四君子汤对IEC-6细胞增殖相关指标及大鼠胃肠黏膜c-Myc表达的影响

目的观察四君子汤对IEC-6细胞(大鼠小肠上皮细胞)增殖,多胺调控生长相关基因细胞周期检测点激酶2(Checkpoint kinase 2,Chk2)、c-Myc表达,以及对大鼠胃肠黏膜c-Myc蛋白表达的影响。方法采用SD大鼠制备空白血清及四君子汤含药血清;无负荷细胞实验设空白对照组、腐胺组(10μmol·L^(-1))及四君子汤含药血清低、中、高(5%、10%、20%)剂量组;α-二氟甲基鸟氨酸(α-difluoromethylornithine,DFMO)负荷细胞实验设空白对照组、DFMO组(2.5 mmol·L^(-1))、腐胺组(10μmol·L;)及四君子汤含药血清低、中、高(5%、10%、20%)剂量组;动物实验将SD大鼠随机分为空白对照组、模型组(吲哚美辛组)及四君子汤低、高(5、15 g·kg^(-1))剂量组。采用MTT法检测IEC-6细胞增殖情况;qPCR法检测细胞Chk2、c-Myc mRNA表达;Western Blot法检测细胞Chk2、p-Chk2、c-Myc蛋白表达和大鼠胃肠黏膜的c-Myc蛋白表达。结果 (1)细胞实验:与空白对照组比较,10%、20%四君子汤含药血清可促进给药24 h后IEC-6细胞的增殖(P<0.01),提高p-Chk2蛋白及c-Myc m RNA/蛋白表达水平(P<0.05,P<0.01);5%、10%、20%四君子汤含药血清可促进给药48、72 h后细胞增殖(P<0.01),促进Chk2 mRNA/蛋白表达(P<0.05,P<0.01)。与DFMO组比较,5%、10%、20%四君子汤含药血清可促进给药48 h后细胞增殖(P<0.01),提高c-Myc mRNA/蛋白表达(P<0.05,P<0.01);10%、20%四君子汤含药血清可促进给药72 h后细胞增殖(P<0.01),促进Chk2及p-Chk2蛋白表达(P<0.05,P<0.01);20%四君子汤含药血清可促进Chk2 mRNA表达(P<0.05)。(2)动物实验:与模型组比较,四君子汤5、15 g·kg^(-1)可上调模型大鼠胃黏膜及小肠黏膜c-Myc蛋白表达(P<0.05,P<0.01)。结论四君子汤可促进IEC-6细胞增殖,其作用机制可能与影响多胺信号通路,上调生长相关基因Chk2、c-Myc表达有关。四君子汤可提高胃肠黏膜损伤模型大鼠胃及小肠黏膜c-Myc蛋白表达水平。

四君子汤含药血清对IEC-6细胞增殖及多胺调控NPM及p53表达的影响

目的考察四君子汤含药血清(sijunzi decoction containing serum,SJZDS)对小肠上皮细胞增殖、多胺含量、核仁磷酸蛋白(nucleophosmin,NPM)及p53表达的影响,以探讨四君子汤修复胃肠黏膜损伤的作用机制。方法采用SD大鼠制备SJZDS,MTT法检测细胞增殖,HPLC法检测细胞内多胺含量,RT-PCR法检测NPM及p53 mRNA表达,Western blot法检测NPM及p53蛋白表达。结果与空白对照组比较,10%、20%SJZDS可促进给药24 h后细胞增殖(P<0.01),可增加精脒含量及降低p53 mRNA表达(P<0.05,P<0.01),5%、10%、20%SJZDS可促进给药48 h及72 h后细胞增殖和提高腐胺含量(P<0.01),抑制p53蛋白表达(P<0.01)和NPM mRNA及蛋白表达(P<0.05,P<0.01)。与α-二氟甲基鸟氨酸组比较,5%、10%、20%SJZDS可促进结论SJZDS可促进小肠上皮细胞增殖,其机制与影响多胺调控生长相关基因NPM及p53表达有关。