胞、自然杀伤细胞和树突状细胞的功能抑制,调节性T细胞和骨髓来源的抑制细胞的功能增强,巨噬细胞M2型极化亢进等。上述异常改变严重削弱了机体的抗肿瘤免疫反应,与此相关的免疫无能直接导致肿瘤细胞的快速增殖与转移。鉴于上述原因,CD39-CD73-腺苷-腺苷受体信号轴在肿瘤中的作用近年来得到了越来越多的重视。本文就相关研究的进展及临床意义进行总结,以启发开展后续的机制研究与临床应用。

基于外泌体精准靶向调控肿瘤微环境的中药抗肿瘤作用研究进展

中药及复方制剂用于肿瘤治疗历史悠久,然而由于中药多成分、多靶点等特点,现有的药理研究技术尚未阐明中药抗癌药效物质及机制,限制了抗癌中药的临床应用及发展。因此,找到癌症早期临床诊断标志物及药物作用评价靶标尤为重要。外泌体是肿瘤微环境中细胞、组织、器官信息传递的主要介质之一,影响并决定肿瘤的恶性程度。本文通过对外泌体生物发生途径及功能进行综述,揭示外泌体在肿瘤微环境条件下,调控肿瘤发生发展的作用及机制,旨在阐释基于外泌体作为抗肿瘤药物载体,挖掘中药抗肿瘤药效物质,并构建“外泌体-肿瘤微环境-药效成分-作用靶点”整合分析方法,阐释中药抗肿瘤作用机制科学内涵的新思路与新方法,推动中医药在传承创新中高质量发展。

拮抗CC趋化因子受体5信号诱导肿瘤细胞凋亡并调节肿瘤微环境抑制肿瘤生长

目的探索拮抗CC趋化因子受体5(CCR5)信号通路对肿瘤生长和肿瘤微环境的影响。方法采用CCK8细胞毒试验研究CCR5选择性拮抗剂Maraviroc体外对小鼠Lewis肺腺癌细胞增殖的影响,并运用流式细胞术和RT-PCR检测肿瘤细胞凋亡和Caspase 8基因的表达。然后采用免疫荧光组织化学染色法研究了Maraviroc对小鼠体内肿瘤生长和肿瘤微环境中CD4^(+)和CD8^(+)以及Foxp3^(+)细胞比例的影响。结果拮抗CCR5信号在体内外均能够抑制癌细胞的生长。体外研究发现:CCR5拮抗剂可通过增强凋亡基因Caspase 8表达而诱导肿瘤细胞凋亡。在小鼠体内,CCR5拮抗剂可明显增加肿瘤微环境中CD4^(+)和CD8^(+)细胞的浸润而减少Foxp3^(+)细胞的浸润。结论拮抗CCR5信号可能通过诱导肿瘤细胞凋亡,逆转免疫抑制性肿瘤微环境而抑制肿瘤生长。

肿瘤微环境中与CD8^(+)T细胞耗竭相关的分化及代谢重编程的研究进展

CD8^(+)T细胞耗竭是导致机体免疫应答减弱及恶性肿瘤复发转移的核心原因。T细胞不仅在迁移进入肿瘤微环境(tumor microenvironment,TME)时需要突破重重屏障,而且在浸润至肿瘤微环境的T细胞的分化及代谢过程依然受到多因素的调控,往往造成CD8+T细胞抗肿瘤活性受到抑制,进一步形成耗竭性T细胞,导致免疫逃逸。因此,研究导致T细胞耗竭的相关因素及发生机制是逆转机体低免疫应答的关键,为抗肿瘤免疫治疗提供坚实的基础及依据。该文综述了近年来关于CD8^(+)T细胞在肿瘤微环境中的浸润分化、代谢重编程及耗竭性T细胞形成的相关过程,以期为改善T细胞抗肿瘤疗效提供潜在策略。

