宫颈癌细胞过表达酪氨酸激酶受体1对其肿瘤相关内皮细胞恶性生物学行为的影响

目的探讨宫颈癌细胞过表达酪氨酸激酶受体1(Tie-1)对其肿瘤相关内皮细胞(TRECs)恶性生物学行为的影响。方法用免疫组化法检测96例宫颈癌患者组织中宫颈癌细胞(CCCs)与其TRECs中Tie-1蛋白表达的相关性,分析宫颈癌TRECs中Tie-1的表达与患者临床病理特征及预后的相关性。构建过表达Tie-1的HeLa细胞(HeLa-Tie1OE),采用Transwell小室共培养法将HeLa-Tie1OE与人脐静脉内皮细胞(HUVECs)共培养获得宫颈癌TRECs;通过细胞划痕实验、Transwell侵袭和迁移实验、小管生成实验检测TRECs的迁移、侵袭及小管生成能力变化。结果96例宫颈癌患者CCCs与TRECs中Tie-1的表达呈正相关;Tie-1在FIGO分期为ⅠB2-ⅡA2期、肿瘤直径≥4 cm、宫颈肌层浸润深度≥1/2全层、腺癌、中低分化宫颈癌患者TRECs中高表达率分别高于ⅠA1-ⅠB1、肿瘤直径<4 cm、宫颈肌层浸润深度<1/2全层、鳞癌、高分化宫颈癌患者,差异有统计学意义(P<0.05);Tie-1在宫颈癌患者TRECs中的高表达与患者年龄、淋巴结转移及淋巴脉管间隙浸润无相关性;Tie-1在宫颈癌TRECs中的高表达与患者5年无瘤生存时间及总生存时间呈负相关(P<0.05)。Tie-1在宫颈癌TRECs中表达上调且使TRECs侵袭、迁移、小管生成能力增强。结论Tie-1在宫颈癌TRECs的高表达与患者FIGO分期、肿瘤直径、分化程度、宫颈肌层浸润深度、宫颈癌类型有关,且与患者不良预后有关。过表达Tie-1的CCCs可促进其TRECs侵袭、迁移及小管生成能力。

鼻咽癌相关内皮细胞的诱导及其鉴定

目的:通过体外共培养模型,利用人鼻咽癌(NPC)细胞株(5-8F)诱导肿瘤相关人淋巴管内皮细胞(C-HLEC)及肿瘤相关人脐静脉内皮细胞(C-HUVEC)形成,分析其形态学上及相关基因表达的变化。方法:建立两种共培养体系,即嵌入式细胞共培养体系和条件培养基(CM)共培养体系,将5-8F分别与两种内皮细胞(HLEC和HUVEC)共培养,倒置相差显微镜观察共培养后内皮细胞形态学变化,实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测共培养后两种内皮细胞中肿瘤内皮标志物8(TEM8)的表达,划痕实验检测共培养后两种内皮细胞的迁移能力,小管形成实验检测共培养后两种内皮细胞成管能力。结果:与对照组比较,共培养后的两种内皮细胞,形态伸长、触角增多,变成多角形,细胞间连接疏松,细胞结构紊乱,TEM8 mRNA表达水平升高(P<0.05),且迁移能力及成管能力均明显增强(P<0.05)。结论:与NPC 5-8F细胞共培养,可促进淋巴管及血管内皮细胞向肿瘤相关内皮细胞(TECs)转化,转化后细胞迁移能力和成管能力增强、TEM8表达上调。

肿瘤相关细胞的诱导培养和鉴定及其对SKOV3细胞生物学行为的影响

肿瘤微环境(TME)是促进肿瘤生长的复杂系统。肿瘤微环境中的多种基质细胞以及它们分泌的细胞因子和趋化因子共同促进肿瘤细胞的增殖、迁移和侵袭。而肿瘤细胞也会分泌一些细胞因子促进肿瘤微环境中脉管系统的巩固,导致脉管系统为肿瘤细胞提供更多营养物质的同时抑制药物的运送,使其产生耐药性。本研究针对肿瘤相关细胞与肿瘤细胞间的相互作用问题,进行了体外诱导正常成纤维细胞和血管内皮细胞为肿瘤相关成纤维细胞(CAF)和肿瘤相关血管内皮细胞(TEC),鉴定其相关性及对人卵巢癌细胞(SKOV3)生物学行为影响的研究,为肿瘤微环境多靶标协同调控的肿瘤治疗新策略奠定实验基础。实验结果表明,诱导培养后的人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)和成纤维细胞系(CNLMG)形态高度符合肿瘤细胞形态特征。CCK8测试结果显示,肿瘤相关细胞和肿瘤细胞呈相互促进、相辅相成的作用。ELISA和WB结果表明,肿瘤相关细胞过表达VEGF、TEM1、α-SMA和FAP标志蛋白。迁移和侵袭实验结果表明肿瘤相关细胞可以大大增强肿瘤细胞的迁移和侵袭能力。细胞周期实验反映出共培养后的SKOV3在S期的占比较大,由此可知,肿瘤相关细胞可增强SKOV3细胞的增殖能力。在荧光图像中,共培养后的SKOV3细胞吸收更少的药物并且具有更强的细胞活性,共培后的SKOV3细胞耐药性更强。研究结果表明,肿瘤细胞可以在体外诱导正常细胞成为肿瘤相关细胞,肿瘤相关细胞会影响肿瘤细胞的生物学行为。

微环境在肿瘤生长及耐受抗血管生成疗法中的作用

血管生成对多种类型肿瘤的生长具有重要作用,抗血管生成药物的开发为肿瘤治疗开辟了新纪元。然而,与其他的抗肿瘤疗法相同,肿瘤患者对抗肿瘤药物固有/获得性耐受通常导致疾病复发。近年来多种实验模型研究提示,肿瘤及非肿瘤(基质)细胞均参与并导致了治疗反应性的降低。该综述主要总结基质细胞在肿瘤生长及耐受抗血管内皮生长因子疗法中的作用。

宫颈鳞癌组织整合素β1的表达与患者临床病理特征及预后相关分析

目的探讨子宫颈鳞癌组织癌细胞(TCs)和肿瘤相关内皮细胞(TRECs)中整合素β1的表达及其临床意义。方法选取2008年1月至2018年12月间石河子大学医学院第一附属医院收治的80例子宫颈鳞癌患者,采用免疫组织化学法分别测定TCs和TRECs中整合素β1的表达,并分析其与患者临床病理特征的关系。结果整合素β1在肿瘤直径≥2cm的子宫颈鳞癌患者TCs中阳性表达率高于肿瘤直径<2cm者,差异有统计学意义(P<0.05);在有深部间质浸润患者TRECs中阳性表达率高于无深部间质浸润者,差异有统计学意义(P<0.05)。整合素β1在子宫颈鳞癌组织TCs和TRECs中的表达与患者总生存时间和无瘤生存时间均相关,差异均有统计学意义(均P<0.05)。整合素β1在子宫颈鳞癌组织TCs和TRECs中的阳性表达患者的总生存时间和无瘤生存时间均低于阴性表达患者,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论整合素β1在子宫颈鳞癌患者中的表达可能与肿瘤直径及浸润相关,且可能与预后有一定相关性,提示整合素β1有可能成为子宫颈鳞癌抗肿瘤治疗新靶点。