肿瘤细胞来源的载药囊泡研究进展

囊泡,也称为微颗粒,是细胞活化或凋亡过程中由细胞膜包裹细胞内容物以"出芽"方式释放到细胞外的囊泡状结构,其直径为100~1000 nm,肿瘤细胞来源的载药囊泡是将肿瘤细胞来源的囊泡经过特殊处理,使其能够与常规化疗药物有机结合,形成以囊泡为载体的载药微颗粒。载药囊泡细胞亲和力高、生物相容性高、靶向性和特异性高、免疫原性低,能够将药物有效传递到靶细胞,逆转肿瘤干细胞耐药性,重塑免疫微环境,在肿瘤免疫治疗中有广泛的应用前景。本文就目前肿瘤细胞来源的载药囊泡的研究进展进行综述。

细胞外囊泡在恶性肿瘤化疗耐药及逆转治疗中的应用进展

细胞外囊泡(EVs)是装载DNA、RNA、蛋白质等生物活性物质的一种膜性囊泡,参与细胞间通信并调节细胞生长发育。恶性肿瘤是人类最常见、最主要的死亡原因之一,人类对恶性肿瘤治疗的逐渐耐受及药物缺乏靶向性是恶性肿瘤治疗效果不佳的主要原因。EVs作为一种重要的细胞外成分,在肿瘤的形成、生长、浸润、侵袭、转移以及肿瘤免疫微环境、肿瘤耐药中起重要作用。EVs可反映其来源细胞及接收细胞的生理、病理情况,又可凭借其高度的生物相容性等特点作为高效的药物运载材料。

细胞外囊泡载药系统治疗腹部肿瘤作用机制的研究进展

传统治疗腹部肿瘤的药物往往不具备肿瘤靶向能力,并且在杀死肿瘤细胞的同时,对正常细胞也造成了破坏,因此亟需新的治疗方式精准靶向的杀死肿瘤细胞。细胞外囊泡作为药物载体具有天然性、生物趋向性和不良反应小等优势,使其在治疗腹部肿瘤的研究中备受关注。主要综述了细胞外囊泡载药系统通过抑制腹部肿瘤细胞生长、逆转肿瘤干细胞的耐药性、抑制肿瘤细胞外排化疗药物以及重塑肿瘤免疫微环境等作用机制,靶向治疗胃癌、肝癌、胰腺癌、胆管癌、结直肠癌和卵巢癌等腹部肿瘤的研究进展。

“载药囊泡化肿瘤靶向治疗术”临床应用专家共识

随着精准医疗的快速发展,细胞外囊泡在肿瘤等疾病的诊断和转化应用中展现出巨大潜力。“载药囊泡化肿瘤靶向治疗术”是中国原创的新型肿瘤免疫治疗技术,其以肿瘤细胞来源的微囊泡作为载体,包裹或负载临床常用小分子化疗药物,通过药物靶向递送、趋化和激活中性粒细胞、逆转巨噬细胞极化表型及促进肿瘤抗原提呈等多重作用机制实现对肿瘤细胞的有效杀伤。历经十余年的抗肿瘤机制探究、临床前评估及临床试验,该技术已成功完成临床转化,获批临床应用。为进一步推动“载药囊泡化肿瘤靶向治疗术”在临床的规范和科学应用,中国免疫学会肿瘤免疫与生物治疗专业委员会和中国抗癌协会肿瘤生物治疗专业委员会联合组织细胞外囊泡及肿瘤免疫治疗领域的技术和临床专家,经过多次商讨与修订,最终撰写了《“载药囊泡化肿瘤靶向治疗术”临床应用专家共识》。本共识就“载药囊泡化肿瘤靶向治疗术”在肿瘤治疗领域的研究和应用进行了介绍,并对该技术面临的挑战及未来发展方向进行了展望,旨在为其临床合理使用提供建议及参考。

