miR-7对Hp诱导胃上皮细胞自噬及EMT的影响

目的探讨微小RNA-7(miR-7)对幽门螺杆菌(Hp)诱导的胃上皮细胞(GES-1)自噬及上皮细胞间质转化(EMT)的影响。方法体外将Hp悉尼株(SS1)与GES-1细胞共培养建立GES-1细胞转化模型;实验分为空白对照组(NC组)、Hp组、miR-7模拟物(mimics)组、Hp+miR-7 mimics组。qRT-PCR验证转染效果;MTT法、划痕实验、Transwell实验检测各组GES-1细胞增殖能力、迁移能力和侵袭能力;透射电镜下观察细胞自噬体;免疫印迹法检测各组GES-1细胞自噬相关蛋白[RM-9106微管相关蛋白1轻链3-Ⅰ(LC3-Ⅰ)、LC3-Ⅱ]及EMT相关蛋白[E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)]表达情况。结果与NC组比较,Hp组GES-1转化细胞增殖抑制率、p62蛋白、E-Cadherin蛋白水平降低(P<0.05),迁移率、侵袭数、自噬体数量及自噬泡/胞质总面积、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值、N-Cadherin和Vimentin蛋白水平均升高(P<0.05),miR-7 mimics组GES-1细胞增殖抑制率、p62蛋白、E-Cadherin蛋白水平升高(P<0.05),迁移率、侵袭数、自噬体数量及自噬泡/胞质总面积、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值、N-Cadherin和Vimentin蛋白水平均降低(P<0.05);与miR-7 mimics组比较,Hp+miR-7 mimics组转化细胞增殖抑制率、p62蛋白、E-Cadherin蛋白水平降低(P<0.05),迁移率、侵袭数、自噬体数量及自噬泡/胞质总面积、自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值、N-Cadherin和Vimentin蛋白水平均升高(P<0.05)。结论miR-7下调Hp诱导的GES-1细胞自噬,降低细胞侵袭及迁移能力,抑制EMT。

脾胃培源方含药血清对鹅去氧胆酸诱导胃上皮细胞肠化生的影响

目的探究脾胃培源方含药血清对鹅去氧胆酸诱导的人胃上皮细胞(GES-1)肠上皮化生的影响及其潜在作用机制。方法①采用CCK-8法检测不同浓度鹅去氧胆酸(0,20,50,100,150,200μmol/L)、脾胃培源方含药血清(0,2.5%,5%,10%,20%,30%,40%)对GES-1细胞活性的影响,确定后续实验鹅去氧胆酸和脾胃培源方含药血清浓度。②实验分为空白对照组、鹅去氧胆酸组、鹅去氧胆酸+5%脾胃培源方含药血清组、鹅去氧胆酸+10%脾胃培源方含药血清组、鹅去氧胆酸+20%脾胃培源方含药血清组,CCK-8法检测各组GES-1细胞活性。③实验分为空白对照组、20%脾胃培源方含药血清组、鹅去氧胆酸组、鹅去氧胆酸+20%脾胃培源方含药血清组,ELISA法检测炎症因子与氧化应激相关指标水平[白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)]。④实验分为空白对照组、鹅去氧胆酸组、鹅去氧胆酸+5%脾胃培源方含药血清组、鹅去氧胆酸+10%脾胃培源方含药血清组、鹅去氧胆酸+20%脾胃培源方含药血清组,分别采用Western blot法和RT-PCR法检测肠上皮化生相关分子标志物(CDX1、CDX2、MUC2)蛋白及mRNA表达情况。结果选择100μmol/L的鹅去氧胆酸和5%,10%,20%脾胃培源方含药血清进行后续实验。各浓度脾胃培源方含药血清组GES-1细胞活性均明显低于鹅去氧胆酸组(P均<0.05),且各浓度脾胃培源方含药血清组GES-1细胞活性呈剂量依赖性降低。与空白对照组比较,鹅去氧胆酸组IL-6、IL-8、TNF-α、MDA水平均明显升高(P均<0.05),SOD水平明显降低(P<0.05);与鹅去氧胆酸组比较,鹅去氧胆酸+20%脾胃培源方含药血清组IL-6、IL-8、TNF-α、MDA水平均明显降低(P均<0.05),SOD水平明显升高(P<0.05)。鹅去氧胆酸组CDX1、CDX2、MUC2蛋白及mRNA相对表达量均明显高于空白对照组(P均<0.05);鹅去氧胆酸+10%脾胃培源方含药血清组和鹅去氧胆酸+20%脾胃培源方含药血清组CDX1、CDX2、MUC2蛋白及mRNA相对表达量均明显低于鹅去氧胆酸组(P均<0.05),且各指标呈一定浓度依赖性降低。结论脾胃培源方可通过抑制炎症与氧化应激反应,下调肠化标志物CDX1、CDX2、MUC2的表达,从而抑制鹅去氧胆酸诱导的GES-1肠上皮化生。

