药物新靶标非神经性乙酰胆碱系统的分布特征与功能

非神经性乙酰胆碱系统 (non neuronalacetyl cholinesystem ,NNAs)广泛存在于各种非神经支配的组织或器官中。非神经性ACh ,以自分泌或旁分泌方式 ,通过相应的受体参与细胞基本功能的调节 ,如基因表达、增生、分化、细胞骨架的组成、细胞间接触、细胞运动、迁移、液体的分泌与重吸收以及细胞的营养等功能 ,也对细胞因子的释放和系统急性炎症等方面具有重要调节作用。非神经性胆碱系统具有的广泛的生物学功能提示 ,非神经胆碱系统功能异常在一些疾病如炎症、动脉粥样硬化、局部及系统感染以及肿瘤等中具有重要的作用。因此 ,NNAs已成为药物研究的新靶标。

胆碱系统和其它神经递质/神经调质系统在学习记忆中的作用及相互作用

学习记忆是大脑的重要功能之一。学习记忆过程伴随着复杂的神经生理和生化机制，其中神经递质／神经调质系统对信息的获得、储存、保持及再现等学习记忆过程的基本神经活动，即脑中复杂神经通路的突触传递起着重要作用，已成为当代国际生物学界和医学界研究的新兴领域之一...

淋巴细胞上的非神经性乙酰胆碱系统

尽管乙酰胆碱作为神经递质存在于哺乳动物神经系统中的事实已广为人知,但近年来在淋巴细胞等非神经性组织和细胞中也发现了乙酰胆碱。淋巴细胞具备一个独立的非神经性乙酰胆碱系统,包括:乙酰胆碱、胆碱酯酶、胆碱乙酰转移酶、毒蕈碱乙酰胆碱受体和烟碱能乙酰胆碱受体等组分。免疫系统与淋巴细胞胆碱能系统之间可以相互作用。免疫刺激后的淋巴细胞可增强胆碱能系统的表达;激活后的乙酰胆碱受体参与淋巴细胞的免疫调节。淋巴细胞上胆碱能系统的这些发现将为相关疾病的研究和寻找有效的防治药物提供新的研究思路。

免疫活性细胞非神经乙酰胆碱系统的研究进展

免疫活性细胞表达胆碱乙酰转移酶（ChAT）、乙酰胆碱合成酶（AChE）、毒蕈碱和烟碱型乙酰胆碱受体（mAChR/nAChR）,刺激免疫活性细胞上mAChR和nAChR,免疫细胞可以产生各种生化和功能的变化。活化免疫细胞,可以通过上调ChAT的表达,增加ACh的合成,而上调ChAT的表达。免疫细胞的免疫功能和淋巴细胞胆碱能活性密切相关。免疫细胞（如T细胞、B细胞、单核细胞）表达所有5种亚型的毒蕈碱型乙酰胆碱受体（mAChR M1-M5）,同时表达不同亚型的烟碱型乙酰胆碱受体（nAChR）,如α3、α5、α7、α9和α10。用卵白蛋白（OVA）免疫敲除M1和M5基因小鼠,上调脾脏单核细胞的TNF-α、IFN-γ和IL-6产生。导致血清抗OVA特异性IgG1增加。而敲除α7基因小鼠,α7烟碱受体下调促炎因子,减少抗OVA特异性IgG1的产生。免疫活性细胞,通过mAChR和nAChR调节细胞因子及抗体的产生。非神经胆碱能系统（NNCS）参与调节免疫细胞功能,二者相互影响。

基于胆碱能系统探讨益肺宣肺降浊方抗血管痴呆的作用研究

目的 探讨益肺宣肺降浊方通过胆碱能系统抗血管痴呆的作用及机制。方法 建立中动脉栓塞(middle cerebral artery occlusion, MCAO)大鼠血管性痴呆模型;给予益肺宣肺降浊方及联合应用胆碱受体拮抗剂山莨菪碱及其激动剂毛果芸香碱。具体分组:假手术组,模型组,益肺宣肺降浊方治疗组,益肺宣肺降浊方联合山莨菪碱组,益肺宣肺降浊方联合毛果芸香碱组,石杉碱组。水迷宫实验检测动物神经行为学;苏木精-伊红(HE)染色检测海马组织病理;透射电镜检测海马组织细胞超微结构;免疫荧光检测海马组织神经元MAP2及突触蛋白Synapsin表达。结果 益肺宣肺降浊方能有效提高血管性痴呆动物的学习和记忆能力,对海马组织病理改变具有显著的缓解作用,对神经元树突生长异常以及海马组织细胞超微结构的改变具有明显的改善作用。山莨菪碱有拮抗而毛果芸香碱有协同益肺宣肺降浊方对血管性痴呆动物的作用。结论 益肺宣肺降浊方可能通过调控胆碱能系统缓解血管性痴呆动物海马组织的病理改变、神经元细胞的超微结构改变、神经元突触生长异常从而改善血管性痴呆的认知功能障碍。

