防风通圣散对肥胖症小鼠胆囊收缩素、胰高血糖素、促胰液素表达的影响

研究防风通圣散对于肥胖小鼠肠组织中胆囊收缩素、胰高血糖素、促胰液素的影响,探索防风通圣散治疗肥胖症的作用机理。方法以DOI小鼠为研究对象,高脂喂养8周建立单纯性肥胖小鼠模型,将小鼠随机分为空白组、模型组、中药组、西药组,每组6只,连续干预21天。观察并评价肥胖小鼠的体质量变化情况,油红染色观察脂肪组织病理学变化,ELISA法测定肥胖模型小鼠小肠组织中胆囊收缩素、胰高血糖素、促胰液素的表达水平,qPCR法检测于小鼠棕色脂肪中解耦连蛋白(UCP-1)mRNA变化。结果与模型组比较,中药组(防风通圣散)肥胖模型小鼠体质量减少,小鼠脂肪组织中染色减少,小肠组织胆囊收缩素显著升高,胰高血糖素显著升高,促胰液素显著升高。结论防风通圣散对肥胖小鼠的体质量具有抑制作用,可以减少脂肪组织中脂滴的数量与大小,其机制可能与升高肠道组织中的胆囊收缩素水平、胰高血糖素水平、促胰液素水平,提升棕色脂肪组织中的解耦连蛋白(UCP-1)mRNA水平有关。

八肽胆囊收缩素对谷氨酸诱导的海马星形胶质细胞GLT-1表达的影响

目的 探讨八肽胆囊收缩素(CCK-8)对谷氨酸(Glu)诱导的海马星形胶质细胞谷氨酸转运体1(GLT-1)表达的影响。方法 分离小鼠海马星形胶质细胞,检测不同浓度CCK-8对小鼠海马星形胶质细胞的毒性。将细胞分为对照组、Glu组、Glu+0.1μmol/L CCK-8组、Glu+0.5μmol/L CCK-8组和Glu+1.0μmol/L CCK-8组。MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,生化试剂盒检测细胞培养上清液中Glu含量,qRT-PCR检测GLT-1和谷氨酸/天冬氨酸转运体(GLAST)mRNA的表达,Western blot检测Caspase-3、Bcl-2、GLT-1和GLAST蛋白的表达,ELISA检测细胞培养上清中TNF-α的含量。结果 不同浓度的CCK-8对小鼠海马星形胶质细胞的增殖均无明显影响。与对照组相比,Glu组细胞增殖能力、细胞中Bcl-2蛋白、GLT-1、GLAST mRNA和蛋白表达水平显著降低(均P<0.01),细胞凋亡率、细胞外Glu含量、细胞中Caspase-3蛋白表达水平、细胞上清中TNF-α水平显著升高(均P<0.01);与Glu组相比,Glu+0.5μmol/L CCK-8组和Glu+1.0μmol/L CCK-8组细胞增殖能力、细胞中Bcl-2蛋白、GLT-1、GLAST mRNA和蛋白表达水平显著升高(均P<0.05),细胞凋亡率、细胞外Glu含量、细胞中Caspase-3蛋白表达水平、细胞上清中TNF-α水平显著降低(均P<0.01)。结论 CCK-8能够抑制Glu诱导的星形胶质细胞的炎症反应,促进GLT-1的表达,降低细胞外Glu的浓度,促进细胞增殖并抑制凋亡。

