胃癌间质干细胞敲减YAP抑制胃癌的发展

目的:探讨胃癌间质干细胞(gastric cancer-derived mesenchymal stem cell,GC-MSC)中YAP敲减对血管形成,胃癌细胞增殖和迁移的影响。方法:采用慢病毒感染GC-MSC进行敲减YAP,定量PCR、蛋白质印迹验证YAP敲减效果。定量PCR检测YAP敲减后GC-MSC血管内皮生长因子(VEGF)、血小板衍生生长因子(PDGF)、IL-8mRNA表达水平。收集GC-MSC YAP敲减组和对照组上清液,通过内皮细胞血管形成实验检测YAP敲减后GCMSC促血管形成能力的变化。平板克隆实验及迁移实验检测YAP敲减的GC-MSC上清液对SGC-7901细胞增殖和迁移的影响。结果:GC-MSC中YAP敲减后YAP蛋白和基因表达水平相对于对照组显著下调(P<0.01)。YAP敲减后GC-MSC中VEGF、PDGF、IL-8 mRNA表达水平显著下调(P<0.01)。YAP敲减后的GC-MSC促血管形成能力显著下降。YAP敲减的GC-MSC抑制胃癌细胞SGC-7901增殖和迁移。结论:GC-MSC中YAP分子可能通过参与胃癌的血管形成、胃癌细胞的增殖和迁移进而影响胃癌的发生发展。

胃癌间质反应特点及其意义

肿瘤间质反应在肿瘤中的分布及其生物学特性迄今仍有较大分歧。本文试图探讨间质反应与胃癌淋巴结转移及预后之间的关系。

胃癌间质干细胞活化Wnt/β-catenin信号通路促进胃癌细胞增殖及迁移作用的探讨

目的探讨胃癌间质干细胞(gastric-cancer-derived mesenchymal stem cells,GC-MSCs)活化Wnt/β-catenin信号通路促进胃癌细胞增殖、迁移的作用。方法采用贴壁培养法从胃癌组织中分离GC-MSCs,成骨、成脂培养基诱导GC-MSCs分化。收集GC-MSC上清,胃癌细胞系HGC-27分别经L-DMEM培养液(Control组)、GC-MSC上清(GC-MSC组)、GC-MSC上清及20μmol/L ICG001(GC-MSC+ICG001组)处理24 h,克隆形成试验和Transwell迁移试验分别检测细胞增殖、迁移能力,免疫荧光染色或western blot检测Wnt/β-catenin信号相关蛋白(β-catenin、CD44、CyclinD3)的表达水平。结果 GC-MSC上清处理组HGC-27细胞增殖形成的克隆数[(203.700±8.762)个]显著高于Control组[(33.670±1.856)个](t=18.98,P<0.01),且其迁移细胞数[(349.700±7.881)个]较Control组[(145.000±3.712)个]亦显著增多(t=23.46,P<0.01)。GC-MSC上清可促进HGC-27细胞β-catenin入核,诱导Wnt/β-catenin信号下游蛋白CD44、CyclinD3的表达。Wnt/β-catenin信号抑制剂ICG001可下调上述分子的表达,逆转GC-MSC上清对HGC-27细胞的促增殖、促迁移作用。与GC-MSC组[(203.000±3.606)个]相比,GC-MSC+ICG001组的克隆细胞数[(70.667±2.603)个]显著减少(q=39.24,P<0.01),且迁移细胞数[(166.000±3.215)个]较GC-MSC组[(352.700±4.096)个]显著降低(q=47.73,P<0.01)。结论 GC-MSCs活化Wnt/β-catenin信号并促进胃癌细胞增殖及迁移。

