肿瘤相关糖蛋白-72抗原在原发性胆囊癌中的表达及其临床意义

目的探讨抗肿瘤相关糖蛋白-72（TAG-72）抗原的表达及其与原发性胆囊癌（PGC）病理特征的关系。方法用原核表达获得抗TAG-72单链抗体，并用聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS—PAGE）和Western blot得以验证；用免疫组化方法检测TAG-72抗原在PGC的表达。结果通过原核表达获取大小为31kDa的抗TAG-72单链抗体并得以证实。TAG-72抗原在胆囊良、恶性组织阳性率分别为59．6％、6．7％（P〈0．05）。高分化PGC的TAG-72抗原表达显著低于中低分化PGC（P〈0．05）；肿瘤直径≤2cm者TAG-72表达显著低于〉2cm者（P〈0．05）；在PGC Nevin临床分期Ⅰ～Ⅲ期与Ⅳ～Ⅴ期间则无显著性差异（P〉0．05）。结论获得了抗TAC-72单链抗体的原核表达方法。TAG-72抗原可以作为一个肿瘤标志物在临床中应用，为抗TAG-72单链抗体在PGC诊治中的应用奠定实验基础。

肿瘤相关糖蛋白-72抗原在原发性乳腺癌组织中的表达及其临床意义

目的:探讨抗肿瘤相关糖蛋白(TAG-72)抗原的表达与原发性乳腺癌病理特征及预后的关系。方法:随机选取原发性乳腺癌患者118例,应用SABC免疫组化方法检测TAG-72抗原的表达。并对其中的92例原发性乳腺癌患者中作术后为期5年的随访,分析TAG-72抗原与原发性乳腺癌患者预后的相关性。结果:TAG-72抗原在原发性乳腺癌组织中的阳性表达率为78.81%(93/118),并与原发性乳腺癌组织的临床病理学特征及患者的预后均有密切的关系。在直径较大(P<0.05)、TNM分期较高(P<0.05)、淋巴结转移(P<0.01)及组织学分级低(P<0.01)的肿瘤组织中,TAG-72抗原高表达。此外,TAG-72抗原阳性表达的原发性乳腺癌患者的生存率明显低于阴性表达的患者(P<0.01)。结论:TAG-72抗原的表达可能与原发性乳腺癌的发生、浸润、转移有关;TAG-72抗原可以作为一个肿瘤标志物在临床中应用,检测其在原发性乳腺癌组织中的阳性表达率,并结合临床病理学分级,可提高对患者预后判断的准确性。

肿瘤相关物质TSGF、血清胃蛋白酶原Ⅰ、糖蛋白抗原72-4对胃癌的诊断价值

探讨联合检测血清胃蛋白酶原Ⅰ(PG-Ⅰ)、糖蛋白抗原72-4(CA72-4)、肿瘤相关物质(TSGF)对胃癌诊断的临床价值。利用免疫放射法(ⅠRMA)检测PG-Ⅰ,电化学发光免疫法检测CA72-4,生化比色法检测TSGF在胃癌患者血清中的含量并与慢性浅表性胃炎、慢性萎缩性胃炎、胃溃疡患者及正常人做对比,分析3种指标对胃癌诊断的临床价值及与胃癌临床生物学行为的关系。胃癌组PG-Ⅰ含量为34.76±10.16μg/L,明显低于各对照组;CA72-4为5.92±2.53U/mL,TSGF为132.11±14.65U/mL,均明显高于其余各组。胃癌组血清PG-Ⅰ、CA72-4、TSGF的阳性表达率分别为42.85%、42.85%、45.71%,联合检测阳性率为80%。血清PG-Ⅰ、CA72-4、TSGF与胃癌诊断及其临床生物学行为密切相关,有助于判断胃癌的转移及预后,联合检测可提高对胃癌诊断的准确率。

血清肿瘤相关糖蛋白72测定对恶性肿瘤诊断价值的初步探讨

不断寻找和筛选新的肿瘤相关抗原并对其诊断价值作出客观准确的评价,是提高恶性肿瘤诊断水平的重要途径。肿瘤相关糖蛋白72(tumor-associated glycoprotein 72,简称TAG 72)是近年从乳腺癌转移细胞株制备出的肿瘤标志物,它是一种高分子量、粘蛋白样物质,据报道此抗原在结肠癌、胃癌、胰腺癌、卵巢癌和肺癌病人血清及组织含量均可见增高。本文测定了正常人以及良性疾病和恶性肿瘤病人的血清TAG72浓度共329例,对其在恶性肿瘤的诊断价值做一初步探讨。

