肿节风复方对肝癌细胞HepG2作用效果观察

目的探讨肿节风复方对人肝癌细胞HepG2细胞增殖及端粒酶活性的影响。方法以不同浓度肿节风复方处理肝癌HepG2细胞48 h,观察细胞形态学改变;采用MTT法评价不同浓度肿节风复方对HepG2细胞增殖的影响并计算半抑制浓度(IC50);应用ELISA法检测肿节风复方、紫杉醇对HepG2细胞端粒酶活性的影响。结果肿节风复方处理HepG2细胞48 h后,细胞脱落明显,增殖活力显著降低(P<0.05),呈现剂量依赖趋势;肿节风复方对HepG2细胞IC50为292.2 mg/ml。肿节风复方和紫杉醇对HepG2细胞端粒酶活性均有抑制作用(P<0.05),并且抑制作用相当(P>0.05)。结论肿节风复方能抑制HepG2细胞增殖及端粒酶活性。

肿节风复方含药血清对肝癌HepG2细胞增殖、端粒酶及凋亡的影响

目的:观察肿节风复方含药血清对人肝癌细胞HepG2细胞增殖及凋亡的影响。方法:实验设阴性对照组(NS)、5-氟尿嘧啶(5-FU)组(0.025 g·kg-1)和肿节风复方低、中、高剂量组(2.5,5,10 g·kg-1),灌服于大鼠后,提取含药血清。取上述含药血清分别作用于HepG2细胞24,48,72 h;MTT法测定细胞增殖抑制率;ELISA法测定端粒酶活性;荧光显微法及流式细胞术(Annexin V-FITC/PI法)检测肿节风复方含药血清对HepG2细胞凋亡的影响。结果:与对照组比较,肿节风复方含药血清低、中、高剂量组均能抑制HepG2细胞的增殖(高剂量组抑制率最高达42.5%),呈现与时间-剂量依赖趋势;肿节风中、高剂量组能有效抑制HepG2细胞端粒酶活性,与对照组比较P<0.05;肿节风复方含药血清具有诱导HepG2细胞凋亡的作用,与对照组比较P<0.05,其中中剂量组作用24,48,72 h细胞凋亡率分别为(14.2±0.9)%,(30.6±1.0)%,(61.6±1.5)%。结论:肿节风复方含药血清能抑制HepG2细胞增殖、端粒酶活性,诱导HepG2细胞凋亡。

复方肿节风溶液抗炎和平喘作用的研究

为考察复方肿节风溶液的抗炎平喘作用,进行了该药的体外抗炎和体内平喘作用研究。用脂多糖(LPS)诱导RAW 264.7细胞建立体外炎症模型,MTT法检测复方肿节风对RAW 264.7细胞活力的影响,ELISA检测细胞上清液中TNF-α、IL-1和IL-6浓度,Griess法检测NO水平。体内试验通过卵清蛋白(OVA)致敏、激发Wistar大鼠建立哮喘模型,并灌服不同剂量(12、6、3g/kg)的复方肿节风溶液。ELISA检测大鼠血清中IL-4、IL-17、IFN-γ及IgE水平;瑞特-吉姆萨染色血涂片,用血细胞计数器计数血液白细胞总数和嗜酸性粒细胞数,肺组织HE染色,观察肺组织病理变化。体外抗炎试验结果表明,复方肿节风溶液在10μg/mL^40μg/mL的浓度范围内对RAW 264.7细胞活力无显著影响。10、20、40μg/mL的复方肿节风溶液能不同程度抑制LPS诱导的RAW 264.7细胞产生TNF-α、IL-6、IL-1和NO的水平(P<0.05),并存在一定的剂量依赖关系。体内平喘试验结果表明,与哮喘模型组相比,复方肿节风溶液能明显下调血清中IL-4、IL-17和IgE的高分泌,上调血清中IFN-γ水平(P<0.05)。表明复方肿节风溶液抗炎平喘作可能通过抑制相关炎症因子的表达来实现的。