基于营卫理论探讨桂枝-赤芍配伍重塑肿瘤血管微环境的网络药理学机制

目的:采用网络药理学方法预测桂枝-赤芍配伍影响肿瘤血管生成的潜在靶点和通路,从分子网络药理学水平探索该配伍重塑肿瘤血管微环境的网络药理学机制。方法:采用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)检索桂枝、赤芍的化学成分和潜在靶点,选择口服生物利用度≥30%和类药性≥0.18作为化学成分筛选条件;在GeneCards数据库中检索血管生成的靶点;利用Cytoscape 3.6.0软件绘制桂枝-赤芍配伍-化合物-靶点-血管生成网络;使用STRING 11.0在线软件构建蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络并挖掘核心靶点;采用David Bioinformatics Resources数据库对该复方活性成分潜在的靶点网络中的蛋白进行基因本体(GO)功能富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。结果:桂枝-赤芍配伍的33种有效成分作用于血管生成过程的77个靶点,PPI网络的核心靶点包括蛋白激酶B(Akt)1、JUN、白细胞介素6、基质金属蛋白酶、血管内皮生长因子A、一氧化氮合酶2和缺氧诱导因子-1α等多个蛋白。GO功能富集分析提示,该配伍的关键蛋白主要参与了DNA结合转录激活剂活性、血红素结合、抗氧化活性、核受体活性和转录因子活性等生物过程。KEGG通路富集分析显示,该配伍参与了缺氧诱导因子-1(HIF-1)信号通路、肿瘤蛋白53信号通路、细胞凋亡信号通路、表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂耐药信号通路、血管内皮生长因子(VEGF)信号通路和磷脂酰肌醇3激酶-Akt信号通路等,提示桂枝-赤芍配伍与肿瘤血管生成的关系最为密切。结论:桂枝-赤芍配伍中的黄芩素、谷甾醇和鞣花酸等成分可能通过HIF-1信号通路、VEGF信号通路影响肿瘤血管生成,干预肿瘤的生物学行为。

基于单细胞RNA测序数据对胰腺癌肿瘤微环境中缺氧肿瘤亚群的探究

胰腺癌作为恶性程度极高的肿瘤之一,多数患者确诊时已处于不可切除或转移性阶段。随着单细胞RNA测序(single-cell RNA-sequencing, scRNA-seq)技术的发展,我们能够以更高分辨率深入探索肿瘤微环境(tumor microenvironment, TME)的内部异质性,从而揭示胰腺癌进展中预后不良的关键机制。先前研究指出,缺氧是实体瘤TME的固有特性,能激活血管生成与转移相关的信号通路,但缺氧TME的异质性仍需进一步阐释。通过基因集富集分析、拟时序分析和细胞间通讯分析等手段,对胰腺癌scRNA-seq数据进行分析,识别出具有不同生物学功能的肿瘤亚群,特别是与缺氧密切相关的亚群。该缺氧肿瘤亚群与不良预后紧密相关,据此构建的风险评分模型可有效预测胰腺癌患者总生存期。本研究加深了对胰腺癌TME的了解,为胰腺癌预后的预测提供了一定参考。

鉴定LTBP1作为胃癌预后的生物标志物及其与肿瘤免疫微环境的相关性

目的探索潜在转化生长因子β结合蛋白1(latent transforming growth factor beta binding protein 1,LTBP1)在胃癌发生发展及免疫微环境中的生物学功能。方法在TCGA数据库中分析LTBP1在泛癌中的表达,然后通过胃癌组织和癌旁组织进行验证。通过回归比例分析法分析LTBP1表达与临床病理变量之间的相关性。Cox回归分析和Kaplan-Meier图用于评估LTBP1在胃癌中的预后价值。通过TIMER分析LTBP1的表达水平与胃癌中免疫细胞浸润之间的相关性。免疫组织化学染色检测LTBP1蛋白在胃癌组织及癌旁组织中的表达水平。结果与正常胃组织相比,胃癌组织中LTBP1表达显著上调。其表达与病理TNM分期显著相关。LTBP1高表达的胃癌患者的总体生存率(overall survival,OS)缩短。免疫组化结果显示,与癌旁组织相比,LTBP1在胃癌组织中显著高表达。TIMER检测发现LTBP1的表达与3种免疫细胞浸润呈正相关。结论LTBP1可能是胃癌预后的一个潜在生物标志物,并影响癌症的肿瘤免疫微环境。

