中药干预肿瘤微环境相关细胞抗肿瘤耐药的作用机制

肿瘤发病率逐年上升,化疗作为其主要治疗手段之一,在临床实际应用上却面临着严重的耐药问题。肿瘤微环境中的肿瘤相关成纤维细胞、肿瘤相关巨噬细胞和肿瘤干细胞与化疗耐药性密切相关,它们通过各种途径影响化疗药物的分布与渗透,能在化学压力下存活并分泌多种细胞因子,促进肿瘤细胞生长并产生耐药性。中药有效成分及中药复方具有多靶点作用的优势,能够有效调控肿瘤微环境细胞的招募与浸润,重编程其细胞表型,抵抗其作用途径,从而发挥抗肿瘤和抗化疗耐药的作用。

高危耐药及复发妊娠滋养细胞肿瘤诊疗现状

妊娠滋养细胞肿瘤(gestational trophoblastic neoplasia,GTN)可根据国际妇产科联盟临床分期及预后评分系统将患者分为低危和高危两大类,其中高危患者具有较高的单药化疗耐药风险,应首选联合化疗。然而,仍有部分高危患者在联合化疗后出现耐药或在治愈后复发,此类患者异质性强,后续治疗难度大,近年来受到研究者广泛关注。本文就高危耐药及复发GTN患者的危险因素及治疗策略进行综述,以期为早期识别高风险患者及其精准治疗提供依据。

利拉鲁肽对人胰腺癌耐药细胞株增殖和凋亡的影响及机制研究

目的研究胰高糖素样肽1受体(GLP-1R)激动剂利拉鲁肽对人胰腺癌耐药细胞株PANC-1-GR增殖和凋亡的影响及机制。方法应用聚合酶链反应(PCR)和Western blot检测人胰腺癌细胞株PANC-1和人胰腺癌耐药细胞株PANC-1-GR中GLP-1R、蛋白激酶A(PKA)的表达,利用不同浓度(10、100、1000 nmol/L)利拉鲁肽处理PANC-1-GR细胞,PCR和Western blot检测GLP-1R/PKA信号通路的表达,细胞计数试剂盒8(CCK8)检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,Western blot检测促凋亡蛋白的表达。分别加入GLP-1R拮抗剂Ex-9和PKA抑制剂H89,再次检测利拉鲁肽对细胞增殖和凋亡的影响。结果CCK8检测结果显示,与对照组相比,10、100及1000 nmol/L利拉鲁肽干预24 h和48 h后PANC-1-GR细胞增殖存活率降低(P<0.05)。Western blot结果显示,与对照组相比,10、100及1000 nmol/L利拉鲁肽干预24 h后PANC-1-GR细胞中促凋亡蛋白Bax和胱天蛋白酶3的表达升高(P<0.05);流式细胞仪检测结果显示,与对照组相比,10、100及1000 nmol/L利拉鲁肽干预24 h后PANC-1-GR细胞中凋亡细胞数量增加(P<0.05)。PCR和Western blot结果显示,与对照组相比,10、100及1000 nmol/L利拉鲁肽干预24 h后GLP-1R和PKA表达升高(P<0.05)。CCK8检测结果显示,与利拉鲁肽组相比,利拉鲁肽+Ex-9组和利拉鲁肽+H89组细胞增殖存活率升高(P<0.05)。流式细胞仪检测结果显示,与利拉鲁肽组相比,利拉鲁肽+Ex-9组和利拉鲁肽+H89组细胞凋亡率降低(P<0.05)。结论利拉鲁肽可抑制人胰腺癌耐药细胞增殖并促进其凋亡,其机制可能是通过激活GLP-1R/PKA信号通路实现的。

