14种药用植物抗肿瘤筛选初报

报道了利用人脑胶质用体外培养细胞系５ＨＧ－４４筛进１４种药用植物的初步结果，其中钢钻ＭａｐｐｉａｎｔｈｕｓｉｏｄｏｉｄｅｓＨａｎｄ。Ｍａｚｚ，和倒吊笔ＷｒｉｇｈｔｉａｐｕｂｅｓｃｅｎｓＲ．Ｂｒ在体外具有较好的抗肿瘤活性，两者的半数抑制浓度ＩＣｓ０（４溶性组分μｇ／ｍｌ）分别为３２和２。

肿瘤患者个体化治疗药物筛选技术研究进展

目前,我国肿瘤发病率逐年攀升,每年新发肿瘤患者数目已居世界首位。现今肿瘤常规治疗方法为手术联合放化疗、靶向治疗和免疫治疗,但不同肿瘤患者对化疗药物敏感性存在巨大差异,故通过体外药物敏感性筛选技术筛选患者最为敏感的药物,从而指导患者个体化用药尤为重要。目前肿瘤患者个体化用药筛选技术较多,每项技术各有优缺点,本文对常用的几种技术的应用进行综述,为肿瘤患者个体化用药技术的筛选提供参考。

几种化学计量学方法在放线菌及其次生代谢产物抗肿瘤活性筛选中的应用

当今肿瘤的诊断与治疗对人类健康非常重要.在放线菌次生代谢产物内寻找抗肿瘤抗生素的过程中,如何从种类多、数量大的土壤放线菌株中确定目标菌株,筛选是关键.将化学计量学方法用于大批量的放线菌及其次生代谢产物的筛选数据分析,首先通过主成分分析获得具有抗肿瘤活性菌株对6种肿瘤细胞抑制作用的一些关系与特异性,其次在进行菌株次生代谢产物的分子模型筛选数据分析时,利用比较分析发现有较好肿瘤抑制作用者,基本与细胞筛选结果吻合.二者结合建立了一种简便适当的分析模式,能较快地从大批量放线菌株的筛选中找到具有抗肿瘤活性的有研究价值的目标放线菌株.

肿瘤细胞膜模型筛选抗肿瘤多肽新方法的建立

背景与目的:部分多肽类药物具有靶向选择性抗肿瘤作用,目前针对多肽抗肿瘤的研究都是基于某一或数个肽链的信息,受到现有多肽信息的限制。本研究旨在通过肿瘤细胞膜模型的建立,应用核糖体表达法进行抗肿瘤多肽筛选。方法:选择已知可在肿瘤细胞膜上穿孔的阳性对照多肽Mast21和MastoparanX优化人工合成的肿瘤脂质体细胞膜模型。组建可直接用于体外多肽表达的DNA库,应用核糖体表达法进行特异性抗肿瘤多肽筛选,应用MTT法检测筛选的多肽在体外抗肿瘤效果。结果:应用核糖体体外表达法和脂质体(PE/PS,3∶7)肿瘤细胞膜模型成功地从设计的肽库中筛选出一些肽,体外实验证实部分多肽能抑制非小细胞肺癌细胞株(NCI-H460)生长,而对正常人体纤维细胞CCD-27SK无影响。结论:合适的肿瘤细胞膜模型和核糖体表达法,可从肽库中筛选特异性抗肿瘤多肽,为开发作用机制完全不同的抗肿瘤新药奠定基础。

体外MTT法筛选白花蛇舌草抗肿瘤活性部位

目的:实验筛选出中药材的药理活性部位。方法:采用体外MTT法进行肿瘤细胞抑制率试验。将全草提取物分为9个不同的极性部位,据白花蛇舌草的临床疗效,选用肿瘤细胞BGC-823分别进行筛选。结果:初步显示F5部位对肿瘤细胞BGC-823具有抑制作用,并呈现一定剂量关系。结论:初步认为白花蛇舌草的抗肿瘤活性部位为部位F5。

喜树碱衍生物抗肿瘤活性的初步筛选及部分作用机制

目的通过体内、外实验筛选喜树碱衍生物Ⅰ-Ⅻ的抗肿瘤活性并初步探讨其作用机制。方法四甲基偶氮唑法（MTT）检测喜树碱衍生物对多种肿瘤细胞的抑制率;建立荷瘤小鼠模型测定抑瘤率;采用脾细胞增殖法检测荷瘤小鼠脾淋巴细胞生成白介素2（IL-2）的含量,Griess法检测荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞生成一氧化氮（NO）的含量,放免法测定荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞生成肿瘤坏死因子α（TNFα-）的含量。结果衍生物Ⅶ、Ⅷ体外能明显抑制肿瘤细胞增殖,衍生物Ⅷ对荷瘤小鼠具有较强的抑瘤作用,衍生物Ⅶ、Ⅷ可降低荷瘤小鼠NO,升高TNFα-和IL-2,并且衍生物Ⅷ呈明显的剂量依赖关系。结论通过体内外的初步筛选得到的衍生物Ⅷ能高效杀伤肿瘤细胞,具有进一步研究开发前景。

