大鼠胃底平滑肌细胞5-HT受体的信号转导通路的研究

目的 以 5 HT引起胞内Ca2 + 变化为指标 ,研究大鼠胃底平滑肌细胞 5 HT受体的信号转导机制。方法 采用Ca2 + 指示剂Fluo - 3/AM负载培养的胃底平滑肌细胞 (SF SMC) ,共聚焦显微术检测细胞内钙荧光强度的变化。结果 基础状态下SFSMC[Ca2 + ]i 荧光强度 (fluorescenceintensi ty ,FI)为 2 6 4± 1 5 ,5 HT 10 μmol·L-1使荧光强度缓慢升高 ;这一作用与细胞外钙内流和内钙释放有关 ;10 μmol·L-1米安舍林 (mianserin)可部分拮抗 5 HT升高 [Ca2 + ]i 的作用 ,钙拮抗剂拉西地平 (lacidipine)、G蛋白拮抗剂NEM均能完全抑制 5 HT升高 [Ca2 + ]i 的作用 ;5 HT引起 [Ca2 + ]i的升高被PLC抑制剂部分地取消 ;PKC激动剂拮抗了 5 HT引起的钙动员 ,而PKC特异性抑制剂D 鞘氨醇取消了这一抑制作用。结论 5 HT部分通过激动了胃底平滑肌细胞的G 蛋白偶联的 5 HT2B受体引起细胞去极化 ,从而激发L型钙通道使外Ca2 + 内流 ,并促进SR上的ryanodine受体的开放 ,引起 [Ca2 + ]i 升高。而这一升高 [Ca2 + ]i

二氢吡啶类钙拮抗剂对抗5-HT引起的胃底平滑肌细胞的增殖及其机制

目的 通过对大鼠胃底平滑肌细胞 (SFSMCs)的研究 ,揭示二氢吡啶类钙拮抗剂对抗 5 HT促增殖作用的机制。方法 采用MTT法、免疫组化法及PKC活性测定观察在二氢吡啶类钙拮抗剂Mn92 0 2及lacidipine作用下 ,培养的大鼠胃底平滑肌细胞对 5 HT引起的增殖活性的变化及增殖信号的变化。结果 5 HT(1 μmol·L- 1 )具有明显的促大鼠SFSMCs增殖作用 ,并促进MAPK和PKC活性的增加 ,高剂量 (1 μmol·L- 1 )的钙拮抗剂Mn92 0 2和lacidipine能够有效地抑制大鼠胃底平滑肌细胞的生长 ,同时也抑制MAPK的表达以及PKC由胞质向胞膜的转移。结论 二氢吡啶类钙拮抗剂的这一抗增殖作用 ,除与其阻断 5 HT引起的Ca2 + 内流有关 ,还可能干预 5 HT与细胞膜上的 5 HT2B受体结合 ,从而阻断了增殖信号的传递。

毒黄素中毒大鼠胃底平滑肌细胞超微结构观察

目的:观察毒黄素对大鼠胃底平滑肌毒性作用的超微结构影响,探讨毒黄素的中毒作用机制。方法:选择健康SD大鼠18只,分为模型组和正常对照组,每组9只,实验组大鼠经口灌注毒黄素,建立模型后,实验动物均脱臼致死,迅速取出胃底部,采用透射电镜观察细胞超微结构改变。结果:毒黄素主要损伤线粒体、密斑和密体以及毛细血管周围有嗜酸性粒细胞等结构。结论:毒黄素可造成平滑肌亚细胞结构的损伤,为毒黄素中毒机制提供形态学依据。

牛磺酸对前列腺素E_2兴奋大鼠胃底平滑肌作用的影响

目的 :观察了牛磺酸对大鼠胃底平滑肌收缩性的影响。方法 :采用离体平滑肌实验技术观察胃底条收缩作用。结果 :牛磺酸能使前列腺素E2 (PGE2 )累加量效曲线明显降低。结论 :牛磺酸能对抗PGE2

地龙匀浆液对离体胃底平滑肌收缩功能的影响及机制研究

目的:研究地龙匀浆液对离体胃底平滑肌收缩功能的影响,并联合受体阻断剂阐明其可能的作用机制。方法:制备长约4 cm的离体胃底平滑肌条,一端固定于恒温水浴槽独立内管底部的玻璃弯钩上,另一端固定在张力传感器上,后者连接于BL-420E+生物机能实验记录系统。向槽中加入不同浓度的地龙匀浆液,描记收缩曲线并选择最适宜的地龙匀浆液浓度。再分别向槽中加入50μg/mL的胃肠平滑肌M受体阻断剂阿托品、α受体阻断剂酚妥拉明、β受体阻断剂普萘洛尔,观察其对平滑肌收缩曲线的影响,计算张力变化率。结果:地龙匀浆液能舒张胃底平滑肌,最适宜浓度为33.3%;地龙匀浆液与M型受体阻断剂阿托品能协同减弱平滑肌的收缩能力,而α受体阻断剂酚妥拉明、β受体阻断剂普萘洛尔使用前后胃底平滑肌的收缩张力无明显改变。结论:地龙匀浆液能舒张胃底平滑肌,其作用机制可能是阻断了胃底平滑肌表面的M受体。

