嗜酸乳杆菌在模拟胃肠环境中抗性的研究

采用MRS培养基,模拟胃肠环境,即低pH值（1.5～4.5）。高胆汁盐（0.1％～0.4％）对嗜酸乳杆菌抗性进行了研究。同时对肠道中致病性大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的拮抗特性以及服用抗生素后嗜酸乳杆菌的耐药性进行了研究。结果表明,嗜酸乳杆菌在pH2.5～4.5时具有较强的生存能力,6h活菌数仍达 107cfu/mL以上,pH1.5条件下仍有部分存活。在0.1％～0.3％胆汁盐条件下4h活菌数仍达106cfu/mL以上,且能在0.4％胆汁盐中存活。同时,对致病性大肠杆菌和金黄色葡萄球菌具有明显的抑菌作用,且对青霉素、罗红霉素具有中敏和耐药特性。

双歧杆菌模拟胃肠环境中抗性的研究

采用PYG培养基 ,模拟胃肠环境 ,即低 pH值 (1 5～ 4 5 ) ,高胆汁酸盐 (0 1%～ 0 4 % )对青春双歧杆菌进行抗性研究。同时对肠道致病性大肠埃希菌、福氏志贺菌和金黄色葡萄球菌拮抗性以及对氨苄青霉素、庆大霉素、卡那霉素和氯霉素的耐药性进行研究。结果表明 ,青春双歧杆菌在 pH4 5时有较强的生存能力 ,4h活菌数可达 10 7CFU/ml以上。且能在含 0 1%～ 0 4 %的胆汁盐中存活 ,在 0 1%～ 0 2 %时 4h活菌总数可达 10 6CFU/ml以上。同时对致病性大肠埃希菌、福氏志贺菌和金黄色葡萄球菌具有明显的抑菌作用 ,且对庆大霉素中度敏感 ,对氨苄青霉素、卡那霉素和氯霉素有耐受性。

蓝莓花色苷体外及模拟人体胃肠环境的抗氧化活性研究

以野生蓝莓为原料提取花色苷,对其进行纯化、121℃高温加热6 min和模拟人体胃肠环境处理,测定处理后的样液的抗氧化活性,对结果进行综合分析比较,得出不同条件对花色苷抗氧化活性的影响。结果表明:同一处理环境下,水溶液中的花色苷的抗氧化活性随纯度的增大而明显增强,二次纯化物的活性是粗提物的4倍左右,但在模拟胃肠环境中活性受纯度的变化影响较小;在同一纯度下,花色苷经过模拟胃肠和高温加热处理后抗氧化活性大大的降低,水溶液中的花色苷活性是模拟胃肠环境中的2倍以上;花色苷经121℃高温加热后活性大大降低,同一条件下活性损失了一半左右,但这种损失在模拟人体胃肠环境中较小,粗提物水溶液中的花色苷的活性是121℃加热后的花色苷的2.7倍。

HRP在模拟人体胃肠环境中的稳定性研究

以中国药典中的人工胃液和人工肠液模拟人体胃肠环境 ,对过辣根氧化物酶的稳定性进行了一系列单独及综合研究。结果表明 ,辣根过氧化物酶在人工胃液中受到很强的破坏 ,2 0min后 ,其活性仅存 1.1%,主要由胃酸破坏 ;而在人工肠液中则较为稳定 ,1.5h后 ,其活性仍存 89%。同时还发现 ,天然结构的辣根过氧化物酶对胰蛋白酶具有较强的耐受力。

单唾液酸四己糖神经节苷脂在模拟人体胃肠环境中稳定性研究

目的考察单唾液酸四己糖神经节苷脂(GM1)在模拟人工胃肠环境中的稳定性。方法采用HPLC分别测定GM1在稀盐酸溶液、人工胃液以及在pH=6.8的磷酸盐缓冲液、人工肠液中8 h内的稳定性。结果 GM1(浓度100 mg·L^(-1)),在稀盐酸溶液及pH=6.8的磷酸盐缓冲液中连续孵育8 h测定的百分含量分别为(98.70±9.32)%、(97.65±4.76)%;在人工胃液及人工肠液中其连续孵育8 h测定的百分含量分别为(97.42±6.18)%、(100.91±5.50)%。结论 GM1(浓度100 mg·L^(-1))在模拟人工胃肠环境中以37℃恒温孵育8 h后稳定性良好。