抗肿瘤相关糖蛋白-72单抗在人乳腺癌中的表达

目的检测肿瘤相关糖蛋白-72(TAG-72)在人乳腺癌细胞系的表达,为利用抗TAG-72单链抗体(singlechainvariablefragment,scFv)诊治乳腺癌提供实验依据。方法将人乳腺癌细胞系MCF-7和Bcap-37通过细胞培养至对数生长期,并固定于载玻片上。用原核表达的抗TAG-72scFv经免疫细胞化学方法检测TAG-72在乳腺癌细胞中的表达。结果TAG-72在乳腺癌细胞系MCF-7中表达为阳性,在Bcap-37中表达为阴性,表明TAG-72在部分人乳腺癌细胞中得以表达。结论TAG-72在人部分乳腺癌中阳性表达,表明TAG-72抗原可作为一个肿瘤标志物在临床中应用,也为抗TAG-72scFv在乳腺癌诊治中应用奠定了实验基础。

肿瘤相关糖蛋白-72嵌合锚定T细胞对肝癌的抑癌效应

目的制备肿瘤相关糖蛋白-72(TAG-72)嵌合锚定T细胞,体内外实验检测其对肝癌的抑癌活性。方法分离健康人外周血单个核细胞(PBMC),采用脂质体lipofectamineTM2000介导的细胞转染,将已制备的重组真核表达载体抗TAG-72 scFv-CD3ζ-pcDNA3.0导入PBMC,获得肿瘤相关糖蛋白-72(TAG-72)嵌合锚定T细胞,以此为实验组治疗细胞;用SDS-PAGE检测TAG-72嵌合锚定T细胞中抗TAG-72 scFv-CD3ζ嵌合分子的表达,并用Western blotting证实。用转染空载体pcDNA3.0的PBMC作为对照组治疗细胞。将实验组及对照组的治疗细胞分别经尾静脉注射治疗荷TAG-72+肝癌细胞HepG2、荷TAG-72-肝癌细胞BEL7402裸鼠动物模型,观察对裸鼠的抑癌效应。结果 SDS-PAGE检测TAG-72嵌合锚定T细胞嵌合分子抗TAG-72 scFv-CD3ζ的表达,显示大小为47 kDa的融合蛋白片段,与抗TAG-72 scFv-CD3ζ的理论值相符;Western blotting证实该片段CD3呈阳性表达。TAG-72嵌合锚定T细胞与肝癌细胞HepG2共培养后可对后者产生G1期阻滞。用TAG-72嵌合锚定T细胞经尾静脉注射治疗荷瘤裸鼠,发现实验组细胞对荷HepG2细胞裸鼠存活时间、体质量、肿瘤包块大小等方面疗效优于荷BEL7402细胞裸鼠的疗效,两者比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 TAG-72嵌合锚定T细胞可特异性抑制荷TAG-72+肝癌细胞裸鼠的肝癌细胞生长;该治疗策略将为肝癌的临床诊治提供一种有希望的途径。

血清胃蛋白酶原Ⅰ、糖蛋白抗原72-4、单抗MG7相关抗原对胃癌诊断的临床研究

目的探讨联合检测血清胃蛋白酶原Ⅰ(PGⅠ)、糖蛋白抗原72-4(CA72-4)、单抗MG7相关抗原(MG7Ag)对胃癌诊断的临床价值。方法利用免疫放射分析法(IRMA)检测PGⅠ、CA72-4,酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测MG7Ag在胃癌患者血清中含量并与慢性浅表性胃炎、慢性萎缩性胃炎、胃溃疡患者及正常人做对比,分析三种指标对胃癌诊断的临床价值及与胃癌临床生物学行为的关系。结果胃癌患者血清PGⅠ含量为(35.79±11.16)ng/m l明显低于各对照组,CA72-4含量为(5.91±2.54)U/m l、MG7Ag含量为(7.09±4.56)U/m l均明显高于各对照组,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。胃癌患者血清PGⅠ、CA72-4、MG7Ag的阳性表达率分别为33.33%,39.39%,51.52%;联合检测阳性率PGⅠ+CA72-4为57.58%,PGⅠ+MG7Ag为69.70%,CA72-4+MG7Ag为72.73%,PGⅠ+CA72-4+MG7Ag为78.79%。结论血清PGⅠ、CA72-4、MG7Ag与胃癌诊断及其临床生物学行为密切相关,有助于判断胃癌的转移及预后;联合检测可提高对胃癌诊断的准确率。