EB病毒相关性伴淋巴样间质胃癌20例临床病理及预后分析

目的 探讨EB病毒(EBV)相关性伴淋巴样间质胃癌(EBVaGCLS)的临床病理特征及预后情况,为临床诊治提供参考。方法 对20例EBVaGCLS患者的临床资料进行回顾性分析,包括病理学特征、免疫组化检查结果、原位杂交检测结果等。结果 EBVaGCLS占同期收治胃癌患者的2.0%(20/983)。20例中,男17例(85.0%)、女3例(15.0%);发病年龄43~75岁,中位年龄60岁;肿瘤发生于贲门9例(45.0%),胃体8例(40.0%),胃窦2例(10.0%),残胃1例(5.0%);早期胃癌4例(20.0%),进展期胃癌16例(80.0%);伴淋巴结转移13例(65.0%),无淋巴结转移7例(35.0%)。肿瘤多呈溃疡型,肿瘤最大径1.7~10.0 cm。肿瘤显示推挤式的生长边界,肿瘤细胞呈条索状、片状生长,细胞界限不清,呈合胞体样,胞质丰富,细胞核空泡样,可见小核仁,间质伴多量淋巴细胞浸润,可见淋巴滤泡形成,局部可见肿瘤腺管融合,呈“花边样”结构。20例肿瘤细胞EBV编码RNA原位杂交检测均显示核阳性;HER-2染色0~+17例、++3例,3例++患者肿瘤HER2双色银染原位杂交检测结果均无扩增;错配修复蛋白MLH1、PMS2、MSH2、MSH6均阳性;p53均为野生型表达。20例均行胃癌根治术及淋巴结清扫,随访结束时13例存活、5例死亡、2例失访。结论 EBVaGCLS是EBV感染引起的特殊类型的胃癌,中老年男性多发,肿瘤多位于近端胃,间质伴多量淋巴细胞浸润,肿瘤淋巴结转移率低,多数患者预后较好。

伴有淋巴样间质的胃癌患者临床病理特征分析

目的 探讨伴有淋巴样间质的胃癌(GCLS)患者的临床病理特征、免疫表型、鉴别诊断及预后。方法 收集2016—2022年郑州大学第一附属医院收治的25例GCLS患者的临床及病理资料,行免疫组织化学染色及EB病毒编码的小RNA(EBER)原位杂交,并复习相关文献。结果 25例GCLS患者中男23例,女2例,年龄(59.20±12.41)岁。21例患者肿瘤位于近端胃,4例位于远端胃。显微镜下肿瘤细胞呈弥漫性、小巢状、条索状分布,局部可见发育不良的腺腔形成,部分病例可见腺管样结构,间质见大量淋巴细胞浸润。免疫组化结果显示,25例病例中,肿瘤细胞AE1/AE3均呈阳性表达(25/25,100%);间质中淋巴细胞CD3、CD20均呈阳性表达(25/25,100%),且CD3阳性细胞多于CD20阳性细胞;错配修复蛋白MSH2、MSH6、PMS2、MLH1肿瘤细胞表达均无缺失(25/25,100%)。25例病例中人表皮生长因子受体-2(HER2)表达均为阴性,其中14例HER2表达评分为0(14/25,56.00%),11例HER2表达评分为(1+)(11/25,44.00%)。所有病例细胞程序性死亡配体1(PD-L1)均呈阳性表达(25/25,100%),综合阳性评分(CPS)为50~70;其中18例以肿瘤细胞阳性表达为主(18/25,72.00%),7例以淋巴细胞、巨噬细胞阳性表达为主(7/25,28.00%)。原位杂交结果显示,25例病例中,肿瘤细胞EBER均呈阳性表达(25/25,100%)。随访3~72个月,24例无瘤存活,1例失访。结论 GCLS是一种少见的胃癌类型,与EB病毒感染和错配修复蛋白缺陷密切相关,其肿瘤微环境具有淋巴细胞丰富、PD-L1高表达等特点,PD-1/PD-L1抑制剂或许是未来治疗GCLS的一个有效手段。

EBV相关性伴淋巴样间质胃癌4例临床病理分析

目的探讨EBV相关性伴淋巴样间质胃癌(Epstein-Barr virus-associated gastric carcinoma with lymphoid stroma,EBVaGCLS)的临床病理学特征、免疫表型、分子遗传学特征及预后。方法收集4例EBVaGCLS的临床病理学资料,采用免疫组化EnVision两步法及原位杂交法标记肿瘤细胞,分析其临床、病理形态学特征,及与预后的关系,并复习相关文献。结果4例均为男性,年龄60~66岁,平均62岁。肿瘤位于近端胃,最大径4.2~8.7 cm,平均6.8 cm。癌组织浸润性生长,一般呈梁状、条索状、片状或不规则腺管状。肿瘤细胞较大,合体样多角形。间质伴大量成熟淋巴细胞浸润,可形成淋巴滤泡。免疫表型:肿瘤细胞CKpan、CK-L、CK7、错配修复蛋白(MLH1、PMS2、MSH2、MSH6)均阳性,间质淋巴细胞CD3、CD20均阳性,AFP、Heppar-1均阴性,Ki-67增殖指数为20%~80%。4例EBER原位杂交均呈阳性。4例患者平均随访9个月,其中1例死亡。结论EBVaGCLS多发生于中老年人,临床症状相较于分化型胃癌无特殊,诊断和鉴别诊断依赖于其特征性形态学表现并辅以免疫组化、原位杂交检测。EBVaGCLS预后好于EBV阴性胃癌,治疗以手术完整切除为主。

