胆固醇结石病的发生机制

胆石病是常见病,患病率在10%左右.近期,胆固醇结石病与代谢综合征,肠肝轴脂质代谢异常受到关注.本文论述胆固醇结石发病机制的研究领域中有关胆汁胆固醇的主要来源,肠道吸收胆固醇,胆囊运动的调节,胆固醇的载体以及代谢综合征的进展,并提出胆囊结石病基础研究的若干任务.

胆汁酸代谢与胆固醇结石病

胆汁酸是胆汁的主要成分,由胆固醇在肝脏内转化合成。胆汁酸具有调节胆固醇饱和度和排除机体过多胆固醇的作用。胆固醇过饱和是胆固醇结石病发病机制中的重要因素。本文综述胆汁酸代谢与胆固醇结石病发病关系的研究进展。

Lith基因和胆固醇结石病

胆固醇结石病是遗传病 ,1 995年发现了首个小鼠致石基因Lith 1基因 ,在随后的研究中又相继发现了其他Lith基因及其可能的功能。人类基因组和小鼠间有一定的同源性 。

胆囊胆固醇结石病的遗传基础

胆囊胆固醇结石病的发生与胆汁胆固醇过饱和、成核缺陷以及胆囊收缩功能异常有关 ,同时受到遗传因素的影响。为进一步探索胆石病发病机制 ,复习近年来国内外胆石病的遗传基础研究取得的进展。

胆固醇结石病和代谢综合征的关系

近年来,代谢综合征(MS)和胆石病的发病率在我国均呈逐年上升趋势。流行病学研究显示两者具有一定的相关性,且MS导致的脂质代谢异常,可能引起胆囊胆汁胆固醇过饱和,并促进胆石的形成。此文就MS与胆固醇结石的相关性及其可能的发病机制作一综述。

肠道菌群改变与胆固醇结石病

胆固醇结石病(简称‘胆石病’)是临床常见疾病之一。在西方国家,其发病率达10%~20%。在我国,随着经济发展、生活水平提高和生活习惯改变,也呈上升趋势。笔者对上海地区人群调查显示,其发病率接近10%[1]。回顾国内外研究,与胆结石的形成有关的病理生理机制包括[2]:胆固醇过饱和胆汁形成、胆囊运动障碍以及胆汁中促/抗成核因子平衡破坏,加速胆固醇结晶形成。

胆固醇结石病小鼠胆囊组织中Rho-ROCK信号、钙调信号相关分子的表达及意义

目的观察胆固醇结石病(胆石病)小鼠胆囊组织中Rho-ROCK信号和钙调信号相关分子的表达,探讨其在胆固醇结石形成过程中的作用。方法将40只C57BL/6小鼠随机分为对照组和胆石组各20只,对照组给予正常饮食,胆石组给予高脂饮食诱导胆石病模型,连续8周。小鼠麻醉,剖腹观察胆囊的结石形成情况。胆总管插管,收集胆汁,采用荧光探针检测胆汁中的钙离子(Ca^2+)水平;眼球取血,采用HITACHI自动分析仪检测胆汁和血清总胆固醇和高密度胆固醇(HDL-C)含量,并计算非高密度脂蛋白胆固醇含量。小鼠脱颈椎处死,取胆囊组织,采用HE染色法观察胆囊组织的病理变化;采用RT-PCR法和Western blotting法检测胆囊组织中Rho-ROCK信号相关分子(RhoA、RhoB、ROCK)和钙调信号相关分子[肌球蛋白轻链激酶(MLCK)、磷酸化的肌球蛋白轻链(p-MLC)、肌球蛋白轻链磷酸酶(MLCP)]mRNA及蛋白表达。结果对照组胆囊无结石和胆泥形成,胆石组胆囊出现胆结石6只、胆泥5只,其余9只未造模成功被排除。与对照组相比,胆石组胆汁分泌率和胆汁中的Ca 2+水平下降,胆汁和血清总胆固醇、非高密度脂蛋白胆固醇升高(P均<0.05)。病理检查显示,胆石组胆囊组织出现炎症细胞浸润及胆囊壁增厚等炎症迹象。胆石组胆囊组织中RhoA、RhoB、ROCK、MLCK、p-MLC mRNA及蛋白表达较对照组下降,MLCP mRNA及蛋白表达较对照组升高(P均<0.05)。结论胆石病小鼠胆囊组织中Rho-ROCK信号和钙调信号相关分子的表达发生异常变化,Rho-ROCK和钙调信号相关分子可能参与了胆固醇结石的形成过程。

