加味七方胃痛颗粒含药血清对胃黏膜上皮细胞铁死亡的影响及机制研究

目的:探究加味七方胃痛颗粒含药血清对胃黏膜上皮细胞铁死亡的影响及机制。方法:GES-1细胞分为空白对照组、模型组、加味七方胃痛颗粒含药血清低浓度组、加味七方胃痛颗粒含药血清中浓度组、加味七方胃痛颗粒含药血清高浓度组、si-E-cad-NC+加味七方胃痛颗粒含药血清组、si-E-cad+加味七方胃痛颗粒含药血清组。CCK-8法检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡、ROS水平、线粒体膜电位和Fe~(2+)水平;qPCR检测E-cadherin、NF2、YAP、TEAD、TfR1 mRNA表达;Western Blot检测E-cadherin、Merlin、p-YAP、YAP、TEAD、TfR1蛋白表达。结果:与空白对照组比较,模型组GES-1细胞活力及E-cadherin、NF2(Merlin)、TEAD表达显著降低,细胞凋亡率、ROS水平、线粒体膜电位、Fe~(2+)水平、TfR1 mRNA及蛋白表达和p-YAP/YAP水平显著升高。与模型组比较,加味七方胃痛颗粒含药血清可逆转上述除TEAD外各指标的变化。给予加味七方胃痛颗粒的同时抑制E-cadherin表达则可抑制加味七方胃痛颗粒含药血清的作用。结论:加味七方胃痛颗粒可通过上调E-cadherin表达,活化NF2而拮抗Hippo通路,抑制胃黏膜上皮细胞铁死亡。

黑果枸杞多糖结构表征及对乙醇诱导胃黏膜上皮细胞损伤的影响

采用热水浸提法提取黑果枸杞多糖(Lycium ruthenicum Murr. polysaccharide,LRMP),解析其单糖组成、糖苷键连接方式、链构象等结构参数,并评价其对乙醇诱导胃黏膜上皮细胞(gastric mucosal epithelial cells,GES-1)损伤的保护效果。结果表明,LRMP由阿拉伯糖、木糖、半乳糖、葡萄糖、岩藻糖和半乳糖醛酸组成,结构末端主要由阿拉伯糖、木糖、葡萄糖和半乳糖残基组成,在溶液中呈典型的无规卷曲构象,均方半径为(80.4±1.0)nm。LRMP对GES-1细胞无毒性作用,质量浓度600μg/mL LRMP可以显著抑制乙醇对GES-1细胞造成的损伤,同时恢复细胞内超氧化物歧化酶的活性,降低GES-1细胞凋亡率。综上所述,LRMP作为功能性多糖在健康食品开发中具有潜力。

槟榔碱对人胃黏膜上皮细胞的毒性作用研究

本文旨在探讨槟榔碱对人胃黏膜上皮细胞GES-1的毒性作用。用不同浓度(60、90、120、150μg/mL)的槟榔碱处理GES-1细胞,并检测GES-1细胞活力、活性氧水平(Reactive Oxygen Species,ROS)和线粒体膜电位(Mitochondrial Membrane Potential,MMP),测定GES-1细胞还原型谷胱甘肽(Glutathione,GSH)水平、超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)活力、乳酸脱氢酶(Lactate dehydrogenase,LDH)活力、三磷酸腺苷(ATP)酶活力。测定肿瘤坏死因子-α(Tumor Necrosis Factor-α,TNF-α)、白介素-6(Interleukin 6,IL-6)、血管内皮生长因子(Vascular Endothelial Growth Factor,VEGF)、转化生长因子-β(Transforming Growth Factor-β,TGF-β)水平。结果表明,与空白对照组相比,槟榔碱刺激后GES-1细胞形态发生改变,细胞活力最低降低至24%,活性氧水平最高升至12.5倍,线粒体膜电位最低下降至10.4%。在150μg/mL槟榔碱刺激下,总ATP酶以及Na^(+)K^(+)-ATP酶活力分别下降至42.31%和39.84%,GSH和SOD分别下降了40.23%和34.1%,LDH上升了30.46%,TNF-α、IL-6、VEGF、TGF-β水平分别上升了4.67%、10.2%、23.14%和22.83%。结果表明槟榔碱能够产生氧化应激并诱发炎症因子,对GES-1细胞造成毒性损伤。