复方肿节风颗粒对小鼠急性高尿酸血症的影响

通过腹腔注射氧嗪酸钾人工复制小鼠急性高尿酸血症模型,研究复方肿节风颗粒对高尿酸血症小鼠血清尿酸水平的影响以及探索其降尿酸的机制。结果显示,与空白对照组相比,阳性对照组小鼠血清尿酸值极显著升高(P<0.01),表明应用氧嗪酸钾造模取得成功;与阳性对照组相比,复方肿节风颗粒高、中、低剂量组和别嘌醇对照组小鼠血清尿酸值均极显著降低(P<0.01),表明两药均有良好的降尿酸作用,且复方肿节风颗粒降尿酸作用呈一定的量效关系;各给药组小鼠肝脏匀浆中黄嘌呤氧化酶(XOD)活性与模型组相比,高、中剂量组显著降低(P<0.05),低剂量组差异不显著,提示复方肿节风颗粒降尿酸作用可能与降低XOD活性有关。

复方肿节风雾化剂联合廉泉、环甲膜、天突穴穴位注射治疗急性咽炎(肺胃热盛证)的临床研究

目的观察复方肿节风雾化剂联合廉泉、环甲膜、天突穴位注射治疗急性咽炎(肺胃热盛证)的临床效果。方法治疗组予复方肿节风雾化剂雾化吸入加廉泉、环甲膜、天突穴穴位注射炎琥宁治疗。对照组予生理盐水加硫酸庆大霉素注射液加注射用地塞米松磷酸钠雾化吸入治疗,穴位注射同治疗组,疗程均为5 d。结果治疗组总有效率与对照组总有效率相当(P> 0.05)。治疗3 d、5 d后两组咽痛视觉模拟量表(VAS)评分比较,差别均不大(均P> 0.05)。治疗组治疗3 d、5 d后咽干VAS评分均低于对照组同期(均P <0.05)。且治疗组咽部黏膜急性充血评分低于对照组同期(均P <0.05)。结论复方肿节风雾化剂联合廉泉、环甲膜、天突穴穴位注射治疗肺胃热盛型急性咽炎疗效满意。

复方肿节风颗粒祛痰平喘作用研究

采用小鼠呼吸道排泌酚红法制造祛痰模型,卵白蛋白(OVA)致喘法激发大鼠哮喘模型,观察复方肿节风颗粒的祛痰、平喘效果。结果表明,复方肿节风颗粒可显著促进小鼠气管酚红排泌量,降低哮喘大鼠异常升高的白细胞总数、嗜酸性粒细胞数,降低血清IgE、IL-4、IL-17的水平,升高血清IFN-γ的水平。表明复方肿节风颗粒显示了良好的祛痰、平喘效果。

复方肿节风Ⅰ号雾化剂治疗急性咽炎100例

目的:观察清热解毒、消炎利咽类中药治疗急性咽炎的临床疗效。方法:采用复方肿节风Ⅰ号雾化剂(肿节风、鱼腥草、桔梗、冰片等)治疗急性咽炎100例,并设对照组对比。结果:治疗组总有效率97%,优于对照组的83%(P<0.001)。提示:本方法对本病有清热解毒,消炎利咽的功效。

正交法优化复方肿节风合剂提取工艺研究

目的:建立复方肿节风合剂制备工艺。方法:采用正交试验法,对复方肿节风合剂制备工艺进行研究,以其有效成分反丁烯二酸的提取量为考察指标,对浸泡时间、煎煮次数、溶剂用量、提取时间等主要影响因素进行考察,筛选最佳提取工艺。结果:最佳提取工艺参数为浸泡1h,第1次加8倍量水(扣除药材吸水),第2、3次加6倍量水,提取时间0.5h,煎煮3次。结论:本产品各项技术参数与工艺优选条件相同,且工艺条件稳定,说明工艺可行,适合批量生产。

复方肿节风喷雾合剂成型工艺及中试研究

目的：将原剂型汤剂改为合剂，建立复方肿节风合剂成型工艺及中试研究方法。方法：确定剂型选择依据，通过加速试验、稳定性试验，以及防腐剂的选择及用量、相对密度、pH值等因素的考察，结合中试研究的结果，建立复方肿节风合剂成型工艺。结果：新工艺选择0.05%浓度的羟苯乙酯作为防腐剂，相对密度为1.14，pH范围定为3.5～5.5。结论：新工艺条件稳定可行，适合批量生产。

