胃泌素拮抗剂增加CD自杀基因对结直肠癌细胞的杀伤作用

目的:研究联合应用胃泌素拮抗剂和胞嘧啶脱氨酶(CD)的基因治疗对结肠癌细胞的杀伤作用.方法:脂质体法转染G1CEACDNa至LoVo细胞.用含1mmol/L 5—FC或/和1× 10^(-8)mmol/L CI-988的100ml/L胎牛血清的RPMI1640培养基培养细胞,测生长曲线;MTT法测细胞杀伤率;透射电镜观察细胞的超微结构;流式细胞仪annexin V和PI双重染色行凋亡相关检查;Balb/c裸鼠背部皮下接种 CD^+LoVo细胞,5-FC(500 mg/kg)腹腔注射或/和CI-988(10 mg/kg)灌胃处理20 d,处死裸鼠后肿瘤称重,病理切片HE染色,瘤组织透射电镜检查,结果:用 5—FC或/和 CI-988处理 6d后 CD^+LoVo细胞抑制率分别为90％和 50％,二者合用于 3 d和 6 d抑制率分别为40％和97％;MTT法检测联合应用5—FC和CI-988较单用任何一种处理对 CD^+LoVo 细胞杀伤作用更强,有统计学差异(0.53± 0.05 vs 0.49±0.02,0.38± 0.06,F=29.5536,n=5,P<0.01);电镜和流式细胞仪分别显示CD/5—FC和CI-988结合处理72 h后细胞有凋亡现象;用5-FC(500 mg/kg)腹腔注射和 CI-988(10 mg/ke)灌胃处理荷瘤裸鼠均可出现明显的抑瘤作用,抑瘤率分别为69.4％和49.5％,二者合用抑瘤较单用任一种处理更明显,有统计学意义(0.42±0.12vs 0.69±0.11,1.22±0.22,F=33.1709,n=5,P<0.05),抑瘤率达81.5％,电镜下见瘤组织内有凋亡小体.结论:联合应用胃泌素拮抗剂CI-988可以提高CD/5-FC对结肠癌细胞的杀伤作用.凋亡相关过程可能是这种协同作用的原因.

前药5-FC联合胃泌素拮抗剂CI-988对转CD基因大肠癌SW480细胞的杀伤作用

目的:探讨联合应用前药5-氟胞嘧啶(5-fluorocytosine,5-FC)和胃泌素拮抗剂CI-988对转组织特异性胞嘧啶脱氨基酶(cytosine deaminase,CD)基因的大肠癌SW480细胞生长的影响。方法:将转CD基因大肠癌SW480细胞接种至4块24孔细胞培养板中,依次分为实验组1、2、3及对照组,分别以含有前药5-FC、胃泌素拮抗剂CI-988、5-FC联合CI-988及正常培养液进行培养。每天胰酶消化法计数各组4孔,共6d,绘制细胞生长曲线并计算生长抑制率。按上述分组方法另接种培养4组细胞,于培养72h行MTT法检测490nm处吸光度A值,计算细胞杀伤率。结果:应用5-FC联合CI-988处理的转CD基因大肠癌SW480细胞在6d后生长抑制率达97;于培养72h时,实验组1、3细胞杀伤率较对照组有显著性差异(P<0.01);实验组2与对照组无显著性差异(P>0.05);实验组3较实验组1、2有显著性差异(P<0.01)。结论:CD/5-FC系统和胃泌素拮抗剂CI-988对转基因大肠癌SW480细胞具有杀伤或抑制作用,联合应用胃泌素拮抗剂可以提高CD/5-FC自杀基因系统对大肠癌细胞的杀伤效应。

胃泌素拮抗剂和活化T淋巴细胞联合应用对结肠癌细胞的杀伤作用

目的:探讨联合应用胃泌素拮抗剂和CD28/CD80单克隆抗体共刺激活化的健康人外周血T淋巴细胞(PBLs)在体外对结肠癌细胞株HT-29的杀伤作用。方法:分离与体外培养外周血PBLs,并用CD28/CD80共刺激活化PBLs;用含活化的PBLs和(或)胃泌素拮抗剂CI-988的RPMI1640培养基培养HT-29细胞。MTT法检测2者对HT-29细胞的杀伤率,并用电镜观察效应细胞杀伤结肠癌细胞株HT-29的超微结构及HT-29细胞的凋亡情况。结果:胃泌素拮抗剂与活化PBLs合用,对结肠癌细胞株HT-29的杀伤率((95.81±1.99)%)大于单用胃泌素拮抗剂((66.36±1.31)%)(P<0.05)。电镜结果显示,效应细胞作用12h肿瘤细胞就发生部分坏死,部分肿瘤细胞可见凋亡。结论:联合应用活化的PBLs和胃泌素拮抗剂CI-988可以提高对结肠癌细胞株HT-29杀伤作用。活化的淋巴细胞杀伤结肠癌细胞可能是通过诱导肿瘤细胞坏死及凋亡2条途径来实现。