乳酸杆菌胃分离株WR22体外抑制幽门螺杆菌黏附胃上皮细胞研究

目的研究乳酸杆菌WR22体外对胃上皮细胞的黏附能力和抑制幽门螺杆菌黏附上皮细胞的效果。方法乳酸杆菌WR22在体外与胃上皮细胞爬片共同孵育2h后,采用光镜、电镜技术观察其黏附效果。WR22与幽门螺杆菌SS1对胃上皮细胞竞争性黏附2h后,荧光抗体染色法定性评价黏附于胃上皮细胞上的幽门螺杆菌密度。结果乳酸杆菌WR22在活菌和死菌状态下都能大量地黏附于上皮细胞,显著降低幽门螺杆在胃上皮细胞上的黏附密度,但死菌状态下抑制能力次于活菌状态。结论乳酸杆菌胃分离株WR22具有显著抑制幽门螺杆菌体外黏附胃上皮细胞的能力,有待进行体内效果评价。

幽门螺杆菌对胃上皮细胞形态与生长的影响

目的 研究幽门螺杆菌（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ，Ｈｐ）活菌对体外培养的胃上皮细胞形态与生长的影响。方法 采用Ｈｐ与细胞体外共培养技术，细胞计数、ＭＴＴ检测及Ｋｉ－６７抗原的免疫组化分析，观察Ｈｐ活菌对人胃腺癌细胞系ＳＧＣ－７９０１生长增殖的影响，同时参照病毒的致细胞病变效应实验计算Ｈｐ引起５０％细胞空泡变性所需的最低浓度。结果 ①细胞毒效应实验表明，３．

半夏泻心汤对幽门螺杆菌感染人胃上皮细胞GES-1生长的影响

目的:观察半夏泻心汤对幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染的胃上皮细胞GES-1增殖的影响。方法:采用MTT法检测细胞的增殖。以细胞细菌不同比例体外共培养48 h,以确定两者的合适比例。用不同浓度的含药血清培养感染细胞。结果:细胞:细菌比例在1∶10以上时,Hp显著抑制细胞的增殖(P<0.05),而且呈量效关系;与模型组相比,半夏泻心汤能降低细菌对细胞增殖的抑制作用(P<0.05)。结论:Hp抑制细胞增殖,半夏泻心汤能扭转细菌的抑制作用。

幽门螺杆菌对胃上皮细胞间隙连接超微结构的影响(英文)