基于GEO基因芯片联合网络药理学及分子对接技术探讨参苓脾喜汤治疗慢性胃炎、胃黏膜上皮内瘤变、胃早期癌作用机制

目的 基于GEO基因芯片、网络药理学及分子对接技术探讨参苓脾喜汤防治慢性胃炎(CG)、胃黏膜上皮内瘤变(GIN)、胃早期癌(EGC)的作用机制。方法 从GEO数据库下载含CG、GIN、EGC基因芯片GSE130823,使用R4.1.1筛选共同差异表达基因。利用TCMSP数据库筛选参苓脾喜汤活性成分及对应靶点,使用R4.1.1对共同表达基因与药物靶点取交集,通过Cytoscape3.9.1软件构建中药-活性成分-靶点网络,并通过STRING数据库构建蛋白相互作用(PPI)网络并进行拓扑分析,以筛选核心靶点,使用R4.1.1对交集基因进行GO功能和KEGG通路富集分析。最后将排名靠前的药物活性成分与核心靶点蛋白进行分子对接验证。结果 共筛选出1 115个差异表达基因,参苓脾喜汤活性成分119种,靶点247个,主要活性成分包括槲皮素、豆甾醇、木犀草素等。预测得到参苓脾喜汤治疗CG、GIN、EGC潜在作用靶点22个,包括CHRM3、AR、ADRB2、DPP4等。GO功能和KEGG富集分析结果显示,参苓脾喜汤治疗CG、GIN、EGC主要涉及对cAMP、IL-17、TNF、离子跨膜转运蛋白活性的调节、钙信号通路等方面。分子对接结果显示,木犀草素与ALB、AR、DPP4有较强结合能力,槲皮素与ALB、DPP4有较强结合能力,豆甾醇与AR有较强结合能力。结论 参苓脾喜汤中多种活性成分可能通过cAMP、IL-17、TNF等信号通路,调控ALB、AR、DPP4、CYP3A4等靶点治疗CG、GIN、EGC。

电子胃镜病理活检在伴幽门螺杆菌感染的胃黏膜上皮内瘤变中的应用价值

目的探讨电子镜病理活检在伴幽门螺杆菌(Hp)感染的胃黏膜上皮内瘤变的应用价值。方法回顾性分析2022年2月至2023年10月医院就诊的120例拟行手术切除伴Hp感染胃黏膜上皮内瘤变患者,均行电子胃镜病理活检检查,并以手术病理检查结果为金标准,进行诊断一致性分析,并比较两种拟行手术切除检查方法对疾病不同病理类型、内镜分型、直径和分化程度的检出率。结果疑似伴Hp感染胃黏膜上皮内瘤变患者中,手术病理检查确诊86例,诊断一致性分析结果显示:电子胃镜检查和手术病理检查诊断结果高度一致(Kappa=0.898,P=0.000);两种诊断方式对低级别样瘤变、高级别样瘤变的检出率比较,差异无统计学意义(P>0.05);手术病理检查对浅表型病变、直径>2 cm病变和中高分化病变的检出率高于电子胃镜病理活检,差异有统计学意义(P<0.05)。结论电子胃镜病理活检与手术病理检查准确诊断伴Hp感染的胃黏膜上皮内瘤变具有一致性,但在鉴别疾病分型、肿瘤大小、分化程度方面要特别注意,需结合手术病理诊断结果,以提高诊断准确率。

甘草对胃黏膜上皮细胞损伤修复及多胺含量影响的研究

目的观察甘草含药血清对胃黏膜上皮细胞(GES-1)迁移、增殖及细胞内多胺(腐胺、精脒、精胺)含量的影响,探讨甘草促进胃黏膜损伤修复的作用机制。方法枪头(Tips)划痕法建立GES-1细胞损伤迁移模型,NIH Image J软件统计分析细胞迁移率;MTT法检测细胞增殖;柱前衍生高效液相色谱法测定细胞内多胺含量。结果 10%甘草含药血清可加速GES-1细胞迁移(与空白对照血清组比较P<0.01);在损伤后24 h或36 h,10%甘草含药血清可促进GES-1细胞增殖(与空白对照血清组比较P<0.01);10%甘草含药血清可提高胃黏膜上皮损伤修复过程细胞内腐胺、精脒和精胺含量(与空白对照组血清组比较P<0.05,P<0.01)。结论益气健脾中药甘草可促进胃黏膜损伤修复,其机制可能与提高细胞内多胺(腐胺、精脒、精胺)含量,促进细胞迁移和增殖有关。