CD3和CD28双刺激活化的健康人外周血T淋巴细胞与胃泌素拮抗剂合用对结肠癌细胞的杀伤作用

目的探讨联合应用胃泌素拮抗剂和CD3/CD28单克隆抗体共刺激活化健康人外周血T淋巴细胞(PBLs)在体外对结肠癌细胞株HT-29的影响及杀伤途径。为结直肠癌的过继免疫治疗提供参考。方法外周血T淋巴细胞(PBLs)的分离与体外培养;CD3/CD28共刺激活化外周血T淋巴细胞(PBLs);MTT法检测活化细胞的体外淋巴细胞毒作用,并用流式细胞仪检测结肠癌细胞的凋亡情况。结果用CD28共刺激细胞和CI—988分别处理6d后对结肠癌细胞株HT-29抑制率为66%和47.5%,二者合用后3d和6d抑制率分别为41%和90.5%;较单用任何一种处理对结肠癌细胞株HT-29杀伤作用更强(P<0.01)。流式细胞仪FCM图像可见实验组细胞群坏死比例为30.1%,凋亡细胞占19.2%,而对照组仅有坏死细胞0.22%,凋亡细胞1.6%。结论联合应用胃泌素拮抗剂CI-988可以提高单抗协同诱导的效应细胞对结肠癌细胞株HT-29总体抑制,而坏死细胞进一步增多说明效应细胞是通过诱导肿瘤细胞坏死及细胞凋亡两条途径来实现抑制作用。

胃泌素在结肠癌患者中的表达及其受体拮抗剂对人结肠癌细胞株的抑制作用及其对P38信号转导通路的影响

背景结肠癌(colon cancer,CC)是我国常见消化系统恶性肿瘤,早期缺乏特异性症状诊断率较低,导致患者丧失根治性机会,病死率较高,极大危害患者生命健康.胃泌素主要是由胃肠道G细胞分泌一种激素,与胃泌素受体结合后可刺激胃酸分泌,促进胃肠道黏膜生长.丝裂原活化蛋白激酶是一组能被胃泌素等激素激活的丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶,负责细胞表面与细胞核内部间信号传递.目的分析胃泌素在CC患者中的表达,并探讨其受体拮抗剂对人CC细胞株的抑制作用及对P38信号转导通路的影响.方法将2016-01/2018-10我院病理科30例CC组织标本根据世界卫生组织恶性肿瘤分化程度标准分为低分化标本、中分化标本、高分化标本,采用免疫组化技术检测观察胃泌素在CC组织中表达情况,体外培养人CC细胞株SW480,将细胞分为对照组(不进行任何药物处理)、胃泌素组(分别加入6.25-200.00 mg/L胃泌素进行处理)、丙谷胺组(分别加入8.00-256.00 mg/L丙谷胺进行处理)、胃泌素联合丙谷胺组(加入12.5 mg/L胃泌素与8.00-256.00 mg/L丙谷胺进行处理),统计SW480中胃泌素受体/胆囊收缩素-B受体表达情况,比较各组CC细胞株SW480活力、细胞增殖指数、P38信号转导通路表达情况P38蛋白、磷酸化-P38蛋白、B淋巴细胞瘤-2(B lymphocyte tumor-2,SBcl-2)、细胞凋亡促进基因(BAX).结果CC组织分化程度越高,胃泌素表达阳性率越高;胃泌素组6.25-200.00 mg/L范围内SW480 OD值均高于对照组(P<0.05);胃泌素组12.50 mg/L时SW480 OD值最高(P<0.05);胃泌素组25.00-200.00 mg/L范围内SW480 OD值比较差异无统计学意义(P>0.05);丙谷胺组8.00-256.00 mg/L范围内SW480 OD值比较差异无统计学意义(P>0.05);胃泌素组联合丙谷胺组在12.50 mg/L胃泌素联合16.00 mg/L丙谷胺时,SW480OD值最低,低于对照组(P<0.05),之后随着丙谷胺浓度增加,SW480 OD值比较差异无统计学意义(P>0.05);胃泌素组(12.50 mg/L)细胞增殖指数高于丙谷胺组(16.00 mg/L)、胃泌素组联合丙谷胺组(12.5mg/L+16.00 mg/L)(P<0.05);胃泌素组(12.50 mg/L)P38蛋白、磷酸化-P38蛋白、BAX蛋白低于对照组、丙谷胺组(16.00 mg/L)、胃泌素组联合丙谷胺组(12.5mg/L+16.00 mg/L),Bcl-2蛋白表达高于对照组、丙谷胺组(16.00 mg/L)、胃泌素组联合丙谷胺组(12.5 mg/L+16.00 mg/L)(P<0.05).结论胃泌素可抑制人CC细胞株SW480的凋亡,且在CC组织中的表达与肿瘤分化程度有关,分化程度越高,其表达量越高,胃泌素受体拮抗剂在一定浓度范围内可拮抗胃泌素促增殖效应,其机制与上调P38、磷酸化-P38、BAX表达及下调Bcl-2表达有关.