通过实验和临床观察幽门螺杆菌(Helicobacter pylori)对胃上皮细胞间隙连接超微结构的影响,从细胞间隙连接角度探讨H.pylori致癌机制.将不同H.pylori菌株与BGC-823细胞共培养24h或48h,用原位固定与原位包埋法透射电镜观察细胞间隙连接超微结构变化.对70例胃癌患者,用快速尿素酶试验、碱性品红染色和14C尿素呼气实验检测H.pylori,PCR法检测H.pyloriCagA基因,及透射电镜观察胃上皮细胞间隙连接超微结构变化.结果显示,未加H.pylori组BGC-823细胞可见较多细胞连接及连接复合体,加H.pylori各组细胞的连接数、单位周长连接数与单位周长连接长度均小于未加H.pylori组,而细胞间隙最小宽度大于未加H.pylori组(P<0.001或P<0.005),且CagA+的NCTCJ99组、临床株GC01组和NCTC11639组细胞连接数、单位周长连接数均小于CagA-的NCTC12908组(P<0.001或P<0.05),NCTCJ99组与临床株GC01组细胞单位周长连接长度短于NCTC12908组(P<0.001).胃癌患者H.pylori感染组细胞连接数、单位周长连接数与单位周长连接长度均小于无H.pylori感染组,细胞间隙最小宽度大于无H.pylori感染组(P<0.001),且CagA+H.pylori感染者细胞连接数、单位周长连接数与单位周长连接长度均小于CagA-H.pylori感染者,细胞间隙最小宽度大于CagA-H.pylori感染者.上述结果表明,胃上皮细胞间隙连接改变与H.pylori感染,特别是CagA+H.pylori感染有关.

幽门螺杆菌对胃上皮细胞株GES-1凋亡及XIAP表达的影响

目的观察幽门螺杆菌(Hp)慢性感染对胃上皮细胞凋亡及X凋亡抑制蛋白(X IAP)表达的影响。方法通过Hp SS1与人非肿瘤性胃上皮细胞株GES-1共培养,建立GES-1模型细胞,检测模型细胞凋亡率及胃上皮细胞X IAP mRNA的表达。结果Hp感染8周、12周、16周模型细胞凋亡率分别为64.55%、60.58%、45.52%,模型胃上皮细胞的X IAP mRNA实时定量PCR的CT值分别为0.901、0.842、0.796,明显低于对照组细胞凋亡率75.52%(P<0.05)及X IAP mRNA的CT值1.030(P<0.01)。结论Hp慢性感染能抑制胃上皮细胞凋亡,其机制可能与上调X IAP mRNA表达有关。

不同幽门螺杆菌培养滤液对胃上皮细胞端粒酶活性的影响

目的 分析不同幽门螺杆菌 (H .pylori)培养滤液对胃上皮细胞端粒酶活性的影响。 方法 分别以来自胃癌患者和来自慢性浅表性胃炎患者的cagA+ vacAs1a/m2和来自慢性浅表性胃炎患者的cagA+ vacAs1b/m2、cagA-vacAs1a/m2的H .pylori培养滤液与胃上皮细胞共孵育 ,然后撤除刺激物继续培养 ,观察不同时间的DNA合成速率和端粒酶活性。 结果 cagA+ vacAs1a/m2和cagA+ vacAs1b/m2Hp培养滤液与胃上皮细胞共孵育 6h ,诱导了胃上皮细胞端粒酶活性表达上调 ,DNA合成速率增加 ,cagA+ vacAs1a/m2的作用明显强于cagA+ vacAs1b/m2 ,撤除刺激物继续培养 2 4h后 ,其改变得以逆转 ;cagA-vacAs1a/m2H .pylori培养滤液与胃上皮细胞共孵育 ,其端粒酶活性和DNA合成速率无明显改变。 结论 不同H .pylori培养滤液对胃上皮细胞端粒酶活性的影响各异 ,cagA+