巴戟甲素在模拟人体胃肠环境中稳定性试验

目的测定巴戟甲素在模拟人体胃肠环境中的稳定性,为口服剂型的选择提供依据。方法采用HPLC-ELSD法,分别测定巴戟甲素在稀盐酸溶液和人工胃液中2 h以及在pH 6.8磷酸盐缓冲液及人工肠液中12 h的稳定性。结果在稀盐酸溶液和人工胃液中温育30 min后,巴戟甲素在两液中只剩下加入量的67.59%和64.85%,120 min后在稀盐酸溶液和人工胃液中分别为加入量的43.31%和50.41%;加入pH 6.8磷酸盐缓冲液及人工肠液中12 h后,巴戟甲素分别为加入量的90.43%和90.65%。结论巴戟甲素具有在稀盐酸溶液和人工胃液中均不稳定、在pH 6.8磷酸盐缓冲液和人工肠液中稳定性较好的特点,在设计口服给药剂型时应予以重视。

4株乳酸菌对模拟胃肠环境的耐受性及生长特性研究

对4株来源于自然发酵肉制品中的乳酸菌进行耐酸耐胆盐性能的测定,选取在p H3.0和含0.3 g/100 m L胆盐的MRS培养基中存活率均超过50%的2株菌(M12、M23),进一步研究其在模拟胃肠液中的耐受性及MRS培养基中的生长特性。结果表明,这2株乳酸菌对人工模拟胃肠道环境有较好的耐受性,经过人工模拟胃液处理2 h后,存活率均>50%,经人工模拟肠液处理10 h后仍可存活;这2株菌具有较强的增殖及产酸能力,24 h内均已进入稳定生长期,随着菌体数目的增加,培养基p H值快速降低,在肉制品的发酵温度范围内均能较好地生长。因此,这2株菌可作为潜在的益生菌菌株应用于肉制品的发酵。

酱油渣中乳酸乳球菌分离鉴定及对模拟胃肠环境的耐受性

利用形态学观察、生理生化试验、16SrRNA基因序列分析方法,从酱油渣中分离鉴定乳酸乳球菌,并研究其对模拟胃肠环境的耐受能力。初步从酱油渣中分离得到4株乳酸乳球菌,3株鉴定为Lactococcus lactis subsp.hordniae,称之为HT127、HT223和HT227;1株鉴定为Lactococcus lactis subsp.lactis,称为HT122。生长曲线测定结果发现,4株菌生长情况基本相似,对数生长期为2~12h。模拟胃肠环境耐受试验结果表明:耐受胃液3h后,菌株HT223、HT127、HT227、HT122的菌存活率达(94.85±0.05)%,(81.67±0.25)%,(77.99±0.58)%,(58.57±0.57)%;在模拟肠液中继续培养8h,菌株HT122、HT127、HT223、HT227的菌存活率为(77.78±0.68)%,(67.42±0.72)%,(34.25±0.08)%,(22.28±0.18)%。说明菌株HT127对人工模拟胃肠液显示出较好的耐受能力。

模拟胃肠环境对3株光合细菌存活率影响的实验研究

目的模拟胃肠环境对3株光合细菌(Photosynthetic bacteria,PSB)存活率影响进行体外实验研究。方法测定3株PSB分别在pH2.0、3.0和4.0的模拟胃液及含有或不含有0.45%牛胆盐(pH8.0)的模拟小肠液中不同时间的存活率。结果pH2.0时模拟胃液处理不同时间对3株PSB存活率有显著影响(P<0.01);pH3.0时,模拟胃液处理60、90和180 min对菌株rub存活率有显著影响(P<0.01),处理90、180 min对菌株Ga存活率有显著影响(P<0.05),处理180 min对菌株2C存活率无显著影响(P>0.05);pH4.0时模拟胃液处理180 min对3株PSB存活率无显著影响(P>0.05)。模拟小肠液处理240 min对3株PSB菌株活菌数无显著影响(P>0.05)。结论模拟胃液对3株PSB存活率影响具有菌株特异性和pH依赖性,而模拟小肠液对3株PSB存活率无显著影响。