外源性八肽胆囊收缩素对急性胰腺炎的影响及其机制研究

目的研究外源性八肽胆囊收缩素(cholecystokininoctopeptide,CCK-8)对急性胰腺炎的影响,探讨CCK-8通过胆碱能抗炎通路抑制炎症的机制。方法采用SD大鼠建立急性胰腺炎模型,将SD大鼠随机分为四组各18只,分别为假手术组、模型组、模型制备联合CCK-8组(CCK-8组)、模型制备联合膈下迷走神经切断及CCK-8组(切断组),各组分别于3、6、9h分批处死SD大鼠,采用酶联免疫吸附测定试剂盒检测大鼠血清白介素(interleukin,IL)-6、肿瘤坏死因子(tumornecrosisfactor,TNF)-α水平,并观察大鼠胰腺组织病理情况。结果假手术组大鼠各时间点血清IL-6浓度较低,模型组大鼠血清IL-6浓度水平在6h时达到1个高峰。模型组大鼠各时间点IL-6浓度水平均分别高于假手术组大鼠对应时间点IL-6浓度水平;CCK-8组大鼠6h、9h的IL-6浓度水平明显低于模型组大鼠对应时间点IL-6浓度水平;切断组大鼠6h及9h点IL-6浓度水平明显高于CCK-8组大鼠对应时间点IL-6浓度水平,差异均有显著性(P<0.05)。假手术组大鼠血清TNF-α在9h时浓度达到1个高峰;模型组大鼠血清TNF-α浓度在6h时达到1个高峰。模型组大鼠各时间点TNF-α的浓度水平均高于假手术组大鼠对应时间点TNF-α浓度水平;CCK-8组大鼠6h及9h点TNF-α浓度水平明显低于模型组大鼠对应时间点TNF-α浓度水平;切断组大鼠6h及9h点TNF-α浓度水平明显高于CCK-8组大鼠对应时间点TNF-α浓度水平,差异均有显著性(P<0.05)。CCK-8组3、6、9h各亚组胰腺镜下改变较模型组轻,切断组3、6、9h各亚组胰腺病理改变较CCK-8组重。假手术组大鼠各时间点胰腺组织胰腺损伤评分较低;模型组大鼠胰腺损伤评分随时间推移,分值逐渐增加,各时间点评分均高于假手术组大鼠对应时间点的胰腺损伤评分(P<0.05);CCK-8组大鼠各时间点胰腺损伤评分呈逐渐增加趋势,各时间点胰腺损伤评分均低于模型组大鼠对应时间点胰腺损伤评分(P<0.05);切断组大鼠各时间点胰腺损伤评分均高于CCK-8组大鼠对应时间点评分(P<0.05),但较模型组各时间点胰腺损伤评分差异不显著。结论CCK-8可以激活迷走神经胆碱能抗炎通路,促进迷走神经乙酰胆碱的释放,参与炎症反应的调节,能减轻了急性胰腺炎的炎症反应。

急性胆囊炎患者胆囊切除术后血清CCK-8、TREM1水平与发生感染的关系

目的分析急性胆囊炎(AC)患者胆囊切除术后血清胆囊收缩素-8(CCK-8)、髓系细胞触发受体1(TREM1)水平与发生感染的关系。方法将该院2020年12月至2022年12月收治的70例胆囊切除术后发生感染的AC患者纳入研究组,66例胆囊切除术后未发生感染的AC患者纳入对照组。采用酶联免疫吸附试验检测血清CCK-8、TREM1水平。采用Pearson相关分析胆囊切除术后发生感染AC患者血清中CCK-8、TREM1水平与炎症因子水平的相关性。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清CCK-8、TREM1水平对AC患者胆囊切除术后发生感染的诊断价值。采用多因素Logistic回归分析AC患者胆囊切除术后感染的影响因素。结果研究组与对照组有胆囊结石、胆囊周边积液比例比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,研究组血清CCK-8水平明显降低,TREM1水平明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。研究组C反应蛋白(CRP)、白细胞介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。胆囊切除术后发生感染的AC患者血清CCK-8水平与CRP、IL-8、TNF-α水平均呈负相关(P<0.05),TREM1水平与CRP、IL-8、TNF-α水平均呈正相关(P<0.05)。ROC曲线分析显示,血清CCK-8与TREM1联合检测诊断AC患者胆囊切除术后发生感染的曲线下面积(AUC)明显大于CCK-8、TREM1单独检测的AUC(Z=5.703,P<0.001;Z=4.584,P<0.001)。有胆囊结石、胆囊周边积液及血清CCK-8水平降低、血清TREM1水平升高均为AC患者胆囊切除术后发生感染的危险因素(P<0.05)。结论胆囊切除术后发生感染的AC患者血清CCK-8水平降低,TREM1水平升高,二者联合检测能够提高对AC患者胆囊切除术后发生感染的诊断价值。