氨对大鼠胃上皮细胞凋亡和白介素1β-转化酶mRNA表达的影响

探讨幽门螺杆菌（Ｈｐ）感染诱发胃上皮细胞凋亡的机制。方法： ３０只Ｗｉｓｔａｒ大鼠随机分成实验组和正常对照组，实验组大鼠饮用氨水３个月，造成胃粘膜损伤模型。采用ＴＵＮＥＬ方法检测鼠胃上皮细胞凋亡情况；采用ＲＴ－ＰＣＲ方法检测胃粘膜白介素１β－转化酶（ＩＣＥ）ｍＲＮＡ的表达。结果：与正常对照组大鼠相比，实验组大鼠胃粘膜肉眼观察见充血、水肿，病理检查示炎症和轻度萎缩改变。实验组胃粘膜上皮细胞凋亡指数（６．９±１．３）显著高于对照组（１．２±０．５， Ｐ＜０．０１），实验组ＩＣＥ ｍＲＮＡ经ＲＴ－ＰＣＲ后的电泳条带用自动图象仪处理测得相对值为０．８３±０．２０，而正常对照组为０．４７±０．１０，差异有显著性（Ｐ＜０．０１）。结论：氨所致的胃粘膜损伤可能与其诱发ＩＣＥ ｍＲＮＡ表达，引起胃粘膜上皮细胞凋亡有关。

汉坦病毒激发人胃上皮细胞病变和凋亡

目的证实人胃粘膜上皮细胞是否为汉坦病毒属(HV)汉滩病毒型(HTN)和汉城病毒型(SEO)病毒的靶细胞,病毒对其是否有致细胞病变效应(CPE)和促凋亡作用。方法建立人胃上皮细胞(HGEC)离体培养;用HVN8、76118、Z37、Seoul8039株感染HGEC,观察细胞CPE,用直接免疫荧光法(IFA)检测病毒感染细胞和感染灶;用AnnexinV FITCkit观察HV的致HGEC凋亡和坏死作用。结果HTNV和SEOV可以感染离体培养的HGEC,形成感染灶并出现CPE;与模拟感染细胞相比,N8、76118、Z37、Seoul8039株感染的HGEC凋亡和坏死细胞比例明显增高,HTNV较SEOV促凋亡和坏死作用更强。结论HGEC可作为HTNV和SEOV感染的靶细胞,致CPE并促进细胞凋亡和坏死,在急性肾综合征出血热病人胃粘膜损害机制中起重要作用。

EB病毒转化人胃上皮细胞GES-1中bcl-2基因的表达

目的研究EBV感染人胃上皮细胞系GES-1后bcl-2基因的表达状况,探讨bcl-2基因在EBV相关胃癌发生中所起的作用。方法采用携带新霉素抗性(NEOr)基因的重组EBV产生细胞系Akata1061以密切接触法感染人胃上皮细胞系GES-1,经有限稀释法克隆和G418筛选获得感染和转染细胞克隆,用pcDNA3空载体质粒转染的人胃上皮细胞系GES-1细胞作对照;采用免疫细胞化学染色(ICC)法测定EBNA1基因的表达以鉴定EBV感染细胞克隆及测定EBV感染细胞中Bcl-2蛋白的表达。结果与对照相比较,感染细胞中Bcl-2蛋白的表达阳性。结论EBV感染可使人胃上皮细胞Bcl-2蛋白表达增高,EBV对人胃上皮细胞的转化作用可能与bcl-2基因的过度表达有关。

幽门螺杆菌对胃上皮细胞的凋亡作用

目的 研究幽门螺杆菌 (Hp)对胃黏膜上皮细胞的凋亡作用。 方法 10例Hp阴性的非溃疡性消化不良(NUD)患者 ,2 5例Hp相关性胃炎患者 ,以TUNEL法进行细胞凋亡的检测 ,免疫组织化学法检测凋亡调控蛋白Bcl 2 ,Bax ,Bak等的表达。结果 与Hp阴性的NUD患者相比 ,Hp相关性胃炎患者胃黏膜上皮细胞的凋亡指数 (AI)明显增加 (19.6 6 %vs 3.0 3% ,P <0 .0 1) ,其促凋亡蛋白Bak ,Bax蛋白的表达明显增加 (47.0 7%vs 16 .6 3%&42 .6 %vs 13.8% ,P <0 .0 1)。Bcl 2蛋白表达也与促凋亡蛋白呈现一致的变化 (2 5 .1%vs 8.0 7% ,P <0 .0 1)。AI与炎症积分无明显相关性 (P >0 .0 5 )。AI、Bak、Bax及Bcl 2蛋白之间具有显著相关性 (P <0 .0 1)。结论 Hp诱导胃上皮细胞凋亡伴随着Bak蛋白表达增加 ,提示Bak蛋白在Hp诱导的胃上皮细胞凋亡中起了作用。

