健脾为主中药对人胃癌移植瘤裸鼠肿瘤生长与转移及红细胞免疫功能影响的实验研究

目的观察健脾为主中药(胃肠安)对人胃癌移植瘤裸小鼠肿瘤生长、转移和红细胞免疫功能的影响。方法采用人胃癌细胞SGC-7901裸小鼠脾包膜下移植,实验动物32只,随机分为3组。中药组10只,予胃肠安煎剂灌胃,1次/d;西药组10只,予5-FU腹腔注射,1次/周;对照组12只,予生理盐水灌胃,共治疗12周。观察肿瘤形态学改变并应用郭峰法测定红细胞C3b受体花环率(RCR)和免疫复合物花环率(RICR)。结果中药组、西药组的瘤质量、瘤块体积和肿瘤转移与对照组差异有统计学意义,P<0.05;中药组RCR,RICR均显著高于其他两组,P<0.05,与接种前差异无统计学意义,P>0.05。经多元回归分析,瘤质量、瘤块体积与肿瘤转移数量与红细胞免疫关系有显著关系。结论健脾中药能显著调节红细胞免疫功能,其抑瘤作用与增强C3b受体活性,减少体内免疫复合物堆积,改变红细胞免疫功能紊乱有关。

早期肠内营养对胃癌行全胃切除术后患者免疫功能的影响

目的探讨早期肠内营养对全胃切除术后患者免疫功能的影响。方法46例全胃切除手术患者,随机分为肠外营养(PN)组(24例)、肠内营养(EN)组(22例)。EN组术后第1天起经鼻饲管输注能全力。分别于术前1 d及术后1 d、8 d取外周血检测B淋巴细胞、IgA、IgG、IgM、淋巴细胞总数、CD3、CD4、CD8、CD4/CD8、NK细胞活性等免疫指标。结果术后8 d两组B淋巴细胞数均无明显改变,EN组IgA、IgG、IgM、淋巴细胞总数、CD3、CD4、及CD4/CD8及NK细胞活性明显回升,CD8则回落正常水平,而PN组CD8仍处高水平,其余指标处于低水平,两组间差异有显著性(P<0.05)。结论早期肠内营养可增强胃癌术后免疫功能。

胃癌的局部免疫细胞反应

目的 观察胃癌局部免疫反应细胞与胃癌生物学行为的关系。方法 对 10 7例有 3～ 8年随访资料的胃癌根治性切除标本作局部免疫细胞反应程度的观察。淋巴 -浆细胞反应和嗜酸性白细胞反应用图像分析系统作定量测定 ,肥大细胞在光镜下以个 mm2 作定量计数 ,然后以均数作界值分为高反应组和低反应组 ,并分析与临床病理参数的关系。结果 患者存活时间、肿瘤浸润深度和淋巴结转移情况在胃癌局部免疫细胞反应的高反应组和低反应组间存在显著差异 (P <0 .0 5 )。

沉默Livin基因对胃癌细胞SGC-7901生物学行为的影响

目的:探讨沉默Livin基因表达对胃癌细胞SGC-7901细胞形态和凋亡的影响。方法:取SGC-7901细胞,分成pSUPER-neo-LsB组、空载体pSUPER-neo-LsC组、空白对照组,用脂质体包裹法转染,空白对照组不转染。转染48h后,FCM法、TUNEL法检测细胞凋亡,电镜观察凋亡细胞。结果:人胃癌癌细胞株SGC-7901细胞瞬时转染针对Livin的表达载体后,出现早期凋亡细胞和凋亡小体。TUNEL检测SGC-7901细胞凋亡指数显著高于对照组。FCM法计算细胞的凋亡率与转染空载体pSUPER-neo-LsC组和空白对照组比较均有显著性差异。结论:沉默livin基因可以有效的改变SGC-7901细胞的生物学行为,Livin基因可能成为胃癌治疗的新靶点。