不同基因型幽门螺杆菌对人胃黏膜上皮细胞引起免疫损伤的作用

幽门螺杆菌（Hp）是一种革兰氏阴性微需氧螺旋状细菌,其与慢性胃炎、胃溃疡、十二指肠溃疡和胃癌等疾病密切相关。国际癌症机构已将Hp列为Ⅰ级致癌因子。Hp感染在全世界非常普遍,然而只有少部分最终在其他诱因的共同作用下导致胃癌的发生,提示不同基因型的Hp在胃癌的发生发展中起了重要的作用。

MNNG、CDCA构建胃黏膜上皮细胞GES-1肠化生模型的可行性

目的探讨N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)、鹅脱氧胆酸(CDCA)构建胃黏膜上皮细胞GES-1肠化生模型的可行性。方法体外培养GES-1细胞,分别给予不同浓度CDCA、MNNG处理24 h,采用CCK-8法检测450 nm波长处各孔光密度(OD)值,确定CDCA、MNNG对GES-1细胞具有生长抑制作用,二者的10%抑制浓度(IC10)分别为0.14、51.89μmol/L。另取GES-1细胞随机分为CDCA组、MNNG组,分别加入IC10的CDCA、MNNG,同时设未加药物处理的细胞为对照组,培养24 h时采用实时荧光定量PCR法检测黏蛋白1(MUC1)mRNA、黏蛋白2(MUC2)mRNA及尾型同源框转录因子2(CDX2)mRNA相对表达量。结果与对照组比较,CDCA组、MNNG组MUC1 mRNA相对表达量均降低,MNNG组MUC2 mRNA相对表达量降低,组间比较P均<0.05。三组间CDX2mRNA相对表达量比较P>0.05。结论 CDCA、MNNG可抑制胃黏膜上皮细胞生长,可用于构建胃黏膜上皮细胞的肠化生模型;下调胃特异性基因MUC1表达、上调肠特异性基因CDX2表达可能是二者的作用机制。

检测胃黏膜上皮细胞微量元素、DNA、P_(53)、Ki-67、C-erbB_2、P21^(ras)研究中医脾虚证和胃癌前病变的关系

目的:探索中医脾虚证的病理生理学变化与胃黏膜癌前病变的关系。方法:对160例脾虚证胃黏膜均伴有肠上皮化生(intestinal metaplasia,IM)和/或低级别上皮内瘤变(low grade intraepithe1ial neoplasia,L-IN)患者,脾虚证分为脾气虚证(spleen Qi deficiency,SQD)、脾阴虚证(spleen Yin deficiency,SyinD)和脾虚气滞证(spleen deficiency with Qi stagnation,SDQS)三型和22例健康对照者为研究对象,采用现代科学仪器和技术检测胃黏膜上皮细胞核和线粒体的微量元素、DNA与胃黏膜P_(53),Ki-67,C-erbB_2,P21^(ras)。结果:SDQS组与L-IN间在分子生物学上也无显著性的差异。结论:要定期随访检测以上指标。有利于早期发现慢性胃炎的癌变。

