胃上皮内瘤变患者术前活检结果与ESD术后病理结果的差异性分析

胃上皮内瘤变是胃腺上皮异型或非典型性增生导致胃上皮细胞向恶性肿瘤转变的状态,根据组织学形态结构改变中细胞的异型性和结构紊乱程度分为低级别上皮内瘤变(low grade intraepithelial neoplasia,LGTN)和高级别上皮内瘤变(high grade intraepithelial neoplasia,HGTN),其中HGTN为早期胃癌,需及时采取内镜治疗[1]。

miR-7对Hp诱导胃上皮细胞自噬及EMT的影响

目的探讨微小RNA-7(miR-7)对幽门螺杆菌(Hp)诱导的胃上皮细胞(GES-1)自噬及上皮细胞间质转化(EMT)的影响。方法体外将Hp悉尼株(SS1)与GES-1细胞共培养建立GES-1细胞转化模型;实验分为空白对照组(NC组)、Hp组、miR-7模拟物(mimics)组、Hp+miR-7 mimics组。qRT-PCR验证转染效果;MTT法、划痕实验、Transwell实验检测各组GES-1细胞增殖能力、迁移能力和侵袭能力;透射电镜下观察细胞自噬体;免疫印迹法检测各组GES-1细胞自噬相关蛋白[RM-9106微管相关蛋白1轻链3-Ⅰ(LC3-Ⅰ)、LC3-Ⅱ]及EMT相关蛋白[E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)]表达情况。结果与NC组比较,Hp组GES-1转化细胞增殖抑制率、p62蛋白、E-Cadherin蛋白水平降低(P<0.05),迁移率、侵袭数、自噬体数量及自噬泡/胞质总面积、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值、N-Cadherin和Vimentin蛋白水平均升高(P<0.05),miR-7 mimics组GES-1细胞增殖抑制率、p62蛋白、E-Cadherin蛋白水平升高(P<0.05),迁移率、侵袭数、自噬体数量及自噬泡/胞质总面积、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值、N-Cadherin和Vimentin蛋白水平均降低(P<0.05);与miR-7 mimics组比较,Hp+miR-7 mimics组转化细胞增殖抑制率、p62蛋白、E-Cadherin蛋白水平降低(P<0.05),迁移率、侵袭数、自噬体数量及自噬泡/胞质总面积、自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值、N-Cadherin和Vimentin蛋白水平均升高(P<0.05)。结论miR-7下调Hp诱导的GES-1细胞自噬,降低细胞侵袭及迁移能力,抑制EMT。

金合欢素对幽门螺杆菌感染的胃上皮GES-1细胞凋亡的抑制作用

目的研究金合欢素对幽门螺旋杆菌(Hp)感染GES-1细胞凋亡的保护作用及潜在的作用机制。材料和方法体外用Hp和金合欢素处理GES-1细胞,CCK-8法检测细胞活力,创面愈合法评估细胞迁移及修复能力的变化,流式细胞术分析细胞凋亡率,western blots法检测凋亡相关蛋白的表达水平。结果Hp可诱导GES-1细胞活力下降,抑制细胞迁移,使细胞凋亡比率增加,同时增加Bax、cle-caspase3的表达水平。而金合欢素处理可增强细胞活力,抑制Hp感染所致的细胞凋亡水平,并下调Bax、cle-caspase3的表达。讨论与结论金合欢素能增强GES-1细胞活性,通过抑制Hp感染的GES-1细胞凋亡,从而对胃黏膜上皮细胞具有保护作用。