酵母源金属硫蛋白在模拟胃肠环境中对铅离子的螯合作用

目的探讨酵母源金属硫蛋白(metallothionein,MT)在模拟胃肠环境中对铅离子的螯合作用,为酵母源MT促排铅功能的深入研究及相关促排铅产品的开发提供一定的理论参考与数据支持。方法以动物源金属硫蛋白(ZnMT)为对照,采用石墨炉原子吸收光谱法测定2种构型酵母源金属硫蛋白(MT-Ⅰ、MT-Ⅱ)在模拟胃肠环境中对铅离子的螯合作用,计算MT对铅离子螯合率,并分析螯合体系重金属离子的迁移与转化情况及酵母源MT在模拟胃肠环境中的稳定性。结果 MT在模拟胃肠环境中表现出显著的螯合铅离子能力,并呈现量效关系。在模拟胃环境中,MT-Ⅰ与MT-Ⅱ对铅离子的螯合率显著高于Zn-MT(P<0.05);胃蛋白酶对MT-Ⅰ和Zn-MT螯合铅离子效果具有一定的减弱作用(P<0.05),而对MT-Ⅱ影响不明显(P>0.05)。在模拟肠环境中,3种MT对铅离子的螯合效果差异有统计学意义(P<0.05),其螯合能力为Zn-MT>MT-Ⅰ>MT-Ⅱ,且显著高于同浓度MT在模拟胃环境中对铅离子的螯合率(P<0.05);胰蛋白酶对MT螯合铅离子效果影响较小(P>0.05)。MT在螯合铅离子过程中,可同时释放自身结合重金属元素,且自身重金属离子释放率显著高于铅离子螯合率(P<0.05);2种构型的酵母源MT在模拟肠环境中降解程度较弱,稳定性较好。结论 MT-Ⅰ与MT-Ⅱ在模拟胃肠环境中均能显著地螯合铅离子,并在12 h内能较好地抵抗模拟胃肠环境的消化,保持其螯合铅离子能力。

藏灵菇酵母菌M3耐胃肠道逆环境特性及降胆固醇的实验研究

利用从藏灵菇中筛选的马克斯克鲁维酵母M3菌株探讨胃肠道耐受性及体外降胆固醇功效。分别在pH1．5～4．5、胆盐浓度0.3％～3．0％、NaCl浓度3．0%-6．0％的模拟胃肠道环境下，采用活菌计数法检测M3菌株的耐胃肠道逆环境特性，以邻苯二甲醛法检测其降胆固醇效果。结果表明：在pH1．5-4．5作用4h活菌数可达10^6cfu／ml，0．3％～3．0％胆盐及3．0％～6．0％NaCl作用8h活菌数可达10^5-10^6cfu／ml，在pH1．5～3．0（4h）及胆盐浓度0．3％～3．0％的模拟人体胃肠道环境下降胆固醇率均在60％以上。显示M3菌株具有较强的耐胃肠道逆环境特性及良好的降胆固醇能力，为开发研制降胆固醇功能食品及微生态制剂提供了试验基础。

藏灵菇酵母菌K1耐胃肠道逆环境特性及降胆固醇的实验研究

利用从藏灵菇中筛选的马克斯克鲁维酵母K1菌株探讨胃肠道耐受性及体外降胆固醇功效。分别在pH 1.5~4.5、胆盐浓度0.3%~3.0%、NaCl浓度3.0%~6.0%的模拟胃肠道环境下,采用活菌计数法检测K1菌株的耐胃肠道逆环境特性,以邻本二甲醛法检测其降胆固醇效果。结果表明,在pH2.5~4.5作用4h活菌数超过106cfu/mL,0.3%~3.0%胆盐及3.0%~6.0%NaCl作用8h活菌数为104cfu/mL^106cfu/mL,在pH1.5~3.0(4h)及胆盐浓度0.3%~3.0%的模拟人体胃肠道环境下降胆固醇率40.0%~52.8%。显示K1菌株具有较强的耐胃肠道逆环境特性及良好的降胆固醇能力。