幽门螺杆菌感染对正常胃粘膜向胃癌演进过程中胃上皮细胞增殖的影响

目的探讨幽门螺杆菌（Ｈｐ）感染对正常胃粘膜向胃癌演进过程中对胃上皮细胞增殖的影响。材料和方法采用免疫组化染色方法测定胃粘膜增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）标记指数（ＬＩ）。１１例基本正常胃粘膜、３２例浅表性胃炎、８３例萎缩性胃炎伴肠化、２５例异型增生和１０例胃癌被纳入本研究。结果１．从正常胃粘膜、浅表性胃炎、萎缩性胃炎伴肠化、异型增生至胃癌，胃粘膜上皮细胞ＰＣＮＡ标记指数进行性地升高，各阶段病变组之间及病变组与正常对照组相比均有显著差异（Ｐ＜０．０１）；２．浅表性胃炎组和萎缩性胃炎伴肠化轻度组中Ｈｐ阳性病例的ＰＣＮＡ标记指数分别为１３．１４±１．６和１９．６８±２．２２，而Ｈｐ阴性病例则为６．９５±０．７８和１１．３４±１．８９，有显著差异（Ｐ＜０．０１）；其他各组中Ｈｐ阳性与阴性病例间ＰＣＮＡ标记指数无显著差异（Ｐ＞０．０５）。结论Ｈｐ感染增加浅表性胃炎和轻度萎缩性胃炎阶段胃粘膜上皮细胞增殖，Ｈｐ感染可能在胃癌发生过程中的早期阶段参与启动作用。

幽门螺杆菌诱导胃上皮细胞表达分泌IL-8的研究

目的 :探讨幽门螺杆菌 (H elicobacter pylori,Hp)体外诱导胃上皮细胞表达分泌 IL - 8的状况。方法 :逆转录多聚酶链反应 (RT- PCR)检测 IL - 8在 Hp诱导的胃上皮细胞的表达 ,酶联免疫吸附试验 (EL ISA)检测 IL - 8表达产物的量。结果 :经 Hp标准菌株 CCU G17874刺激后 ,在胃上皮细胞株 MKN 4 5、MKN 2 8、SGC 790 1均检测到 IL - 8m RNA;共同培养 6 0 m in开始明显表达 (P<0 .0 5 ) ,12 0～ 180 min时表达最强 (P<0 .0 1)。刺激 2 4 h后 ,MKN 4 5分泌 IL - 8蛋白最高 ,为 (14 80± 36 0 ) pg/ ml,SGC790 1为 (112 0± 2 90 ) pg/ ml,MKN 2 8最低 ,为 (710± 2 2 0 ) pg/ ml,而未刺激对照组为 (6 3± 2 1)、(5 2± 16 )和 (30± 18)pg/ m l,刺激组与各自未刺激对照组间有显著差异 (P<0 .0 1) ,其相差倍数分别为 2 3.5、 2 1.5、2 3.7倍 ,不同细胞株间的无统计学意义。 结论 :Hp能体外诱导胃上皮细胞株表达分泌 IL - 8,该作用可能与