基于网络药理学探究金果胃康胶囊治疗慢性萎缩性胃炎和胃上皮内瘤变的分子机制

目的 运用网络药理学和分子对接方法研究自拟复方金果胃康胶囊治疗胃炎-癌转化中慢性萎缩性胃炎(CAG)及胃上皮内瘤变(GIN)阶段的潜在活性成分及作用机制。方法 通过TCMSP数据库、TCMID数据库及上海有机所化学数据库,经文献整理筛选金果胃康胶囊的活性化学成分,并通过Swiss Target Prediction数据库检索各成分并预测靶点。借助OMIM、GenCards数据库获取CAG及GIN靶点。利用String数据库结合Cytoscape软件绘制“靶点-疾病”网络和蛋白互作网络(PPI)。采用Metascape平台进行GO、KEGG富集分析,获得金果胃康胶囊治疗CAG及GIN的潜在作用通路,利用Cytoscape 3.7.1构建成分-靶点-通路图。运用AutoDuck Vina软件等工具进行核心靶蛋白与重要化合物的分子对接验证。结果 金果胃康胶囊中含有70个活性成分,作用靶点共251个。金果胃康胶囊治疗CAG和GIN的共有核心成分为山奈酚、槲皮素、木犀草素等,共有核心靶点为EGFR、AKT1等,在慢性萎缩性胃炎及胃上皮内瘤变中,共有通路为癌症通路、蛋白多糖肿瘤通路等。分子对接结果表明,重要化合物与核心靶蛋白对接均有较强的结合能力。结论 金果胃康胶囊治疗CAG、GIN具有中药复方多成分-多靶点-多通路的特点,为金果胃康胶囊的临床应用提供了初步的理论基础。

脾胃培源方含药血清对鹅去氧胆酸诱导胃上皮细胞肠化生的影响

目的探究脾胃培源方含药血清对鹅去氧胆酸诱导的人胃上皮细胞(GES-1)肠上皮化生的影响及其潜在作用机制。方法①采用CCK-8法检测不同浓度鹅去氧胆酸(0,20,50,100,150,200μmol/L)、脾胃培源方含药血清(0,2.5%,5%,10%,20%,30%,40%)对GES-1细胞活性的影响,确定后续实验鹅去氧胆酸和脾胃培源方含药血清浓度。②实验分为空白对照组、鹅去氧胆酸组、鹅去氧胆酸+5%脾胃培源方含药血清组、鹅去氧胆酸+10%脾胃培源方含药血清组、鹅去氧胆酸+20%脾胃培源方含药血清组,CCK-8法检测各组GES-1细胞活性。③实验分为空白对照组、20%脾胃培源方含药血清组、鹅去氧胆酸组、鹅去氧胆酸+20%脾胃培源方含药血清组,ELISA法检测炎症因子与氧化应激相关指标水平[白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)]。④实验分为空白对照组、鹅去氧胆酸组、鹅去氧胆酸+5%脾胃培源方含药血清组、鹅去氧胆酸+10%脾胃培源方含药血清组、鹅去氧胆酸+20%脾胃培源方含药血清组,分别采用Western blot法和RT-PCR法检测肠上皮化生相关分子标志物(CDX1、CDX2、MUC2)蛋白及mRNA表达情况。结果选择100μmol/L的鹅去氧胆酸和5%,10%,20%脾胃培源方含药血清进行后续实验。各浓度脾胃培源方含药血清组GES-1细胞活性均明显低于鹅去氧胆酸组(P均<0.05),且各浓度脾胃培源方含药血清组GES-1细胞活性呈剂量依赖性降低。与空白对照组比较,鹅去氧胆酸组IL-6、IL-8、TNF-α、MDA水平均明显升高(P均<0.05),SOD水平明显降低(P<0.05);与鹅去氧胆酸组比较,鹅去氧胆酸+20%脾胃培源方含药血清组IL-6、IL-8、TNF-α、MDA水平均明显降低(P均<0.05),SOD水平明显升高(P<0.05)。鹅去氧胆酸组CDX1、CDX2、MUC2蛋白及mRNA相对表达量均明显高于空白对照组(P均<0.05);鹅去氧胆酸+10%脾胃培源方含药血清组和鹅去氧胆酸+20%脾胃培源方含药血清组CDX1、CDX2、MUC2蛋白及mRNA相对表达量均明显低于鹅去氧胆酸组(P均<0.05),且各指标呈一定浓度依赖性降低。结论脾胃培源方可通过抑制炎症与氧化应激反应,下调肠化标志物CDX1、CDX2、MUC2的表达,从而抑制鹅去氧胆酸诱导的GES-1肠上皮化生。