利用蚕豆根尖细胞诱变微核率变化筛选抗肿瘤中草药的尝试

[目的]观察黄芪等中草药对蚕豆根尖细胞诱变微核率的影响,筛选具有抗肿瘤、抗诱变作用的中药。[方法]采用诱变剂甲基磺酸乙酯(EMS)处理提高蚕豆根尖细胞的微核率,观察中药对微核率的降低程度。[结果]黄芪、黄连、芦荟、甘草、刺五加、枸杞均能不同程度地降低由EMS诱发的蚕豆根尖细胞的微核率,与模型组比较具有显著性差异(均P <0.05或P<0.01),艾叶和木槿花则无明显作用;黄芪和甘草均对蚕豆根尖细胞本底微核率无明显影响。[结论]利用降低蚕豆根尖细胞微核率作为指标是筛选抗肿瘤中草药的有效方法之一。

以p53为靶点的新型抗肿瘤化合物细胞筛选模型的构建与应用

目的构建含有p53蛋白结合位点的p21或survivin基因启动子区的荧光素酶报告基因重组质粒,并获得稳定转染的细胞模型用于抗肿瘤化合物筛选。方法将含有p53蛋白结合位点的p21或survivin启动子区序列连接到pGL4.17-basic载体上,分别获得报告基因重组质粒pGL4.17-p21和pGL4.17-survivin;将两种重组质粒分别转染A549细胞,经G418筛选获得稳定转染细胞株A549-p21和A549-survivin;对该细胞模型进行条件优化,并将可调节p53蛋白表达的多种抗肿瘤药物作用于稳定转染细胞,通过荧光素酶检测和western blot方法验证细胞模型用于药物筛选的可行性。结果成功建立了分别含有p21或survivin启动子报告基因的A549-p21和A549-survivin稳定细胞模型,多种抗肿瘤药物作用该细胞后能够通过调节p53蛋白表达而影响报告基因荧光素酶活性。结论构建的稳定转染细胞模型可以用于筛选以p53为靶点的抗肿瘤化合物。

以c-Met为靶点的抗肿瘤系列化合物体内外药效筛选

目的从8个LY系列肝细胞生长因子受体(c-Met)酪氨酸激酶抑制剂中筛选具有抗肿瘤活性的化合物,并进一步评价其体内外抗肿瘤作用。方法首先采用均相时间分辨荧光技术(HTRF)对LY系列化合物进行初步筛选,观察它们对c-Met酪氨酸激酶的抑制作用;采用CCK-8法观察筛选出的活性化合物在体外对人胃癌MKN-45、人神经胶质瘤U87MG、人肾癌Caki-1、人前列腺癌PC-3细胞株的增殖抑制作用。建立人恶性胶质母细胞瘤U87MG裸小鼠移植瘤模型,考察活性化合物的抑瘤效果。结果 HTRF结果显示有4个活性较好的化合物(LY22、LY25、LY28、LY32),其中LY28对c-Met抑制作用优于阳性对照药克唑替尼(Crizotinib)。CCK-8结果显示这些活性化合物对选用的4种靶细胞均有不同程度的抑制作用,其中LY28对肿瘤细胞增殖抑制作用最明显。裸小鼠移植瘤实验显示,LY28可显著抑制U87MG裸小鼠移植瘤的增殖,40 mg/kg LY28抑瘤率达到78.13%。结论化合物LY28具有较好的抗肿瘤活性,具有进一步研发的价值。

一种基于荧光图像的体外抗肿瘤药物快速筛选方法

目的:建立一种基于荧光成像的抗肿瘤药物体外快速筛选系统。方法:①采用二乙酸荧光素(FDA)标记测定活细胞数法,评价26个乌药组分对的体外抗肿瘤活性,并对本方法的线性范围和精密度进行了考察;②在活性筛选结果的指导下,应用LC/MS对样品进行分析,初步推断药效活性物质。结果:①该方法在细胞密度为0～10 000/孔的范围内荧光强度与细胞个数线性相关(r2=0.9858),板内的精密度为9.41%;②在26个乌药组分中,筛选得到两个抗肿瘤活性较强的组分C13和C15,抑制率均达到90%以上。结论:本方法快速、稳定、简便、线性范围宽,可用于从复杂中药组分中快速筛选抗肿瘤活性物质。此外,根据LC/MS分析结果并结合文献报道,推断乌药中具有抗肿瘤活性的化合物为异波尔定碱。