胃癌组织中Pin1和β-catenin的表达及其与肿瘤侵袭转移的关系

目的:探讨胃癌组织中Pin1与β-catenin的表达及其与肿瘤侵袭转移的关系。方法:应用S-P免疫组化技术检测50例胃癌组织及30例正常胃组织(对照组)中Pin1、β-catenin蛋白的表达,分析两指标间相关性及其与胃癌临床病理学特征和转移的关系。结果:胃癌组织中Pin1与β-catenin的阳性率表达明显高于对照组,分别为24%,62%。Pin1与β-catenin在胃癌组织中的表达密切相关(r=0.51,P<0.01));Pin1异常表达与胃癌病理分化程度、临床分期、淋巴结转移有关(P<0.05);β-catenin异常表达与病理分化程度、临床分期、淋巴结转移有相关性(P<0.05)。结论:Pin1与β-catenin胃癌组织中存在异常表达,且两指标间呈正相关,其阳性表达与胃癌病理分化程度、临床分期、淋巴结转移有相关性。Pin1与β-catenin有可能在胃癌的发生发展中发挥重要作用,其阳性表达与胃癌侵袭转移有密切关系,并可能成为判断胃癌转移及预后的指标之一。

胃癌术后免疫化疗的远期疗效评价

目的：为探讨术后免疫化疗在胃癌综合治疗中的远期疗效，本文对428例胃癌进行回顾性分析。方法：全部资料来自我院、西安交通大学第一附属医院1989／2001年收治的428例胃癌患者，并随机分为单纯手术组144例，术后化疗组138例，术后化疗免疫组146例。化疗组均给于术后化疗1～3a，观察其5a生仔率。结果：（1）单纯手术、术后化疗及术后免疫化疗组5a生存率分别为24．3％、38．4％和53．4％。术后免疫化疗组与单纯手术组间差异有显著性（P〈0.01）；5a生存率术后免疫化疗组较术后化疗组提高15．0％。（2）无淋巴结转移组中，单纯手术组，术后化疗组及术后免疫化疗组5a生存牢分别为29．3％、51．9％、66．7％。术后免疫化疗组与单纯手术组差异有显著性（P〈0．01），较术后化疗组5a生存率提高14．8％；有淋巴结转移组中，单纯下术组，术后化疗组及术后免疫化疗组5a生存率分别为14．8％、29．8％、44．2％。术后免疫化疗组与单纯手术组差异有显著性（P〈0.01），较术后化疗组5a生存率提高14．4％。结论：胃癌术后免疫化疗呵提高患者的生存期，其远期疗效明显优于术后化疗及单纯手术。对有／无淋巴结转移者，术后免疫化疗均有明显的远期疗效。

胃癌本虚标实辨证的病理生理学基础探讨

通过对胃癌患者临床表现的观察,提出胃癌本虚标实辨证分型。并探讨其病理生理学基础。结果表明:细胞免疫功能下降,主要是 LCT、CD_3、CD_4下降,CD_8升高,CD_4/CD_8比值降低;体液免疫升高趋势,主要是 IgA、补体 C_3、C_4和 B 因子,而 IgM下降。内分泌激素皮质醇升高为主,T_3都下降,脾肾阳虚同时伴 T_4下降。胃肠吸收功能都下降。癌标记物都升高。在此结果的基础上,提出胃癌中医健脾益气,补肾温阳,理气活血,祛痰清热的治法。

组织芯片技术研究胃肠道间质瘤的病理特点及免疫表型特征

目的:利用组织芯片技术和免疫组化方法相结合探讨胃肠道间质瘤的病理特点及免疫表型特征,阐明其诊断和鉴别诊断的要点。方法:利用80点胃肠道间质瘤芯片以免疫组织化学S-P法对上述组织进行CD117、CD34、SMA、Desmin、Vimentin、NSE、S-100及Syn检测并分析其病理特点。同时以60点胃肠道平滑肌瘤与神经鞘瘤复合组织芯片作对比分析。结果:胃肠道间质瘤、平滑肌瘤、神经鞘瘤组织学上均以梭形细胞为主,恶性者出现明显异形性,伴多少不等出血、坏死、粘液变等。免疫组化染色胃肠道间质瘤CD117、CD34表达率分别为95.0%、84.3%,弥漫强阳性表达。平滑肌瘤CD117和CD34表达率分别为11.1%和20.0%,与胃肠道间质瘤组表达率差异具有显著性。神经鞘瘤中1例良性神经鞘瘤出现CD117表达,CD34未见表达。结论胃肠道间质瘤中CD117和CD34呈高表达,是其敏感的标记物,部分可伴有肌源性标记物或神经源性标记物表达。组织芯片技术具有高通量大样本的特点,为筛选肿瘤的免疫学标记物提供了一个很好的平台。

