远志与厚朴配伍对小鼠胃间质细胞活性的影响

参照Koh法,改良优化GICC(gastric interstitial Cells of Cajal)的培养方法;采用四唑盐比色实验(MTT法),考察空白血清组、远志血清组、厚朴血清组、远志与厚朴1∶1、1∶2、1∶3配伍血清组对GICC的影响,以优选配比;采用乳酸脱氢酶法(LDH),考察空白血清组、远志血清组、厚朴血清组、远志与厚朴最优配伍血清组对GICC的LDH活力的影响机制。MTT法显示最优配伍组为远志与厚朴1∶2配伍血清组。与空白血清组比较,单味远志血清组(6g/kg)有降低GICC增殖趋势;而与单味远志血清组(6g/kg)比较,远志与厚朴1∶1、1∶2、1∶3配伍血清组,均能极显著促进GICC增殖(P<0.01)。LDH结果显示,与空白血清组比较,单味远志血清组(6g/kg)有降低LDH活力趋势;与单味远志血清组(6g/kg)比较,厚朴含药血清组(6g/kg)、远志与厚朴1∶2配伍血清组能显著增强LDH活力(P<0.05)。综上可见,远志与厚朴配伍能显著促进GICC生长,并提高其存活时间,其机制可能与增强LDH酶活力相关。

厚朴汁炙远志炮制品对胃间质细胞活力影响的探讨

目的:探索研究不同剂量厚朴汁炙远志炮制品对胃间质细胞活力的影响。方法:将实验分成空白组、远志组、厚朴组、厚朴汁炙远志高、中、低剂量组、远志配厚朴1:2组七个不同剂量组对培养的胃间质细胞进行干预,24 h后采用四唑盐比色实验(MTT法),考察厚朴炮制远志的水煎液及其含药血清对胃间质细胞活力的影响。结果:厚朴汁炙远志炮制品水煎液对胃间质细胞活力的影响结果显示,与单味生远志20 g.kg-1组比较,空白组、单味厚朴10 g.kg-1组、炮制高剂量30 g.kg-1组、远志配厚朴1:2(30 g.kg-1)组的胃间质细胞OD值均显著增高(F=2.750,P=0.024);厚朴汁炙远志炮制品含药血清对胃间质细胞活力的影响结果显示,炮制高剂量30 g.kg-1组、远志配厚朴1:2(30 g.kg-1)组的含药血清的胃间质细胞OD值均显著高于空白组(F=10.22,P=0.000);且单味厚朴10 g.kg-1组、炮制高剂量30 g.kg-1组、远志配厚朴1:2组(30 g.kg-1)的OD值均显著高于单味远志组(F=10.22,P<0.05)。结论:远志有抑制胃动力起搏细胞活性趋势,单味厚朴组、厚朴汁炙远志炮制品组、远志配厚朴1:2组均能极显著促进胃间质细胞活力,从而促进胃动力,故推测厚朴能通过促进胃间质细胞的活力,在配伍和炮制过程中降低远志对胃间质细胞造成的伤害,而达到缓解胃肠动力障碍的目的。

胃间质细胞瘤的多层螺旋CT诊断分析

目的:探讨胃间质细胞瘤的CT影像特征及其临床价值。方法:回顾性分析胃间质细胞瘤16例,所有病例均行螺旋CT平扫及双期增强扫描,并经手术后病理检查证实。结果:16例胃间质瘤按照肿块生长方式分为腔外生长型10例(62.5%),跨壁生长型4例(25%),腔内生长型2例(12.5%)。其中恶性12例(75%),良性4例(25%),恶性胃间质瘤,平扫肿瘤密度均匀或不均匀,边界不清,增强扫描呈均匀或不均匀强化,坏死液化区不强化;良性胃间质瘤边缘多光整,密度均匀,增强扫描多呈均匀性强化。结论:CT能准确显示胃间质瘤的部位及形态特征,对良恶性的鉴别和预后的判断有重要的临床指导价值。

健脾消痞方联合推拿对厌食症胃肠动力、Cajal间质细胞自噬的影响

目的:基于促分裂原活化的蛋白激酶(MAPK/MEK)/胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)信号通路分析健脾消痞方联合推拿疗法对厌食症幼鼠胃肠动力及胃窦Cajal间质细胞自噬的作用机制。方法:无特定病原体(SPF)级SD健康幼鼠50只随机分为健康组、模型组(小儿厌食症模型)、中药组(模型+健脾消痞方干预)、联合组(模型+健脾消痞方+推拿疗法干预),每组10只。另10只大鼠建立小儿厌食症模型给予MEK/ERK信号通路抑制剂PD98059进行注射作为抑制剂组。每2周测量幼鼠体质量和摄食量;比色法测血清淀粉酶水平;放射免疫法测血清胃泌素水平;苏木精-伊红(HE)染色观察病理形态;实时PCR检测Cajal间质细胞标志物氨酸蛋白激酶生长因子受体(c-kit)、微管相关蛋白轻链3(LC3)、自噬基因苄氯素1(Beclin1)基因表达。蛋白印迹检测MEK、ERK1/2、p-MEK、p-ERK1/2蛋白表达。结果:与健康组比较,模型组幼鼠体质量、体质量增长率、摄食量、c-Kit、小肠推进比、血清淀粉酶、血清胃泌素降低,MEK、ERK1/2、LC3、Beclin1、胃内残留水平升高(P<0.05)。在经过中药组及联合组干预后,幼鼠体质量、体质量增长率、摄食量、c-Kit、小肠推进比、血清淀粉酶、血清胃泌素升高,MEK、ERK1/2、LC3、Beclin1、胃内残留水平降低(P<0.05),且联合组较中药组效果更佳(P<0.05)。联合组与抑制剂组幼鼠蛋白表达比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论:健脾消痞方联合推拿可能是通过抑制MEK-ERK1/2信号通路激活,从而抑制胃窦Cajal间质细胞自噬,改善胃肠道功能。