复方肿节风雾化剂联合穴位注射治疗风热型急性咽炎临床研究

目的:观察复方肿节风雾化剂雾化吸入联合廉泉、环甲膜、天突穴穴位注射疗法治疗风热型急性咽炎的临床疗效。方法:将90例患者随机分为2组,对照组45例采用炎琥宁注射液予廉泉、环甲膜、天突穴穴位注射,隔天1次;治疗组45例在对照组治疗的基础上予复方肿节风雾化剂雾化吸入,每天1次,2组疗程均为5天;观察治疗前后咽痛、咽干、咽部灼热感、咽部黏膜急性弥漫性充血、咳嗽、咳痰等症状总积分的变化,主次症减轻的时间,并进行临床疗效评价。结果:总有效率治疗组为97.78%,对照组为86.67%,2组比较,差异有统计学意义(P <0.05)。治疗后第1、3天,2组症状总分积比较,差异无统计学意义(P> 0.05);治疗后第5天,治疗组症状总积分明显低于对照组,差异有统计学意义(P <0.05)。治疗后,咽干、咽部灼热缓解时间比较,差异无统计学意义(P> 0.05);而治疗组咽痛缓解时间明显短于对照组,差异有统计学意义(P <0.05)。2组不良反应发生率均为4.44%。结论:复方肿节风雾化剂雾化吸入联合穴位注射治疗风热型急性咽炎疗效显著,且副作用少,值得临床推广应用。

复方肿节风喷雾剂的制备及其质量标准研究

目的:制备复方肿节风喷雾剂,并制定其质量标准。方法:采用醇提水沉-超滤工艺制备复方肿节风喷雾剂;采用薄层色谱法鉴别肿节风、板蓝根,高效液相色谱法测定异秦皮靛含量。结果:本制剂制备工艺可行,质量稳定,疗效确切;薄层斑点清晰,重现性好;含量测定异秦皮靛应不少于0.04 mg/mL。结论:复方肿节风喷雾剂采用醇提水沉-超滤工艺制备工艺稳定,质量可控,方法简便准确。

HPLC测定复方肿节风胶囊中异秦皮啶的含量

目的 :建立复方肿节风胶囊专属性的含量测定方法。方法 :采用HPLC法 ,色谱柱ODS 3柱 ,流动相乙腈 0 .1%磷酸溶液 (2 0∶80 ) ,检测波长 343nm。结果 :异秦皮啶在 0 .0 35～ 0 .5 2 μg范围内呈良好线性关系 ;平均加样回收率为 98.5 % ,RSD =0 .93% (n =5 )。结论 :该法操作简便、易行 。

复方肿节风清咽合剂质量标准研究

目的:建立复方肿节风清咽合剂的质量控制方法。方法:采用薄层色谱法鉴别该制剂中肿节风、麦冬和红花;采用HPLC-DAD测定复方肿节风清咽合剂中反丁烯二酸含量,色谱柱为DIKMA Dia-monsil~C_(18)(5μm,4.6mm×250mm),乙腈-0.1%磷酸溶液(2∶98)为流动相,DAD扫描范围:190～360nm,柱温:30℃,流速:1.0mL/min。结果:鉴别方法专属性强,斑点分离清晰,且阴性无干扰;反丁烯二酸线性范围在0.015 184～0.379 6μg,(R^2=0.999 8),平均回收率92.73%,RSD为1.02%。结论:该方法简便、准确、重现性好,可用于该制剂的质量控制。

复方肿节风雾化剂治疗慢性咽炎的随机对照研究

目的观察复方肿节风雾化剂治疗慢性咽炎的临床疗效。方法将80例慢性咽炎患者采用Stata12统计软件直接进行病例随机分组分为观察组40例和对照组40例。观察组采用复方肿节风雾化剂5 mL加0.9%氯化钠注射液20 mL雾化吸入治疗,每日1次;对照组采用慢严舒柠清喉利咽颗粒1袋/次,2次/d,温开水冲服。两组疗程均为14天,并于治疗后3个月随访复发情况。结果观察组在改善慢性咽炎症状、体征方面优于对照组;其总有效率为92.11%,高于对照组的74.36%,两组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论复方肿节风雾化剂治疗慢性咽炎疗效显著。