MiR-31-5p调控非小细胞肺癌吉非替尼耐药机制的研究

目的:探讨miR-31-5p对吉非替尼耐药的影响及其作用机理。方法:利用TargetScan、miRDB、mirDIP和ENCORI等在线工具预测PRSS8的靶向miRNAs,并从高通量数据库(GEO)搜索并下载与吉非替尼耐药相关的miRNA芯片数据,筛选差异表达的miRNAs。利用实时荧光定量PCR技术(RT-qPCR)检测miR-31-5p在吉非替尼敏感的NSCLC(PC9)和对吉非替尼产生耐药的NSCLC(PC9/GR)表达。将PC9/GR细胞分为两组,分别转染miR-31-5p NC、miR-31-5p mimic;应用CCK8技术测定经转染处理后的细胞对吉非替尼的敏感性;应用蛋白免疫印迹分析法(WB)测定细胞PRSS8、BAX、BCL-2的表达。结果:生信分析表明miR-31-5p为靶向PRSS8且在吉非替尼耐药细胞中异常表达的miRNA。实时定量PCR分析表明,miR-31-5p在PC9/GR细胞中的表达量相比PC9细胞有所降低(P<0.0001)。miR-31-5p mimic组细胞增殖速度明显低于NC组(均P<0.0001)。在miR-31-5p mimic组中,与NC组相比,BAX蛋白的表达水平显示出上升趋势(P<0.001),而BCL-2水平下降(P<0.05)。进一步研究发现,miR-31-5p mimic组PRSS8 mRNA(P<0.0001)、蛋白均下调(P<0.05)。结论:非小细胞肺癌耐药细胞PC9/GR中miR-31-5p表达明显下降,且miR-31-5p通过降低PRSS8的表达可能有助于逆转PC9/GR细胞对吉非替尼药物耐药的情况。

小细胞肺癌免疫治疗耐药机制及后线治疗策略研究进展

免疫治疗是小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)的重要治疗手段之一,极大改善患者的预后。但由于治疗期间出现迅速耐药,导致很大一部分患者无法从中受益。本文总结了针对SCLC免疫治疗中产生耐药性的关键分子机制的最新研究,包括PD-L1表达缺失、抗原呈递受损、T细胞本身缺乏和浸润受限、PI3K/AKT信号通路的激活、基因组损伤和克隆多样性爆发等。我们还探索了对免疫治疗耐药后进展的策略,包括免疫治疗再挑战的可能、联合放疗、联合抗血管生成药物及其他可能疗法,为提高SCLC免疫治疗的临床疗效提供参考。

外泌体miRNA参与肿瘤化疗耐药的机制

背景:化疗作为癌症治疗的常见手段,前期具有一定的治疗效果,但随着化疗次数增加,肿瘤细胞对药物的抵抗性也逐渐增加,即化疗耐药性。目前化疗耐药性产生的主要机制包括化疗药物未能达到肿瘤部位,药物活性丧失导致药效下降,肿瘤细胞通过重塑代谢功能、基因表型和微环境逃避药物攻击等,但具体机制还有待深入探讨。目的:归纳并总结不同肿瘤中外泌体miRNA参与耐药的机制,提出潜在靶点。方法:以“hematological malignancies,liver cancer,lung cancer,breast cancer,melanoma,colorectal cancer,drug resistance,exosomal miRNAs”为英文检索词,检索PubMed数据库。检索时间范围为2013年1月至2023年8月。通过阅读文题和摘要进行初步筛选,排除与此次研究内容相关性差或内容重复的文献,最后纳入60篇文献进行综述。结果与结论:(1)外泌体miRNA进入细胞间质和循环,通过发挥局部旁分泌或远端效应,参与不同肿瘤生物进程的形成和发展,包括肿瘤微环境重塑、血管生成和耐药性产生;(2)外泌体miRNA可以透过细胞膜进入另一个细胞的胞浆内,通过传递miRNA启动或抑制受体细胞中的信号通路,在化疗过程中维持细胞存活、增殖和转移能力,从而导致耐药产生;(3)目前已经鉴定出许多与化疗耐药有关的外泌体miRNA,并将其作为常见肿瘤治疗靶点来开展研究;(4)虽然外泌体miRNA作为潜在的生物标志物和治疗靶点具有很大的前景,但仍有一些研究缺陷需要解决:一是缺乏用于外泌体分离和表征的标准化方案,导致不同研究中使用的方法存在差异;二是虽然外泌体中miRNA的存在和丰度已被广泛研究,但其功能作用和作用机制尚不完全清楚,阐明外泌体miRNA调控的特定靶点和途径可以为它们的生物学意义和潜在的治疗应用提供有价值的见解。解决这些研究缺陷将有助于更全面了解外泌体miRNA及其在各个领域的潜在应用,包括诊断、治疗和个性化医疗。