厚朴汁炙远志对小鼠胃Cajal间质细胞Ca^(2+)通道的影响

目的考察厚朴汁炙远志含药血清对小鼠胃Cajal间质细胞内离子活性来影响胃动力的细胞钙通道机制。方法采用体外小鼠胃Cajal间质细胞和含药血清共孵。实验分成:空白组、厚朴组、远志组、远志配厚朴组、厚朴汁炙远志含药血清高、中和低剂量组。采用分光光度法检测细胞内外钙离子浓度和微量ATP酶、ELISA法检测1,4,5-三磷酸肌醇(IP3)浓度。结果远志组的胞内游离Ca2+浓度、ATP酶活性、和IP3浓度与空白组比较均显著升高(P<0.05,P<0.01),而厚朴组、远志配厚朴组,厚朴汁炙远志含药血清高和中剂量组的Ca2+浓度、ATP酶活性、IP3浓度与远志组比较,显著降低(P<0.05,P<0.01)。结论远志能抑制胃Cajal间质细胞活性,使细胞钙离子内流,产生自由基导致细胞成分破坏,诱发细胞凋亡;而厚朴汁炙远志能缓解细胞钙超载,维持细胞稳态,从而缓解胃动力障碍。

15例胃间质细胞瘤临床诊治

目的:探讨胃间质细胞瘤临床诊治方法。方法:回顾性分析15例胃间质细胞瘤患者临床资料。结果:15例均行胃镜、超声胃镜及病理、免疫组织化学检查明确诊断,均行手术治疗,3例失访,7例生存时间>2 a,3例死亡,2例有远处转移者,给予甲磺伊马替尼治疗,生存时间>2 a。结论:胃镜及超声胃镜检查是诊断胃肠道间质细胞瘤主要方法,手术切除为首选治疗方法。

食管裂孔疝合并胃食管反流病合并胃间质细胞瘤的外科治疗

目的探讨食管裂孔疝合并胃食管反流病合并胃间质细胞瘤患者的围手术期处理及安全性。方法统计新疆维吾尔自治区人民医院2012年10月至2015年1月收治的17例食管裂孔疝合并胃食管反流病合并胃间质细胞瘤患者的病案资料,均采用腹腔镜下微创手术,其中单纯食管裂孔疝缝合者13例,生物补片修补者3例,强生PHY补片修补者1例。抗反流术式中行Nissen式胃底折叠术者8例,Dor式胃底折叠术者6例,Toupet式胃底折叠术者3例。病理结果提示极低危险度胃间质细胞瘤8例,低度危险度者4例,中度危险度者3例,高度危险度者1例,极高危险度者1例,回顾性总结分析该类患者围手术期的处理措施。结果本组患者无围手术期死亡,术后无严重并发症发生,术后患者反流症状均较术前明显改善,反流时间、反流次数、酸反流时间百分比、长反流次数及DeMeester评分较术前明显降低(P<0.05),术后GERD Q量表评分较术前明显减低(P<0.05);LES压力较术前明显提高(P<0.05)。术后切口感染1例,慢性疼痛1例,给予换药、理疗后好转。2例患者术后出现进食哽噎,1例患者术后出现腹泻,嘱其少量多餐、细嚼慢咽,1个月后症状消失。合并贫血患者术后血红蛋白恢复至95g/L,术后随访中位数10个月,无复发病例。结论食管裂孔疝合并胃食管反流病合并胃间质细胞瘤患者病情较复杂使得手术风险大,难度高,但只要作好充分的术前准备,采用恰当的手术方式,术中谨慎、细致操作,针对性的处理术后出现的各种问题,仍是安全可行的。