乳酸杆菌胃分离株WR22体外抑制幽门螺杆菌黏附胃上皮细胞研究

目的研究乳酸杆菌WR22体外对胃上皮细胞的黏附能力和抑制幽门螺杆菌黏附上皮细胞的效果。方法乳酸杆菌WR22在体外与胃上皮细胞爬片共同孵育2h后,采用光镜、电镜技术观察其黏附效果。WR22与幽门螺杆菌SS1对胃上皮细胞竞争性黏附2h后,荧光抗体染色法定性评价黏附于胃上皮细胞上的幽门螺杆菌密度。结果乳酸杆菌WR22在活菌和死菌状态下都能大量地黏附于上皮细胞,显著降低幽门螺杆在胃上皮细胞上的黏附密度,但死菌状态下抑制能力次于活菌状态。结论乳酸杆菌胃分离株WR22具有显著抑制幽门螺杆菌体外黏附胃上皮细胞的能力,有待进行体内效果评价。

幽门螺杆菌对胃上皮细胞形态与生长的影响

目的 研究幽门螺杆菌（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ，Ｈｐ）活菌对体外培养的胃上皮细胞形态与生长的影响。方法 采用Ｈｐ与细胞体外共培养技术，细胞计数、ＭＴＴ检测及Ｋｉ－６７抗原的免疫组化分析，观察Ｈｐ活菌对人胃腺癌细胞系ＳＧＣ－７９０１生长增殖的影响，同时参照病毒的致细胞病变效应实验计算Ｈｐ引起５０％细胞空泡变性所需的最低浓度。结果 ①细胞毒效应实验表明，３．

半夏泻心汤对幽门螺杆菌感染人胃上皮细胞GES-1生长的影响

目的:观察半夏泻心汤对幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染的胃上皮细胞GES-1增殖的影响。方法:采用MTT法检测细胞的增殖。以细胞细菌不同比例体外共培养48 h,以确定两者的合适比例。用不同浓度的含药血清培养感染细胞。结果:细胞:细菌比例在1∶10以上时,Hp显著抑制细胞的增殖(P<0.05),而且呈量效关系;与模型组相比,半夏泻心汤能降低细菌对细胞增殖的抑制作用(P<0.05)。结论:Hp抑制细胞增殖,半夏泻心汤能扭转细菌的抑制作用。

幽门螺杆菌与十二指肠疾病及胃上皮化生的关系

目的：研究幽门螺杆菌（ＨＰ）与十二指肠疾病及其胃上皮化生的关系。方法：应用特殊染色方法对１６６例胃窦及十二指肠活检标本进行了形态学观察及ＨＰ检测。结果：在十二指肠球部，ＨＰ仅见于胃上皮化生区，ＨＰ的检出率随着炎症及胃上皮化生程度的增加而上升。