胃泌素受体拮抗剂对大肠癌肝转移的疗效观察

目的 观察胃泌素拮抗剂对大肠癌肝转移患者的治疗效果。方法 对照组 3 8例常规化疗 ;治疗组 46例除常规化疗外同时服用胃泌素受体拮抗剂丙谷胺 12 0 0mg/d。两组患者每月定期随访 1次。 结果 对照组患者 1年内肝脏转移癌最大径增加 8.1± 2 .2cm ,死亡率为 5 5 .3 % ( 2 1/3 8) ;治疗组患者肝脏转移癌 1年内最大径增加 3 .5± 1.2cm ,死亡率为 2 1.7% ( 10 /46) ,均明显低于对照组 (P <0 .0 1)。结论 用胃泌素受体拮抗剂对大肠癌肝转移患者进行治疗 ,可以延缓肿瘤生长 ,延长患者生存时间 ,降低患者死亡率。

胃泌素释放肽受体拮抗剂RC-3095对大鼠肺组织纤维化的干预作用

目的研究胃泌素释放肽(GRP)受体(R)拮抗剂RC-3095对大鼠肺组织纤维化的干预作用。方法构建肺组织纤维化大鼠模型,将大鼠随机分为正常对照组(NC组)、模型组(MO组)、RC-3095处理组(RC组,20μg/d),检测肺湿重、肺干重、肺系数,HE染色观察肺组织病理变化,酶联免疫吸附法检测肺组织中Ⅰ型和Ⅲ型胶原含量,Western印迹检测GRP、GRPR和转化生长因子(TGF)β1蛋白表达情况,免疫共沉淀检测GRP和GRPR相互作用情况。结果成功构建肺组织纤维化大鼠模型,MO组肺组织结构被破坏,肺泡间隔增厚,存在大量炎性细胞浸润;RC组肺组织结构较为完整,纤维化程度降低。同时MO组肺组织湿重、干重和肺系数均高于NC组,RC组肺组织湿重、干重和肺系数均高于NC组但是低于MO组(P<0.05)。MO组中Ⅰ型胶原含量高于NC组,Ⅲ型胶原含量低于NC组。RC组中Ⅰ型胶原含量低于MO组,Ⅲ型胶原含量高于MO组(P<0.05)。RC-3095处理可有效抑制GRPR和TGFβ1蛋白水平,同时抑制GRPR和GPR的结合。结论 RC-3095可以通过调节GRP和GRPR的结合能力及TGFβ1的蛋白水平有效地抑制肺部纤维化。

胃泌素研究进展:从受体到药物

胃泌素是一种非常重要、具有激素(分布于胃肠系统)和神经肽(分布于神经系统)双重功能的肽类。胃肠道胃泌素已不仅局限于它的促泌酸作用,调节细胞生长及营养作用被认为是胃泌素最重要的功能。胃泌素受体拮抗剂在胃肠道肿瘤、消化性溃疡、高胃泌素血症等的应用价值受到高度重视。

胃泌素在胃癌中的作用

胃泌素在胃癌中的作用受到越来越多的重视。甘氨酸延伸型胃泌素和酰胺化胃泌素体外促进胃癌细胞生长;酰胺化胃泌素对正常胃粘膜细胞,特别是壁细胞分化起调节作用;酰胺化胃泌素协同其他致癌因子加速胃癌产生;胃泌素和猫胃螺杆菌引起小鼠胃癌。越来越多的证据表明胃泌素与胃癌的发生发展关系密切,抑制异常升高胃泌素的作用将成为防治胃癌的一种有效手段。