外源性八肽胆囊收缩素对谷氨酸诱导大鼠大脑皮层神经元凋亡的保护作用研究

目的探讨外源性八肽胆囊收缩素(CCK-8)对谷氨酸诱导体外大鼠大脑皮层神经元损伤模型中神经细胞凋亡的保护作用及其可能作用机制。方法不同浓度CCK-8处理体外培养的大鼠大脑皮层神经元,MTT法检测细胞存活情况并筛选合适浓度。培养大鼠大脑皮层神经细胞并用谷氨酸(Glu)处理建立神经元损伤模型,分为模型组、CCK-8组,另设对照组。采用流式细胞术检测细胞周期与凋亡率;Flou-4实验检测各组细胞Ca^(2+)水平;实时定量PCR法检测B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)、Bcl-2相关蛋白(Bax)mRNA表达情况;Western blot检测Bcl-2、Bax、cleaved caspase-3蛋白表达情况。结果与对照组比较,模型组神经元细胞存活率、G_(1)期细胞分布比例、Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平降低,S期、G_(2)/M期细胞分布比例、细胞凋亡率、Ca^(2+)水平、Bax和cleaved caspase-3蛋白表达水平升高(P<0.05)。与模型组比较,CCK-8组神经元细胞存活率、G_(1)期细胞分布比例、Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平升高,S期、G_(2)/M期细胞分布比例、细胞凋亡率、Ca^(2+)水平、Bax和cleaved caspase-3蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论CCK-8对谷氨酸诱导的神经元细胞凋亡有一定的抑制作用,可能是通过抑制钙离子内流,调节细胞内Bax/Bcl-2表达水平发挥作用。

胆囊收缩素(CCK)主动免疫对猪血液中CCK含量和器官中CCK基因表达的影响

目的:探讨CCK-8主动免疫对猪血清中CCK-8的含量和抗体滴度及器官中CCK基因表达的影响。方法:本实验选用平均体重为28.46kg,阉割的杜洛克×长白猪×约克夏三元杂交猪(DLY)8头,随机分为两个处理,每个处理4个重复,每个重复1头猪。实验组用CCK与人血清白蛋白的交联物(CCK-HSA)在D1进行基础免疫,分别在29、43和64d进行加强免疫。对照组用人血清白蛋白(HSA),免疫程序同实验组。在实验的D71对每只猪进行前腔静脉采集血液来测定血清中CCK-8的含量和CCK抗体的滴度。试验期77d,试验结束时屠宰所有试验猪,迅速取出垂体和空肠前段来测定CCK基因的表达水平。结果:实验猪的平均日采食量提高了13.97%(P>0.05);实验组血清中的CCK-8含量比对照组降低了19.77%,而抗体的滴度则升高了67.63%(P<0.01);实验组的空肠前段和垂体中CCK的mRNA含量显著低于对照组(P<0.05),血清中CCK-8的浓度与空肠前段和垂体中CCK基因表达的水平呈高度的正相关。结论:CCK-8主动免疫能抑制猪空肠前段和垂体中CCK基因的表达,从而降低猪血清中CCK-8的浓度。