肿瘤来源胞外囊泡在肿瘤微环境中的作用

肿瘤来源胞外囊泡(CCEVs)是肿瘤细胞产生并释放到胞外的脂质双层囊泡,内含多种脂质、蛋白质、RNA等物质,与肿瘤微环境(TME)中的肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)、免疫细胞、内皮细胞及胞外间质等进行信息交换,从而影响肿瘤进展。本文根据近年有关CCEVs的研究,总结了CCEVs在TME中的作用,即:CCEVs通过所携带的遗传物质和活性分子作用于TME中的各种细胞,促进肿瘤增殖、侵袭转移、血管新生、胞外间质重塑及调控肿瘤免疫反应。基于CCEVs在TME和肿瘤进展中的作用及自身分泌的特异性,CCEVs或将成为肿瘤分子诊断的有效生物标志物和肿瘤靶向治疗的新靶点。

甲氨蝶呤载药囊泡在小鼠实验性牙周炎治疗中的作用研究

目的探究甲氨蝶呤载药囊泡对小鼠实验性牙周炎的治疗作用。方法分离人脐带间充质干细胞(hUC-MSC)的细胞外囊泡(EVs)。构建甲氨蝶呤(MTX)载药囊泡(MTX-EVs)并通过扫描电镜及动态光散射仪(DLS)对构建的载药囊泡进行形态大小分析,通过蛋白质印迹法对其表面特异性蛋白进行鉴定。选取4~5周C57BL/6J雄性小鼠,其中通过盲抓法随机抽取8只不做处理,正常饲养作为对照组(由第四军医大学实验动物中心提供),其余小鼠利用脂多糖(LPS)(2 g/L,5μl)牙周局部注射诱导小鼠牙周炎模型,间隔1天注射1次,诱导2周。将成功诱导牙周炎模型小鼠通过盲抓法随机分为4组,每组8只。分别为LPS组、LPS+MTX组、LPS+EVs组及LPS+MTX-EVs组。牙周局部治疗2周后,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测牙龈组织炎症因子白细胞介素(IL)-1β、IL-6及肿瘤坏死因子α(TNF-α)的质量浓度。通过显微CT(micro-CT)、HE染色评估对照组、LPS组、LPS+MTX组、LPS+EVs组及LPS+MTX-EVs组小鼠的牙槽骨吸收情况。流式细胞仪分析牙龈组织中γ干扰素(IFN-γ)阳性细胞的占比。结果扫描电镜结果显示EVs和MTX-EVs呈圆形或椭圆形,DLS粒径分析证明EVs粒径在200 nm左右,MTX-EVs粒径在300 nm左右。ELISA结果显示,对照组、LPS组、LPS+MTX组、LPS+EVs组及LPS+MTX-EVs组IL-1β质量浓度分别为(28.86±2.76)、(51.50±2.04)、(35.26±2.40)、(45.49±2.04)、(35.77±3.49)ng/L;LPS+MTX组、LPS+EVs组及LPS+MTX-EVs组IL-1β质量浓度均显著低于LPS组(均P<0.05);LPS+MTX-EVs组IL-1β质量浓度显著低于LPS+EVs组(P<0.05)。对照组、LPS组、LPS+MTX组、LPS+EVs组及LPS+MTX-EVs组IL-6质量浓度分别为(125.44±4.12)、(221.64±10.59)、(178.16±16.90)、(181.09±18.22)、(170.15±9.04)ng/L;LPS+MTX组、LPS+EVs组及LPS+MTX-EVs组IL-6质量浓度均显著低于LPS组(均P<0.05);LPS+MTX-EVs组IL-6质量浓度显著低于LPS+EVs组和LPS+MTX组(均P<0.05)。对照组、LPS组、LPS+MTX组、LPS+EVs组及LPS+MTX-EVs组TNF-α质量浓度分别为(320.27±38.68)、(479.62±40.94)、(342.18±25.89)、(415.88±12.01)、(325.75±30.83)ng/L;LPS+MTX组、LPS+EVs组及LPS+MTX-EVs组TNF-α质量浓度均显著低于LPS组(均P<0.05);LPS+MTX-EVs组TNF-α质量浓度显著低于LPS+EVs组及LPS+MTX组(均P<0.05)。micro-CT扫描结果显示,对照组、LPS组、LPS+MTX组、LPS+EVs组及LPS+MTX-EVs组小鼠右上颌第一磨牙第一牙根处釉质子骨质界到牙槽嵴顶的距离分别为(0.11±0.03)、(0.28±0.02)、(0.23±0.03)、(0.20±0.04)、(0.18±0.03)mm,与LPS组相比,LPS+MTX组、LPS+EVs组及LPS+MTX-EVs组骨吸收均得到不同程度的抑制,差异均有统计学意义(均P<0.05),其中LPS+MTX-EVs组与LPS+MTX组及LPS+EVs组相比,骨吸收抑制效果最好,且差异均有统计学意义(均P<0.05)。流式细胞仪检测结果显示,LPS组、LPS+EVs组及LPS+MTX-EVs组IFNγ阳性细胞占比分别为(11.77±1.02)%、(6.87±0.65)%及(4.15±0.92)%,LPS+EVs组及LPS+MTX-EVs组中IFN-γ阳性细胞占比均显著低于LPS组(均P<0.05),LPS+MTX-EVs组中IFN-γ阳性细胞占比显著低于LPS+EVs组(P<0.05)。结论MTX-EVs可有效改善牙周炎模型小鼠牙周局部炎症环境,减少小鼠牙槽骨骨吸收。