胆囊胆固醇结石病与胰岛素抵抗关系的临床研究

在 3 3对样本的病例 对照配对研究表明目前尚不能肯定胰岛素敏感性在胆囊胆固醇结石发病中的独立风险作用 ,但糖负荷试验 2h胰岛素水平和收缩压升高是胆结石发病的危险因素。结石患者体力活动较少 。

胆囊胆固醇结石病胆汁成分与线粒体单核苷酸多态性的关系

胆囊胆固醇结石病（胆石病）是一种常见外科疾病。最近研究显示，胆石病的发生可能与线粒体基因变异有关。胆汁胆固醇过饱和是胆石形成的基本条件，胆汁胆固醇饱和指数（CSI）是胆石病患者的重要表型。本研究试图探讨胆石病患者中具有不同线粒体单核苷酸多态性（SNP）位点个体的胆汁成分及胆汁CSI的差异，探究胆石病与线粒体DNA（mtDNA）变异的关系。

胆固醇7α-羟化酶基因多态性与胆固醇结石病关系的研究

目的探讨胆固醇7α-羟化酶(CYP7A-1)基因多态性与胆固醇结石病之间的关系。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法对160例胆固醇结石患者和94例正常人进行CYP7A-1基因A-204C基因座基因型分析。结果CYP7A-1基因A-204C基因座等位基因C、A频率在胆石组和对照组分别为83.75%、16.25%和81.91%、18.09%,2组间差异无统计学意义(P>0.05)。胆石组和对照组中AA基因型个体低密度脂蛋白(LDL-C)水平较AC、CC基因型患者显著降低(P<0.05)。结论CYP7A-1基因多态性与胆固醇结石无关,但与LDL-C水平有关。

胆固醇结石患者肝脏核受体基因表达的研究

目的研究胆囊胆固醇结石患者肝脏的核受体基因:肝脏X受体α(liver X receptor α,LXRα)、法尼醇受体(farnesoid X receptor,FXR)、人类固醇异生物受体(steroid xenobiotic receptor,SXR)及肝受体同类物1(liver receptor homolog 1,LRH-1)的表达,探讨胆固醇结石病的发病机理。方法27例胆囊胆固醇结石患者(胆石组),男6例,女21例,平均年龄(52.44±1.92)岁。10例无胆石症的胆囊息肉患者为对照(对照组),男6例,女4例,平均年龄(47.10±2.73)岁。测定胆石胆固醇成分及血清脂类成分:总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-ch)、载脂蛋白(Apo)B和ApoA1和胆汁脂类成分(胆固醇、磷脂和胆汁酸),并计算胆汁总脂和胆汁胆固醇饱和指数。实时定量PCR法测定肝脏LRH-1、FXR、SXR及LXRα基因的表达量。结果胆石组血清中HDL-ch浓度明显低于对照组〔(0.93±0.05)mmol/L vs(1.33±0.09)mmol/L〕,P<0.001;ApoA1浓度也低于对照组〔(1.19±0.05)g/L vs(1.36±0.06)g/L〕,P<0.05;血清ApoB、TC和TG2组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。胆石组胆汁呈胆固醇过饱和(胆固醇过饱和指数:1.17±0.02 vs 0.79±0.10,P<0.001);胆汁胆固醇摩尔百分比浓度较对照组升高〔(7.96±0.39)mol% vs(5.26±0.89)mol%〕,P<0.01;胆汁总脂较对照组明显下降〔(104.72±10.51)g/L vs(154.24±14.20)g/L〕,P<0.05;胆汁中胆汁酸和磷脂成分2组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。胆石组LRH-1表达高于对照组(14.18±1.80 vs 7.22±2.22),P<0.05,LXRα、FXR和SXR表达2组差异无统计学意义(P>0.05)。结论人类肝脏LRH-1的表达增高与胆囊胆固醇结石形成有关。