工程化间充质干细胞来源外泌体在靶向递送抗肿瘤药物中的应用与问题

背景:间充质干细胞来源外泌体具有免疫原性低且肿瘤归巢能力强等优点,在靶向递送药物方面备受关注。但外泌体在到达靶细胞前易被体内循环迅速清除,此外,由于外泌体表面性质和摄取机制复杂,其靶向性并不十分明显,需要一定的工程化策略提高递送效率。目的:通过综述间充质干细胞来源外泌体工程化修饰的不同策略,了解提高外泌体递送效率的相关机制、临床前应用和面临的问题,为进一步临床应用提供理论依据。方法:检索中国知网、维普、万方、PubMed数据库从建库至2024年的相关文献,检索词为“间充质干细胞,外泌体,工程化外泌体,靶向递送,抗肿瘤药物”和“mesenchymal stem cells,exosomes,engineered exosomes,targeted delivery,antineoplastic agents”,筛选工程化间充质干细胞来源外泌体靶向递送抗肿瘤药物的文献,共计纳入85篇文献进行综述分析。结果与结论:(1)间充质干细胞来源外泌体的工程化修饰复杂多样,可通过显著增强外泌体对器官或组织靶向能力,增加血液循环中停留时间,以及降低外泌体中促肿瘤分子的表达,以此达到提高外泌体递送效率的效果;(2)间充质干细胞外泌体在目前的抗肿瘤治疗研究中递送传统和新型药物具有巨大前景;(3)当前仍然存在一些安全问题不能将其转化在临床中,未来的研究将进一步改进和深入研究递送机制,有望开发出更为高效和安全的治疗策略。

SWI/SNF染色质重塑复合物在肿瘤耐药中的作用

肿瘤耐药是化疗和靶向药物治疗面临的重要问题,它是一个涉及染色质重塑的复杂过程。SWI/SNF是肿瘤发生中研究最多的ATP依赖性染色质重塑复合物之一,在染色质结构稳定性、基因表达和翻译后修饰的协调过程中起着重要作用,但其调控肿瘤耐药的机制尚未被系统梳理。SWI/SNF按其亚基组成可分为BAF、PBAF和ncBAF 3种,这3种亚型均包含ATP酶催化亚基、核心亚基和调节亚基,可以通过调控染色质结构来控制基因表达。SWI/SNF复合物亚基的改变是调控肿瘤耐药和进展的重要因素之一,充分了解该复合物在肿瘤耐药中的分子机制可以改善癌症的治疗。本文总结了SWI/SNF复合物的组成、引起肿瘤耐药的突变或异常表达亚基类型、主要的耐药机制以及肿瘤耐药的克服方法等,为临床上SWI/SNF亚基突变或异常表达引起的肿瘤预后不良的诊断和治疗提供了思路。

基于网络药理学探讨欣力康胶囊对EGFR依赖性及奥希替尼耐药性非小细胞肺癌细胞增殖抑制作用及机制验证

目的通过网络药理学和细胞生物行为学实验探究欣力康胶囊(XLKC)治疗非小细胞肺癌(NSCLC)的主要活性成分及潜在作用机制。方法利用HERB、Swiss Target Prediction和GeneCards等数据库获取XLKC的药物靶点信息和NSCLC疾病靶点信息。使用Cytoscape软件构建成分-疾病网络和PPI网络,并使用Metascape工具进行GO和KEGG富集分析。分子对接技术评估潜在靶标与生物活性化合物之间的结合亲和力。选择EGFR依赖性NSCLC细胞PC9为研究对象,利用药物浓度递增法构建奥希替尼耐药PC9细胞(PC9-OR);使用MTS比色法评估XLKC对PC9和PC9-OR细胞的增殖抑制作用,采用Western blot法开展作用机制研究。结果通过网络药理学方法,确定了XLKC的777种活性化合物和1194个靶点。在PPI网络中,发现了参与程度较高的靶点,包括AKT1和MAPK1等。GO和KEGG富集分析表明,XLKC主要通过影响EGFR酪氨酸激酶抑制剂耐药通路、转录调控、复合蛋白磷酸化、激酶活性调控、癌症通路以及PI3K/Akt信号通路治疗NSCLC。分子对接结果表明,关键靶点与活性成分均具有较好的结合活性。此外,实验证实XLKC可有效抑制PC9和PC9-OR细胞的增殖,促进细胞凋亡;下调EGFR磷酸化水平和蛋白表达水平,同时可下调c-MET蛋白表达水平,提示其抑制PC9和PC9-OR细胞增殖作用可能依赖于EGFR和c-MET信号通路。结论本研究通过网络药理学确认XLKC具有治疗NSCLC的潜质,并利用实验证实XLKC可能通过EGFR和c-MET信号通路,抑制EGFR依赖性及奥希替尼耐药性NSCLC的细胞增殖,为探索XLKC治疗NSCLC的临床应用提供依据。