卵巢肿瘤的临床病理分析

卵巢肿瘤是女性生殖系统常见肿瘤,其性质及组织学形态多种多样,为此,我们对116例卵巢肿瘤资料进行回顾性分析,以期进一步加深对卵巢肿瘤的组织学认识。 1 材料和方法 1.1 资料来源收集本院及海军401医院1994年1月～1998年4月间,经病理诊断为卵巢肿瘤的116例资料,年龄3～82岁。

乳腺癌患者白细胞来源微泡的特性及其临床意义

目的:探讨乳腺癌患者白细胞来源微泡(leukocyte-derived microparticles,LMPs)的特性及其临床意义。方法:用流式细胞仪检测44例乳腺癌患者和10例健康志愿者外周血的LMPs以及其中CD44+LMPs、CD24+LMPs和CD44+CD24-LMPs的表达情况。进一步用流式细胞仪检测乳腺癌患者和志愿者外周血单个核细胞(monocytes,MNCs)中CD44+、CD24+和CD44+CD24-细胞的比例。最后分析LMPs的临床相关性以及MNCs与LMPs之间的相关性。结果:乳腺癌组的LMPs、CD44+LMPs和CD44+CD24-LMPs比例显著高于健康对照组(P值分别为0.021、0.011和0.006)。LMPs比例在不同大小的肿瘤组织间差异有统计学意义(P=0.018)。CD44+LMPs比例在不同水平的Her-2表达组间差异也有统计学意义(P=0.020)。MNCs中CD44+、CD24+和CD44+CD24-细胞比例在健康对照组和乳腺癌组之间差异无统计学意义。LMPs与MNCs间无显著相关性。结论:乳腺癌患者的LMPs比例与肿瘤大小有关,而CD44+LMPs比例与Her-2水平密切相关,该指标可用来评估乳腺癌的复发转移及预后情况。

搭载达沙替尼的巨噬细胞膜囊泡用于缺血性脑卒中的治疗研究

目的研究开发靶向缺血性大脑和跨血脑屏障的纳米载体,帮助达沙替尼(DAS)有效地输送到大脑,以减轻缺血性脑卒中(IS)后局部炎症反应和神经损伤。方法提取巨噬细胞膜构建搭载DAS的纳米囊泡。经尾静脉给药IS小鼠后,通过各器官组织切片HE染色分析载药囊泡的生物安全性。采用荧光标记载药囊泡,利用活体成像和免疫荧光分析载药囊泡的大脑靶向性和生物分布。对不同治疗处理组做神经功能评分、死亡率统计和神经细胞计数,评估载药囊泡的神经保护作用。结果载药囊泡在活体内具有良好的生物安全性,可快速高效靶向缺血侧脑组织内并被神经细胞摄取。对比单纯的DAS治疗,载药囊泡治疗可明显改善IS小鼠的神经功能,降低死亡率,减少神经细胞的凋亡。结论研究证实搭载DAS的巨噬细胞膜纳米囊泡可安全高效靶向缺血侧大脑递药,有效发挥抗炎和神经保护作用,可为改善IS后药物治疗提供新思路。