鹅去氧胆酸对小鼠肝灌流及原代肝细胞胆汁酸代谢通路相关基因表达的影响

目的通过小鼠原代肝细胞、离体肝灌流模型和整体动物实验,比较鹅去氧胆酸(chenodeoxycholic acid,CDCA)对胆汁酸代谢通路的影响。方法实验包括原代肝细胞、离体肝灌流和整体动物实验3部分,每部分均包括空白组和CDCA给药组(n=6),给药剂量分别为100μmol/L、100μmol/L和50 mg/kg。采用实时荧光定量PCR检测肝细胞或肝脏中Cyp7a1、Cyp8b1、Fxr、Shp、Bsep、Ostβ等基因表达的水平。结果在原代肝细胞的实验中,CDCA能显著上调Shp、Ostβ基因的表达(P<0.05),抑制Cyp7a1、Cyp8b1和Bsep基因的表达(P<0.05)。在离体肝灌流的实验中,CDCA能诱导Ostβ的基因表达(P<0.05),而在整体动物实验中,CDCA对Bsep基因的表达产生明显抑制(P<0.05)。结论由实验结果可知,在肝灌流及原代肝细胞中,CDCA对胆汁酸代谢通路的影响不同,在离体肝灌流模型与整体动物上的影响较一致。因此,在其开发与研究中,不能局限于体外细胞模型,还需要进一步的验证。

高脂饮食对C57BL/6J小鼠肝脏胆汁酸代谢调控通路基因的表达影响

目的探讨C57BL/6J小鼠在高脂饮食压力下,肝脏胆汁酸代谢调控通路基因表达的差异研究。方法选取日龄42~56 d SPF级C57BL/6J雄性小鼠22只,随机分为正常对照组、模型组。模型组经高脂饮食饲喂16周后,生化法测定血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)和高密度脂蛋白(HDL-C)水平,LC-MC进行肝脏胆酸(CA)、鹅脱氧胆酸(CDCA)含量分析,以肝脏组织为材料提取总RNA进行测序,采用主成分分析(PCA)、热图可视化、火山作图法等方法进行数据挖掘,并找出显著性变化的代表性基因。结果经高脂饮食饲喂16周后,模型组小鼠TC、LDL-C高于对照组(P<0.01,P<0.05),肝脏CA和CDCA显著下降(P<0.05)。胆汁酸代谢调控通路中Cyp3a11、Nr0b2、Hnf4aos和Fgfr4基因表达显著下调,Cyp39a1、Scp2、Hsd17b4基因表达显著上调,P均<0.05。结论高脂饮食对C57BL/6J小鼠胆汁酸代谢调控通路基因表达有显著影响。