藏灵菇耐胃肠道环境酵母菌和乳酸菌的筛选

以藏灵菇发酵乳液为原料,分别利用改良的马铃薯乳糖培养基和改良MRS培养基分离出8株酵母菌和10株乳酸菌。以pH值为3.0,质量分数为0.3%牛胆盐的培养液模拟胃肠道环境作为初筛条件,以不同pH值和牛胆盐质量分数作为耐酸和耐胆盐的复筛条件,筛选得到耐受性好活力高的两株酵母菌C3和C8,两株乳酸菌M1和M3。

多重耐药与药物敏感大肠杆菌菌株在体外模拟胃肠道环境的生存力研究

目的大肠杆菌是人和温血动物肠道重要的兼性厌氧寄居菌群,也是水源和食品粪便污染指示菌。研究多重耐药型大肠杆菌和药物敏感型大肠杆菌菌株在体外模拟胃肠道环境下的生存能力,本文数据为控制有害大肠杆菌提供理论依据。方法从奎屯市超市采集30份零售食品,分离出8份大肠杆菌阳性样品,污染率为27%。利用纸片扩散法对分离的8株大肠杆菌进行耐药实验,从8株菌中选出1株具有多重耐药的E27号菌和1株药物敏感型菌株E25号菌进行人工胃液和人工肠液耐受试验。结果所测定的8株大肠杆菌对大多数耐药纸片敏感,大肠杆菌对氨苄西林和四环素耐药率较高。8株菌中有4株耐药菌和4株敏感菌。结论所选出的两株菌,E25在人工胃肠液中的耐受力较好,菌株E27在人工胃肠液中耐受力较差,敏感菌株E25要比多重耐药菌株E27菌数减少的缓慢。

宿主和微生物相互作用形成胃肠道环境

肠道微生物群是一个相互依赖的微生物网,宿主和微生物相互作用形成稳定的胃肠道环境。同时,肠道菌群的组成和生物多样性通过对宿主胃肠道环境及其功能作用从而影响宿主的健康和生长。总结微生物的代谢过程如何控制共生菌群组成、病原菌入侵和肠道屏障功能等新的概念,有助于进一步了解形成和维持肠道菌群多样性的因素,以期更好的促进机体健康、预防和治疗疾病。

胃肠道环境对蚕蛹蛋白稳定Pickering高内相乳液及其负载虾青素的影响

以蚕蛹蛋白稳定的Pickering高内相乳液(high internal phase emulsions,HIPEs)为研究对象,评价其在体外胃肠道环境中的稳定特性及负载虾青素的能力,阐明其靶向肠道控释的机理。通过测定粒径分布、Zeta电位以及利用激光粒度分布仪、激光共聚焦扫描电子显微镜、反相高效液相色谱和电泳技术等分析蚕蛹蛋白颗粒及其所稳定的Pickering HIPEs在模拟胃肠道环境中的变化,以及乳液负载虾青素的能力和生物可给性。结果表明:蚕蛹蛋白颗粒可稳定油相体积分数为78%的Pickering HIPEs,其对虾青素的负载率约为88%;该乳液在胃环境中90 min内保持稳定,在肠环境中随消化时间延长逐渐失稳,显著提高了虾青素在肠道的生物可给性;界面蛋白组成表明分子质量为70 kDa的蚕蛹蛋白是稳定乳液的主要蛋白,肠消化酶的水解作用是乳液在肠道失稳并释放虾青素的主要原因。本研究为蚕蛹蛋白颗粒稳定的Pickering HIPEs用于口服靶向肠道递送疏水性生物活性物质提供了理论基础,同时为虾青素在食品和保健品领域中的应用提供了新的可能。