艾灸血浆对乙醇损伤的人胃黏膜上皮细胞的影响

目的:探讨艾灸血浆对乙醇损伤的离体人胃黏膜上皮细胞(GES-1)的保护作用.方法:将离体胃黏膜上皮细胞(GES-1)分为4组,即空白组、乙醇损伤模型组、艾灸穴位血浆组和艾灸非穴位血浆组.艾灸人体足三里、中脘、关元穴及非穴对照点前后提取并制备艾灸前后的血浆.以含8%乙醇培养液作用于后3组胃黏膜上皮细胞,建立胃黏膜上皮细胞损伤模型.各组分别加入预先提取的灸前血浆、艾灸穴位血浆和艾灸非穴位血浆.采用MTT法检测细胞抑制率,比色法检测细胞培养上清液中液乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的含量,流式细胞技术检测细胞周期及细胞凋亡率.结果:模型组与空白组比较,细胞A490降低(P<0.01),抑制率明显上升;与模型组比较,艾灸穴位血浆组A490升高(P<0.01),细胞抑制率降低;艾灸非穴位血浆组A490低于艾灸穴位血浆组A490(P<0.01),而细胞抑制率高于艾灸穴位血浆组(26.52%vs22.06%).与空白组比较,模型组培养液中LDH、MDA、SOD含量均有所提高(P<0.01或0.05);艾灸穴位血浆组与模型组比较,SOD水平升高(P<0.01),LDH、MDA含量降低(均P<0.01);艾灸非穴位血浆组与艾灸穴位血浆组比较,SOD水平下降(34.11kU/L±4.14kU/Lvs38.73kU/L±4.34kU/L,P<0.05),LDH和MDA水平升高(9.26U/L±1.62U/Lvs7.38U/L±1.28U/L;3.91μmoL/L±0.11μmoL/Lvs3.75μmoL/L±0.11μmoL/L,均P<0.05).艾灸非穴血浆组与艾灸穴位血浆组比较,细胞周期中各期无明显差异(均P>0.05),凋亡率升高(1.56%±0.19%vs1.24%±0.08%,P<0.01).结论:艾灸足三里、中脘、关元穴后提取的人体血浆对受损人胃黏膜细胞具有一定的保护作用.

小檗碱减轻幽门螺杆菌诱导的人胃黏膜上皮细胞损伤

目的:探讨小檗碱(Ber)对幽门螺杆菌(Hp)诱导的人胃黏膜上皮细胞GES-1损伤的保护作用及机制。方法:采用Hp感染GES-1细胞,加入小檗碱(5,10和20μmol/L)和细胞外调节蛋白激酶(ERK1/2)抑制剂PD98059(20μmol/L)共培养。MTT法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡,ELISA法检测细胞白细胞介素(IL)-1β及IL-8的水平,比色法检测细胞乳酸脱氢酶(LDH)活性并以Western blot法检测细胞Bax、Bcl-2、p-ERK1/2的蛋白水平。结果:与对照组比较,Hp可抑制GES-1细胞活力、促进GES-1细胞凋亡、诱导GES-1细胞分泌IL-1β和IL-8、增加LDH活性、增加GES-1细胞内p-ERK1/2及Bax蛋白水平并降低Bcl-2蛋白水平,差异均有统计学显著性(P<0.05);与Hp感染组比较,中、高剂量小檗碱均可逆转Hp对GES-1细胞活力、细胞凋亡、细胞IL-1β及IL-8分泌、LDH活性和GES-1细胞内p-ERK1/2、Bax及Bcl-2蛋白水平的影响,差异均有统计学显著性(P<0.05);与高剂量小檗碱组比较,PD98059联合小檗碱可进一步逆转Hp对GES-1细胞上述指标的影响,差异均有统计学显著性(P<0.05)。结论:小檗碱可通过抗炎、增加细胞活力和抗凋亡来减轻Hp诱导的GES-1细胞损伤,其机制可能与抑制ERK1/2通路有关。

白扁豆提取物对幽门螺杆菌损伤人胃黏膜上皮细胞的修复作用

对数种中药提取物进行筛选后发现,白扁豆提取物对人胃黏膜上皮(human gastric epithelial cell line,GES-1)细胞增殖具有良好的促进作用,在500.00 μg/mL浓度作用下GES-1细胞存活率可提高到125.80%。同时,白扁豆提取物可明显抑制幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)生长。以15.62μg/mL白扁豆提取物作用24h后,对Hp抑制率达62.61%。白扁豆提取物对脲酶活性也有明显的抑制作用,其IC50值为397.14μg/mL。以Hp侵染GES-1细胞24 h建立GES-1细胞损伤模型,经500μg/mL白扁豆提取物作用12h后,GES-1细胞存活率可达到95%以上。因此,白扁豆可能通过促进GES-1细胞增殖的同时抑制Hp及脲酶活性,从而对Hp损伤GES-1细胞起到修复的作用。