外泌体circ-0001328靶向miR-545-3p对胆囊癌细胞吉西他滨耐药的影响

目的:明确circ-0001328、miR-545-3p对胆囊癌细胞吉西他滨(gemcitabine,GEM)耐药的影响并探究相关机制。方法:从胆囊癌细胞(NOZ、GBC-SD和SGC-996)和对GEM耐药的胆囊癌细胞(NOZ/G、GBC-SD/G和SGC-996/G)中提取外泌体,采用qRT-PCR检测circ-0001328、miR-545-3p表达水平。将NOZ/G细胞分别转染sh-NC载体(sh-NC组)、sh-circ-0001328载体(sh-circ-0001328组)、inhibitor-NC(inhibitor-NC组)、miR-545-3p inhibitor(miR-545-3p inhibitor组)、sh-circ-0001328+miR-545-3p inhibitor(sh-circ-0001328+miR-545-3p inhibitor组),采用CCK-8法检测GEM半抑制浓度(semi-inhibitory concentration,IC 50)和光密度(optical density,OD)值,EdU染色检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot法检测增殖相关蛋白(Cyclin E1、CDK2)和凋亡相关蛋白(Caspase-3、Bax)表达水平,相关试剂盒检测谷氨酰胺代谢,包括谷氨酰胺(glutamine,Gln)摄取量、谷氨酸(glutamate,Glu)和α-酮戊二酸(α-ketoglutarate,α-KG)产生量。采用生信分析、荧光素酶报告基因及RIP试验验证circ-0001328、miR-545-3p之间调控关系。结果:与胆囊癌细胞相比,对GEM耐药的胆囊癌细胞外泌体中circ-0001328表达上调、miR-545-3p表达下调,其中NOZ/G细胞最为显著(P<0.05)。与sh-NC组比较,sh-circ-0001328组IC 50、24、48、72 h OD值降低,EdU阳性率、Cyclin E1、CDK2蛋白表达降低,凋亡率、Caspase-3、Bax蛋白表达升高,Gln摄取量、Glu和α-KG产生量减少(P<0.05)。与inhibitor-NC组比较,miR-545-3p inhibitor组IC 50、24、48、72 h OD值升高,EdU阳性率、Cyclin E1、CDK2蛋白表达升高,凋亡率、Caspase-3、Bax蛋白表达降低,Gln摄取量、Glu和α-KG产生量增加(P<0.05)。与sh-circ-0001328组比较,sh-circ-0001328+miR-545-3p inhibitor组IC 50、24、48、72 h OD值升高,EdU阳性率、Cyclin E1、CDK2蛋白表达升高,凋亡率、Caspase-3、Bax蛋白表达降低,Gln摄取量、Glu和α-KG产生量增加(P<0.05)。miR-545-3p是circ-0001328靶基因,circ-0001328直接抑制miR-545-3p表达。结论:对GEM耐药的胆囊癌细胞外泌体中circ-0001328表达上调、miR-545-3p表达下调,circ-0001328靶向miR-545-3p增强胆囊癌细胞对GEM耐药,机制可能与促进谷氨酰胺代谢有关。

铁死亡相关途径改善胃肠道恶性肿瘤细胞耐药性的研究进展

目前,临床上对胃肠道恶性肿瘤的治疗仍然以放化疗为主,但是患者对放化疗药物易产生耐药性,严重影响患者的生活质量。研究发现,肿瘤化疗药物的耐药性是由铁的累积和氧化还原稳态失调所造成,也许调控铁死亡途径可以为胃肠道恶性肿瘤耐药的治疗带来新的机遇。本文对铁死亡的特征、调控机制进行了系统的总结与分析,同时概述了铁死亡不同途径对改善胃肠道恶性肿瘤细胞耐药性的研究进展,旨在为胃肠道恶性肿瘤耐药患者的治疗提供新的思路和方向。

