33.5kDa胆汁泡蛋白促成核活性及其对泡形态学影响的研究

目的探讨３３．５ｋＤａ泡蛋白在胆固醇成核过程中的作用。方法利用超速离心技术结合ＰＡＧＥ电泳及区带定位法制备３３．５ｋＤａ泡蛋白；并将其加入Ｓｍａｌ模拟胆汁及综合模拟胆汁作为试验组，相应地以人体白蛋白为对照组，用偏光显微镜观察胆固醇成核时间，在透射电镜下观察模拟胆汁泡的大小、形态及数量。结果Ｓｍａｌ试验组成核时间为３．８３±０．３１天，对照组为１２．３３±０．５６天（Ｐ＜０．００１）；综合试验组平均成核时间为３．１７±０．１７天，而对照组长达１０．３３±０．２１天（Ｐ＜０．００１）。随着时间的推移，Ｓｍａｌ试验组及综合试验组泡逐渐增大、聚集、融合，最终形成巨大复层泡。两组均较相应的对照组变化显著（Ｐ＜０．０５）。结论３３．５ｋＤａ泡蛋白具有很强的促进泡形成、聚集、融合及胆固醇单水结晶析出的作用（成核活性约为０．３１０）。

胆汁泡蛋白酶联免疫吸附检测法的建立与初步临床应用

目的 建立胆汁泡蛋白快速检测法 ,作为防治胆石症临床研究的指标。方法 提取 3 3 .5kd胆汁泡蛋白 ,建立酶联免疫吸附检测法 (ELISA)标准曲线 ,并应用ELISA药盒测定正常人、胆石症患者胆汁和血清中泡蛋白含量 ,同时观察利胆冲剂、胆通胶囊等对泡蛋白的影响。结果 ELISA曲线方程为Y =0 .0 3 5X(r=0 .99) ;胆固醇性结石组胆囊胆汁和血清 3 3 .5kd泡蛋白含量分别为 (2 13 .4± 70 .1)mg/L、(179.8± 97.9)mg/L ,明显高于胆色素性结石症、非胆石症胆道疾病组以及正常人组 (P <0 .0 5) ,而后三者之间没有显著差异 (P >0 .0 5) ;利胆冲剂治疗两周后 ,胆汁和血清泡蛋白含量显著降低 ,而对照组和胆通胶囊治疗组未见明显变化。结论 胆汁泡蛋白的含量在不同人群差异显著 ;利胆冲剂等药物能降低胆汁和血清 3 3 .5kd泡蛋白含量 。

胆汁泡蛋白成核活性及其氨基酸序列分析的研究

分离胆汁泡蛋白,研究其成核活性和末端氨基酸序列。方法:应用超速离心法分离胆石症患者胆汁泡,运用SDS-PAGE电泳分离其中胆汁泡蛋白,并经HPLC系统纯化,研究其成核活性和N-端氨基酸序列。结果:分离到一种分子量为33.5kd的胆汁泡蛋白,其促成核活性为0.30,N-端氨基酸具有较多的极性氨基酸(天冬酰、苏、丝和谷氨酰等)。结论:33.5kd胆汁泡蛋白有明显的促成核活性,其N-端极性氨基酸可能参与促成核机制。

胆汁泡蛋白ELISA检测法的建立与初步临床应用

目的 建立胆汁泡蛋白快速检测法 ,筛选有效的胆石症防治手段。方法 获取 33.5kd胆汁泡蛋白 ,通过微量抗原免疫法获得高效价抗体 ,建立ELISA标准曲线 ;并应用ELISA法测定正常人、胆石症患者胆汁和血清中泡蛋白含量 ,同时观察不同溶石防石药物如利胆冲剂、胆酸钠等对泡蛋白的影响。结果 建立了ELISA标准曲线 ,其曲线方程为Y =0 .0 35X(r=0 .99) ;正常人胆汁和血清中 33.5kd泡蛋白含量都明显较胆固醇结石患者低 (0 .0 0 7± 0 .0 0 3)mg/mlvs(0 .0 5 0± 0 .0 11)mg/ml,(0 .0 15± 0 .0 10 )mg/mlvs(0 .0 45± 0 .0 2 1)mg/ml,P <0 .0 5 ;利胆冲剂治疗 2周后 ,胆汁和血清泡蛋白含量显著降低 ,而对照组和胆酸钠治疗组未见明显变化。结论 在不同人群胆汁泡蛋白的含量差异有显著性 ;利胆冲剂等溶石防石药物能降低胆汁和血清 33.5kd泡蛋白含量 ,改变胆汁致石性 。

