胃癌高系家族成员胃蛋白酶原C基因多态性及其诊断意义的探讨

采用限制性酶切片段长度多态性分析法，检测在胃癌高发区庄河检出的１９例胃癌高系家族成员胃蛋白酶原Ｃ基因多态性，发现三种常见片段及一种稀有片段。对其中４例携带稀有片段的受检者进行了胃镜追踪观察，２．５年后发现１例早期胃癌。本文对此作了初步探讨。

斑鳜胃蛋白酶原C及其5′侧翼区的克隆及序列特征分析

采用RT-PCR和RACE等技术克隆了斑鳜(Siniperca scherzeri)胃蛋白酶原C(pepsinogen C,PGC)的cDNA全长和部分DNA序列,结果表明:PGC cDNA序列全长1 505 bp,5′端非翻译区37 bp,3′端非翻译区304 bp,开放阅读框架(ORF)1 164 bp,共编码含有387个氨基酸的蛋白质,包括由16个氨基酸组成的信号肽、39个氨基酸的激活肽和332个氨基酸的成熟肽。斑鳜PGC氨基酸序列与斜带石斑鱼、伯氏豚虾虎鱼、狼鲈、美洲红点鲑4种鱼的相似度分别为92.0%、91.5%、90.2%、89.1%,与非洲爪蟾、鸡、人、兔、褐家鼠的序列相似度分别为76.8%、72.8%、72.5%、69.9%、67.3%,表明PGC基因在长期的进化中较为保守。PGC基因由9个外显子和8个内含子组成,内含子剪切位点符合GT-AG规则,在第7含子中发现(GACA)6、(CA)6类型的微卫星序列,第8内含子中发现(TG)5类型的微卫星序列。采用锚定PCR方法获得了PGC 5′侧翼区长1 924 bp的序列,启动子区域位于-40^+10 bp,包含TATA盒以及GATA-1、CdxA、Hand1/E47、AP-1、Nkx-2、S8、FOX J2等转录因子的结合位点。结果为进一步研究该基因的表达、功能及其转录调控特征奠定了分子基础。

胃蛋白酶原C基因多态性在胃癌家系成员中的分布

目的 通过PCR方法检测胃蛋白酶原C基因(pepsinogen C gene,PGC gene)多态在辽宁庄河地区胃癌家系成员基因组中的分布,并进一步分析遗传因素对庄河地区胃癌发生的影响。方法 研究材料为61例胃癌家系成员外周血及42例健康人外周血,通过PCR方法检测胃蛋白酶原C基因多态性。结果 与正常对照组比较,胃癌家系成员组等位基因1出现的频率(0.564)较正常组(0.3659)高且有统计学意义(X^2=5.09,p<0.05)。等位基因1纯合基因型在胃癌家系成员组中的分布频率为0.36,较正常组(0.15)高且有统计学意义(x^2=5.65,p<0.05)。结论 庄河地区胃癌家系高发胃癌与PGC多态有关。本实验结果说明该地区胃癌高发的原因不仅与环境因素有关,而且与遗传因素有关。

幽门螺杆菌相关性胃疾病胃蛋白酶原C的表达研究

目的:探讨幽门螺杆菌(Hpylori)相关性胃疾病胃蛋白酶原C 的表达及其意义. 方法:采用免疫组织化学染色法检测318例胃黏膜标本中胃蛋白酶原C的表达情况;采用HE染色、ELISA及PCR方法检测Hpylori感染情况. 结果:Hpylori阳性组浅表陛胃炎胃蛋白酶原C抗原的过表达率高于Hpylori阴性组(P<0.05,X2=0.032,28/33vs 15/25),Hpylori阳性组萎缩性胃炎胃蛋白酶原C的表达率低于Hpylori阴性组(P<0.01,X2=0.003 4/61 vs9/30), Hpylori阳性组的异型增生和胃癌胃蛋白酶原C的表达率与Hpylori阴性组相比有下降趋势(P>0.05). 结论:Hpylori感染与胃蛋白酶原C的表达密切相关,在胃黏膜炎症中胃蛋白酶原C的表达增加;在萎缩性胃炎、异型增生和胃癌中胃蛋白酶原C的表达降低.

