AICAR对不同肿瘤细胞系c-Myc表达及细胞增殖影响的差异研究

目的探讨5-氨基咪唑-4-羧基酰胺核糖核苷(5-aminoimidazole-4-carboxamide 1-β-D-ribofuranoside,AICAR)在不同肿瘤细胞系内对促癌基因c-Myc的调节作用及对细胞增殖能力的影响。方法使用qRT-PCR法检测AICAR处理后c-Myc mRNA表达水平的变化。Western blot检测AICAR处理后c-Myc蛋白水平的变化。使用RNA干扰分析AICAR对c-Myc的调节作用是否依赖于AMPK和AICAR相关代谢酶。利用放线菌素D和放线菌酮研究AICAR对c-Myc的mRNA和蛋白质稳定性的影响。在多种肿瘤细胞中,用Western blot检测AICAR对不同肿瘤细胞c-Myc的调节作用,并用MTT法检测AICAR处理对细胞增殖的影响。结果AICAR明显提高c-Myc的mRNA和蛋白的表达。AICAR对c-Myc的上调效果在处理约12 h后达饱和。AICAR对c-Myc的调控不依赖于AMPK信号通路,也不是通过AICAR的代谢产物实现的。AICAR明显提高c-Myc mRNA的稳定性,但不影响蛋白的稳定性。AICAR对c-Myc的上调作用具有细胞特异性,在SW1990、786-O和A549细胞上调c-Myc表达,在HepG2、MCF-7和U2OS细胞下调c-Myc表达。在HepG2细胞中,AICAR处理明显降低细胞活力。而在SW1990和A549细胞中AICAR处理组的细胞活力与对照组差异无统计学意义。只有当c-Myc被敲低时,AICAR处理才会影响细胞活力。结论AICAR可以通过不依赖于AMPK的方式上调c-Myc的表达。AICAR对c-Myc表达调控的作用具有细胞选择性。AICAR对c-Myc的调控影响了其对肿瘤细胞增殖的抑制效果。

单细胞转录组测序在肿瘤异质性研究及临床中的应用

随着现代生物医学的发展,基因测序技术已经在肿瘤学研究的多个领域得到广泛应用,但对肿瘤整体进行测序往往会掩盖细胞之间的异质性。为了探索单个肿瘤细胞的行为特性,肿瘤细胞异质性已成为从事肿瘤方面研究的科研和临床专家目前共同关注的焦点。单细胞转录组测序能从单个细胞的水平揭示同一肿瘤内不同细胞之间的变异程度与相互联系。随着单细胞分离、二代测序技术的发展,单细胞转录组测序日趋成熟。未来在临床中,单细胞转录组测序技术将会在肿瘤的早期诊断、监测、临床预后以及个体化用药等方面得到越来越广泛的应用。