抑郁介导肿瘤免疫微环境对乳腺癌预后的影响

本研究旨在探究抑郁对乳腺癌肿瘤免疫微环境(TME)的影响及其对乳腺癌预后的潜在影响,以期为乳腺癌的综合治疗提供更为精准的策略。方法 通过前瞻性队列研究,选取120例新诊断的乳腺癌患者为研究对象,根据心理评估结果将患者分为抑郁组(n=60)和非抑郁组(n=60)。分析两组患者的肿瘤免疫微环境特征,包括免疫细胞浸润、细胞因子表达水平以及免疫逃逸相关标志物的差异。进一步通过随访观察两组患者的预后情况,包括无病生存期(DFS)和总生存期(OS)。结果 抑郁组患者的肿瘤免疫微环境显示出较低的CD8+ T细胞浸润和较高的免疫抑制细胞如调节性T细胞(Tregs)的比例。此外,抑郁组患者的肿瘤组织中,免疫逃逸相关标志物如PD-L1的表达水平显著高于非抑郁组。随访结果表明,抑郁组患者的DFS和OS均显著低于非抑郁组。结论 抑郁状态可能通过改变乳腺癌肿瘤免疫微环境,通过增强免疫逃逸机制,从而对乳腺癌患者的预后产生不利影响。这一发现表明了在乳腺癌治疗过程中,对抑郁症状的识别和干预的重要性,以及心理健康在肿瘤治疗中的作用,为乳腺癌的综合治疗策略提供了新的视角。

外泌体调控肺癌肿瘤微环境机制和临床应用的研究进展

肺癌发病率逐年上升,是目前癌症死亡的主要原因。外泌体是细胞分泌的内源性膜小囊泡,目前已被公认是细胞间遗传物质的转运载体,在不同细胞通讯间发挥桥梁作用。近年来,越来越多的研究数据表明外泌体携带的蛋白质、脂质、核酸(lncRNA、microRNA、mRNA)等遗传物质在肺癌肿瘤微环境中发挥重要作用。本文主要综述外泌体调控肺癌肿瘤微环境相关作用机制,探讨外泌体作为肿瘤药物递送载体和循环标志物在肺癌诊断和治疗评估的应用价值。

单细胞RNA测序技术在肺癌肿瘤微环境研究中的进展

免疫微环境对肿瘤的发生发展起着关键作用。近年来,随着高通量测序技术的飞速发展,研究人员对肿瘤微环境中的免疫细胞组成及其功能有了更深入的了解。然而,传统的群体测序技术难以解析单个细胞层面的异质性,限制了对肿瘤微环境复杂性的全面理解。单细胞RNA测序技术的兴起,为揭示肺癌免疫微环境的异质性带来了新的机遇。当前以T细胞为中心的免疫治疗在临床中容易出现免疫原性耐药或者免疫相关性肺炎等影响预后的副作用,其关键因素是肿瘤微环境中免疫细胞与肿瘤细胞的相互作用发生了变化。而单细胞RNA测序技术可以从细胞间互作、拟时序分析等角度揭示肿瘤微环境中不同亚群间的起源与作用,进而发现新的细胞亚群或新生生物标志物,为揭示免疫治疗的耐药及疗效监测等提供新的途径。该综述系统回顾了单细胞RNA测序技术在揭示肺癌特别是免疫治疗后肺癌微环境异质性方面的最新研究进展,为促进肺癌免疫治疗的精准化与个体化提供参考。