肿瘤相关糖蛋白-72在结肠癌及癌前病变组织中的表达

目的观察肿瘤相关糖蛋白-72(TAG-72)抗原在结肠癌及癌前病变组织中的表达,并探讨其临床意义。方法应用免疫组化EnVision二步法检测TAG-72抗原在221例结肠癌及癌前病变组织中的表达,其中癌旁正常结肠黏膜32例、结肠增生性息肉24例、结肠低级别上皮内瘤变75例、结肠高级别上皮内瘤变和结肠管状腺癌各45例。结果 TAG-72抗原在正常结肠黏膜、增生性息肉、低级别上皮内瘤变、高级别上皮内瘤变及腺癌组的表达阳性率分别为3.12%、29.17%、53.33%、88.89%、100%。正常组与息肉组间表达率差异不显著(P>0.05);低级别、高级别上皮内瘤变组、腺癌组抗原表达率显著高于前两组(P<0.05);其中高级别上皮内瘤变组与腺癌组的抗原表达明显增高,但两组间表达差异不显著(P>0.05)。结论 TAG-72在结肠高级别上皮内瘤变及结肠癌中表达增高。由于TAG-72在结肠组织的恶性转化中起着重要作用,故其阳性表达及表达强度对诊断结肠腺癌和监测腺瘤癌变有重要意义。

肿瘤相关糖蛋白72和葡萄糖调节蛋白94在乳腺良恶性病变组织中的表达及其意义

目的:研究乳腺良恶性病变组织中肿瘤相关糖蛋白72(tumor-associated glycoprotein,TAG72)和葡萄糖调节蛋白94(glucose-regulated protein94,GRP94)的表达及其临床病理意义。方法:采用免疫组织化学法检测60例乳腺癌组织和30例乳腺良性病变组织中TAG72和GRP94的表达,并进行评分。应用Kaplan-Meier法对乳腺癌患者进行生存分析。结果:乳腺癌组织中TAG72和GRP94表达的阳性率分别为68.3%和63.3%,其总评分分别为2.53±1.86和2.73±2.23;乳腺良性病变组织的TAG72和GRP94表达阳性率分别为10.0%和13.3%,其总评分分别为0.37±1.13和0.47±1.22;乳腺癌组织与乳腺良性病变组织相比,差异均有统计学意义(P=0.000)。导管内癌、组织学分级为Ⅰ或Ⅱ级、肿瘤最大径≤3cm、无淋巴结转移、雌激素受体阳性、p53阴性及CA15-3阴性乳腺癌患者的TAG72和GRP94表达阳性率及其评分均明显低于浸润性导管癌(P<0.05)、组织学分级Ⅲ级(P<0.01)、肿瘤最大径>3cm(P<0.05)、淋巴结转移(P<0.01)、雌激素受体阴性(P<0.05)、p53阳性(P<0.01)和CA15-3阳性(P<0.01)的乳腺癌患者。TAG72和GRP94表达阳性的乳腺癌患者及两者均表达阳性的乳腺癌患者的术后生存期明显短于阴性表达者(P<0.01)。COX多因素分析结果显示,TAG74和(或)GRP94表达阳性均与术后生存率呈负相关,与死亡率呈正相关,均是独立的预后因素。结论:TAG72和GRP94表达在乳腺癌的发生、发展、临床生物学行为及预后方面可能具有重要作用,TAG72和(或)GRP94表达阳性的乳腺癌患者预后不良。

上皮细胞黏附因子及肿瘤相关糖蛋白-72在结肠癌中的表达及临床意义

目的探讨上皮细胞黏附因子(EpCAM)、肿瘤相关糖蛋白-72(TAG-72)在结肠癌组织中的表达及临床意义。方法采用免疫组化法检测132例结肠癌组织中EpCAM、TAG-72表达并计算评分,分析EpCAM、TAG-72表达与临床病理特征、预后的关系。结果EpCAM表达阳性率为65.91%,平均评分(2.48±0.54)分;TAG-72表达阳性率为70.45%,平均评分(2.56±0.62)分;EpCAM阳性并TAG-72表达阳性率为58.33%,平均评分(3.12±0.60)分。肿瘤直径>3 cm、低分化/黏胰腺、TNM分期(Ⅲ、Ⅳ期)、T 3~4浸润深度、有淋巴结转移的结肠癌患者EpCAM表达阳性率及TAG-72表达阳性率、评分显著高于肿瘤直径≤3 cm、高中分化、TNM分期(Ⅰ、Ⅱ期)、T 1~2浸润深度、无淋巴结转移者(P<0.05或P<0.01)。EpCAM表达阳性、TAG-72表达阳性、EpCAM表达并TAG-72表达阳性者评分显著高于表达阴性者,生存时间显著短于表达阴性者(P<0.01);EpCAM表达阳性并TAG-72表达阳性者评分显著高于EpCAM表达阳性者、TAG-72表达阳性者(P<0.01),生存时间显著短于EpCAM表达阳性者、TAG-72表达阳性者(P<0.01)。结论EpCAM、TAG-72表达与结肠癌肿瘤直径、分化程度、TNM分期、浸润深度、淋巴结转移相关,EpCAM、TAG-72阳性表达者生存时间明显缩短,EpCAM与TAG-72均阳性表达者预后更差。