枯草芽孢杆菌WB600芽孢和营养体耐受凡纳滨对虾胃肠道环境及定殖存活的研究

采用体外模拟胃肠道环境与体内芽孢存活计数相结合方法,考察枯草芽孢杆菌WB600耐受凡纳滨对虾胃、肠道环境及其在凡纳滨对虾肠道内的定殖存活情况。试验结果表明,枯草芽孢杆菌WB600芽孢在不同的pH环境中均表现出很强的耐受性和良好的生长增殖趋势,而营养体的耐受性较差;在含不同浓度胰蛋白酶的模拟肠液中芽孢和营养体均能表现出良好的耐受性,其中芽孢的耐受能力更为显著;当温度高达80℃时,仍有93.9%的芽孢存活,而营养体基本失活;在虾的肠道内容物中能检测到大量的活芽孢,说明芽孢在进入虾肠道内是可以在其内存活并生长定殖的。表明枯草杆菌WB600芽孢比营养体对胃肠道环境和高温具有更强的耐受能力,且能顺利在虾肠道内定殖存活,有望在水产养殖领域发挥益生作用的同时成为新型的口服疫苗载体。

猪源益生菌对胃肠道环境、高温的耐受性以及体外抑菌效果研究

为了研制优良的猪用益生菌制剂,试验对从猪粪便分离得到的7株益生菌（地衣芽孢杆菌S3、产朊假丝酵母Y1、德氏乳杆菌德氏亚种B1、粪肠球菌C1和C2、枯草芽孢杆菌S1和S2）进行胃酸耐受性、肝脏胆盐耐受性、环境温度耐受性以及对大肠杆菌和葡萄球菌的抑制效果研究。结果表明：7株益生菌均能够耐受仔猪胃酸和小肠中胆盐,除芽孢杆菌外其他分离菌株均不耐热,在生产应用时需要考虑选用低温加工法;除S3和Y1外,其他菌株（B1、C1、C2、S1、S2）均有明显的抑菌作用,以S2抑菌效果最强。说明B1、C1、C2、S1、S2可用于益生菌制剂的研制菌种。

传统发酵食品中耐胃肠道环境乳酸菌的筛选及其在酸乳发酵中的应用

在前期从民族传统发酵食品中分离得到的乳酸菌中,通过检测在人工胃肠道溶液中存活率筛选胃肠道环境耐受性强的菌株,再通过感官评价、质构测定等对耐受性强的菌株应用于酸乳发酵潜力进行综合性评价。结果显示,58株从民族地区传统食品中分离的乳酸菌中有7株菌于4种人工胃肠道溶液中存活率均在50%以上,其中5株菌的发酵酸乳感官评价得分较高;而菌株"新E6"发酵的酸乳在质构破裂力、最大黏附力、硬度、内聚力、弹性、胶黏性、咀嚼性以及黏度、持水力等指标都较优,分子生物学鉴定结果"新E6"为坚强肠球菌(Enterococcus durans),为后续益生菌的开发奠定基础。

体外模拟发酵探究KGM和KOS与不同胃肠段微环境的影响

不同胃肠段微环境对机体健康的影响及其与膳食纤维的相互作用是目前研究的热点。该文为探究魔芋葡甘聚糖(konjacglucomannan,KGM)和魔芋葡甘低聚糖(konjac oligosaccharides,KOS)与不同胃肠段微环境的影响,分别以KGM和KOS为碳源,采用YCFA培养基培养不同胃肠段微生物,同时做葡萄糖(glucose)和不加碳源的空白对照,测定不同发酵液pH值、黏度、菌落总数、短链脂肪酸(short-chain datty acids,SCFAs)、总糖及还原糖含量。与对照相比,随着发酵时间的延长,添加KGM和KOS的发酵液pH降低,SCFAs含量增加,菌落总数增加;KGM显著增加胃及小肠发酵液黏度,总糖和还原糖含量略有降低,大肠发酵液中还原糖含量先增加后减少。KGM和KOS可调节不同胃肠段发酵液环境,增加微生物数量及代谢产物含量,从而更有利于机体健康,为KGM和KOS的应用提供新思路。