幽门螺杆菌VacA^+ BCS致胃上皮细胞基因表达谱的改变

目的 :通过观察VacA+ BCS作用胃癌来源的SGC790 1细胞后 ,细胞基因表达谱的改变 ,分析Va cA等分泌性细胞毒力因子的致病性和致病意义。方法 :利用常规方法获得VacA+ BCS和VacA-BCS ,然后作用细胞 ,最后利用cDNA基因表达谱芯片技术观察细胞基因表达谱的变化。结果 :发生明显表达差异的基因占基因总数的 5 %左右 ,其中已经明确功能的表达差异基因涉及许多重要的细胞功能和生命活动 ,如基因表达调控、信号转导相关基因的差异表达、细胞骨架相关蛋白表达的变化、细胞凋亡相关因子编码基因表达的变化、以及肿瘤发生相关基因的表达变化等。结论 :VacA+ BCS可致细胞基因表达谱发生多层次和多方面的改变 ,几乎涉及H .pylori相关疾病所有重要病理过程 ,提示其在H .pylori致病机制中具有重要作用。

幽门螺杆菌上调miR-7致胃上皮细胞GES-1凋亡

目的探讨miR-7对幽门螺杆菌感染胃上皮细胞凋亡的影响。方法以Hp感染GES-1细胞,感染24 h的细胞分为1∶50(细胞∶细菌)组和1∶100组;当感染比率为1∶100(细胞∶细菌)时,按感染时间分为24 h组和48 h组,同时设未感染细胞为空白对照组,观察不同感染菌量和感染时间对GES-1细胞miR-7和RELA表达的影响。以miR-7-5p类似物转染GES-1细胞设为miR-7 mimics组,miR-阴性序列转染GES-1为阴性对照组(NC组),未转染细胞作为空白对照组,观察各组细胞增殖凋亡及RELA蛋白表达情况。实时定量PCR法检测miR-7表达量,CCK-8法检测细胞增殖能力,流式细胞仪检测细胞凋亡率,Western blot检测RELA蛋白表达量。结果与空白对照相比较,感染24 h时1∶50组及1∶100组的miR-7表达量上调,差异有统计学意义(P<0.05)。当感染率1∶100时,与空白对照组比较,感染24 h组和48 h组miR-7表达量均显著上调(P<0.05),48 h组RELA蛋白显著下降(P<0.05),但24 h组差异无统计学意义。转染实验中发现,与空白对照组和NC组相比较,mimics组细胞增殖能力明显下降(P<0.05),细胞凋亡率明显增加(P<0.05),RELA蛋白表达显著降低(P<0.05)。结论Hp通过上调感染细胞的miR-7分子调控其靶基因RELA的表达,抑制细胞增殖,促进细胞凋亡,这可能是Hp导致胃上皮细胞损伤致病的机制之一。

EB病毒BARF1基因对人胃上皮细胞恶性转化的作用

目的探讨EB病毒编码BARF1基因在人胃上皮细胞恶性转化中的作用。方法用携带BARF1基因的真核载体PIRES2-EGFP/BARF1,转染人胃上皮细胞系GES-1,通过G418筛选,获得稳定表达BARF1基因的人胃上皮细胞株。GES-1细胞被分为4组,包括1个转染BARF1基因的细胞组,1个转染BARF1基因并有TPA刺激细胞组,1个转染空载体细胞组和未转染的细胞组。观察软琼脂克隆形成能力和SCID鼠体内成瘤能力。SCID鼠被分成不同的组进行皮下接种,每一组接种3只。结果转染BARF1基因的细胞组及其TPA刺激组在软琼脂中能形成克隆,转染组克隆形成率为24.2%(58/240),TPA组克隆形成率为40.0%(96/240);而未转染组和转染空载体组细胞在软琼脂中没有克隆形成。转染BARF1基因的TPA刺激组细胞在SCID鼠体内能形成了肿瘤;未转染组、转染空载体组及转染BARF1基因的细胞组在SCID鼠体内没能形成肿瘤,但转染BARF1基因的细胞组在SCID鼠体内产生了结节。结论作为EBV的一个癌基因BARF1能够使细胞发生恶性转化,获得肿瘤细胞生长的特性,在人胃上皮细胞恶性转化过程中起重要作用。