饮食诱导的胆碱能系统损伤及二甲双胍 可能的影响

肥胖相关慢性低度炎症是机体代谢紊乱的主要驱动因素,它涉及代谢综合征、胰岛素抵抗等代谢性疾病的发生和发展,目前尚无有效治疗方法,一个重要原因在于炎症调节的机制尚不完全清楚。迷走神经介导的胆碱能信号传导可通过调节机体的代谢稳态和免疫功能而改善肥胖相关炎症。近年的研究表明,肥胖状态下机体抗炎的基本途径—胆碱能抗炎途径损伤,导致的促炎与抗炎系统失衡是慢性炎症形成的关键。二甲双胍(metformin,MF)是一种具有临床实用性的降血糖药物,其控制炎症和改善代谢紊乱等多方面的作用机制已被阐明。研究发现,MF与机体胆碱能信号通路的激活可发挥协同效应,且二者之间可能存在重要联系,这使MF通过靶向胆碱能抗炎通路而发挥效应成为可能。该文拟对高脂饮食诱导的胆碱能抗炎通路的损害及MF靶向胆碱能抗炎途径的可能机制作一综述,以期为肥胖驱动的炎症和代谢性疾病的预防和治疗研究提供新的见解。

激活中枢胆碱系统治疗脑外伤后认知障碍

认知功能障碍在脑外伤生存者中很常见。中枢胆碱神经系统是认知功能的最主要结构基础。脑外伤后慢 性期脑内胆碱神经系统的结构及受体表达明显改变,从而突触问的信息传导受到影响,进一步阻碍认知过程中的 信号处理。分析这种认知损伤机制,有利于在治疗脑外伤后认知障碍中发现新的方法,更多的选择方案。

知母皂苷元对拟痴呆大鼠β-淀粉样肽沉积及胆碱能系统功能的影响

目的 观察知母皂苷元 (ZMS)对拟痴呆大鼠模型脑内 β 淀粉样肽沉积及胆碱能系统功能的作用。 方法 单侧基底核内联合注射 β 淀粉样肽2 5-3 5片段 (β AP2 5-3 5)和兴奋性氨基酸建立大鼠拟痴呆模型 ,然后将模型动物分为假手术组 37、模型组和ZMS组 ,采用免疫组织化学方法和图像分析法测定β AP2 5-3 5沉积斑块的面积。用避暗法及跳台法测定动物的学习记忆功能 ,用放射配基结合分析法分别测定脑胆碱乙酰转移酶 (ChAT)活性和M受体密度。结果 一次性脑内联合注射 β AP +IBO后 ,模型大鼠脑内有明显的 β AP斑块沉积 ,而模型大鼠喂服ZMS 6 0d后 ,能有效地减少β AP沉积的面积 ,同时ZMS能明显改善模型动物的学习记忆功能 ,并提高模型动物脑内ChAT活性和M受体密度。结论 ZMS可能对脑内 β AP的沉积有一定的清除作用 。

针刺拟痴呆大鼠对脑内自由基系统与胆碱能系统功能影响相关性的分析

目的 :运用自由基学说和胆碱能学说 ,探讨针刺对拟阿耳茨海默氏病 (AD)大鼠大脑皮质及海马抗氧化能力和胆碱能系统功能的影响。方法 :应用迷宫试验观测针刺对拟AD大鼠学习记忆能力的影响 ;并应用分光光度法测定大鼠大脑皮质中丙二醛 (MDA)含量及谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH Px)、超氧化物歧化酶 (SOD)活性变化 ,应用巯基比色分析法、免疫组化方法测定大鼠海马区乙酰胆碱酯酶 (AChE)和胆碱乙酰化酶 (ChAT)活性变化。结果 :迷宫学习记忆能力测试表明 ,针刺组大鼠成绩好于模型组 (P <0 .0 1) ;针刺组大鼠大脑皮质中MDA含量比模型组显著降低(P <0 .0 1) ,而SOD和GSH Px活性明显升高 (P <0 .0 1) ;在AChE和ChAT测定中 ,针刺组比模型组大鼠AChE、ChAT活性明显增强 (P <0 .0 1)。结论 :针刺可增强脑内抗氧化能力 ,减轻脑内自由基对神经元的损伤 ,从而改善AD的病理反应 ,提高中枢胆碱能系统功能 。