表皮生长因子和前列腺素E2在合并幽门螺杆菌感染的胃上皮内瘤变中的作用研究

目的探讨表皮生长因子(EGF)和前列腺素E2(PGE2)在合并幽门螺杆菌(Hp)感染的胃上皮内瘤变(GIN)患者中的作用。方法选取2012年5月—2013年4月武汉市中心医院收治的胃镜下初次行黏膜钳取活检,病理诊断为低级别GIN(LGIN)患者82例,快速尿素酶法检测Hp阳性58例、Hp阴性24例,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测静脉血中EGF及PGE2水平。结果 82例患者初次胃镜诊断为浅表性胃炎16例、糜烂性胃炎52例、出血性胃炎9例、萎缩性胃炎5例。病理诊断为慢性炎症伴LGIN,其中轻度炎症34例、中度炎症42例、重度炎症6例。Hp阳性患者较Hp阴性血清EGF水平升高〔(180.7±49.9)ng/L与(68.5±1.7)ng/L,P<0.05〕,PGE2水平降低〔(11.8±1.8)ng/L与(21.0±3.4)ng/L,P<0.05〕。Hp阳性和Hp阴性不同胃镜下分型患者血清EGF、PGE2水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。Hp阳性和Hp阴性不同病理分级患者血清EGF、PGE2水平比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论合并Hp感染GIN患者血清EGF水平高于未合并Hp感染者,血清EGF和PGE2在合并Hp感染GIN患者胃黏膜损伤中起一定作用。

幽门螺杆菌对胃上皮细胞间隙连接超微结构的影响(英文)

通过实验和临床观察幽门螺杆菌(Helicobacter pylori)对胃上皮细胞间隙连接超微结构的影响,从细胞间隙连接角度探讨H.pylori致癌机制.将不同H.pylori菌株与BGC-823细胞共培养24h或48h,用原位固定与原位包埋法透射电镜观察细胞间隙连接超微结构变化.对70例胃癌患者,用快速尿素酶试验、碱性品红染色和14C尿素呼气实验检测H.pylori,PCR法检测H.pyloriCagA基因,及透射电镜观察胃上皮细胞间隙连接超微结构变化.结果显示,未加H.pylori组BGC-823细胞可见较多细胞连接及连接复合体,加H.pylori各组细胞的连接数、单位周长连接数与单位周长连接长度均小于未加H.pylori组,而细胞间隙最小宽度大于未加H.pylori组(P<0.001或P<0.005),且CagA+的NCTCJ99组、临床株GC01组和NCTC11639组细胞连接数、单位周长连接数均小于CagA-的NCTC12908组(P<0.001或P<0.05),NCTCJ99组与临床株GC01组细胞单位周长连接长度短于NCTC12908组(P<0.001).胃癌患者H.pylori感染组细胞连接数、单位周长连接数与单位周长连接长度均小于无H.pylori感染组,细胞间隙最小宽度大于无H.pylori感染组(P<0.001),且CagA+H.pylori感染者细胞连接数、单位周长连接数与单位周长连接长度均小于CagA-H.pylori感染者,细胞间隙最小宽度大于CagA-H.pylori感染者.上述结果表明,胃上皮细胞间隙连接改变与H.pylori感染,特别是CagA+H.pylori感染有关.

幽门螺杆菌对胃上皮细胞株GES-1凋亡及XIAP表达的影响

目的观察幽门螺杆菌(Hp)慢性感染对胃上皮细胞凋亡及X凋亡抑制蛋白(X IAP)表达的影响。方法通过Hp SS1与人非肿瘤性胃上皮细胞株GES-1共培养,建立GES-1模型细胞,检测模型细胞凋亡率及胃上皮细胞X IAP mRNA的表达。结果Hp感染8周、12周、16周模型细胞凋亡率分别为64.55%、60.58%、45.52%,模型胃上皮细胞的X IAP mRNA实时定量PCR的CT值分别为0.901、0.842、0.796,明显低于对照组细胞凋亡率75.52%(P<0.05)及X IAP mRNA的CT值1.030(P<0.01)。结论Hp慢性感染能抑制胃上皮细胞凋亡,其机制可能与上调X IAP mRNA表达有关。

胃上皮异型增生的新概念

关于异型增生的诊断标准,在东西方国家的胃肠病学术界存在着很大差异,曾一度导致诊断上的混乱.鉴于此.国际上制定了帕达瓦和维也纳新分类系统,对异型增生的诊断标准提出全新的概念,明确将高级别胃上皮异型增生作为胃癌最早期的镜下可见阶段,只是尚未发生浸润.因此,异型增生作为胃癌前病变这一描述已不再准确.深化对胃上皮异型增生的认识与理解,加强对其形成机制、可逆性和治疗方面的研究,是当前重要的研究课题.