胃蛋白酶原C在不同胃疾病中的表达及其与血清sPGC、sPGA的相关性

目的:探讨胃蛋白酶原C(PGC)在不同胃疾病中的表达及其与血清sPGC、sPGA的相关性。方法:选取2010年10月至2015年6月陕西省延安市人民医院消化内科收治的360例不同胃疾病患者临床资料。360例患者中,90例浅表性胃炎,85例萎缩性胃炎,100例胃黏膜糜烂溃疡,85例胃癌。所有患者均采用免疫组织化学染色检测胃黏膜标本中PGC的表达水平,患者血清sPGC、sPGA水平检测方法采用酶联免疫吸附实验法。结果:浅表性胃炎患者PGC抗原均为阳性表达,表达率100%;萎缩性胃炎、胃癌及胃黏膜糜烂溃疡患者PGC抗原阳性表达率分别为34.48%、11.43%、80.00%,PGC抗原阳性表达率随着疾病恶性程度的增加而下降(P<0.05);患者血清sPGC、sPGA的水平各组间比较差异无统计学意义(P>0.05);浅表性胃炎、胃黏膜糜烂性溃疡、萎缩性胃炎、胃癌患者的血清sPGC、sPGA比值随着其病变组织PGC表达水平的降低而降低,呈正相关关系(r=0.297,P=0.001)。结论:PGC组织表达与患者胃疾病的恶性程度关系密切;而PGC抗原组织表达与血清sPGC、sPGA水平具有明显的相关性。

胃癌及其高危人群胃蛋白酶原C基因限制性片段长度多态性研究

目的探讨胃蛋白酶原Ｃ基因多态性在不同人群中分布的差异，探讨其在胃癌高危人群筛选中的应用价值，以期明确其作为胃癌基因诊断指标的可靠性并为探索胃癌遗传学病因及发病机理提供理论依据．方法本研究共分两部分，第１部分为正常人及胃癌患者胃蛋白酶原Ｃ基因多态性研究，第２部分为胃癌高发家族成员胃蛋白酶原Ｃ基因多态性研究及追踪随访．实验对象共计４０例，包括正常献血员１１例，胃癌患者１０例，胃癌高系家族成员１９例．主要实验方法为Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ．探针采用ＰＧＣ３０１，限制性内切酶为ＥｃｏＲⅠ．追踪随访采用胃镜及胃粘膜活检等手段．结果①在正常人体，常见ＰＧＣＥｃｏＲⅠ等位片段有三种，分别为２０Ｋｂ、５７Ｋｂ及３６Ｋｂ，稀有片段有一种，３５Ｋｂ，在胃癌患者，未发现与正常人体不同的多态片段，但是，稀有片段及稀有杂交带型的出现频率明显高于正常组．②胃癌高系家族成员ＰＧＣ稀有片段及稀有杂交带型的出现频率略高于正常人体．利用胃镜病理手段对其进行长达３年的追踪随访中发现，携带ＰＧＣＥｃｏＲⅠ稀有片段４例胃癌高系家族成员中，有１例罹患早期胃癌．③ＥｃｏＲⅠ常见等位片段在胃癌组织杂交信号减弱甚至缺失．结论ＰＧＣＥｃｏＲⅠ稀有片段及?

金银冶炼区居民胃蛋白酶原C基因多态性的研究

目的通过调查永兴县柏林镇居民胃蛋白酶原C基因多态性分布情况,研究环境因素与胃癌发病病因之间的关系,为胃癌的早期诊断提供实验依据。方法通过PCR方法检测132例金银冶炼区固定居民与82例非金银冶炼区固定居民胃蛋白酶原C基因多态性。结果两组居民310个bp处的等位基因差异无显著意义(χ2=0.22,P>0.05)。结论永兴县地区居民患胃癌的风险性是否增加,有待进一步的研究。

具不良生活习惯者胃蛋白酶原C基因多态性的研究

目的通过调查具不良生活习惯如抽烟、喝酒者胃蛋白酶C基因多态性分布情况,研究生活习惯与胃癌病因之间的关系。方法采用PCR检测具不良生活习惯者中胃蛋白酶原C基因的多态性。结果既抽烟又喝酒者52人中,等位基因1出现频率比对照组高且差异有统计学意义(P<0.05)结论既抽烟又喝酒者是胃癌发病的高危险人群。