消化道肿瘤相关抗原CA72-4、CA19-9的临床应用研究

目的 探讨糖类抗原CA72 4及CA19 9联合检测对消化道肿瘤诊断临床价值及预后意义。方法 用放免分析法检测 5 0例健康者 ,2 2 9例消化道疾病患者血清CA72 4、CA19 9浓度。结果 放免分析法测得新疆乌鲁木齐地区成年个体 5 0例血清中CA72 4抗原参比值 x±s为 (0 .78± 0 .98)U/ml,阳性界值为 3.8U/ml,CA19 9抗原参比值 x±s为 (8.8± 5 .3)U/ml,阳性界值为 37U/ml。结论 2 2 9例消化道疾病患者的临床观察分析认为 ,CA72 4、CA19 9对胃癌、结直肠癌、胰腺癌的诊断是一项有参考价值的肿瘤标志物 ,尤其对术后疗效判断及预后监测具有重要的参考价值。在恶性肿瘤的鉴别诊断中也具有较重要的意义。

靶向性肿瘤相关抗原TAG-72的scFv-CD28融合基因的真核表达载体的构建

目的 构建含抗肿瘤相关抗原TAG 72单链抗体及CD2 8胞内区及跨膜区融合基因的哺乳细胞表达载体 ,为制备消化道肿瘤靶向性嵌合锚定T细胞 ,并探讨其对消化道肿瘤的杀伤活性。方法 应用PCR法 ,将抗TAG 72单链抗体 (singlechainvariablefragment ,scFv)克隆入哺乳细胞表达载体pcDNA3 .0 ,在 5′端及 3′端分别引入相应酶切位点 ;用RT PCR法从正常人外周血T细胞克隆CD2 8胞内区及跨膜区的cDNA ,然后将其克隆于scFv的下游 ,并在 5′端及 3′端引入相应的酶切位点。结果 抗TAG 72scFvcDNA片段为 72 9bp ,与已知的序列相符 ;CD2 8胞内区及跨膜区的cDNA片段为 2 40bp ,与Genebank公布的序列一致。重组的表达载体经酶切琼脂糖电泳测序加以证实。结论 完成了抗肿瘤相关抗原TAG 72scFv及CD2 8胞内区及跨膜区融合基因scFv CD2 8 pcDNA3 .0的构建 ,为制备消化道肿瘤靶向性嵌合锚定T细胞奠定了实验基础。

肿瘤相关糖蛋白72在胃癌组织和外周血中的表达及临床意义

目的研究肿瘤相关糖蛋白72(tumor-associated glycoprotein 72,TAG-72)在胃癌组织中的表达情况及临床意义;分析胃癌组织中TAG-72及术前外周血TAG-72(即糖类抗原724,CA724)在表达、预后判断方面的相关性。方法采用免疫组化法检测149例胃癌患者组织TAG-72的表达,用电化学发光法检测71例胃癌患者术前外周血CA724水平。结合临床资料,分析TAG-72表达与胃癌患者病理特征关系。采用Kaplan-Meier法和Log-Rank法评估患者生存率,通过Cox回归分析影响胃癌患者预后的危险因素。结果胃癌组织TAG-72表达阳性率显著高于癌旁正常组织(53.02%vs 12.94%,P<0.05)。TAG-72表达阳性组患者总体生存率(P<0.05)及5年生存率(P<0.01)均低于TAG-72表达阴性组。TAG-72表达是胃癌患者生存预后的独立危险因素(P<0.05)。胃癌组织中TAG-72与术前外周血CA724表达水平呈弱相关(r=0.314,P=0.008),术前外周血CA724表达与胃癌患者生存率无相关性。结论TAG-72在胃癌组织中高表达,是胃癌患者不良预后的独立危险因素。术前外周血CA724与胃癌组织TAG-72表达呈弱相关,术前外周血CA724与患者生存预后无相关性。

基于肿瘤相关糖抗原的抗肿瘤疫苗研究进展

由于肿瘤细胞可以逃避免疫系统监视,使得人体免疫系统将肿瘤细胞误认为正常细胞而不予杀死.同时,肿瘤细胞与正常体细胞的相似性,又使已有的药物无法高选择性地杀死肿瘤细胞而不伤及正常细胞.