胃泌素和丙谷胺对人胃癌细胞增殖的调控

为探讨胃泌素及其受体拮抗剂丙谷胺(PGL)对体外培养的人胃癌细胞株HGC803生长的影响,我们采用MTT比色分析法检测了它们对细胞增殖的调控作用。并用EIA法测定了胃部细胞的胃泌素自分泌。将对数生长期HGC803细胞接种于96孔板。

测定丙谷胺片溶出度的新方法

丙谷胺片为胃泌素受体拮抗剂,在溶出度检查一项时,<中华人民共和国药典>2000年版第2部采用对照品比较法,由于对照品价格比较昂贵且用前须105℃干燥,除去水分,操作步骤比较繁琐.根据国家药典委员会的安排,我们对<中华人民共和国药典>2000年版第2部收载的丙谷胺片质量标准检查项中溶出度进行了修改,用吸收系数法测定丙谷胺片溶出度,该方法操作简便、快捷,测定结果准确、可靠,现报告如下.

消化性溃疡的药物治疗

消化性溃疡是指胃肠道壁在病理情况下,由于消化液的自身消化,而形成深达粘膜下层以上的慢性溃疡。其发生是由于致溃疡的攻击因子与防御因子失去平衡。攻击因子包括胃酸、胃蛋白酶、动力学异常、胆酸、溶血卵脂酶、某些药物、酒精、烟碱以及幽门螺旋杆菌等;防御因子包括粘膜屏障、粘膜血流、前列腺素、碳酸氢盐分泌以及上皮再生等;中枢神经和自主神经对调节平衡起重要作用,平衡的调节则与神经递质有关。

RC-3095对大鼠肺组织纤维化的防治作用及其机制研究

目的探讨胃泌素释放肽受体拮抗剂(RC-3095)对大鼠肺组织纤维化的治疗作用及其作用机制。方法选取SPF级健康成年雄性SD大鼠48只,随机选出12只作为对照组(等量生理盐水),另外36只建立肺组织纤维化模型大鼠,选取其中建模成功的24只采用随机数字表法分为模型组(等量生理盐水)和实验组(RC-3095处理,20μg/d各12只);4周后处死大鼠,采用HE染色观察各组大鼠肺组织病理变化、采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、血小板衍生生长因子(PDGF)以及肺组织中胶原蛋白的含量。结果模型组、实验组大鼠的血清TNF-α、PDGF水平均显著高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);实验组大鼠的血清TNF-α、PDGF水平均显著低于模型组,差异具有统计学意义(P<0.05);模型组、实验组大鼠肺组织的Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白均显著高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);实验组大鼠肺组织的Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白水平均显著低于模型组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 RC-3095可以减轻肺组织纤维化大鼠模型的炎症反应水平,降低肺组织中胶原蛋白含量,从而达到治疗肺纤维化的目的。

胃疾病

0028660 小鼠模型上γ干扰素在幽门弯曲杆菌诱导的胃炎症性应答中的作用/Sawai N//Infect Immun.-1999,67(1).-279～285 医科情0028661 一种新型 CCK-B/胃泌素受体拮抗剂 S-0509对大鼠的抗分泌和溃疡愈合的效应/Amagase K//Dig Dis Sci.-1999,44(5).-879～888 医科情0028662 大鼠胃溃疡愈合时细胞因子诱导的中性白细胞趋化因子:吲哚美辛延迟了溃疡愈合时】40-kDa 趋化因子的表达/Yamada H//Dig Dis Sci.-1999,44(5).-

莫轻视，抑酸治疗八大误区埋隐患

抑制胃酸的药物目前有H2受体拮抗剂、M受体阻断剂、胃泌素受体拮抗剂、质子泵抑制剂（PPI）4类。强力抑酸药尤其是质子泵抑制剂问世，且不断换代升级，

丙谷胺与奥曲肽对人大肠癌LoVo细胞增殖和细胞周期的影响

胃泌素（GAS）对结直肠癌细胞的增殖具有促进作用，而生长抑素（SS）具有广泛的抑制作用，可抑制大肠癌的生长。本研究旨在观察研究胃泌素受体拮抗剂（丙谷胺）及人工合成的八肽生长抑素（奥曲肽）对人大肠癌LoVo细胞增殖和细胞周期的影响，探讨丙谷胺与生长抑素对大肠癌细胞增殖的具体调控机制。