不同胃黏膜疾病胃蛋白酶原C组织原位表达与胃蛋白酶原血清学检测水平的比较

目的:通过对不同类型胃黏膜活检组织胃蛋白酶原C(PGC)的表达和血清胃蛋白酶原含量的检测,研究二者的匹配程度及其在胃癌筛查与诊断中的价值.方法:129例胃黏膜活检组织及其血清标本(浅表性胃炎30例,胃黏膜糜烂溃疡35例,萎缩性胃炎29例,胃癌35例),采用免疫组织化学染色检测胃黏膜标本中PGC的表达情况;采用酶联免疫吸附实验检测血清PGA(sPGA)和PGC(sPGC)含量.结果:30例浅表性胃炎PGC抗原均为阳性表达,表达率为100%,而胃黏膜糜烂溃疡、萎缩性胃炎和胃癌组PGC抗原阳性表达率分别为80.00%,34.48%和11.43%,其表达率随疾病恶性程度的增加而下降(P<0.05).sPGC、sPGA含量各组间无统计学差异,sPGA/sPGC比值从浅表性胃炎→胃黏膜糜烂溃疡→萎缩性胃炎→胃癌依次下降,分别为11.55±0.69,9.39±0.86,8.86±0.63,6.83±0.68(P<0.05).sPGA/sPGC比值随其病变组织PGC表达程度的降低而下降,具有良好的相关性(r=0.297,P=0.001).结论:PGC的组织表达与胃黏膜细胞恶性程度呈负相关.sPGA/sPGC与PGC抗原组织表达有良好的相关性,是一个方便、经济的胃癌及癌前病变筛选和诊断的指标,具有较好的临床实用价值.

维生素D受体基因、胃蛋白酶原C基因及TP53基因多态性与乳腺癌相关研究

乳腺癌的发病往往是外界各种不良因素及个体基因长期共同作用的结果,在众多因素中基因多态性是造成个体差异非常重要的一方面。通过国内外的病例对照研究我们发现维生素D受体基因、胃蛋白酶原C基因及TP53基因多态性与乳腺癌相关研究是目前国外的研究热点。通过对维生素D受体基因、胃蛋白酶原C基因及TP53基因多态性的研究可使我们进一步了解乳腺癌的病因。

正常人及胃癌患者胃蛋白酶原C基因多态性研究

以ＰＧＣ３０１为探针，对１０例胃癌组织及１１例正常人体组织基因组ＤＮＡ中胃蛋白酶原Ｃ基因的ＥｃｏＲＩ限制性片段长度多态性作了观察分析。发现在正常人体有三种常见等位片段，分别为２０ｋｂ、５．７ｋｂ及３．６ｋｂ；一种稀有片段，３．５ｋｂ。在胃癌患者，未发现与正常人体不同的等位片段。但是，稀有片段及稀有杂交带型的出现频率高于正常组。这一结果对深入探讨胃蛋白酶原Ｃ基因稀有片段及稀有杂交带型对胃癌的诊断价值有启示意义。

维生素D受体、胃蛋白酶原C与TP53基因及其多态性与乳腺癌的研究进展

维生素D受体(VDR)是类固醇激素和甲状腺受体超家族成员,具有抑制增殖、诱导乳腺癌细胞凋亡的功能;蛋白水解酶是胃蛋白酶原C(PGC)或胃亚蛋白酶的前体,是反映乳腺癌早期复发和死亡的新型预后因素;而TP53基因突变及其过表达见于乳腺癌的早期阶段,是乳腺癌发生的早期事件。基因多态性将会为乳腺癌的治疗提供新的治疗方向。

HER2、G-17与胃蛋白酶原C在胃癌中的表达及临床意义

目的探讨表皮生长因子受体2(HER2)、胃泌素-17(G-17)及胃蛋白酶原C在胃癌中的表达及临床意义。方法利用免疫组织化学法检测胃癌组、癌旁组及正常胃黏膜组HER2、G-17及胃蛋白酶原C阳性表达率,并对不同临床病理特征间HER2、G-17、胃蛋白酶原C表达率进行比较分析。结果正常胃黏膜组、癌旁组及胃癌组HER2、G-17及胃蛋白酶原C阳性表达率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。胃癌组不同Lauren分型、分化程度、淋巴转移患者间HER2阳性表达率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。胃癌组不同分化程度、淋巴转移、TNM分期患者间G-17阳性表达率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。胃癌组不同分化程度、淋巴转移、TNM分期患者间胃蛋白酶原C阳性表达率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论胃癌患者HER2、G-17及胃蛋白酶原C阳性表达率可作为胃癌筛查指标,为胃癌的早诊断、早治疗提供可靠的临床依据。