胆胃舒颗粒预防胆囊结石及对胆囊收缩素受体(CCK-AR)基因表达的影响

目的:观察利胆健脾方胆胃舒颗粒对胆囊结石的预防作用及其作用机制。方法:实验用短毛雄性豚鼠90只,随机分为3组,每组30只,空白组:喂养普通饲料每天40g/只;模型组:喂养胆固醇结石诱石饲料40g/天/只;治疗组喂养胆固醇诱石饲料40g/天/只,并胆胃舒颗粒溶液灌胃2mL(含300mg胆胃舒颗粒)。实验2个月后观察胆囊内结石情况、胆囊收缩功能、及胆囊、胃窦平滑肌CCK-AR最大结合容量;结果:胆囊结石情况:空白组3.33%(1/30);模型组92.59%(25/27);治疗组:10.71%(3/28)。胆囊收缩功能:空白组为66.83%±5.34%;模型组43.06%±4.27%;治疗组67.93%±6.82%;胆囊平滑肌CCK-AR基因表达:空白组0.862±0.112;模型组0.521±0.083;治疗组0.792±0.098。结论:利胆健脾法可降低胆囊结石的形成,其作用机制可能通过提高胆囊CCK-AR基因表达,从而加强胆囊收缩功能,促使胆汁流动,防止胆囊结石的发生。

胆囊结石与胆囊收缩素受体(CCK-A)和血管活性肠肽(VIP)的关系研究

目的探讨胆囊动力学异常在胆囊结石形成中的作用。方法随意选择胆囊结石患者35例,胆囊息肉样病变患者25例,正常对照30例。B超测空腹胆囊容积。放射免疫法测定血浆中血管活性肠肽(VIP)的浓度,逆转录-聚合酶链反应(rt-PCR)法测胆囊黏膜中胆囊收缩素(CCK-A)受体表达数目。结果①胆囊结石组胆囊空腹体积明显大于其它两组(F=3.45,P=0.039);②胆囊结石组胆囊收缩率明显低于其它两组(F=5.747,P=0.005);③三组之间餐后VIP升高量无明显差异(F=0.768,P=0.47);④胆囊结石组胆囊收缩素(CCK-A)受体表达明显低于胆囊息肉样病变组(t′=4.390,P=0.022),差异具有显著性。结论①胆囊结石组空腹胆囊体积增大与其胆囊结石形成有关;②胆囊结石组胆囊收缩功能下降导致结石形成;③胆囊收缩素(CCK-A)受体表达低,使胆囊收缩功能减弱,促进胆囊结石的形成;④血管活性肠肽(VIP)与胆囊结石的形成无明显关系。

摄食抑制时鹅血浆八肽胆囊收缩素样免疫活性(CCK-8LI)的变化

采用放射免疫分析法,测定鹅外周血液中八肽胆囊收缩素样免疫活性(CCK-8LT),观察禁食和抱窝期摄食抑制状态下血浆 CCK-8LI 水平的变化.结果如下:(1)刚饲喂混合精料后,鹅血浆中 CCK-8LI显著升高,为禁食时水平的2.6倍,揭示外周血液中 CCK-8LI 在鹅摄食活动的短期调节中起作用;(2)在持续4周的抱窝期内,母鹅血浆 CCK-8LI 显著低于醒抱后恢复期水平.血浆中 CCK-8LI 是否参与鹅抱窝期摄食抑制的调控,有侍进一步研究.

八肽胆囊收缩素(CCK_8)的人工合成

本文报道了用液相法合成八肽胆囊收缩素(H-Asp-Tyr(SO_3H)-Met-Gly-Trp-Met-Asp-Phe-NH_2,ccK_8)。先分别合成C-端四肽和N-端四肽,然后缩合成八肽,并用温和的乙酰硫酸吡啶盐(PAS)法使其酪氨酸的酚羟基硫酯化。根据其氨基酸组成,层析行为和生物活性等证实产物为纯品。

甘丙肽（GAL）和胆囊收缩素（CCK）对垂体前叶催乳素和β－内啡肽释放的影响

甘丙肽（ＧＡＬ）和胆囊收缩素（ＣＣＫ）对垂体前叶催乳素和β－内啡肽释放的影响许荣 ，周远征，黄曼影，单惠敏，郭传海（中国医学科学院基础医学研究所生理研究室北京１００００５）本工作通过在体（ｉｎｖｉｖｏ）和离体（ｉｎｖｉｔｒｏ）实验，探讨甘丙肽（ｇａｌ?..