肿瘤干细胞源性的外泌体促进结直肠癌细胞的化疗耐药和侵袭

肿瘤干细胞作为肿瘤组织中一小群具有自我更新和多向分化潜能的细胞,可以启动原发肿瘤并介导治疗耐药、肿瘤复发和转移,但其在细胞间层面如何影响结直肠癌的机制仍尚不清楚。因此,本文探究了肿瘤干细胞及其分泌的外泌体对结直肠癌恶性表型的影响。首先,从结直肠癌肿瘤组织中分离出CD166+CD44+肿瘤干细胞(CSC),通过超速离心法提取肿瘤干细胞源性的外泌体(CSC-exo)和结直肠癌SW480细胞源性的外泌体(S-exo),并进行NTA粒径分析、电镜观察和Western印迹鉴定。将成功分离得到的CSC和CSCexo与结直肠癌SW480细胞共培养,共培养后的细胞通过CCK-8、细胞凋亡实验发现,经过CSC或CSCexo共培养后的SW480细胞凋亡率从20%下降至13%(P<0.01),并且侵袭能力显著增加(P<0.001)。此外,通过动物体内实验发现,S-exo治疗组的肿瘤生长速度比CSCexo治疗组的缓慢,CSCexo抑制了5-FU对结直肠癌肿瘤的药物疗效。PET/CT显像、免疫组化分析以及Western印迹结果显示,CSCexo增强了结直肠癌肿瘤对葡萄糖类似物18F-FDG的摄取和糖酵解酶HK2、PFKFB2、PKM2和LDHA的表达。此外,用siRNA干扰糖酵解酶的表达会阻断CSCexo引起的耐药现象。综上,本研究表明,结直肠癌干细胞传递外泌体影响肿瘤葡萄糖代谢途径,并促进化疗耐药和侵袭能力,揭示了恶性肿瘤微环境的形成和动态变化机制。

肿瘤浸润T淋巴细胞代谢重编程与免疫耐药的研究进展

免疫治疗疗法在肿瘤治疗中取得突破性进展,但是免疫治疗耐药的出现使大多数患者获益有限,如何逆转免疫治疗耐药是亟待解决的问题。肿瘤微环境(tumor microenvironment,TME)中存在大量T淋巴细胞,在增殖、活化和发挥效应的生物过程中,肿瘤浸润T淋巴细胞(tumor infiltrating lymphocytes,TILs)面临严峻的局部代谢压力而发生代谢重编程,以满足急剧增加的能量需求和生物合成需求。这种适应性改变自身代谢模式的过程与TILs的表型和功能密切相关,影响免疫治疗疗效并介导免疫治疗耐药。近年来,随着对TILs代谢的研究,寻找特异性的代谢调控点,靶向TILs代谢通路有望恢复其肿瘤杀伤功能,逆转免疫治疗耐药。本综述探讨TILs代谢重编程与免疫耐药的关系,为逆转免疫耐药提供新的策略。

抗菌肽Dermaseptin-PP协同化疗药物抗肿瘤并逆转A549/DDP细胞顺铂耐药性

目的:探究抗菌肽Dermaseptin-PP对多种化疗药物体外抗肿瘤活性的协同增效作用,以及其对人非小细胞肺癌顺铂(DDP)耐药细胞株A549/DDP耐药性的逆转作用,并进一步探究其作用机制。方法:采用噻唑蓝(MTT)染色法检测不同质量浓度的Dermaseptin-PP对人非小细胞肺癌A549、H157细胞或小鼠乳腺癌4T1细胞的增殖抑制作用,考察低毒质量浓度Dermaseptin-PP与多烯紫杉醇(DTX)、阿霉素(DOX)或DDP联用对A549、H157或4T1细胞的协同抗肿瘤作用;采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测低毒质量浓度Dermaseptin-PP对A549/DDP细胞DDP耐药性的逆转作用。采用流式细胞术检测Dermaseptin-PP对DDP诱导A549细胞凋亡的影响,采用乳酸脱氢酶(LDH)释放实验及碘化丙啶(PI)摄取实验考察Dermaseptin-PP对A549和A549/DDP细胞膜完整性的影响,最后通过扫描电镜观察Dermaseptin-PP处理后A549和A549/DDP细胞膜形态的变化。结果:Dermaseptin-PP可在体外抑制A549、H157和4T1细胞增殖且呈剂量依赖性;与低毒质量浓度Dermaseptin-PP(0.002、0.020、0.200μg·mL^(-1))联用后,DTX、DOX及DDP对A549细胞的增殖抑制率均有不同程度的提高,半数抑制浓度(IC50)均有所降低,药物联合指数(CI)基本均小于0.9,其中Dermaseptin-PP与DDP的协同作用最强(CI<0.4)。此外,Dermaseptin-PP与DDP联用对H157和4T1细胞的CI也均小于0.9,表现为协同作用。低毒质量浓度Dermaseptin-PP(0.2、2.0、4.0μg·mL^(-1))均能显著逆转A549/DDP细胞的DDP耐药性,逆转倍数(RF)分别为2.83、5.09、9.73。相比于单用DDP,与0.2μg·mL^(-1) Dermaseptin-PP联用可显著提高A549细胞的凋亡率(P<0.05);不同质量浓度的Dermaseptin-PP均可显著增加A549、A549/DDP细胞的LDH释放率和PI摄取率,且呈浓度依赖性;扫描电镜观察发现,经2×IC50的Dermaseptin-PP处理后,A549细胞的细胞膜明显受损、质膜解体、细胞形态发生改变,A549/DDP细胞的细胞膜也出现明显孔洞。结论:Dermaseptin-PP对多种化疗药物体外抗肿瘤活性均具有协同增效作用,其中与DDP的协同作用最强,并且能够逆转A549/DDP细胞的DDP耐药性,其增效及逆转耐药的机制可能与破坏肿瘤细胞膜,进而提高化疗药物入胞药量有关。