复方肿节风雾化剂联合奥美拉唑和莫沙必利治疗反流性咽喉炎40例

目的:探讨复方肿节风雾化剂联合质子泵抑制剂及胃动力药物治疗反流性咽喉炎(GERL)的临床疗效。方法:将80例GERL患者随机按数字表法分为西药组和观察组各40例。两组均采用奥美拉唑镁肠溶片,20 mg/次,口服,1次/d;枸橼酸莫沙必利片,5 mg/次,口服,3次/d。西药组加用地塞米松注射液+庆大霉素雾化吸入,1次/d。观察组加用复方肿节风雾化剂雾化吸入,1次/d。两组疗程均为8周。进行治疗前后反流症状指数(RSI)量表和反流检查评分(RFS)量表评价;治疗前后24h食管p H监测。结果:经Ridit分析,观察组临床疗效优于西药组(P<0.05);治疗后观察组在声嘶或发声问题、清喉、咽喉黏液增多或后鼻溢液感、饭后或仰卧时咳嗽、刺激性咳嗽、喉中有黏滞或团块状感等方面评分及RSI总分均低于西药组(P<0.01);治疗后观察组声门下水肿、喉室消失、红斑/充血、声带水肿、弥漫性喉水肿、喉黏液蓄积等方面评分及RFS总分均低于西药组(P<0.01);治疗后两组酸反流总次数,>5 min的次数,总计p H<4的百分比和De Meester评分均比治疗前下降,但组间差异无统计学意义。结论:复方肿节风雾化剂联合奥美拉唑和莫沙必利对GERL咽喉部的症状、体征的改善作用显著。

A Preliminary Investigation on Anti-inflammatory and Antibacterial Effect of Compound Sarcandra Aerosol

[Objective] This study aimed to reveal the therapeutic mechanism of compound sarcandra aerosol, which was exclusively owned by the Second Affiliated Hospital of Guiyang College of Traditional Chinese Medicine. [Method] An inflammation model was established by xylene-induced inflammation test and carrageenan- induced inflammation test to analyze the anti-inflammatory effect of compound sarcandra aerosol. By bacteriostasis test in vitro, the antibacterial effect of compound sarcandra aerosol against five common pathogens of pharyngitis was investigated. Blood samples were collected from Wistar rats in different compound sarcandra aerosol groups and control group to compare blood routine indicators and interleukin-1 （IL-1） levels. [Result] Three different concentrations of compound sarcandra aerosol could reduce degrees of xylene-induced ear edema in mice and carrageenan- induced paw edema in rats, but the anti-inflammatory effect of compound sarcandra aerosol was reduced as the concentration declined. In bacteriostasis test in vitro, the minimum inhibitory concentration of compound sarcandra aerosol against Streptococcus pneumoniae, Streptococcus hemolytis, Corynebacterium diphtheriae, Staphylococcus aureus and Salmonella typhimurium was 76, 105 38, 65 and 30 mg/ml, respectively. Compound sarcandra aerosol reduced white blood cell count, neutrophil count and lymphocyte percentage in pharyngitis model rats. Moreover, interleukin-1 level in watermelon frost lozenge group and different compound sarcandra aerosol groups was lower compared with control group. [Conclusion] Compound sarcandra aerosol can effectively treat pharyngitis by exerting anti-inflammatory and antibacterial effect and reducing interleukin-1 level. This study laid a solid foundation for clinical application of compound sarcandra aerosol.