核受体在胆固醇性胆结石形成过程中的作用

胆固醇结石病(cholesterol gallstone disease,CGD)是一种常见的消化系疾病,其发病机制被认为是遗传、环境及生活方式共同作用的结果。研究表明:胆石病的发生与代谢综合征密切相关。核受体是配体依赖性的转录因子超家族成员之一,不仅调节机体生长发育、细胞分化,而且还对机体内许多生理,特别是代谢过程中的基因表达进行调控。该综述主要概述了肝X受体、法尼醇X受体、孕烷X受体和雌激素受体在胆固醇结石形成过程中的作用。

尼曼匹克C1样蛋白1及其与胆囊胆固醇结石形成关系的研究进展

脂质代谢异常与胆固醇结石病、动脉粥样硬化、冠心病等疾病发生关系密切。尼曼匹克C1样蛋白1（Niemann Pick C1 like 1,NPC1L1）是小肠参与胆固醇摄取的重要蛋白质[1],自其被发现以来,一直是研究和临床关注的热点。本文对NPC1L1蛋白及其基因多态性研究的最新成果作一综述,并对其在相关疾病治疗中的作用作一展望。

Ezetimibe抑制胆固醇结石形成的实验研究

目的 :探讨ezetimibe(Eze)对胆囊胆固醇结石形成的抑制作用。方法 :将30只雄性成年C57BL/6小鼠随机分为普通饲料喂养(chow)组、成石饲料喂养(LD)组和成石饲料加Eze组[Eze 5 mg/(kg·d)灌胃]。饲养8周后收集血清、肝脏、小肠和胆囊。观察胆囊内胆固醇结石形成情况。采用酶法测定血清、胆汁成分、肝组织胆固醇含量。采用实时定量PCR测定肝脏和小肠胆固醇代谢相关基因mRNA相对表达量。结果:chow组小鼠胆囊内未发现结石形成。LD组小鼠胆囊结石形成率为100%。Eze组完全无结石形成。Eze组小鼠小肠胆固醇吸收率(9.29%±4.32%),较LD组(58.62%±3.10%)和chow组(56.42%±2.67%)均显著降低(P<0.01)。LD组血清胆固醇[(4.99±0.50)mmol/L]和肝组织胆固醇含量[(22.92±2.39)mg/g]均较chow组[(2.87±0.06)mmol/L和(2.45±0.08)mg/g]显著增加(P<0.05)。Eze组血清胆固醇[(1.11±0.10)mmol/L]和肝组织胆固醇含量[(2.70±0.07)mg/g]均较LD组显著降低(P<0.05)。LD组小鼠胆汁胆固醇含量[LD组(10.87±1.46)mmol/L比chow组(3.67±0.58)mmol/L]和胆固醇饱和指数[LD组(1.42±0.19)比chow组(0.59±0.02)]显著增加。Eze组胆汁胆固醇含量[(2.72±0.29)mmol/L]和胆固醇饱和指数(0.57±0.07)均较LD组显著降低(P<0.01)。结论:Eze抑制小肠胆固醇肠道摄取,具有预防胆囊胆固醇结石形成的作用。

胆固醇代谢相关蛋白及相关特异microRNAs在胆固醇型胆囊结石患者血清中的表达及意义

目的探讨胆固醇型胆囊结石患者和健康对照人群血清中胆固醇代谢相关蛋白,以及可能靶向ABCA1的相关micro RNAs(mi RNAs)表达差异及意义。方法选取60例胆固醇型胆囊结石患者(结石组)和60例健康对照人群(非结石组)的血清样本,采用Western blot检测胆固醇代谢相关蛋白(SREBP-2、FXR、LXR、ABCA1、ABCB11)的表达,利用生物信息学软件预测可能靶向调控ABCA1的相关mi RNAs,采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-q PCR)对相关mi RNAs的表达进行检测。结果结石组血清中SREBP-2、FXR、LXR、ABCA1、ABCB11蛋白的表达量较非结石组降低(P<0.05),结石组血清中mi RNA-26a、mi RNA-144、mi RNA-758表达较非结石组升高(P<0.05)。结论胆固醇代谢相关蛋白差异性表达及可能靶向ABCA1的相关mi RNA在胆固醇型胆囊结石的发病过程中可能发挥极为重要的作用。