柴胡疏肝散含药血清对大鼠胃Cajal间质细胞增殖及细胞周期的影响

目的:研究柴胡疏肝散含药血清对体外大鼠胃Cajal间质细胞(interstitial cells of Cajal,ICC)增殖及其细胞周期的影响.方法:体外培养的大鼠胃ICC经荧光鉴定,取生长对数期内的I C C与各含药血清共孵.实验分为空白组、柴胡疏肝散含药血清组(5%、10%、20%)及10%多潘立酮含药血清组.通过CCK-8法检测ICC的增殖作用;使用流式细胞术检测ICC细胞周期;Western blot检测ICC细胞周期素依赖性激酶2(cyclin dependent kinase 2,CDK2)、cyclin E的表达.结果:与空白组比较,柴胡疏肝散含药血清各浓度组及10%多潘立酮含药血清组可显著促进ICC增殖(均P<0.01),可提高ICC细胞周期G0/G1期及S期比例(均P<0.01),同时10%柴胡疏肝散及10%多潘立酮含药血清组可显著上调ICC周期蛋白CDK2、cyclin E的表达(均P<0.01).柴胡疏肝散各浓度组内比较,10%、20%浓度组对促进ICC增殖及提高G0/G1期和S期比例均优于5%浓度组(均P<0.05);10%与20%浓度组在促进I C C增殖作用及提高S期比例上差异无统计学意义(均P>0.05).与10%多潘立酮含药血清组比较,10%柴胡疏肝散组对ICC增殖作用及上调CDK2、c y c l i n E的表达均优于10%多潘立酮组(均P<0.05);10%、20%柴胡疏肝散含药血清组提高G0/G1期及S期比例亦优于10%多潘立酮组(均P<0.05).结论:柴胡疏肝散含药血清可提高ICC生长活性,对ICC的增殖分化起促进作用.

耳电针对链脲佐菌素致糖尿病大鼠胃窦Cajal间质细胞的修复效应

目的:观察低频电针耳穴"胃"对链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)致糖尿病大鼠胃窦病理形态、Cajal间质细胞(interstitial cells of Cajal,ICC)、血清胃促生长素(Ghrelin)和血管活性肠肽(vasoactive intestinal peptide,VIP)浓度的影响。方法:24只雄性SD大鼠随机分为模型组、假耳针组、耳针组,每组各8只,腹腔注射STZ(55 mg/kg)诱导糖尿病大鼠模型,造模后第8周假耳针组取耳垂,耳针组取耳穴"胃"进行电针治疗(2 Hz,20 min/次,每天1次,1周5 d,连续2周),模型组无治疗。比较治疗前、后各组大鼠空腹血清Ghrelin、VIP浓度的改变,治疗结束后取胃窦组织行HE染色、c-Kit免疫组化染色,以及Western blot检测胃窦组织c-Kit蛋白表达水平。结果:治疗后,耳针组血清Ghrelin浓度较治疗前显著上升(P<0.05),且高于模型组(P<0.05);免疫组化及Western blot结果均显示耳针组胃窦c-Kit蛋白的表达均显著高于模型组与假耳针组(P均<0.01)。结论:电针耳穴"胃"能够促进糖尿病大鼠胃窦ICC的修复,可能与上调血清Ghrelin有关。

大鼠胃电节律失常模型胃肌间Cajal间质细胞含量的变化

目的:观察胃电节律失常大鼠模型中胃肌间Cajal间质细胞(Interstitial Cells of Cajal,ICC)含量的变化,以探讨该模型病理机制,为今后的研究奠定基础. 方法:采用不规则喂养法制备大鼠胃电节律失常模型,用免疫组化法检测其胃肌间c-kit阳性I CC含量的变化. 结果:胃电节律失常模型大鼠的胃肌间c-kit阳性ICC含量比正常对照组明显升高(P<0.001). 结论:张氏大鼠胃电节律失常模型中作为起搏细胞的ICC的增加,可能导致异常的胃电起搏点的增加,从而引发胃电节律失常.

枳实含药血清对大鼠胃Cajal间质细胞内质网应激损伤的影响及机制

目的探讨枳实含药血清对大鼠胃Cajal间质细胞(ICCs)内质网应激(ERS)损伤的影响及机制。方法采用酶解法分离培养ICCs并行c-kit免疫荧光染色法鉴定细胞。使用衣霉素(Tm)构建ICCs内质网应激模型,4苯基丁酸(4-PBA)抑制内质网应激。血清药理学方法制备枳实含药血清。取对数生长期的ICCs,随机分为四组,ICCs组正常培养,ERS模型组予1μg/m L Tm处理,抑制剂组予含1μg/m L Tm和10 mmol/L 4-PBA处理,枳实组予1μg/m L Tm和20%枳实含药血清,每组作用时间均为24 h。透射电子显微镜观察胃ICCs内质网的超微结构;实时荧光定量PCR法检测ERS相关因子葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、激活转录因子6(ATF6) mRNA表达。结果成功分离、培养并鉴定ICCs。透射电子显微镜下正常ICCs的内质网结构正常,排列整齐;模型组ICCs细胞器减少,内质网肿胀,扩张、囊泡化改变、排列紊乱;枳实组ICCs内质网肿胀,呈局限性扩张。与ICCs组比较,ERS模型组GRP78、ATF6 mRNA表达升高(P均<0. 05);与ERS模型组比较,枳实组GRP78、ATF6 mRNA表达降低(P均<0. 05)。结论枳实含药血清可减轻ICCs细胞的ERS损伤,其机制可能与调控ERS ATF6通路有关。