肿瘤相关中性粒细胞在免疫检查点抑制剂耐药中的研究进展

癌症是严重危害人类健康的重大疾病。近年来,免疫检查点抑制剂(Immune checkpoint inhibitors,ICIs)已经改变了多种实体肿瘤的治疗模式。尽管初始治疗效果显著,然而这种疗法的耐药问题已逐渐显现。深入了解ICIs耐药的机制显得尤为重要。肿瘤微环境(Tumor microenvironment,TME)中的中性粒细胞在程序性细胞死亡蛋白-1(Programmed cell death protein-1,PD-1)及其配体抑制剂耐药中起着关键作用。因此,重塑肿瘤相关中性粒细胞(Tumor-associated neutrophils,TANs)不仅可以增强抗肿瘤免疫反应,而且可以在改善患者预后方面做出贡献。本文旨在探讨TANs在ICIs耐药中的潜在作用,并总结当前为克服ICIs耐药所开展的各项努力。

转染人肿瘤坏死因子-α、白介素-2基因对肺癌细胞耐药基因MDR1、LRP表达的影响

目的 研究转染人体肿瘤坏死因子 α(huTNF α)、白介素 2 (hIL 2 )基因对肺癌细胞耐药基因MDR1、LRP表达的影响 ,探讨基因治疗逆转肺癌多药耐药的可行性。方法 通过阳离子脂质体将克隆的huTNF α和hIL 2基因导入肺癌细胞系A5 49、GLC 82、H44 6、H460 ,经筛选阳性单克隆 ,用半定量RT PCR方法检测转染目的基因前后肺癌细胞系MDR1、LRP基因在mRNA水平的表达情况。结果 MDR1在A5 49、GLC 82、H44 6、H460 ,LRP在A5 49、GLC 82、H 460中均呈阳性表达 ;转染huTNF α目的基因后各肺癌细胞系MDR1、LRP基因的表达无影响 ,而转染hIL 2目的基因能够明显抑制A5 49、H44 6、H 460细胞系MDR1的表达。结论 MDR1、LRP基因在肺癌细胞系中的阳性表达与肺癌的固有耐药性有关 ;huTNF α、hIL 2目的基因能够在被转染细胞中获得表达 ,而且转染hIL 2目的基因能够明显抑制MDR1在A5 49、H44 6、H460的表达。该结果不仅为探讨肺癌多药耐药性的病理机制提供了一个新的线索 ,而且为基因治疗逆转肺癌的多药耐药性提供了一个新的实验依据。

肿瘤细胞MDR1基因多药耐药的研究进展

MDR1基因的过度表达是肿瘤细胞多药耐药的主要原因。作为肿瘤细胞多药耐药性基因重要的表达产物,MDR1与细胞内药物浓度及耐药程度密切相关。通过对多药耐药基因表达的检测及对耐药性逆转药物的研究,临床医师根据患者的基因型资料制定肿瘤化疗方案,选择合适的药物,达到减少耐药性,提高临床疗效的目的。

