硫酸化胆汁酸水解酶基因BSSH1克隆、表达及活性

目的从铜绿假单胞菌克隆出硫酸化胆汁酸水解酶(BSS)基因,并表达蛋白产物、研究其活性。方法通过序列比对确定铜绿假单胞菌中的目的序列BSS H1;通过PCR扩增获得BSS H1基因全序列,将其插入pET30b(+)载体,并将重组表达载体转化到大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达。通过优化诱导表达条件,实现重组蛋白BSS H1的高效表达;通过BSS-HSD酶联法初步研究其酶活性质。结果工程菌扩大培养3 h、以终浓度为1 mmol/L IPTG诱导5 h时蛋白表达量最高;研究发现BSS H1能催化底物生成3α和3β两种构型的羟基胆汁酸,在pH 8.5时,其活性分别是(632±65)U/L和(52±4)U/L。结论成功构建BSS H1高效表达菌株。BSS H1能催化生成两种立体异构体的特性在其他BSS中未见报道,其机制尚不明确,值得深入研究。

胆汁酸代谢与肠道微生物

肠道微生物与胆汁酸代谢密切相关,肠道微生物参与了胆汁酸在肠道中的修饰过程;肠道微生物通过法尼醇受体影响胆汁酸的合成;肠道微生物通过调节胆汁酸的代谢影响机体健康,反过来胆汁酸也可以通过调节肠道微生物菌群的组成影响机体健康。肠道微生物与胆汁酸代谢间的稳态影响着机体健康,现对肠道微生物与胆汁酸代谢及其相互影响做一综述。