氯吡格雷对人胃黏膜上皮细胞增殖作用的影响及其机制的研究

目的探讨氯吡格雷(Clopidogrel)对人胃黏膜上皮细胞(GES-1)增殖作用的影响及其机制。方法建立GES-1单层细胞模型,将细胞分为阴性对照组、氯吡格雷24 h干预组、氯吡格雷48 h干预组、氯吡格雷72 h干预组,采用MTT比色法和流式细胞术检测各组细胞增殖、凋亡情况;采用Western blotting检测各细胞组紧密连接蛋白Occludin的表达量。结果与阴性对照组相比,氯吡格雷24 h干预组、氯吡格雷48 h干预组、氯吡格雷72 h干预组的细胞增殖明显受到抑制(P<0.05);Western blotting结果显示:与阴性对照组相比,后三组的Occludin表达下降。结论在GES-1细胞模型中,氯吡格雷可能通过降低Occludin的表达,从而损伤GES-1细胞。

Ghrelin对大鼠胃黏膜上皮细胞胃酸分泌的调节作用

目的:探讨Ghrelin对胃外分泌功能的作用.方法:从断奶大鼠中获得新鲜胃黏膜组织.分离培养胃黏膜上皮细胞,培养30h后,实验组换为分别含有1×10-4、1×10-3、1×10-2和1×10-1μmol/LGhrelin的新鲜培养液,对照组换为不含Ghrelin的正常新鲜培养液.继续培养4h,收集培养液和细胞,分别测定细胞的相对活性(MTT法)、培养液中胃蛋白酶活性、细胞中H+-K+-ATPasemRNA表达和活性.结果:实验组中细胞的相对活性与对照组相比没有发生明显的变化;1×10-3μmol/LGhrelin可显著提高胃蛋白酶的活性(P<0.05).1×10-3μmol/LGhrelin可显著增加细胞中H+-K+-ATPasemRNA的表达(P<0.05),1×10-4和1×10-3μmol/LGhrelin明显增加了胃黏膜上皮细胞中H+-K+-ATPase的活性(均P<0.05).结论:Ghrelin体外作用于胃黏膜上皮细胞可刺激胃蛋白酶和胃酸的分泌.

健胃愈疡颗粒对胃溃疡复发大鼠胃黏膜上皮细胞凋亡及其相关调控基因影响

目的 :以IL 1β所致胃溃疡复发大鼠为模型 ,从胃黏膜上皮细胞凋亡以及Bcl 2、Bax和MK表达方面 ,探讨健胃愈疡颗粒抗胃溃疡复发的分子生物学机理。方法 :Okabe乙酸法制作大鼠胃溃疡模型 ,ipIL 1β制作复发模型。观察胃组织病理学变化 ,检测胃黏膜上皮细胞凋亡、Bcl 2、Bax和MKmRNA表达。结果 :健胃愈疡组溃疡复发率、凋亡指数 (AI)明显降低 ,Bcl 2、Bcl 2 Bax、MKmRNA表达明显高于模型复发组。结论 :健胃愈疡颗粒可增加Bcl 2及MK的表达 ,减少胃黏膜上皮细胞凋亡 ,降低IL 1β所致的大鼠胃溃疡复发。

三种中药有效成分对转化的人胃黏膜上皮细胞的抑制作用

目的明确三种中药有效成分三七皂甙(PNS)、黄芪皂甙(AS)及黄芩甙(Ba)单用或配伍对永生化的人胃黏膜上皮细胞GES1以及经过幽门螺杆菌(HP)培养滤液转化后的GES1细胞(HP细胞)增殖能力的影响。方法以HP培养上清滤液作用GES1细胞,通过描绘细胞生长曲线、软琼脂集落形成试验和裸鼠成瘤试验检测细胞恶性转化程度。分别以不同浓度的三七皂甙、黄芪皂甙及黄芩甙处理两种细胞,四甲基谷氮唑盐(MTT)法及软琼脂集落形成试验检测三种药物单用及配伍对细胞增殖活性的影响。结果HP滤液作用后的GES1细胞增殖活性升高,软琼脂集落形成能力增强,但仍不能在裸鼠体内成瘤。PNS、AS及Ba对GES1和HP细胞的增殖活性有明显的抑制作用,并有随剂量增加作用增强的趋势。三药配伍应用对两种细胞的抑制作用增强,还能明显抑制HP细胞的软琼脂集落形成能力。结论HP滤液能促进GES1细胞的进一步转化。三种药物有效成分显著抑制GES1及HP细胞的增殖,三药配伍抑制作用有不同程度的增强。