恶性肿瘤患者外周血淋巴细胞mdr-1基因表达在原发耐药与继发耐药中的作用研究

目的 :mdr 1基因是肿瘤多药耐药现象中的主要表型 ,探讨mdr 1基因原发耐药与继发耐药表达状况 ,预期指导临床个体化疗。方法 :应用RT PCR方法对 5 1例恶性肿瘤患者外周血淋巴细胞mdr 1基因进行定量体外诱导后检测其表达水平。结果 :5 1例外周血淋巴细胞中原发性阴性表达 34例占 6 6 % ,继发性阴性表达仅 5例占 9.8% ,外周血中的原发mdr 1阴性表达与继发性表达比较有显著性差异 (P <0 .0 1)。在低阳性组 ,原发性表达 11例占 2 1% ,继发性表达 31例占 6 0 .7% (P <0 .0 1)。高阳性组原发性表达 6例占 11.8% ,继发性表达 15例占 2 9% (P <0 .0 1)。继发性表达率明显高于原发性。 结论 :RT PCR检测人外周血淋巴细胞mdr 1基因表达取材方便 ,结果可靠 ,提示不同程度的mdr 1基因表达水平可以客观地反映不同个体的药物耐受情况 .

基质刚度重构染色质对肿瘤细胞耐药性的影响

目的研究表明,肿瘤干细胞是肿瘤对临床化疗药物产生耐药性的元凶,但目前对其耐药性形成的力学机制所知甚少。本研究发现,肿瘤干细胞相比普通肿瘤细胞,细胞牵引力更低,染色质更疏松。而染色质构象又与DNA损伤修复效率密切相关。那么力学信号能否通过改变染色质构象调控肿瘤干细胞的耐药性,其机制仍需进一步探索。方法首先通过构建不同刚度的基质研究基质刚度对肿瘤细胞耐药性及DNA损伤修复的影响;通过细胞拉伸仪加力,调控染色质构象,探究其调控肿瘤细胞耐药的机制;随后通过RNA干扰,质粒过表达,RNA seq等方法探究力学信号调控肿瘤细胞染色质构象的机制;最后在体内验证力学干预逆转肿瘤耐药策略。结果初步证实基质刚度越高,肿瘤细胞耐药性越低,DNA损伤修复因子的表达和募集效率越高。相同浓度的化疗药物处理后,肿瘤干细胞DNA损伤程度显著低于普通肿瘤细胞。并且相较于普通肿瘤细胞,肿瘤干细胞的Ku70总量无明显变化,但更倾向于聚集在细胞核内。结论细胞外基质刚度可以作为一种力学信号影响肿瘤细胞的耐药性,目前实验结果表明力学信号可能通过调控Ku70在细胞内的定位,影响肿瘤细胞的DNA损伤修复能力,进而影响其耐药性。

肿瘤微环境免疫细胞调节肿瘤细胞耐药性的研究进展

肿瘤微环境(tumor microenvironment,TME)是肿瘤细胞生存的复杂细胞环境,内含多种类型的细胞和围绕肿瘤细胞的细胞外成分。免疫细胞是TME的关键组成部分,包括肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophages,TAMs)、髓系抑制性细胞(myeloid-derived suppressor cells,MDSCs)、淋巴细胞、调节性T细胞(regulatory T cells,Tregs)、自然杀伤细胞(natural killer cells,NK cells)及树突状细胞(dendritic cells,DCs)等。值得关注的是,目前肿瘤耐药是化学治疗(化疗)、放射治疗(放疗)、靶向治疗及免疫治疗等肿瘤治疗方法疗效受限并导致治疗失败的主要原因。研究发现,肿瘤细胞耐药性的产生是肿瘤细胞与TME相互作用的结果。因此,如何克服TME所致肿瘤耐药被认为是肿瘤治疗的一大难点。近年来,随着对TME中免疫细胞研究的深入,免疫细胞调节肿瘤细胞耐药性的具体机制研究取得重大进展,而靶向相应免疫细胞、信号通路或细胞因子的治疗策略被证实能够有效减少肿瘤耐药并改善肿瘤治疗效果。该文就TME中TAMs、MDSCs、Tregs和NK细胞等在肿瘤耐药中发挥的作用及克服肿瘤耐药的靶向策略的研究进展进行综述,并讨论肿瘤相关中性粒细胞(tumor-associated neutrophils,TANs)和免疫抑制性调节性B细胞(B regulatory cells,Bregs)与肿瘤耐药之间的关系,以期为克服肿瘤耐药和提高抗肿瘤治疗效果提供方向和参考。