胃蛋白酶原C在胃癌及胃癌前疾病诊断中的意义

目的 探讨胃蛋白酶原C(PGC)在不同胃疾病中的动态表达情况并对其在胃癌前疾病及胃癌诊断中的价值作出评价。方法 采用免疫组织化学染色检测 4 2 4例胃黏膜标本中PGC的表达情况。结果 PGC抗原在 5 4例正常胃黏膜中全部阳性表达 (10 0 % ) ,在 12 4例胃癌中表达率显著下降 (2 4 % ) ,从浅表性胃炎或胃糜烂溃疡到萎缩性胃炎或异型增生再到胃癌 ,PGC阳性表达率依次逐渐下降 ,差异有非常显著意义 (P <0 0 1)。结论 PGC抗原的表达与胃黏膜细胞恶性程度呈负相关 ,与胃疾病的发生发展有良好的相关性。PGC抗原对于胃癌前疾病的诊断具有较高的灵敏度和特异度 ,对于癌前疾病的诊断 ,对胃癌筛查、早期诊断具有一定的参考价值。

胃蛋白酶原C基因插入-缺失多态与胃癌患者及其癌前疾病易感性的关系

目的从胃癌发生发展的角度探讨胃蛋白酶原C（PGC）基因插入-缺失多态与胃癌及其癌前疾病易感性的关系，并初步探讨PGC基因多态与H.pylori感染的交互作用对胃癌发生发展的影响。方法利用聚合酶链反应（PCR）及琼脂糖电泳分析方法，检测141例胃癌患者和564例非胃癌者PGC基因的基因型；比较不同基因型与胃癌和胃癌前疾病的关系。利用酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清H.pylori-IgG滴度，并以效应修饰模型分析PGC—H.pylori感染之间的交互作用。结果PGC等位基因1纯合型与非纯合型携带者比较，纯合型携带者罹患萎缩性胃炎的风险增加到3．103倍（95％CI，1．440～6．686），罹患胃癌的风险增加到2．962倍（95％CI，1．370～6．404），发生肠上皮化生的风险增加到1.659倍（95％CI，0.998～2．757）。携带等位基因1纯合型并且pylori-IgG阳性的个体，罹患萎缩性胃炎和胃癌的风险显著增高（似然比检验，P=0.023和P=0.005）。结论PGC基因多态与萎缩性胃炎、胃癌的遗传易感性有关。PGC基因多态与H.pylori感染在胃癌及其癌前疾病的发病过程中存在交互作用。

胃蛋白酶原C基因插入-失多态和幽门螺杆菌感染的交互作用与胃癌发病风险

目的探讨胃癌发生发展过程中，胃蛋白酶原C（PGC）基因插入一缺失多态与幽门螺杆菌（Hp）及其不同基因亚型菌株感染的交互作用。方法1：1频数配伍，选择基本正常（NOR）、胃糜烂溃疡（GU）、萎缩性胃炎（AG）和胃癌（GC）各141例，分析PGC基因多态和Hp感染的交互作用。同时选择177例Hp感染阳性者，分析PGC基因多态与不同基因亚型Hp感染的交互作用。以聚合酶链反应（PCR）检测PGC基因多态型及Hp基因亚型。以酶联免疫吸附实验（FLISA）检测血清Hp-IgG抗体。结果PGC基因多态与Hp感染两因素交互作用，PGC等位基因1纯合型、Hp-IgG阳性者罹患GU、AG和GC的OR值分别为8．69、11．16和10．61（P值分别为0．049、0．02和0．03），交互作用指数分别为5．40、6．48和4．34，归因比分别为0．721、0．770和0．697。PGC基因多态与不同基因亚型Hp感染对于AG和GC患病均无交互作用。结论GC发生发展过程中，PGC基因多态与Hp感染存在正交互作用。而与不同基因亚型Hp菌株感染无交互作用。

血清胃蛋白酶原对胃癌早期诊断的应用研究

目的通过对胃癌早期患者血清胃蛋白酶原Ⅰ(PGⅠ)、胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅡ)进行检测,探讨血清PGⅠ、PGⅡ及PGⅠ/PGⅡ比值对胃癌早期诊断的价值。方法采用化学发光微粒子免疫检测方法,测定胃癌早期患者(32例),胃溃疡患者(38例)和健康对照人群(30例)的血清PGⅠ、PGⅡ。结果胃癌早期患者组血清PGⅠ水平及PGⅠ/PGⅡ比值低于胃溃疡患者组及健康对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。胃癌早期患者组PGⅡ水平与健康对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。而胃溃疡患者组PGⅡ水平高于胃癌早期患者组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论通过检测血清PGⅠ、PGⅡ水平及PGⅠ/PGⅡ比值变化,可以作为胃癌早期无创伤性的筛选指标。