胆固醇24S-羟化酶基因多态性与散发性阿尔茨海默病的相关性研究

目的探讨胆固醇24S-羟化酶（CYP46）基因多态性是否为散发性阿尔茨海默病（SAD）的遗传易感基因。方法选择SAD患者108例作为SAD组，同期选择年龄、性别相匹配的健康老年人118例作为对照组，用变性高效液相色谱法对CYP46基因的核苷酸序列进行扫描，比较2组变异位点的基因型和等位基因频率分布。结果在外显子-内含子交界区检出10个不同的变异位点，5个多态性位点（IVS2～150A〉G，IVS3＋43C〉T，IVS3—130C〉T，IVS5＋51G〉C，IVS7—65T〉C）是较好的遗传标记。SAD组和对照组在IVS2—150A〉G基因型AG＋GG的分布频率差异无统计学意义（χ^2=1．369，P=0．242）；SAD组和对照组等位基因G的分布频率差异无统计学意义（χ^2=0．003，P=0．956）。SAD组和对照组携带载脂蛋白E（apoE）ε4与非携带apoEε4者上述基因分布差异均无统计学意义（P〉0．05）。IVS2-150A〉G与SAD无相关性。结论CYP46是一个较为保守的基因，其内含子2上的多态性位点IVS2-150A〉G与SAD的发病无关。

胆固醇24S-羟化酶基因rs754203多态性与阿尔茨海默病发病风险的Meta分析

目的系统评价胆固醇24S-羟化酶(CYP46A1)基因rs754203多态性与阿尔茨海默病(AD)发病风险的关联强度。方法计算机检索PubMed、中国知网、万方数据库及维普数据库,检索时限从建库至2017年12月。搜集CYP46A1基因rs754203多态性与AD发病风险相关性的病例对照研究(RCT)。应用STATA11.0进行数据分析,应用比值比(OR)及其95%可信区间(CI)表示其关联强度。结果共纳入26组研究数据,累计病例组4 956例,对照组4 994例。Meta分析结果显示:去除4个对照组基因型不符合Hardy-Weinberg平衡后,等位基因模型、显性模型、隐性模型的合并OR值及95%CI分别是0.984(0.886～1.092)、0.947(0.820～1.094)、1.125(0.963～1.315),差异无统计学意义。按人群种族进行亚组分析后结果亦无明显改变。结论尚不能认为CYP46A1基因rs754203多态性与AD发病风险有关联。

脑胆固醇代谢对阿尔茨海默病的影响研究进展

阿尔茨海默病(alzheimer’s disease,AD)是以进行性认知功能障碍和行为损害为特点的原因不明的中枢神经系统退行性疾病,其发生发展与脂质代谢异常、淀粉样蛋白异常、血管炎症、神经递质异常、遗传变异等多种因素有关。全文主要针对脑胆固醇代谢对AD的影响研究进展进行综述。

激活LXR降低脑Aβ与胆固醇及相关基因转录的关系

探讨了激活肝X受体(liver X receptor,LXR)降低的β-淀粉样蛋白(beta-amyloid peptide,Aβ)与脑胆固醇和相关基因转录的关系。给予成年雄性C57BL/6J小鼠口服7 d对照溶剂或LXR的强激动剂TO901317(20mg/kg/d)后,用RT-PCR法检测ATP盒转运体A1(ATP binding cassette transporter A1,ABCA1)和胆固醇-24S-羟化酶(cholesterol-24S-hydroxylase,CYP46)的mRNA表达水平;用氧化酶-比色法测定脑总胆固醇含量;用放免法测定Aβ的含量。结果发现,小鼠口服TO901317后,脑组织中总胆固醇和Aβ的含量降低(P<0.05),LXR的靶基因AB-CA1和非靶基因CYP46的mRNA相对表达量明显增高(P<0.01),脑胆固醇的含量分别与Aβ含量呈正相关(r=0.57,P<0.05),与CYP46 mRNA的相对表达量呈负相关(r=-0.87,P<0.01)。表明激活LXR而降低的Aβ水平与负责胆固醇出胞和胆固醇出脑的相关基因转录增加,脑胆固醇水平降低有关。

血胆固醇与脑胆固醇关系的研究

目的研究血胆固醇(TC)对脑TC及脑β-淀粉样蛋白(Aβ)生成的影响。方法给高TC血症的W istar大鼠饲喂考来烯胺和邻苯二甲酸二异辛酯(d iethylhexyl phthalate,DEHP)促进胆汁酸的合成,降低其血TC后,测定其脑TC及Aβ的含量;以测定脑羟甲基戊二酰辅酶A还原酶HMG-COAR)和脑TC 24S-羟化酶(CYP46)的mRNA表达水平,反映脑TC的合成水平和转出水平。结果高TC血症大鼠脑Aβ含量明显增高(P<0.05),脑TC以及脑HMG-COAR和CYP46的mRNA表达水平未变;考来烯胺饮食组大鼠血TC水平明显降低(P<0.01),脑中Aβ含量和对照组一样保持在低水平,脑TC的含量有增高趋势,HMG-COAR mRNA表达增加(P<0.05),CYP46 mRNA表达无变化;DEHP饮食组血TC及脑中的Aβ无显著变化,脑TC的含量明显增高(P<0.05),脑HMG-COAR mRNA表达增加(P<0.05),CYP46 mRNA表达降低(P<0.01)。结论脑TC的含量不受血TC的直接影响,而与其自身代谢有关;整体动物脑Aβ生成量增加与脑TC浓度无关。