血清药理学方法观察氯吡格雷对人胃黏膜上皮细胞GES-1的影响

背景:氯吡格雷可引起胃肠道不良反心尤其是消化道出血,前期研究已证实氯吡格雷原药对人胃黏膜上皮细胞GES-1增殖具有抑制作用。然而,氯吡格雷经肝脏代谢后对胃黏膜上皮细胞是否具有损伤作用目前尚无报道。目的:通过血清药理学办法研究氯吡格雷含药血清体外对人胃黏膜上皮细胞侏GES-1的影响,以探讨氯吡格雷对人胃黏膜的损伤作用。方法:分离1例服用氯吡格雷(75 mg/d)一年而导致消化道出血患者的血清,并配置成浓度分别为5%、10%、15%、20%的含药血清,同时取该患者停用氯吡格雷10 d后的血清作为对照。与GES-1细胞共同培养24 h后,以倒置相差显微镜观察细胞形念学变化,MTT法和流式细胞术分别检测细胞增殖、凋亡情况。结果:与对照组相比,不同浓度的含药血清可使GES-1细胞变圆、核浓缩,对GES-1细胞均有抑制增殖、促进凋亡的效应,并呈一定的浓度依赖性。结论:氯吡格雷经肝脏代谢后的产物对人胃黏膜上皮细胞具有损伤作用。

幽门螺杆菌感染与胃黏膜上皮细胞凋亡

胃黏膜幽门螺杆菌感染与慢性胃炎、消化性溃疡及胃癌等发生密切相关,其具体致病机制特别是致癌机制尚不清楚.H.pylori(Hp)感染是否引起细胞凋亡数量的改变,成为探讨Hp致病机制的热门课题.现将我们的实验结果报告如下. 1 资料与方法 1.1 研究对象于1997年6月-1998年6月选取 20 例Hp阳性的慢性胃炎患者为实验组,其中男 11 例,女9例,平均年龄34.6岁(24～49岁).

Ghrelin对大鼠胃黏膜上皮细胞中H^＋ -K^＋ -ATP酶基因表达和活性的影响

为揭示Ghrelin对胃酸分泌的作用,从断奶大鼠中分离新鲜胃黏膜,培养胃黏膜上皮细胞,培养30 h后,试验组培养液更换为分别含有1×10-4μmol/L、1×10-3μmol/L、1×10-2μmol/L和1×10-1μmol/L Ghrelin的新鲜培养液,对照组换为不含Ghrelin的正常新鲜培养液。继续培养4 h后,收集培养液和细胞,分别测定细胞中H+-K+-ATPasemRNA表达和活性。结果表明:1×10-3μmol/LGhrelin可显著增加细胞中H+-K+-ATPasemRNA的表达(P<0.05),1×10-4μmol/L、1×10-3μmol/L和1×10-2μmol/L Ghrelin明显增加了胃黏膜上皮细胞中H+-K+-ATPase的活性。这表明Ghrelin体外作用于胃黏膜上皮细胞可刺激胃酸的分泌。

人胃黏膜上皮细胞介电谱的实验研究

在0.01~100 MHz范围内,使用交流电阻抗方法测量了人胃上皮GES-1细胞悬浮液的介电谱,通过介电谱的实部和虚部以及复平面图的分析,观察体积分数对GES-1细胞介电谱特性的影响.结果表明GES-1细胞的介电行为具有3个特征：（1）频率依赖性,即随电场频率的增加,其介电常数增量（Δε=ε-εh）减小,电导率增量（Δκ=κ-κL）增加;（2）体积分数依存性,即当体积分数增加时,介电常数最大增量（Δεmax）、电导率最大增量（Δκmax）和峰值（P1、P2、P3）随之增加;（3）具有3个特征频率（f1、f2、f3）,分别来源于细胞膜（f1）、细胞核膜（f2）和细胞核仁（f3）.