川芎嗪对D-半乳糖损伤模型小鼠学习记忆及胆碱能系统的影响

目的探讨川芎嗪对D-半乳糖(D-galactose,D-gal)损伤模型学习记忆和胆碱能系统功能的影响。方法C57BL/6J小鼠颈背部皮下注射2%D-gal100mg·kg-1·d-1,连续40d制造D-gal损伤模型。第3周起各组分别用生理盐水(正常对照组、模型组)、川芎嗪(高、低剂量组)和哈伯因(阳性对照组)灌胃。第6周起进行Morris水迷宫测试,连续5d。行为测试结束后,进行大脑皮层乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AchE)活性测定和M受体的放射性配基结合分析。结果与正常对照组相比,D-gal模型组学习记忆能力、AchE活性和M受体含量均明显下降(P<0.05),川芎嗪尤其是在100mg·kg-1·d-1剂量时可明显改善学习记忆功能,增强胆碱酯酶活性(P<0.05),上调M受体数目(P<0.005)。结论川芎嗪可明显提高模型小鼠的学习记忆能力,改善中枢胆碱能系统功能。

嗅三针对痴呆大鼠大脑边缘叶胆碱能系统功能的影响

目的:探索嗅三针对痴呆大鼠大脑边缘叶胆碱能系统功能的影响作用。方法:测定大鼠大脑边缘叶乙酰胆碱酯酶(AChE)和胆碱乙酰化酶(ChAT),并测试大鼠记忆能力。结果:迷宫学习记忆能力测试表明,嗅三针组成绩优于模型组(P<0.01);嗅三针组大脑边缘叶乙酰胆碱酯酶(AChE)和胆碱乙酰化酶(ChAT)活性明显高于模型组(P<0.01)。结论:嗅三针可以增强中枢神经胆碱能系统的功能,并且由此对痴呆大鼠产生治疗作用。

老龄雌性大鼠胆碱能系统的氧化损伤及人参皂苷的保护作用

目的探讨自由基对基底前脑-海马/大脑皮质胆碱能系统的损害及人参皂苷(GS)的保护作用。方法W istar♀大鼠30只,随机分为3组:青年组、老龄组、给药组(第17mon龄始饲以GS至27mon龄)。采用紫外可见光光度计对3组大鼠基底前脑、海马结构和大脑皮质进行一氧化氮(NO)及丙二醛(MDA)含量测试;同时进行超氧化物歧化酶(SOD)活性测定。结果老龄组基底前脑、海马结构和大脑皮质NO及MDA含量均较青年组增高(P<0.01);给药组均较老龄组降低(P<0.01);相反,老龄组上述3个脑区SOD活性均比青年组降低(P<0.01),给药组均比老龄组增高(P<0.01)。结论GS具有增强基底前脑-皮质胆碱能系统抗氧化的能力,并能够提高SOD的活性。

绞股蓝皂甙对阿尔茨海默病小鼠海马胆碱能系统功能的影响

目的探讨绞股蓝皂甙对D-半乳糖(D-gal)所致阿尔茨海默病(AD)模型小鼠海马胆碱能系统功能的影响。方法昆明小鼠颈背部皮下注射10%D-gal,连续6 w造模。同时,各组分别灌胃生理盐水(正常对照组、模型组)、绞股蓝(高、低剂量组)。给药结束后进行水迷宫训练,24 h后进行学习记忆功能测试和海马胆碱乙酰基转移酶(ChAT)与乙酰胆碱酯酶(AchE)活性测定以及Western印迹检测ChAT表达。结果与正常对照组相比,D-gal模型组小鼠学习记忆能力,模型组ChAT活性和ChaT表达明显下降(P<0.05,P<0.01);模型组AchE活性明显升高(P<0.01)。给予绞股蓝皂甙可明显改善AD模型小鼠的学习记忆功能(P<0.05,P<0.01),增强海马ChAT活性(P<0.01)和降低AchE活性(P<0.01),上调ChAT的表达(P<0.01)。结论绞股蓝皂甙可明显提高模型小鼠的学习记忆能力,改善海马胆碱能系统功能。