幽门螺杆菌感染与十二指肠胃上皮化生及胃泌素之间关系的研究

目的 通过对幽门螺杆菌 (Hp)感染与十二指肠胃上皮化生 (DGM )及胃泌素 (GAS)关系的研究 ,探讨Hp导致十二指肠溃疡 (DU)的发病机制。 方法 检测了 12 1例患者内镜、病理、Hp感染及DGM情况。同时测定了其中 6 6例患者的血清GAS浓度。结果 球部有溃疡者 ,胃及球部Hp检出率均显著高于球部无溃疡者 (P <0 .0 0 1) ;但球部Hp检出率在DU与CU、GU与CG之间无差别 (P >0 .0 5 ) ;球部有溃疡者DGM的检出率显著高于球部无溃疡者 (P <0 .0 0 1) ,且前者的DGM程度更重 (P <0 .0 0 1) ,但在DU与CU、GU与CG之间无差别 (P >0 .0 5 ) ;胃部Hp阳性者DGM的发生率 (73.0 % )显著高于胃部Hp阴性者 (37.5 % ,P <0 .0 0 1) ,DGM(++)及以上者在Hp阳性组发生率 (47.2 % )也高于Hp阴性组 (2 1.9% ,P <0 .0 5 ) ;Hp阳性者血清GAS浓度显著高于Hp阴性者 (P <0 .0 1) ,但血清GAS浓度在Hp阳性的DU、CU、GU与CG之间无差别(P >0 .0 5 ) ;有DGM者血清GAS浓度也显著高于无DGM者 (P <0 .0 1) ,且随着DGM程度的加重 ,血清GAS浓度早递增趋势 ,两者呈正相关 (rs=0 .4 2 ,P <0 .0 1)。结论 Hp感染特别是十二指肠Hp定植及DGM是影响DU发生、发展的两大危险因素。Hp可影响DGM的发生与发展 ,其中部分可能通过增加血清GAS分泌的作用。

乌梢蛇胃上皮的组织学研究

用光镜和电镜观察了乌梢蛇胃上皮的组织结构 ,结果表明 ,①胃表面上皮均为单层柱状上皮 ,上皮细胞上部充满电子密度较高的椭圆形或杆状黏液颗粒 ,PAS反应呈强阳性 ;②胃体及幽门区上皮分别内陷形成单管状的胃底腺和幽门腺 ,无贲门腺 ;③胃底腺腺管分颈部和颈下部 ,颈部上皮细胞充满电子密度较低的近圆形的黏液颗粒 ,PAS反应呈强阳性 ,颈下部上皮细胞均分泌酶原颗粒 ,PAS反应呈阴性 ;④幽门腺细胞中亦充满电子密度较低、近圆形的黏液颗粒 ,PAS反应呈强阳性 ;⑤胃腺上皮细胞之间和腺细胞基部有不同类型的内分泌细胞分布。本文认为 ,乌梢蛇胃的消化能力较弱 ,其胃的进化在爬行动物中处于较低等的地位。

不同幽门螺杆菌培养滤液对胃上皮细胞端粒酶活性的影响

目的 分析不同幽门螺杆菌 (H .pylori)培养滤液对胃上皮细胞端粒酶活性的影响。 方法 分别以来自胃癌患者和来自慢性浅表性胃炎患者的cagA+ vacAs1a/m2和来自慢性浅表性胃炎患者的cagA+ vacAs1b/m2、cagA-vacAs1a/m2的H .pylori培养滤液与胃上皮细胞共孵育 ,然后撤除刺激物继续培养 ,观察不同时间的DNA合成速率和端粒酶活性。 结果 cagA+ vacAs1a/m2和cagA+ vacAs1b/m2Hp培养滤液与胃上皮细胞共孵育 6h ,诱导了胃上皮细胞端粒酶活性表达上调 ,DNA合成速率增加 ,cagA+ vacAs1a/m2的作用明显强于cagA+ vacAs1b/m2 ,撤除刺激物继续培养 2 4h后 ,其改变得以逆转 ;cagA-vacAs1a/m2H .pylori培养滤液与胃上皮细胞共孵育 ,其端粒酶活性和DNA合成速率无明显改变。 结论 不同H .pylori培养滤液对胃上皮细胞端粒酶活性的影响各异 ,cagA+