EBV感染人胃上皮细胞GES-1中c-myc基因的表达

目的研究Epstein-Barr virus(EBV)感染的人胃上皮细胞系GES-1 c-myc基因表达状况,探讨c-myc基因在EBV相关胃癌发生中的作用。方法采用携带新霉素抗性(NEOr)基因的重组EBV产生细胞系Akata 1061以密切接触法感染人胃上皮细胞系GES-1,经有限稀释法克隆和G418筛选获得感染和转染细胞克隆,用pcDNA3空载体质粒转染的人胃上皮细胞系GES-1细胞作对照,采用免疫细胞化学染色(ICC)法测定EBNA1和c-myc蛋白以鉴定EBV感染细胞克隆及c-myc基因的表达。结果EBV感染的细胞克隆经Icc法检测EBNAI阳性,c-myc蛋白阳性;对照细胞均为阴性。结论EBV感染可使人胃上皮细胞c-myc蛋白表达增高,EBV对人胃上皮细胞的转化作用可能与c-myc基因的过度表达有关。

地塞米松及酪氨酸蛋白激酶抑制剂对胃上皮细胞白介素-8分泌抑制作用的实验研究

目的 :探讨慢性胃肠道炎症机制及其防治 ,本文对肿瘤坏死因子和白细胞介素 (白介素 ) 1β诱导的胃上皮细胞白介素 8分泌作用使用地塞米松及酪氨酸蛋白激酶抑制剂进行了体外实验研究。方法 :胃上皮细胞经体外培养后由肿瘤坏死因子和白介素 1β刺激 ,由酶联免疫法检验其白细胞介素 8的分泌 ,并与地塞米松和蛋白激酶抑制剂组相比较。结果 :地塞米松在 10 -8,10 -7,10 -6,10 -5mol/L可抑制肿瘤坏死因子和白介素 1β诱导的胃上皮细胞白介素 8分泌。酪氨酸蛋白激酶抑制剂金雀异黄素和核比霉素A具有类似效应 ,但蛋白激酶C和A抑制剂却无抑制效应。结论 :本文结果提示细胞介素诱导的胃上皮细胞白细胞介素 8的分泌可能是促进胃部炎症性疾病的原因之一 ,抑制白细胞介素

幽门螺杆菌对胃上皮细胞Cox-2表达与凋亡的影响

目的:研究Cox-2在胃癌细胞中及胃黏膜组织中表达的意义,探讨其表达与胃上皮细胞凋亡的关系. 方法:将粗制H pylori总蛋白与胃上皮细胞株MKN28, AGS共同孵育,用RT-PCR及免疫组化染色法测定孵育前后细胞Cox-2表达的情况,同时检测了40例患者胃镜活检胃黏膜病变标本的Cox-2蛋白的表达及H pylori感染情况.用流式细胞术观察H pylori、选择性Cox-2抑制剂NS-398及二者共同诱导细胞凋亡的情况. 结果:与H pylori孵育后的MKN28细胞株中Cox-2表达增加;Cox-2蛋白在与H pylori共同孵育前后的MKN28细胞株中表达强度分别为0.26和0.40(P<0.05),AGS细胞中为0.29和0.31(P>0.05);Cox-2在胃癌中的表达明显高于浅表性胃炎(CSG)、萎缩性胃炎(CAG)组(P<0.05).流式显示,与H pylori孵育24,48 h MKN28细胞凋亡率分别为1.0%和5.7%(P<0.01);与10,100,200 μmol/L NS- 398孵育24 h及48 h的MKN28细胞凋亡率分别为1.2%, 14.0%,27.5%及1.5%,31.2%,51.8%,具有浓度、时间依赖性(P<0.01).与H pylori,NS-398共同孵育24, 48h的MKN28细胞凋亡率分别为12.2%,25.0%,其凋亡率低于单用NS-398(P<0.01). 结论:H pylori感染上调MKN28细胞中Cox-2的表达; Cox-2基因可抑制细胞凋亡,在胃癌发生发展过程中起重要作用,可能为胃癌形成的机制之一.