复方肿节风雾化剂对慢性咽炎模型大鼠咽部黏膜组织炎症因子的影响

目的探讨复方肿节风雾化剂治疗慢性咽炎的可能作用机制。方法将60只SD大鼠随机分为正常组10只和造模组50只。造模组大鼠采用A族乙型溶血性链球菌注射液咽部注射构建慢性咽炎大鼠模型,将造模成功的42只大鼠随机分为模型组10只,氨苄西林钠组及复方肿节风低、中、高剂量组,每组8只。复方肿节风低、中、高剂量组分别给予20ml含有复方肿节风雾化剂2.33、4.66、9.32g/(kg·d)的氯化钠溶液进行超声雾化,正常组、模型组给予等体积生理盐水雾化,氨苄西林钠组腹腔注射氨苄西林钠0.93g/(kg·d)。在造模开始后第4、14天观察各组大鼠毛发、精神状态、口腔分泌物、咽部黏膜等情况,14天后HE染色观察咽部黏膜组织病理;ELISA法检测咽部黏膜组织肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)含量。采用RT-qPCR和免疫组化法检测咽部黏膜组织中肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)、核因子κB p65(NF-κB p65)蛋白及mRNA表达。结果与正常组比较,模型组大鼠咽部黏膜结构不完整,破坏明显,上皮脱落、坏死,见大量炎性细胞浸润,咽部黏膜组织TNF-α、IL-1β、IL-6水平,TRAF-6、NF-κB p65蛋白及mRNA表达量均升高(P<0.05)。与模型组比较,复方肿节风高、中剂量组及氨苄西林钠组咽部黏膜上皮未见明显角质化,复合鳞状上皮未见明显增生,可见少量炎症细胞浸润,肌层纤维排列整齐;复方肿节风低剂量组咽部黏膜组织复层鳞状上皮角质化、增生、脱落,黏膜下层水肿,大量炎症细胞浸润,肌层纤维排列欠规则。与模型组比较,复方肿节风高、中剂量组及氨苄西林钠组大鼠咽部黏膜组织中TNF-α、IL-1β、IL-6含量,TRAF-6、NF-κB p65蛋白及mRNA表达均降低(P<0.05)。结论复方肿节风雾化剂能有效改善慢性咽炎模型大鼠咽部黏膜炎性状态,其中高、中剂量效果更好,其作用机制可能与调控咽部黏膜组织TRAF6/NF-κB p65通路有关。

基于TLR-4/MyD88/NF-κB通路探讨复方肿节风雾化剂对慢性咽炎模型大鼠的干预机制

目的观察复方肿节风雾化剂对慢性咽炎模型大鼠的影响,探讨其作用机制。方法将60只SD大鼠按随机数字表法分为正常组、模型组、阳性药物组及复方肿节风雾化剂低、中、高剂量组,每组10只。除正常组外,其余各组采用咽部注射A族乙型溶血性链球菌(group A beta-hemolytic streptococcus, GAS)法建立细菌性慢性咽炎大鼠模型。造模成功后,复方肿节风雾化剂低、中、高剂量组分别用2.33、4.66、9.32 g/kg复方肿节风雾化剂进行超声雾化,正常组与模型组予同体积生理盐水雾化,阳性药物组腹腔注射氨苄西林钠0.93 g/kg,1次/d,连续干预14 d。采用HE染色法检测咽部黏膜病理形态学改变,ELISA法检测血清TNF-α、IL-1β、IL-6水平,采用免疫组化染色法检测咽部黏膜组织TLR-4、髓样细胞分化因子88(myeloid differentiation factor88, MyD88)、NF-κB p65蛋白表达,RT-qPCR法检测咽部黏膜组织TLR-4、MyD88、NF-κB p65 mRNA表达。结果 HE染色显示,复方肿节风雾化剂各剂量组随药物剂量升高,炎性细胞浸润情况逐步缓解;与模型组比较,阳性药物组及复方肿节风雾化剂低、中、高剂量组大鼠血清TNF-α、IL-1β、IL-6水平降低(P<0.05),咽黏膜组织TLR-4、MyD88、NF-κB p65蛋白积分光密度值降低(P<0.05);阳性药物组及中、高剂量组大鼠咽黏膜组织TLR-4[(1.17±0.41)、(2.44±1.06)、(1.25±0.34)比(3.87±1.43)]、MyD88[(1.15±0.53)、(1.75±0.36)、(1.09±0.14)比(2.44±0.19)]、NF-κB p65[(1.97±0.51)、(2.64±0.26)、(2.31±0.44)比(5.08±0.34)]mRNA表达降低(P<0.05)。结论复方肿节风雾化剂可通过抑制慢性咽炎模型大鼠TLR-4、MyD88、NF-κB p65表达来降低炎性细胞因子水平,从而发挥抗炎作用。

复方肿节风合剂微生物限度检查方法的验证

目的:建立复方肿节风合剂的微生物限度检查方法。方法:采用平皿计数法对复方肿节风合剂的细菌、霉菌和酵母菌计数进行加样回收率试验;采用控制菌中大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌的相应检查法进行控制菌检查。结果:通过5种阳性菌的回收实验,复方肿节风合剂大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌、黑曲霉菌回收率均高于70%;控制菌测定中,大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌均可检出试验菌,阴性菌对照组均无生长。结论:本文介绍方法可作为复方肿节风合剂的微生物限度检查方法学验证的依据。