汉坦病毒激发人胃上皮细胞病变和凋亡

目的证实人胃粘膜上皮细胞是否为汉坦病毒属(HV)汉滩病毒型(HTN)和汉城病毒型(SEO)病毒的靶细胞,病毒对其是否有致细胞病变效应(CPE)和促凋亡作用。方法建立人胃上皮细胞(HGEC)离体培养;用HVN8、76118、Z37、Seoul8039株感染HGEC,观察细胞CPE,用直接免疫荧光法(IFA)检测病毒感染细胞和感染灶;用AnnexinV FITCkit观察HV的致HGEC凋亡和坏死作用。结果HTNV和SEOV可以感染离体培养的HGEC,形成感染灶并出现CPE;与模拟感染细胞相比,N8、76118、Z37、Seoul8039株感染的HGEC凋亡和坏死细胞比例明显增高,HTNV较SEOV促凋亡和坏死作用更强。结论HGEC可作为HTNV和SEOV感染的靶细胞,致CPE并促进细胞凋亡和坏死,在急性肾综合征出血热病人胃粘膜损害机制中起重要作用。

EB病毒转化人胃上皮细胞GES-1中bcl-2基因的表达

目的研究EBV感染人胃上皮细胞系GES-1后bcl-2基因的表达状况,探讨bcl-2基因在EBV相关胃癌发生中所起的作用。方法采用携带新霉素抗性(NEOr)基因的重组EBV产生细胞系Akata1061以密切接触法感染人胃上皮细胞系GES-1,经有限稀释法克隆和G418筛选获得感染和转染细胞克隆,用pcDNA3空载体质粒转染的人胃上皮细胞系GES-1细胞作对照;采用免疫细胞化学染色(ICC)法测定EBNA1基因的表达以鉴定EBV感染细胞克隆及测定EBV感染细胞中Bcl-2蛋白的表达。结果与对照相比较,感染细胞中Bcl-2蛋白的表达阳性。结论EBV感染可使人胃上皮细胞Bcl-2蛋白表达增高,EBV对人胃上皮细胞的转化作用可能与bcl-2基因的过度表达有关。

氨对大鼠胃上皮细胞凋亡和白介素1β-转化酶mRNA表达的影响

探讨幽门螺杆菌（Ｈｐ）感染诱发胃上皮细胞凋亡的机制。方法： ３０只Ｗｉｓｔａｒ大鼠随机分成实验组和正常对照组，实验组大鼠饮用氨水３个月，造成胃粘膜损伤模型。采用ＴＵＮＥＬ方法检测鼠胃上皮细胞凋亡情况；采用ＲＴ－ＰＣＲ方法检测胃粘膜白介素１β－转化酶（ＩＣＥ）ｍＲＮＡ的表达。结果：与正常对照组大鼠相比，实验组大鼠胃粘膜肉眼观察见充血、水肿，病理检查示炎症和轻度萎缩改变。实验组胃粘膜上皮细胞凋亡指数（６．９±１．３）显著高于对照组（１．２±０．５， Ｐ＜０．０１），实验组ＩＣＥ ｍＲＮＡ经ＲＴ－ＰＣＲ后的电泳条带用自动图象仪处理测得相对值为０．８３±０．２０，而正常对照组为０．４７±０．１０，差异有显著性（Ｐ＜０．０１）。结论：氨所致的胃粘膜损伤可能与其诱发ＩＣＥ ｍＲＮＡ表达，引起胃粘膜上皮细胞凋亡有关。