八肽胆囊收缩素(CCK-8)的抗阿片作用及其机理研究

本实验室较系统地研究了八肽胆囊收缩素（ＣＣＫ－８）的抗阿片作用。发现在不同的生理系统中ＣＣＫ－８的作用强度各不相同：在中枢痛觉调制方面，ＣＣＫ－８的抗阿片作用最强；在心血管中枢调节方面ＣＣＫ－８的抗阿片作用较弱；在大鼠腹腔巨噬细胞的免疫功能方面ＣＣＫ－８不显示抗阿片作用。关于ＣＣＫ－８抗阿片作用机理，可以发生在受体水平、Ｇ蛋白水平和第二信使水平。最终在胞内游离钙的水平上，发挥“生理性拮抗”作用。

禁食和复投喂对大口黑鲈胆囊收缩素及其受体基因表达的影响

为研究大口黑鲈(Micropterus salmoides)胆囊收缩素(Cholecystokinin,CCK)和其受体(Cholecystokinin receptor,CCKR)基因在摄食活动中的功能,研究通过克隆得到CCK1、CCK2、CCK1R和CCK2R基因的编码区序列,其长度分别为414、387、1368和1359bp,分别编码137、128、455和452个氨基酸。荧光定量结果表明CCK1和CCK2基因均在脑组织中高表达,其次为肠道组织,而CCK1R和CCK2R基因分别在胆囊和脑组织中高表达。在摄食后24h内,CCK1、CCK2、CCK1R和CCK2R基因的相对表达量呈先升高后下降趋势,其中CCK1、CCK1R和CCK2R基因在摄食后3h相对表达量达到最高值,而CCK2基因在摄食后12h相对表达量达到最高值(P<0.05)。禁食过程中CCK1、CCK1R和CCK2R基因相对表达量在禁食14d时显著升高(P<0.05)。复投喂后CCK1、CCK1R和CCK2R基因的相对表达趋势与餐后表达趋势相似,呈先升高后降低趋势。但在禁食和复投喂过程中CCK2基因相对表达量并无显著变化。综上所述,研究结果推测CCK1基因可能与CCK1R、CCK2R基因结合,作为饱腹信号因子,通过抑制食欲调控大口黑鲈摄食、消化等生理过程;而CCK2基因可能作为短期食欲因子调节摄食活动。研究结果可为大口黑鲈摄食活动调节提供理论依据。

胆囊收缩素（CCK8）对实验性神经细胞老化过程中脂褐素的影响

目的 观察CCK8对实验性神经细胞老化过程中脂褐素的影响。方法采用小鼠神经母细胞瘤细胞（NBA2）无血清培养建立神经细胞老化实验研究模型。以显微荧光分光光度术测定单个细胞内脂褐素自发荧光值作为细胞的老化指标，观察CCK8对这些指标的影响。结果在无血清培养条件下，细胞内脂褐素荧光值随培养时间的延长而累积性增加（P<0.01）。将CCK8加入无血清培养液，CCK8作用10天和15天都可显著降低细胞内脂褐素荧光值（P<0.01）。结论在无血清培养条件下，NBA2细胞由分裂增殖变为分化成熟老化，反映了神经细胞的老化过程，而CCK8可延缓细胞的老化过程。

八肽胆囊收缩素(CCK-8)的合成及其药理评价

本文用Merrifield固相合成法合成八肽胆囊收缩紊(CCK-8)。酪氨酸酚羟基硫酯化反应用吡啶-三氧化硫络合物进行,快原子轰击质谱和氨基酸组分分析结果与理论值一致。在离体豚鼠胆囊收缩活性实验中,证实了CCK-8的缩胆囊作用。

