胆盐输出泵基因V444A与特发性婴儿肝炎肝内胆汁淤积的关系

目的:探讨胆盐输出泵BSEP基因V444A(BSEPV444A)与特发性婴儿肝炎肝内胆汁淤积的相关性.方法:以81例特发性婴儿肝炎肝内胆汁淤积患儿(病例组)和48例无肝内胆汁淤积婴儿(对照组)为研究对象,应用聚合酶链-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术对V444A片段行扩增及酶切分析.结果:BSEPV444A有3种基因型:AA纯合子、GA杂合子、GG纯合子,AA,AG和GG3种基因型在病例组和对照组频率分别为4.9%,50.6%,44.4%和14.6%,62.5%,22.9%,两组差异显著(P=0.019).等位基因频率的相对风险分析发现,其中GG基因型在两组人群中的分布差异有显著性(P<0.05,OR=2.691,95%CI:1.205-6.008);G等位基因携带者患特发性婴儿肝炎肝内胆汁淤积的风险是A等位基因的1.951倍(OR=1.951,95%CI:1.56-3.291).结论:在广西地区小儿当中发现BSEPV444A单链核苷酸的多态性位点,BSEPV444AG等位基因可能是特发性婴儿肝炎肝内胆汁淤积的一个危险因素,G等位基因携带者可能增加特发性婴儿肝炎肝内胆汁淤积的相对危险度.

胆盐输出泵基因多态性与特发性婴儿肝炎肝内胆汁瘀积的关系

目的探讨特发性婴儿肝炎肝内胆汁瘀积患儿胆盐输出泵(BSEP)基因的突变情况。方法收集2008年10月-2010年2月就诊于广西医科大学第一附属医院儿科的婴儿胆汁瘀积性肝炎患儿81例(病例组),48例无肝内胆汁瘀积、肝功能正常的婴儿为对照组。提取病例组和对照组儿童外周血DNA,采用聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)和DNA测序技术检测BSEP基因上2、3、4、5、6、9、10、16、17、23、24外显子基因多态性,分析BSEP基因多态性与特发性婴儿肝炎肝内胆汁瘀积之间的关系。结果在外显子24上检测到BSEP A1028A同义突变,编码的氨基酸未改变,均为丙氨酸;其他10个外显子均未发现异常突变。A1028A基因型在病例组,CC型53例(占65.4%),TC型28例(占34.6%),C等位基因频率为82.7%;对照组中CC型32例(占66.7%),TC型16例(占33.3%),C等位基因频率为83.3%。二组基因型差异经Fisher's精确概率法检验,差异无统计学意义(P>0.05);等位基因频率经Fisher's精确概率法检验,差异亦无统计学意义(P>0.05)。结论尚不能认为BSEP A1028A是特发性婴儿肝炎肝内胆汁瘀积的一个危险因素。BSEP A1028A与特发性婴儿肝炎肝内胆汁瘀积发生的易感性无关。

胆盐输出泵在胆管癌大鼠胆管组织中的表达状况

目的:本研究通过建立胆管癌大鼠模型,以胆盐输出泵(bile salt export pump,Bsep)为研究对象,初步探讨Bsep在胆管癌大鼠中的表达状况,以期为治疗胆管癌的找到新的手段和方法.方法:取♂Wistar大鼠(体质量160 g±8 g)60只,随机分为2组,每组30只:普通饮食对照组(简称对照组)予以普通饮食、3'-甲基-4,4'-二甲基氨偶氮苯(3'-Me-DAB)饮食实验组(简称实验组)予以含3'-Me-DAB饮食.经过20 wk,建立胆管癌大鼠模型,取对照组和实验组胆管组织:(1)石蜡切片后用免疫组织化学SP(streptavidin-perosidase)法检测两组模型胆管组织的Bsep表达的强度;(2)Western blot法检测两组模型胆管组织的Bsep蛋白表达的强度.结果:免疫组织化学SP法及Western blot法结果均显示,对照组Bsep表达阳性率高于实验组(66.21%vs 18.75%,X2=10.11,P<0.05;0.886±0.017 vs 0.297±0.011,P<0.05).结论:实验组大鼠的Bsep基因的表达较对照组减少,提示我们在胆管癌的治疗中,Bsep有成为新的治疗靶点的可能.

肝癌大鼠瘤组织中Bsep基因的表达变化

目的观察肝癌大鼠瘤组织中胆盐输出泵(Bsep)基因的表达变化。方法取Wistar大鼠70只,随机分为观察组与对照组各35只,对照组予普通饮食,观察组予二乙基亚硝胺饮食。20周后观察组死亡2只,对照组未出现死亡病例。经病理检查证实观察组肝癌模型建立成功,建模成功大鼠胆管内发现数量不等的泥沙样结石。取对照组肝脏组织和观察组肝脏肿瘤组织,采用自动生化仪检测两组胆管内胆汁中胆固醇(TC)、总胆汁酸(TBA)、总胆红素(TBIL)、直接胆红素(DBIL)。采用实时荧光定量PCR法检测对照组肝脏组织和观察组肝脏肿瘤组织中Bsep基因表达强度。石蜡切片后用免疫组化SP法检测对照组肝脏组织和观察组肝脏肿瘤组织中Bsep蛋白表达强度。结果观察组胆汁中TBA、TC、DBIL水平明显高于对照组(P均<0.05),对照组、观察组Bsep基因相对表达量分别为8±0.5、31±1.3,两组比较,P<0.05;对照组、观察组肝脏组织中Bsep蛋白表达阳性率分别为68.2%、17.5%,两组比较,P<0.05。结论肝癌大鼠肝脏肿瘤组织中Bsep基因表达明显减少。