化疗对原发性胃癌患者外周血中免疫细胞亚群的影响

【目的】探讨化疗对原发性胃癌患者外周血中免疫细胞亚群的影响.【方法】本院住院治疗的208例原发性胃癌患者作为观察组,对照组为同期在本院进行健康体检者175例.胃癌患者均接受D2根治术进行治疗后给予同步化疗.化疗3个周期后,检测患者的免疫细胞亚群(CD3^+,CD4^+,CD8^+,CD4^+/CD8^+以及NK细胞)数量的改变.【结果】观察组患者化疗前CD3^+,CD4^+,CD4^+/CD8^+以及NK细胞的含量均低于对照组,且差异有显著性(P<0.05).与化疗前相比,化疗1次后,化疗2次后各指标含量均明显降低(P<0.05);化疗3次后各指标含量与化疗前比较差异无显著性(P>0.05).化疗1次后与化疗2次后的CD3^+,CD4^+,CD4^+/CD8^+以及NK细胞比较差异无显著性(P>0.05),化疗3次后CD3^+,CD4^+,CD4^+/CD8^+以及NK细胞含量较化疗1次后,化疗2次后均升高,且差异有显著性(P<0.05).Ⅰ~Ⅱ级胃癌患者化疗后的CD4^+,CD4^+/CD8^+以及NK细胞含量均高于Ⅲ~Ⅳ级患者(P<0.05).【结论】原发性胃癌患者术后接受化疗可以有效地增加外周血免疫细胞的表达水平.

体外扩增CIK细胞杀伤胃癌细胞SGC-7901

目的：观察CIK细胞增殖情况，了解扩增后的最佳应用时机，并观察体外对SGC-7901的杀伤作用。方法：健康人外周血单核细胞（PBMC）在体外条件下经过多种细胞因子的共同刺激诱导成CIK细胞，计数培养不同时间的CIK细胞，用流式细胞术检测CIK细胞的表型特征。用MTT法检测杀伤活性，对比CIK细胞与5-FU对SGC-7901的杀伤作用，并观察了两者联合应用的效果。结果：CIK细胞随体外培养时间的延长，数量及杀伤活性均增加。体外培养20d增殖124倍，CD3^＋、CD56^＋双阳性细胞的比例达66．1％，其后两者数量增长缓慢；体外实验显示CIK细胞对胃癌SGC-7901细胞株有明显的杀伤作用，最高杀伤效率为73．13％，其杀伤作用优于5-FU，P〈0．05。二者联合应用杀伤作用降低。结论：CIK细胞具有较强的抗胃癌细胞活性；体外培养15～20d时应用较为合适；联合应用时5-FU可降低CIK细胞的杀伤效率。

HP相关性胃癌组织中COX-2和Bcl-2的表达及其意义

目的:探讨HP相关性胃癌组织中COX-2和Bcl-2的表达及其意义。方法:选取68例胃癌组织为实验对象,各对应的癌旁组织为对照组,并选取20例正常胃组织为正常对照组。检测各样本的COX-2和Bcl-2蛋白,并对所得数据进行统计分析。结果:COX-2及Bcl-2蛋白在胃癌组织、癌旁组织及正常组织中的阳性表达率分别为61.8%和70.6%,25.0%和27.9%,15.0%和30.0%。COX-2及Bcl-2蛋白在胃癌组织中的阳性表达率均明显高于癌旁组织及正常组织。胃癌组织中COX-2与Bcl-2表达显著正相关。HP感染的胃癌组织中COX-2及Bcl-2的表达明显高于无HP感染的胃癌组织。结论:胃癌组织中,HP的感染率较高,HP相关性胃癌中,COX-2与Bcl-2均高度表达且密切相关。HP感染可能通过COX-2的过度表达,诱导细胞增殖并刺激Bcl-2蛋白表达抑制细胞凋亡,从而使细胞增殖和凋亡失衡,促进胃癌的发生发展。