Mn9202对培养大鼠胃底平滑肌细胞的5-HT、TH及其受体的影响

目的 研究二氢毗陡类钙桔抗剂，［２，６ 二甲基－４－（３－硝基苯基）－１，４－二氢－３，５－吡啶二羧酸－３－甲酯－５－正戊酯（Ｍｎ９２０２）了、拉西地平（ｌａｃｉｄｉｐｉｎｅ）对培养的大鼠胃底平滑肌 ５－ＨＴ、５－ＨＴ合成酶（ＴＨ）及 ５ＨＴ受体（５－ＨＴＲ）的影响。方法采用免疫细胞化学和图像分析等方法观察Ｍｎ９２０２和ｌａｃｉｄｉｐｉｎｅ作用下培养的大鼠胃底平滑肌细胞中５－ＨＴ、ＴＨ和５－ＨＴＲ含量的变化．并与５－ＨＴ的桔抗剂赛庚定（ｃｙｐｒｏｈｅｔａｄｉｎｅ）比较。结果 正常大鼠胃底平滑肌细胞５－ＨＴ、ＴＨ、５－ＨＴＲ免疫反应均呈阳性，而Ｍｎ９２０２、ｌａｃｉｄｐｉｎｅ和ｃｙｐｒｏｈｅｔａｄｉｎｅ均能使胃底平滑肌５－ＨＴ、ＴＨ和５－ＨＴＲ的含量减少。结论 大鼠胃底平滑肌胞具有自分泌５－ＨＴ的功能，Ｍｎ９２０２和拉西地平可能通过减少５－ＨＴ的合成而使５－ＨＴＲ的表达下降，这一结果与５－ＨＴ桔抗剂赛庚定相似。

食管癌合并胃底平滑肌肉瘤1例

食管癌合并胃底平滑肌肉瘤１例９１医院外一科黄学胜患者胡某，男，６８岁。吞咽不畅３月，伴胸骨后隐痛２月，于１９９３—０８—１１入院。查体无阳性发现，行食管吞钡摄片示下段食管管壁不齐，可见一充盈缺损，局部扩张差，钡剂通过受阻不明显，病变长５．５ｃｍ。临床...

5-羟色胺诱导胃底平滑肌细胞钙火花

以自行合成的胞浆特异性Ca2+荧光探针STDIn-AM标记胃底平滑肌细胞,采用激光共聚焦线扫描技术,首次研究了5-羟色胺诱导胃底平滑肌细胞内钙释放的最基本单位钙火花现象,探讨了其作用机制.表明5-HT与存在于胃底平滑肌质膜上的5-HT2受体结合而使之激活,激活后的5-HT2受体通过Gq/ll蛋白介导的IP3/Ca2+和DG/PKC双信使途径调节钙池内钙释放,内钙释放导致钙池耗竭随即又会促发胞外Ca2+内流;同时,激活的5-HT2受体又直接引起细胞膜去极化,从而激动L型钙通道促发外钙内流.这两种因素促发的胞外Ca2+内流,随即激活质膜附近SR上的ryanodine受体开启单个或多个RyR受体Ca2+通道,从而引起局部内钙释放,形成钙火花.

胃底平滑肌肉瘤术后10年广泛转移一例

患者男,72岁,1992年1月因间歇性黑便2个月,头晕3d就诊.胃镜检查示:胃底部见一约5 cm × 7 cm大小球形肿物,表面见2个脐样溃疡灶,肿物活动度可,质硬,活检病理报告为正常胃黏膜组织及溃疡组织,遂行手术治疗.

新型Ca^(2+)探针用于5-HT诱导细胞钙动员的机制

采用激光共聚焦技术分别进行了新型Ca2+荧光试剂STDIn与Fluo-3对胃底平滑肌细胞的标记及其对胞内游离Ca2+浓度变化的响应等特性的研究.结果表明,与Fluo-3不同,新型Ca2+荧光试剂STDIn对胞浆Ca2+具有靶向性,是一种真正的胞浆Ca2+荧光探针,对5-羟色胺（5-HT）诱导的胞内游离Ca2+浓度变化的响应更灵敏迅速.应用STDIn对5-HT诱导胃底平滑肌细胞内游离Ca2+动员的机制研究发现,L型钙通道拮抗剂Mn9202对5-HT升高[Ca2+]有明显的抑制作用;使用蛋白激酶（protein kinase C,PKC）抑制剂D-Sphingosine孵育后,再加入5-HT胞内荧光强度明显升高,而以磷脂酶（phospholipase C,PLC）抑制剂Compound48/80孵育后,5-HT则不再引起荧光强度的变化表明5-HT通过促进外钙内流和内钙释放使[Ca2+]i升高;在胃底平滑肌5-HT升高[Ca2+]i是通过5-HT2受体介导的IP3/Ca2+和DG/PKC双信使途径;5-HT通过L型钙通道促进外钙内流;Mn9202亦能通过拮抗5-HT受体而起到抑制5-HT促胞内钙释放的作用.

二氢吡啶类钙拮抗剂拉西地平对5-HT诱导的细胞内钙释放的影响

采用Ca2+指示剂Fluo-3/AM负载培养的胃底平滑肌细胞,激光共聚焦纤维技术检测细胞内钙荧光强度的变化.结果显示10μmol/L的拉西地平可使10μmol/L5-HT引起钙超载胃底平滑肌细胞Ca2+spark的发生频率减少50%,振幅减少约50%.表明二氢吡啶类钙拮抗剂拉西地平能够剂量依赖性地对抗5-HT引起的内钙释放.