肿瘤微环境中代谢检查点调节T细胞免疫功能的研究进展

免疫疗法的出现改变了现有的晚期肿瘤治疗模式,为患者带来了希望。然而,许多肿瘤已经显示出对检查点抑制等免疫治疗的显著抵抗机制,导致部分患者的应答率始终不高,甚至超进展。通过对新兴免疫代谢领域的研究发现,靶向代谢途径重塑肿瘤微环境有望重振抗肿瘤免疫反应,并可能与现有免疫疗法产生协同效应。本文着重探讨了代谢检查点调节T细胞代谢在肿瘤免疫治疗中产生的一系列影响,旨在为肿瘤免疫治疗提供新的思路。

Hyperion系统分析直肠癌肿瘤微环境与新辅助放化疗疗效及预后的相关性

目的:探索局部晚期直肠癌(locally advanced rectal cancer,LARC)患者肿瘤微环境特征与新辅助放化疗(neoadjuvant chemoradiotherapy,NCRT)疗效及预后的相关性。方法:回顾性分析2020年10月至2021年4月于我院行NCRT的4例LARC患者,将26个金属标签抗体对患者石蜡切片进行标记,然后用Hyperion成像系统检测和分析标记样本,并与临床疗效和预后进行分析。结果:4例LARC患者NCRT后缓解程度及预后存在显著差异,在成像系统中观察到3种不同的肿瘤微环境特征,包括免疫细胞富集型、免疫细胞匮乏型和免疫抑制细胞为主型,CD8^(+)T细胞、Foxp3^(+)调节性T细胞、CD56^(+)自然杀伤细胞、CD14^(+)单核细胞、CD11b^(+)巨噬细胞、CD11c^(+)树突状细胞和增殖细胞抗原(Ki-67)均在各自样本中显著高表达(P<0.05),PD-1和PD-L1仅在患者2中高表达。结论:LARC患者具有明显的肿瘤微环境异质性,且其异质性可导致患者NCRT疗效及预后的差异。

胶质母细胞瘤肿瘤复发微环境相关的功能成像研究进展

胶质母细胞瘤(GBM)是成人最常见的原发性中枢神经系统恶性肿瘤,其预后不良的主要原因是肿瘤复发,GBM复发与其独特的肿瘤微环境异常有关,包括微血管状态、水分子运动、离子环境、蛋白质变化、氧代谢和免疫异常等。近年来,功能MRI技术已在GBM复发肿瘤微环境研究方面取得较多进展,可反映GBM复发的微血管结构、水分子扩散、离子代谢物、蛋白表达和组织氧张力等方面的异常。GBM肿瘤微环境研究已从离体病理生理学层面拓展到活体功能成像水平。本文就GBM复发微环境相关的功能MRI研究[PWI、DWI、MRS、酰胺质子转移成像(APT)和血氧水平依赖性功能磁共振成像(BOLD-fMRI)]进展进行综述。

Cuproptosis基因和特征基因预测急性髓系白血病预后、免疫和肿瘤微环境的价值

目的筛选急性髓系白血病(AML)中的差异预后Cuproptosis基因和特征基因并探索其在AML中的预后情况以及在免疫和肿瘤微环境中的生物学作用和相关性。方法利用从TCGA、GEO和UCSC 3个主要数据库下载的AML临床、转录组、基因组和拷贝数数据,并从已发表的研究中收集Cuproptosis基因,从多组学的角度,通过各种生物信息学方法、Meta分析和二次分型,研究Cuproptosis基因和特征基因在生存、免疫、肿瘤微环境、干细胞相关性和药物敏感性等方面作用。结果1个Cuproptosis基因被鉴定为AML的差异预后基因和5个通过影响Cuproptosis进而影响AML患者预后的特征基因,并建立了预后模型。差异基因主要富集于线粒体活性、氧化还原酶和能量代谢。在免疫方面,巨噬细胞M0、中性粒细胞、活化记忆CD4 T细胞和Tregs与风险评分呈正相关,巨噬细胞M2、静息肥大细胞、辅助滤泡T细胞和记忆B细胞与风险评分呈负相关;在肿瘤微环境方面,低危组的免疫细胞评分低于高危组,并且在总评分中,低危组的肿瘤微环境得分同样低于高危组,说明高危组的肿瘤纯度低于低危组;然而,干细胞在高风险和低风险组之间没有显著相关性,共有14种药物对治疗AML敏感。结论通过构建AML预后模型,显示AML中的差异预后Cuproptosis基因和特征基因与免疫和肿瘤微环境密切相关。