胆汁泡蛋白在胆石症人群的含量分布及其临床意义

目的探讨胆汁泡蛋白在胆石症人群的含量分布,并观察利胆药物对其活性的影响。方法将纯化的泡蛋白免疫新西兰大白兔获得高效价抗体,建立 ELISA 标准曲线;并应用 ELISA 法测定正常人、胆石症病人胆汁和血清中泡蛋白含量同时观察不同溶石防石药物如利胆冲剂、胆酸钠等对泡蛋白的影响。结果建立了 ELISA 标准曲线,其曲线方程为 Y=0.035X(r=0.99);正常人胆汁和血清中 Mr 33 500泡蛋白含量都明显较胆固醇结石病人低[(0.007±0.003)g/L vs(0.050±0.011)g/L,(0.015±0.010)g/L vs(0.045±0.021)g/L,P<0.05];利胆冲剂治疗2周后,胆汁和血清泡蛋白含量显著降低,而对照组和胆酸钠治疗组未见明显变化。结论在不同人群胆汁泡蛋白的含量差异显著;利胆冲剂等溶石防石药物能降低胆汁和血清 Mr 33 500泡蛋白含量。

胆汁泡相与微胶粒相的蛋白质表达谱对比观察

目的采用比较蛋白质组学技术研究胆固醇结石患者胆囊胆汁的胆汁泡相与微胶粒相的蛋白质表达谱的差异，为探索胆石成因提供实验依据。方法密度梯度超速离心法制备胆汁泡相和微胶粒相，提取蛋白，构建相应的蛋白质表达谱，Image Master图像分析软件获得差异蛋白点信息，质谱鉴定差异表达蛋白。结果胆汁泡相与微胶粒相总蛋白浓度分别为（1．5358±0．0682）mg／ml、（7．1222±0．2022）mg／ml（P〈0．01）。两组组内蛋白质平均匹配点数分别为120±24和198±37，组间72±16个蛋白质点相互匹配，匹配率为45．30％。胆汁泡相与微胶粒相成功鉴定出差异蛋白质点8个，泡相中6个点表达上调，2个点表达下调。视黄醇结合蛋白（RBP）和白蛋白（HSA）丰度差异为免疫印迹法证实。结论初步建立了胆同醇结石患者胆囊胆汁的胆汁泡相和微胶粒相蛋白表达谱，分析、鉴定了差异蛋白点，为筛选胆固醇结石形成关键调控子提供依据。

胆汁泡蛋白ELISA检测法的ROC曲线分析

目的 评价用ELISAkit检测胆固醇性胆结石的准确性。方法 构建胆汁 335 0 0泡蛋白检测试剂盒 ,测定正常人、胆固醇性结石症、胆色素性结石症患者胆囊胆汁泡蛋白含量 ,用受试者工作特征 (receiveroperatingcharacteristic ,ROC)曲线分析评价不同截割点含量的试剂盒诊断价值。结果 胆固醇性结石组、胆色素性结石组和正常人群组胆囊胆汁 335 0 0泡蛋白含量依次为 (2 13± 70 ) μg/ml、(72± 5 5 ) μg/ml及 (6 5± 5 2 ) μg/ml,其中胆固醇性结石组泡蛋白含量明显高于胆色素性结石组和正常人群组 (F =6 0 9,P <0 0 5 ) ;当泡蛋白截割点含量为 14 3μg/ml时 ,该ELISAkit诊断胆固醇性胆石症的敏感度、特异度和符合率分别为 85 %、90 %和 88% ,ROC曲线下面积值高达 0 96。结论 不同人群存在胆汁泡蛋白含量分布的异质性 ,ELISAkit辅助诊断胆固醇性胆结石具有潜在的临床应用价值。