CA72-4在肿瘤诊治中的应用价值

肿瘤标记物是细胞癌变过程中产生的在正常细胞中缺乏或含量极微的特异性和相对特异性的物质,也可能是宿主细胞针对癌细胞产生的正常细胞成分,但在量和质上与正常状态或良性疾病时明显不同。通过化学、免疫、分子生物学等技术对血液、体液、提取液等进行定性或定量检测,对肿瘤的诊断、治疗效果和判断预后均有重要的的临床意义。CA72-4作为一种较新的肿瘤标记物,在多种肿瘤(如胃癌、卵巢癌、结直肠癌等)的诊断、鉴别诊断、病情监测及预后评估中的作用日益受到重视。CA72-4联合其他肿瘤标记物的检测,有利于肿瘤的早发现、早诊断和早治疗。

结肠胰腺癌相关抗原的纯化及其诊断意义

本文参照处Shimano和Kitada方法从正常人结肠粘膜中分离纯化了结肠胰腺癌相关抗原(简称PCAAc),建立了双抗夹心ELISA检测方法,以探讨对胰腺癌诊断的临床价值。现报道如下:

骨肉瘤相关抗原的初步分离、纯化与分析

本文采用高渗氯化钾抽提法和免疫吸附法从人骨肉瘤（ＯＳ）组织中初步分离纯化出了一种骨肉瘤相关抗原（ＯＳＡＡ），经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、免疫印渍分析及糖蛋白染色，证实该抗原系分子量为５７ＫＤ的糖蛋白，并命名为Ｏｇｐ５７。经抗原检测和比较分析，初步认为Ｏｇｐ５７有可能是一种新的ＯＳＡＡ。

胃癌早期诊断相关血清肿瘤标志物的研究进展

早期诊断是降低胃癌患者不良预后的关键,使用血清肿瘤标志物检测胃癌更加方便、安全。胃癌相关血清肿瘤标志物包括DNA甲基化、非编码RNA、胃蛋白酶原、胃泌素、骨桥蛋白、乳腺癌转移抑制基因、胃癌相关抗原、糖类抗原72-4等。分析表明,DNA甲基化、非编码RNA在肿瘤诊断中的灵敏度及特异度仍较低,但在胃癌肿瘤细胞分化、侵袭、转移等具有一定的价值,且可改善胃癌预后及提供新的治疗靶点。胃蛋白酶原在胃癌早期筛查中灵敏度较低、特异度较高,而胃蛋白酶原联合胃泌素17有较高的灵敏度及特异度,联合检测对筛查早期胃癌意义重大。骨桥蛋白诊断胃癌的灵敏度低、特异度高,用于诊断胃癌有一定的参考价值。胃癌相关抗原诊断胃癌有较高的灵敏度及特异度。乳腺癌转移抑制基因在判断淋巴结转移具有一定的价值,但其灵敏度及特异度仍待进一步的研究。CEA、CA199、CA242及CA724诊断胃癌的灵敏度均偏低,但特异度均极高,四者联合检测具有较高的灵敏度及特异度,为胃癌早期诊治提供强有力的参考依据。

肿瘤相关糖蛋白-72特异性T细胞活化融合基因的分子克隆

目的克隆正常人T细胞CD3ξ胞内区、跨膜区基因,将其与肿瘤相关抗原肿瘤相关糖蛋白-72(TAG-72)特异性单链抗体基因克隆入真核表达载体。方法 用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法从正常人外周血T细胞扩增出CD3ξ胞内区、跨膜区基因;应用PCR法扩增抗TAG-72特异性单链抗体(scFv)基因;将该单链抗体与CD3ξ基因顺序克隆构建重组真核表达载体scFv-CD3ξ-pcDNA3.0并测序。结果抗TAG-72 scFv cDNA片段为729 bp,与已知的序列相符;CD3ξ胞内区、跨膜区的cDNA片段为306 bp,与Gene Bank公布的序列一致。重组的表达载体经酶切琼脂糖电泳及测序加以证实。结论成功构建了含抗肿瘤相关抗原TAG-72scFv及CD3ξ胞内区、跨膜区序列的重组表达载体scFv-CD3ξ-pcDNA3.0,为制备消化道肿瘤靶向性嵌合锚定T细胞奠定了实验基础。