非劣效抗肿瘤药物临床试验样本量的估算

非劣效抗肿瘤药物临床试验在新药的开发和临床推广应用中具有重要作用,其样本量的估算是临床试验的关键环节。本研究中,结合相关文献,按不同的分析和评价指标(计量指标、计数指标、生存分析),结合实例探讨需要考虑的效应量和统计特征,以及样本量的估算过程。非劣效抗肿瘤药物临床试验样本量的估算,首先要明确非劣效界值,然后根据临床试验涉及的不同分析和评价指标确定相应的效应量,选择相匹配的统计特征,才能准确估算样本量。临床试验中,足够的样本量是提高试验科学性和研究结果准确性的重要条件之一。

从三七渣和三七废液中提取的三种成分在不同浓度下的体外细胞抗肿瘤活性筛选

目的:考察从三七渣和三七废液中提取的3种成分在不同浓度下对人肝癌细胞HepG2、人皮肤黑色素瘤细胞A375、人结肠癌细胞HCT-116、人胃癌细胞SGC-7901、人肺癌细胞A549的体外抗肿瘤活性。方法:采用改良MTT法对5种人源性肿瘤细胞进行体外抑瘤药理活性筛选。结果:对于HepG2,脂溶性提取物为2 mg/ml的给药组OD值低于空白组,能抑制细胞生长,差异有统计学意义(P<0.05)。对于HCT-116,脂溶性提取物为2、1 mg/ml的给药组OD值低于空白组,能抑制细胞生长;500、200 μg/ml的给药组OD值高于空白组,可促进细胞生长;差异有统计学意义(P<0.05)。对于SGC-7901,脂溶性提取物为2、1 mg/ml的给药组OD值低于空白组,能抑制细胞生长;500、200 μg/ml的给药组OD值高于空白组,能促进细胞生长;差异有统计学意义(P<0.05)。对于A375,脂溶性提取物为2、1 mg/ml的给药组OD值低于空白组,能抑制细胞生长;差异有统计学意义(P<0.05)。对于A549,脂溶性提取物为2 mg/ml的给药组OD值低于空白组,能抑制细胞生长;1 mg/ml、500 μg/ml、200 μg/ml的给药组OD值高于空白组,能促进细胞生长;差异有统计学意义(P<0.05)。结论:三七渣和三七废液中的脂溶性提取物在高浓度时具有明显的抑制细胞增殖作用,在低浓度时,一般具有明显的促进细胞增殖的作用;而富含三七素及水溶性的三七提取物对肿瘤细胞活性的影响不大。

肝胆肿瘤模型与精准药物筛选新技术

肝胆肿瘤是包括原发性肝癌、胆管癌和胆囊癌在内的恶性肿瘤。目前,肝胆肿瘤已成为世界范围内癌症相关死亡的第二大病因,而对于肝胆肿瘤的治疗手段仍无法有效应对临床需求。因此,探索开发肝胆肿瘤精准药物筛选的实验技术,寻找临床治疗新策略新方法,为早期诊断和综合治疗提供新思路,是当前领域内的关键问题。本文主要围绕肝胆肿瘤个性化病理模型的构建及药物筛选方案,特异靶点药物的设计与筛选策略,基于人工智能和大数据分析的药物筛选策略等方面介绍肝胆肿瘤精准药物筛选新技术的最新研究进展,探讨其应用潜力,并展望未来发展方向。

肿瘤血管生成抑制剂筛选模型的研究进展

目的:介绍肿瘤血管生成抑制剂(tumor angiogenesis inhibitor,TAI)筛选模型的研究进展。方法:查阅国内外相关文献进行分析和归纳。结果:TAI的筛选主要依赖于采用形态学检测法测定血管的生成活性。TAI筛选的程序为:体外筛选→体内筛选→应用肿瘤模型进行全面最终的评价。结论:TAI对于肿瘤治疗有重要作用,其筛选模型的研究取得突破性进展。