胃泌素及丙谷胺对胃癌细胞株MKN45增殖及EGF表达的影响

目的:观察五肽胃泌素(PG)及其受体拮抗剂丙谷胺(PGL)对人胃癌细胞株MKN45增殖及表皮生长因子(EGF)表达的影响。方法:MTT法检测人胃癌细胞株MKN45增殖;放射免疫法(RIA)测定表皮生长因子(EGF)的表达。结果:PG(10-6mol/L)明显促进人胃癌细胞株MKN45增殖,24、48h的促细胞增殖率分别为11.24%、17.63%,丙谷胺(2.0～10.0mmol/L)能阻断这一促增殖作用,并可剂量依赖性地抑制胃癌细胞的生长,且随作用时间延长而增强。同时,在胃癌细胞株MKN45培养液中可检测到EGF,且随培养时间延长EGF含量增加;PG(10-6mol/L)可显著增加MKN45培养液中EGF的含量,丙谷胺(6.0mmol/L)不仅明显阻断PG诱导的EGF增加,并且能够减少胃癌细胞MKN45培养液EGF的含量。结论:五肽胃泌素能促进胃癌细胞株MKN45增殖及EGF表达,而其受体拮抗剂丙谷胺不仅能阻断这一的促进作用,并可抑制胃癌细胞株MKN45增殖及EGF的表达。提示PG的促胃癌细胞增殖作用可能与促进EGF表达有关。

CIK细胞及上清液抗胃癌细胞株SGC-7901活性的研究

目的:探讨由多种细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)在体外的增殖情况,分析体外CIK细胞对胃癌细胞株SGC-7901的杀伤作用。方法:健康人外周血单核细胞(PBMC)在体外诱导成CIK细胞,计数培养不同时间的CIK细胞,并用流式细胞术动态分析其表型特征。倒置显微镜下观察CIK细胞作用于SGC-7901胃癌细胞的形态学变化;流式细胞仪检测CIK细胞培养上清液对胃癌细胞的诱导凋亡作用;采用MTT法检测CIK细胞对SGC-7901胃癌细胞株的杀伤活性。结果:CIK细胞随体外培养时间的延长,数量及杀伤活性均增加。体外培养21d,细胞总数增殖倍数111.63±10.97,CD3+CD56+双阳性细胞数量亦增加,比例达(35.8±9.7)%,其后两者数量逐渐降低。CIK细胞上清液能够诱导胃癌细胞株凋亡;CIK细胞对胃癌SGC-7901细胞株有明显的杀伤作用,最高杀伤率为(74.91±2.71)%。结论:CIK细胞具有较强的抗胃癌细胞活性,体外培养14～21d时具有较强的抗瘤活性,其主要通过直接杀伤及释放细胞因子诱导凋亡的作用杀伤肿瘤细胞。

胃癌组织中Survivin、Caspase3、FHIT的表达及临床意义

Objective: To determine survivin,caspase 3 and fragile histidine traid (FHIT) expression and to analyze its clinical significance in gastric cancer. Methods: Survivin,caspase 3 and FHIT expressions were determined by immunohistochemistry in 32 cases of gastric cancer and 10 cases of normal gastric mucous membrane. At the same time the correlation between survivin,caspase 3 and FHIT expression and the clinical pathological type was analyzed. Results: The positive expression rate of Survivin gene in gastric cancer was 62.5%, but was 0% in normal gastric mucous membrane. The positive expression rate of caspase 3 was 80% in normal gastric mucous membrane and 43.8% in gastric cancer. The positive expression rate of FHIT was 90% in normal gastric mucous membrane and 46.8% in gastric cancer. They all have significant difference with the control but had no significant difference with clinical pathological type. The expression of survivin gene showed negative correlation with caspase 3 and FHIT. Conclusions:Survivin,caspase 3 and FHIT gene participate in the carcinogenesis and progression of gastric cancer. Survivin may inhibit the expression activity of caspase 3 and FHIT gene and prohibit cell apoptosis.

胃癌组织中TS、DPD的表达及其临床意义

目的:探讨胸苷酸合成酶(TS)和二氢嘧啶脱氢酶(DPD)在胃癌组织中的表达及与临床病理因素和5-FU为主化疗疗效的关系。方法:采用免疫组化S-P法检测107例胃癌组织及25例癌旁正常胃粘膜组织中TS、DPD的表达。结果:TS、DPD在胃癌组织中的表达明显高于正常胃粘膜,差异有统计学意义;TS、DPD在胃癌组织中的表达与临床病理因素间均无显著性差异;TS和DPD阳性表达者的化疗有效率均低于阴性表达者,两者比较差异有统计学意义。结论:胃癌组织中TS、DPD的表达水平与肿瘤进展及临床分期无关,但可作为接受5-FU为主化疗的胃癌患者判定疗效的预测指标。