南蛇藤提取物协同miR-144靶向mTOR抑制人胃癌上皮间质转化的研究

目的:究南蛇藤提取物对过表达miR-144的人胃癌AGS和HGC-27细胞上皮间质转化(EMT)的影响。方法:利用改良型慢病毒小RNA表达载体,构建两株过表达miR-144的人胃癌AGS和HGC-27细胞。MTT法分析不同浓度(20、40、80、160、320μg/mL)南蛇藤提取物对人胃癌AGS/miR-144^(+)和HGC-27/miR-144^(+)细胞增殖的影响。qRT-PCR法定量检测胃癌细胞高表达miR-144时哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)表达。对数生长期细胞经200μg/mL南蛇藤提取物处理24 h后,Transwell迁移实验考察南蛇藤提取物对人胃癌AGS/miR-144^(+)或HGC-27/miR-144^(+)细胞迁移能力的影响。Western blot检测南蛇藤提取物对EMT主要相关蛋白(E-cadherin、N-cadherin、Vimentin)表达和mTOR信号转导通路的影响。结果:南蛇藤提取物显著抑制人胃癌AGS/miR-144^(+)和HGC-27/miR-144^(+)细胞的增殖,其作用呈浓度依赖性。南蛇藤提取物处理24 h后,AGS/miR-144^(+)和HGC-27/miR-144^(+)细胞的迁移能力显著受到抑制,细胞中E-cadherin蛋白表达显著升高,同时N-cadherin、Vimentin、mTOR、PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt、4EBP1、p-4EBP1蛋白表达均显著减低(P<0.05~P<0.001)。结论:南蛇藤提取物协同miR-144靶向mTOR抑制胃癌细胞的上皮间质转化进程,其分子机制是通过PI3K/Akt/mTOR信号转导通路发挥作用。

化疗诱导胃癌上皮-间质转化的CAC1基因调控机制

目的:研究化疗诱导胃癌上皮-间质转化(EMT)的CAC1基因的相关调控机制,了解CAC1基因在胃癌细胞和组织中的表达情况。方法:选取来源于湛江市第一中医医院及广东医学院附属医院2016年8月至2017年2月选取的42例胃癌手术患者的癌组织、相关癌旁组织、正常组织为主要研究标本,对所有胃癌患者的标本进行测定,对测定结果进行回顾性分析。结果:胃癌细胞系和胃黏膜细胞系均检出CAC1表达,胃癌细胞系的CAC1表达水平明显高于胃黏膜细胞系,差异有统计学意义(P<0.05);CAC1在胃癌组织中的表达水平高于周围正常组织,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:CAC1基因表达可对化疗诱导胃癌EMT产生影响,化疗诱导EMT过程中CAC1具有基础的调控性作用。

胃癌中肿瘤相关纤维母细胞蛋白和VEGF的表达及意义

目的观察胃癌中肿瘤相关纤维母细胞蛋白SMA及VEGF的表达、并探讨其与胃癌侵袭性的关系。方法应用免疫组织化学S—P方法检测57例胃癌和10例正常胃黏膜组织中纤维母细胞平滑肌肌动蛋白（SMA）、血管内皮生长因子（VEGF）的表达，并探讨其在胃癌侵袭转移的意义。结果胃癌组织纤维母细胞中SMA阳性表达率为94．74％，高于正常胃黏膜组（P〈0．05），VEGF阳性表达率为89．47％，高于正常胃黏膜组（P〈0．05），且随着浸润深度的增加、临床分期的进展和淋巴结转移的出现，VEGF和纤维母细胞中SMA的表达增强。结论VEGF、SMA在胃癌组织中存在高水平表达，二者在胃癌的浸润转移中起重要作用。