胆胃舒对豚鼠胆囊收缩素受体(CCK-A)的影响

目的:观察利胆健脾方-胆胃舒预防胆囊结石的作用,并探讨其作用机理。方法:将实验豚鼠分为3组:其中空白组30只:每天每只豚鼠喂养普通饲料40 g;模型组30只:每天每只豚鼠喂养胆固醇诱石饲料40 g;治疗组30只:每天每只豚鼠喂养胆固醇诱石饲料40 g,同时给胆胃舒胶囊溶液灌胃2 mL(含300 mg胆胃舒)。2个月后检查胆囊成石情况、胆囊收缩功能、及胆囊CCK-AR最大结合容量;结果:2个月后各组胆囊结石情况:空白组成石率3.33%;模型组成石率92.59%,治疗组成石率10.71%;2个月后各组胆囊收缩功能:空白组为66.83%±5.34%;模型组为43.06%±4.27%;治疗组为67.93%±6.82%。2个月后各组胆囊CCK-AR最大结合容量:空白组62±15 fmol/mg pro;模型组30±11 fmol/mg pro;治疗组58±12 fmol/mg pro。结论:应用胆胃舒胶囊后,实验动物胆囊结石成石明显减少,说明胆胃舒胶囊具有减少胆石形成的作用,可能通过提高胆囊CCK-AR的表达,从而促进胆囊收缩,强化胆汁流动,防止胆囊结石的发生。

缺锌对幼年大鼠海马胆囊收缩素(CCK)神经元的影响

为观察缺锌对海马胆囊收缩素(CCK)神经元特异性的影响,采用液体缺锌饲料灌胃建立单纯缺锌模型,通过光镜免疫组化ABC法结合图像分析技术,观察和比较了缺锌幼年大鼠(二月龄)海马胆囊收缩素(CCK)神经元的形态学变化。结果发现。缺锌15d时,幼年大鼠海马CCK神经元的数目和免疫反应强度明显降低,但神经元的胞体截面积和无明显变化,CCK神经元的分布模式没有区别。上述结果提示:缺锌对海马CCK神经元的特异性影响是CCK神经元的数目和含量减少,其原因可能与缺锌对CCK神经元的合成和释放能力影响有关。这种变化可能是缺锌影响儿童学习和记忆功能的原因之一。

八肽胆囊收缩素(CCK-8)对抗电针镇痛及电针耐受机理的初步探讨

本文采用电生理学方法,以大鼠丘脑束旁核痛兴奋神经元(PEN)和痛抑制神经元(PIN)的电活动变化为才旨标,在细胞水平上研究八肽胆囊收缩素(CCK-8)与电针镇痛和电针耐受机理的关系.结果表明:电针大鼠“足三里”穴位可抑制PEN和兴奋PIN的电活动,产生镇痛效应;脑室注射CCK-8可取消电针对PEN和PIN放电的影响;而无硫CCK-8对呈现电针效应的PEN和PIN的电活动无影响.长时间电针(六小时)可使PEN和PIN的放电对再次电针无明显变化,亦即产生对电针镇痛的耐受效应.推测,内源性CCK-8可能参与电针耐受的形成.

八肽胆囊收缩素在吗啡依赖及戒断大鼠相关脑区的表达变化

目的:探究慢性吗啡依赖及戒断大鼠相关脑区八肽胆囊收缩素(CCK⁃8)表达的变化。方法:利用Wistar大鼠建立慢性吗啡依赖及戒断模型,分为对照组(control)、吗啡依赖组(MOR)、纳洛酮催促戒断组(NAL)。Gellert⁃Holtzman评分评价吗啡成瘾及戒断程度,采用免疫组织化学和原位杂交技术分别检测相关脑区CCK⁃8蛋白及CCK mRNA表达的变化。结果:戒断组Gellert⁃Holtzman评分与对照组和吗啡依赖组比较显著增加;前额叶皮质(PFC)、黑质致密部(SNc)、中脑腹侧被盖区(VTA)CCK⁃8及CCK mRNA表达依赖组较对组明显升高,戒断后表达下降;杏仁核、蓝斑(LC)吗啡依赖后CCK⁃8及CCK mRNA表达较对照组显著增高,海马齿状回(PoDG)、杏仁核、LC戒断后较依赖组表达进一步升高;尾壳核(CPU)、伏隔核(NAc)、中脑导水管周围灰质(PAG)未检测到CCK⁃8及CCK mRNA的表达。结论:CCK⁃8参与了大鼠吗啡依赖与戒断过程并具有脑区特异性。