肿瘤蛋白质组学的应用现状和发展前景

肿瘤蛋白质组学可用于了解肿瘤的早期诊断，病程监测，以及药物筛选等方面．本文主要以肿瘤蛋白质组的研究技术和对肿瘤的筛选而解释它的研究进展。

山梨猕猴桃根提取物抗肿瘤活性研究

目的从山梨猕猴桃根中筛选抗肿瘤活性成分。方法采用MTT法、细胞集落形成法筛选山梨猕猴桃根提取物的抗肿瘤活性成分。结果山梨猕猴桃根提取物用集落形成法R6,R8对胃癌细胞株SGC7901、白血病细胞株L1210、神经性肿瘤细胞株NG108-15、肝癌细胞株Bele7404的增殖有抑制作用;用MTT法对NG108-15,SGC7901的增殖有抑制作用。山梨猕猴桃根两种提取物(R6,R8)对脾淋巴细胞没有免疫毒性。结论山梨猕猴桃根提物R6,R8有抗肿瘤活性。

循环肿瘤细胞药物敏感性指导的化学治疗在晚期胆系肿瘤中的临床疗效

目的观察循环肿瘤细胞(CTC)药物敏感性指导的化学治疗在晚期胆系肿瘤中的临床疗效和安全性。方法收集2018年7月至2020年4月海军军医大学(第二军医大学)东方肝胆外科医院肿瘤生物治疗科收治的26例晚期胆系肿瘤患者,抽取患者外周血分离和富集CTC,用胆系肿瘤中常用的固定化学治疗方案进行药物敏感性检测,选取最佳方案对患者进行化学治疗(CTC组)。选择同期19例行GEMOX方案(吉西他滨+奥沙利铂)化学治疗的晚期胆系肿瘤患者作为对照(GEMOX组)。观察两组患者化学治疗后的客观缓解率(ORR)、疾病控制率(DCR)、无进展生存期(PFS)、总生存期(OS)及安全性。结果所有患者均可评价疗效与安全性,CTC组完全缓解1例,部分缓解4例,疾病稳定12例,疾病进展9例;GEMOX组部分缓解1例,疾病稳定10例,疾病进展8例。CTC组和GEMOX组患者的ORR分别为19.2%(5/26)和5.3%(1/19),DCR分别为65.4%(17/26)和57.9%(11/19)。CTC组患者的中位PFS为5.8个月(95% CI 4.5~7.2个月),GEMOX组为5.1个月(95% CI 4.6~6.4个月),差异无统计学意义(P=0.313)。CTC组患者的中位OS为13.6个月(95% CI 10.8~16.3个月),GEMOX组为7.9个月(95% CI 5.5~10.3个月),差异有统计学意义(P=0.003)。所有患者中,主要不良反应有贫血、中性粒细胞减少、血小板减少、乏力及厌食,均可耐受,且无治疗相关性死亡。结论 CTC药物敏感性指导的化学治疗提高了晚期胆系肿瘤反应率,延长了患者总生存期,且不良反应可耐受。CTC药物敏感性检测可操作性强,对临床准确选择个体化化学治疗方案有一定的指导价值,值得进一步推广。

肿瘤新药Ⅱ期临床试验中的多阶段设计

在肿瘤新药Ⅱ期临床试验中,往往要对多个瘤种、多种剂量或用法进行探讨,目的是淘汰无效剂量、筛选敏感瘤种,以便进一步深入研究。当某试验组疗效未达到预期效果时,研究者希望尽可能早地终止该试验组的研究,避免更多的受试者接受无效的治疗。本文介绍多阶段设计,包括单阶段设计、二阶段设计和三阶段设计的统计学原理和设计思路,并提供各阶段设计所需样本含量和早期终止的价值,并以实例说明。

蜂胶超临界CO_2萃取物的体外抗肿瘤试验研究

目的研究蜂胶的超临界CO2萃取物的体外抗肿瘤作用。方法以蜂胶的超临界CO2萃取物(SE-P)为原料,采用MTT法研究其对U937、95D、SGC-7901和TE-1共4株肿瘤细胞的体外抑制作用,并与市售蜂胶乙醇提取物(ME-P)和蜂胶超临界CO2萃余物95%乙醇提取物(RE-P)的抗肿瘤活性进行对比。结果SE-P在体外对肿瘤细胞U937、95D、SGC-7901和TE-1具有较强的抑制作用,IC50分别为117.42μg/mL、138.92μg/mL、37.76μg/mL和67.89μg/mL。除95D细胞外,SE-P对其他3株肿瘤细胞的最高抑制率均高于ME-P和RE-P。结论蜂胶的超临界CO2萃取物(SE-P)对体外培养的肿瘤细胞有较强的生长抑制作用。