代谢“废物”乳酸在肿瘤微环境中的免疫抑制作用

近年来,肿瘤微环境(TME)备受科学家们的关注,它是由肿瘤细胞、肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)、免疫细胞、血管、细胞外基质、周围支持组织及其所在的代谢环境等共同组成的复杂体系。免疫逃逸和代谢改变(葡萄糖有氧代谢转至无氧代谢产生乳酸)是此体系的两个基本特征。虽然过去一直认为乳酸是TME中的代谢废物,但现在人们普遍认为乳酸的增加和TME的酸化在肿瘤发生发展中发挥关键作用,包括免疫逃逸、组织侵袭/肿瘤转移、血管生成和肿瘤耐药等。因此,研究TME中乳酸代谢、免疫抑制、血管生成、肿瘤耐药等关键过程的调控机制,可为靶向TME的新治疗策略提供理论基础和实践依据。

外泌体与乳腺癌肿瘤微环境的相互作用及相关研究进展

乳腺癌是常见的恶性肿瘤,具有多种分子类型。对于晚期乳腺癌多采用放化疗、内分泌及靶向治疗。外泌体与肿瘤微环境的相互作用是目前乳腺癌相关研究的热点,外泌体在肿瘤的发生发展、侵袭转移、治疗耐药等过程中发挥重要作用,其相关分子可通过改变肿瘤微环境、影响血管生成、诱导细胞耐药等方式影响乳腺癌的各个环节。因此,深入研究外泌体在乳腺癌肿瘤微环境中的作用及外泌体相关诊治方法,可以为疾病的治疗提供新思路。

肿瘤微环境下调节性B细胞的功能机制研究进展

调节性B细胞(Breg细胞)以较高比例存在于多种恶性肿瘤微环境(TME)中,在维持免疫平衡和调节免疫反应方面发挥重要作用,可阻碍机体抗肿瘤免疫应答。Breg细胞由TME中的一系列信号分化诱导而成,可分泌细胞因子和颗粒酶B、腺苷等代谢物,并通过表达抑制性膜结合分子等机制影响TME中其他免疫调节细胞,从而促进肿瘤的生长和转移。因此,深入理解Breg细胞的分化来源及其在肿瘤免疫调节中关键作用机制可为未来开发新的免疫治疗策略提供方向。

骨膜蛋白在肿瘤微环境中的作用研究进展

肿瘤微环境对肿瘤的发展起重要作用,而肿瘤微环境中的细胞外基质蛋白在肿瘤细胞增殖、转移、免疫逃逸及对化疗的耐药等生物特性调节中发挥着关键作用。充分理解肿瘤微环境中各分子相互作用机制并及时给予有效的干预措施,有助于探索新的治疗靶点并抑制肿瘤进展。近期研究表明,骨膜蛋白(periostin,POSTN)作为细胞外基质蛋白中的一种重要成分,参与了多种肿瘤的生物学过程,并与肿瘤微环境中多个环节相关。从肿瘤微环境出发,总结了骨膜蛋白在肿瘤发生发展中的最新研究进展,以探讨骨膜蛋白能否成为潜在的肿瘤治疗靶点。