LXR激活对大鼠原代培养海马神经元胆固醇代谢关键酶基因表达的影响

为了探讨肝X受体(LXR)激活对海马神经元胆固醇代谢关键酶基因表达和胆固醇外流的影响,本研究取当天新生大鼠海马神经元行体外培养7d,随机分为TO组(培养液含2.0μmol/L的TO901317)和正常对照组(CON),继续培养48h。用胆固醇氧化酶-比色法检测TO组胆固醇的排出量;应用RT-PCR方法检测两组海马神经元ATP结合盒转运体A1(ABCA1)、HMG-CoA还原酶(HMGR)、胆固醇24-羟化酶(CYP46)、P450侧链裂解酶(P450scc)、固醇生成急性调节蛋白(StAR)和酰基辅酶A-胆固醇酰基转移酶1(ACAT1)等胆固醇代谢关键酶基因的mRNA的表达。结果显示:TO组mRNA表达上调的酶有HMGR、P450scc和StAR(P<0.01);表达下调的酶是ACAT1(P<0.01);表达不受影响的酶是CYP46。上述结果表明LXR激活、促进细胞内胆固醇外流时,海马神经元可能通过协调胆固醇代谢关键酶基因的表达,增加胆固醇的合成和向神经甾体的转化,抑制胆固醇的储备,而不影响胆固醇排出血脑屏障,从而维持细胞内胆固醇的动态平衡,保证神经元的正常生理功能。

老年大鼠空间学习记忆能力下降与海马背侧胆固醇含量增加的关系

目的探讨正常老年大鼠空间学习记忆能力变化与海马背侧组织胆固醇代谢之间的关系。方法实验大鼠分老年实验组和青年对照组,利用Morris水迷宫方法评价空间学习记忆能力,然后测定海马背侧组织胆固醇含量及代谢相关酶羟甲基戊二酸单酰CoA还原酶(3-hydroxy-3-methylglutaryl coenzyme A reductase,HMG-CoAR)和胆固醇-24S-羟化酶(cholesterol24-hydroxylase,CYP46)mRNA表达的变化。结果与青年对照组相比,老年实验组逃避潜伏期明显延长(P<0.05),海马背侧组织总胆固醇的含量明显升高(P<0.05),HMG-CoAR mRNA相对表达量无明显变化,CYP46mRNA相对表达量明显降低(P<0.05)。结论正常老年大鼠空间学习记忆能力下降可能与海马背侧组织胆固醇含量增加有关。

电针督脉对癫痫后脑损伤大鼠脑胆固醇代谢的影响

目的:探讨电针督脉对癫痫后脑损伤的神经保护作用及其神经保护作用机制。方法:采用侧脑室立体定位注射海人酸(KA)建立大鼠癫痫持续状态(SE)模型后进行电针督脉百会和筋缩穴合刺干预。首先通过尼氏染色实验观察电针督脉对痫症继发脑损伤是否有神经保护作用。进一步利用Western Blotting和Real-time PCR分析胆固醇代谢相关酶胆固醇24S-羟化酶(CYP46)在蛋白和基因水平上的变化。结果:长时间电针督脉可以有效改善KA诱导的SE继发脑损伤,调节胆固醇代谢酶CYP46的表达,并抑制KA诱导的CYP46 m RNA升高。结论:电针督脉可以通过影响胆固醇代谢途径对癫痫后的脑损伤发挥神经保护作用。

ApoE、CYP46基因多态性与阿尔茨海默病相关性分析

目的探讨中国汉族人群山西地区载脂蛋白E(ApoE)基因与胆固醇24S羟化酶(CYP46)基因第二内含子T/C多态性在阿尔茨海默病(AD)发病中的作用。方法应用聚合酶链反应限制性片段长度多态性(PCRRFLP)方法检测40例AD患者(AD组)和36名正常老年人(对照组)ApoE基因、CYP46基因多态性,进行关联分析。结果AD组与对照组比较,AD组等位基因ε4频率显著升高(χ2=16.151,P<0.001),AD组与等位基因ε4呈正关联(OR=9.281,CI2.650～32.497)。AD组与对照组CYP46基因的3种基因型分布总体差异有统计学意义(χ2=6.863,P=0.032),AD组T等位基因(T/T+T/C)频率明显高于健康对照组(χ2=4.823,P=0.028)。在ApoEε4携带者和非携带者中,CYP46基因T等位基因与AD无统计学意义(P>0.05)。结论中国汉族人群中,ApoE等位基因ε4和CYP46等位基因T可能是AD发病的危险因素,ApoE基因多态性和CYP46基因多态性与AD呈正相关。