胆宁片对胆汁33.5kDa泡蛋白的影响

目的 :探讨中药胆宁片预防胆固醇结石形成的作用机制。方法 :建立胆汁成核因子 (33.5kDa泡蛋白 )ELISA快速检测法。监测正常人群组、胆固醇及胆色素结石组患者血清及胆汁中 33.5kDa泡蛋白浓度。将另一组胆固醇结石患者 (n =4 5 )按随机序贯原则分为胆宁片治疗组、胆酸钠治疗组及对照组。观察药物对 33.5kDa泡蛋白浓度的影响。结果 :胆固醇结石患者血清及胆汁中 33.5kDa泡蛋白含量显著高于正常人群和胆色素结石组。胆宁片治疗 2w后 ,血清及胆汁中 33.5kDa泡蛋白明显降低 (P <0 .0 5 )。结论 :胆宁片能降低血清和胆汁中的成核因子 (33.5kDa泡蛋白 )的含量 ,改变了胆汁中胆固醇的成石趋势。

超速离心法分离泡相胆汁

胆汁中的磷酯泡是胆固醇的主要携带者，在一般情况下，泡处于稳定状态，一旦存有影响其稳定性的因素，则单层泡趋于集聚成复层泡，进而胆固醇结晶成核乃至成石［１］。上述因素可能是泡相胆汁中的蛋白质［２］，后者仅占胆汁蛋白的２％［４］。本实验的目的在于通过超速离...

胆汁微泡附加压力及其成核意义的分析

根据压力因素对结晶过程的影响，讨论了胆汁微泡的附加压力及其成核意义；分析了胆固醇单水结晶只从胆汁微泡中生成的原因；以附加压力观点，说明了胆汁微泡聚集、融合现象的原因和意义。

综合模拟胆汁体系中未结合胆红素与胆固醇的溶解方式

目的 :在含有未结合胆红素 (UCB)、胆固醇、磷脂和胆盐的综合模拟胆汁体系中 ,探讨UCB与胆固醇的溶解方式及相互关系。方法 :检测UCB在Small模拟胆汁、胆汁泡 (胆固醇 磷脂泡 )溶液、泡对照组和本底对照组中的饱和溶解度 ,并分析比较Small模拟胆汁在加入过量UCB保存、过滤前后胆固醇含量的变化 ;同时观察UCB对胆固醇过饱和胆汁成核时间 (NT)的影响。结果 :微胶粒、泡能结合UCB而使其溶解 ,UCB能促进胆固醇结晶形成、NT缩短 ,且其差异显著。结论 :UCB溶解依赖胆固醇的溶解方式 ,同时又可能作为促成核因子参与胆固醇结石形成。

胆汁及血清中促成核泡相蛋白的检测及临床应用

目的 检测胆汁及血清中促成核泡相蛋白并进行初步临床研究。方法 应用酶联免疫吸附试验 (Enzyme linkedimmunosorbentassay ,ELISA)检测胆汁及血清中的胆汁泡蛋白含量 ,在胆囊结石患者及对照组中进行比较研究。结果 胆囊胆固醇结石患者胆汁及血清中的 335 0 0胆汁泡蛋白A值分别为 1.717± 0 .376和 1.5 5 6± 0 .710 ,而对照组分别为 0 .2 35± 0 .2 0 5和 0 .5 2 2± 0 .36 2 (P <0 .0 1)。结论 胆囊胆固醇结石患者胆汁及血清中 335 0 0胆汁泡蛋白含量高于非结石患者 。

猪胆可治猪病

①治猪消化不良:取猪胆一个,大蒜15克捣烂,加入适量绿豆粉混合均匀,制成杏核大小的药丸,每头猪每天喂2次,每次1丸,3天为1个疗程,一般2个疗程即愈。②治猪胃肠炎:取适量胆汁泡适量黄豆,以胆汁淹没黄豆为度,晾干后取出。当猪排粪时干时稀、发热、腹痛时灌服,每天2次,每次服20—30克。③治猪便秘:猪胆1个取汁,蜂蜜60克,豆油80毫升,充分混合后分2次给猪灌服。④治猪肺炎:取鲜猪胆1个,把压碎的明矾塞入胆内,以填满为度,晒干后研成粉末备用。50公斤以上的猪服用9—12克,50公斤以下服用5—7克。⑤治猪坏死杆菌病:取猪胆加等量生石灰,阴干后研成粉末,用以敷体表疮口,每天1次。