胃癌细胞-DC融合疫苗T淋巴细胞激活效应的研究

目的探讨胃癌细胞-树突状细胞(dendritic cell,DC)融合疫苗激活杀伤性T淋巴细胞的效应特点,为胃癌的免疫治疗提供实验基础与理论依据。方法(1)胃癌患者外周血单个核细胞经GM-CSF,IL-4,TNF-α诱导分化获取成熟DC。(2)SGC 7 9 0 1胃癌细胞-DC经PEG诱导融合、HAT/HT筛选培养,获得纯净融合细胞。(3)混合淋巴细胞反应对融合细胞疫苗激活效应T淋巴细胞的增殖能力进行检测。结果按上述方法,可获得具备典型特征的DC及纯净的融合细胞。融合疫苗显著刺激T淋巴细胞增殖,与T淋巴细胞在1∶1效靶比时刺激能力最强,与对照组比较差异非常显著(P<0.0 1)。结论胃癌细胞-DC融合疫苗具有较亲代DC更强的刺激T淋巴细胞增殖的能力,可能是其发挥更强抗肿瘤生物学效应的基础。

抑癌基因Reprimo启动子区甲基化在胃癌中表达及其临床意义

目的:检测胃癌中抑癌基因Reprimo启动子区甲基化状态及蛋白的表达,探讨Reprimo启动子区甲基化在胃癌发生发展中的作用及临床意义。方法:采用甲基化特异聚合酶链反应(MSP)及免疫组化(SP法)检测慢性萎缩性胃炎伴肠上皮化生(36例)、异型增生(23例)、胃癌(42例)标本中Reprimo基因启动子区的甲基化及蛋白表达情况,并与正常胃粘膜组织(20例)作为对照进行对比分析。结果:肠上皮化生、异型增生和胃癌中Reprimo基因启动子区甲基化阳性率依次升高。正常对照组未检出甲基化,与异型增生和胃癌相比差异有统计学意义。Reprimo基因启动子区甲基化在异型增生和胃癌中的阳性率显著高于肠上皮化生组。Reprimo蛋白表达率依次降低且明显低于正常对照组,启动子区甲基化与蛋白表达呈显著负相关。结论:在胃癌发生发展过程中Reprimo基因启动子区发生了甲基化,其高甲基化状态影响了Reprimo蛋白的表达,可能参与胃癌的发生发展,是胃癌发生的早期分子事件。

胃癌患者EBV感染潜伏基因产物表达的研究

目的:研究EBV阳性胃癌中潜伏基因产物EBV编码的小RNA(EBER1)及潜伏膜蛋白LM P1的表达状况。方法:原位杂交法检测胃癌患者石蜡包埋组织标本中EBER1;免疫组化法检测EBV阳性胃癌中LM P1。结果:217例胃癌患者癌组织标本中检测到23例EBER 1;EBV阳性胃癌中无潜伏感染膜蛋白LM P1表达。结论:EBV阳性胃癌中缺乏潜伏感染膜蛋白LM P1的表达。

血清MG7-Ag与TK1联合检测在胃癌诊断的临床价值

【目的】探讨血清胃癌相关抗原（MG7-Ag）和胸苷激酶-1（TK1）联合检测对胃癌患者的临床诊断价值。【方法】分剐检测60例胃癌患者（胃癌组）、35例胃良性疾病患者（胃良性疾痛组）及30例健康对照者（健康对照组）血清MG7-Ag和TK1水平。【结果】胃癌组患者血清MG7-Ag和TK1含量分别高于健康对照组及胃良性疾病变组（均P〈0．05）；胃癌组MG7-Ag、TK1阳性检出率均明显高于胃良性疾病组及健康对照组（均P〈0．05）；血清MG7-Ag和TK1两项联合检测的敏感性、准确性均高于两项指标单独检测（均P〈0．05）。【结论】血清MG7-Ag、TK1对胃癌具有较高的诊断价值，两者联合检测有助于提高胃癌诊断的敏感性和准确性。

hMSH2、hMLH1在胃癌中的表达及其临床意义

目的:探讨错配修复基因hMSH2、hMLH1蛋白的表达与胃癌临床病理学特性之间的关系。方法:采用免疫组织化学方法检测40例胃癌及50例胃炎组织中hMSH2、hMLH1蛋白的表达情况,并研究其与胃癌临床病理之间的关系。结果:40例胃癌标本中,hMSH2减低表达率为35%,hMLH1蛋白降低表达率为72.5%;淋巴结转移阳性的胃癌中,hMSH2、hMLH1蛋白表达明显减低。结论:hMSH2、hMLH1蛋白可能与早期胃癌和胃癌淋巴结转移有关。