胆固醇性微结石病的胆汁中脂质组成

胆固醇性微结石病的定义是胆汁中悬浮有单水胆固醇晶体的沉淀物或者是胆红素钙颗粒,其在急性特发性胰腺炎的发病中具有重要意义。此研究的目的是分析这些病人胆汁中脂质组成是否与胆固醇性胆囊结石病人相似。 病人与方法:此研究共有3组病人。第1组为胆固醇性微结石病病人11例(男7例,女4例,平均年龄47岁),这些病人都有反复发作的特发性胰腺炎史,显微镜下见十二指肠液有5个或5个以上胆固醇结晶伴/不伴胆红素钙颗粒;第2组为胆固醇性胆囊结石病人20例(男10例,女10例,平均年龄53岁)。

肝脏肝X受体α和雌激素受体α表达与女性胆石病关系的研究

目的:研究肝脏肝X受体α(liverXreceptorα,LXRα)和雌激素受体α(estrogenreceptorα,ERα)表达与女性胆石病发生的关系。方法:采用定量PCR方法测定11例女性胆囊胆固醇结石患者和10例胆囊息肉患者肝脏LXRα、ERα以及胆小管侧膜ABC基因(ABCG5,ABCG8,ABCB11,ABCB4)的表达差异。结果:胆石病组患者LXRα基因表达较对照组增加31%,差异显著(P<0.05);ERα表达增加35%,与对照组比较差异无显著性(P>0.05)。ABCG5和ABCG8分别增加53%和64%,差异显著(P<0.05)。ABCB11和ABCB4表达无差异。结论:肝脏LXRα表达增加刺激ABCG5和ABCG8表达增加,从而促进胆汁胆固醇分泌是女性胆石病发生因素之一。ERα增加也可能参与了女性胆石病的发生,有待进一步研究。

清道夫受体A基因敲除对小鼠肝脏代谢及胆囊结石形成的影响

目的探讨清道夫受体A(scavenger receptor class A,SRA)基因敲除对小鼠肝脏代谢及胆囊结石形成的影响。方法 SRAKO小鼠以及C57BL/6野生型小鼠分别给予成石饲料(lithogenic diet,LD)和普通饲料(Chow)喂养8周后,观察胆囊成石情况,并采集肝脏和胆囊组织。采用免疫荧光染色法测定小鼠肝脏巨噬细胞标记F4/80的表达,Western印迹法测定小鼠肝脏SRA表达,QT-PCR法检测肝脏脂质代谢相关基因及炎症因子的表达,胆固醇试剂盒测定胆囊和肝脏组织胆固醇含量。结果 LD喂养8周后,SRAKO小鼠和C57BL/6野生型小鼠成石率均为100%,而普通饲料喂养均不成石;LD喂养的小鼠肝脏脂质沉积增加,炎性细胞和巨噬细胞浸润增加;LD喂养的C57BL/6野生型小鼠肝脏SRA蛋白表达较普通饲料增高,胆固醇代谢相关基因ABCG5、ABCG8和炎症因子IL-1、TNF-α表达增加(P<0.05)。LD喂养的SRAKO组小鼠胆固醇代谢基因ABCG8、胆汁酸磷脂基因ABCB4和炎症因子TNF-α表达均增加(P<0.05);LD喂养的小鼠胆囊组织中胆固醇酯和游离胆固醇含量均较普通饲料增加(P<0.05)。结论敲除SRA基因不改变小鼠胆囊结石形成率,高胆固醇可能更易导致胆囊结石的形成。

胆囊胆固醇结石患者肝脏受体类似物1基因表达差异的研究

目的研究胆囊胆固醇结石患者肝脏受体类似物1(LRH-1)表达,探讨其与胆固醇结石病发病的关系。方法27例胆囊胆固醇结石患者,男6例,女21例,平均年龄52．44岁。14例无胆石症者为对照(肝脏肿瘤2例,胆囊息肉患者12例),男9例,女5例,平均年龄47．50岁。测定胆汁脂类成分和计算胆汁胆固醇饱和指数。实时定量PCR法测定肝脏LRH-1 mRNA的表达量。结果胆石组LRH-1表达14．18±9．37,高于对照组7．86±6．19,(P＜0．05),胆石组胆汁呈胆固醇过饱和(1．17±0．27)。结论本研究提示肝脏LRH-1表达增高与胆囊胆固醇结石病有关。