补骨脂素对淀粉样蛋白损伤海马神经元胆碱能系统的保护作用研究

目的:探讨补骨脂素对淀粉样蛋白(Aβ)诱导海马神经元胆碱能系统损伤的保护作用。方法:应用Aβ损伤补骨脂素预处理的体外培养海马神经元,分别测定海马神经元乙酰胆碱含量,乙酰胆碱酯酶和胆碱乙酰基转移酶活性。结果:补骨脂素可以提高乙酰胆碱酯酶活性和乙酰胆碱水平,对乙酰胆碱酯酶作用不明显。结论:补骨脂素对损伤神经元Aβ损伤海马神经元胆碱能系统有保护作用。

成熟DC固有胆碱能系统nAChRα7、ChAT和AChE及其调节的研究

目的探讨成熟树突状细胞(dendritic cells,DC)是否存在非神经元性胆碱能系统及其调控机制。方法分离正常小鼠骨髓细胞,体外用细胞因子(IL-4,GM-CSF)诱导、分化为DC,细菌脂多糖(LPS)刺激其成熟。光镜和流式细胞术进行DC鉴定。免疫荧光抗体方法、流式细胞术和RT-PCR方法进行DC烟碱样乙酰胆碱受体亚单位α7(nicotinic acetylcholine receptorsubunitα7,nAChRα7)、胆碱乙酰转移酶(choline acetyltransferase,ChAT)和乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AChE)检测。流式细胞仪检测神经节阻断剂美加明(mecamylamine,MEC)作用于成熟DC12小时nAChRα7的变化。结果成熟状态DC表达nAChRα7、ChAT、AChE蛋白和mRNA。nAChRα7蛋白主要分布于细胞膜,ChAT和AChE分布于细胞浆。AChE表达最强,与ChAT比较(P<0.05),nAChRα7表达量次之;MEC作用后nAChRα7蛋白明显下调(P<0.05)。结论成熟状态DC存在固有胆碱能系统通路物质,外源性因素(美加明等)可调节该通路。DC可能在胆碱能抗炎通路的免疫调节机制中发挥重要作用。

实验性关节炎大鼠外周血CD4^+T细胞固有胆碱能系统研究

目的 探索胆碱能系统在关节炎模型大鼠外周血CD4+T淋巴细胞表达状态及其在关节炎中的免疫调节作用。方法 Ⅱ型胶原乳剂多点皮内注射, 建立胶原性关节炎 (CIA) 大鼠模型, 根据关节炎严重程度将大鼠分为 CIAⅠ和CIAⅡ组。运用流式细胞术和双标记免疫荧光技术检测烟碱样乙酰胆碱受体α7亚单位 (nAChRα7) 及胆碱乙酰转移酶 (ChAT) 在CIA大鼠外周血CD4+T淋巴细胞中的表达, 分析其与外周血 CD4+ T淋巴细胞活化 (表达 CD71)的关系。结果 CIA 大鼠外周血 CD71 +/CD4+ T 淋巴细胞明显多于对照组 (P< 0. 01); CD4+ T 淋巴细胞表达nAChRα7和ChAT明显低于对照组 (P< 0 01), CIAⅡ组又明显低于 CIA Ⅰ组 (P< 0 01)。nAChRα7+/CD4+ 与CD71+/CD4+T淋巴细胞呈负相关关系 (P< 0 05); ChAT+/CD4+ 与 CD71+/CD4+ T 淋巴细胞无相关关系 (P>0. 05)。结论 nAChRα7和ChAT在正常大鼠外周血 CD4+ T淋巴细胞中表达, 并参与免疫细胞活性的抑制性调节,CIA大鼠外周血CD4+T淋巴细胞胆碱能系统功能减弱, 胆碱能系统在自身免疫性疾病中起重要调节作用。

嗅三针对痴呆大鼠海马胆碱能系统功能影响

目的:探索嗅三针对拟痴呆大鼠脑海马区胆碱能系统功能的影响作用。方法:测定大鼠脑海马区乙酰胆碱酯酶(AChE)和胆碱乙酰化酶(ChAT)。结果:迷宫学习记忆能力测试表明,嗅三针组成绩优于模型组(P<0.01);嗅三针组海马区乙酰胆碱酯酶(AChE)和胆碱乙酰化酶(ChAT)活性明显高于模型组(P<0.01)。结论:嗅三针可以增强中枢神经胆碱能系统的功能,并且由此对痴呆大鼠产生治疗作用。

头穴丛刺对阿尔兹海默患者胆碱能系统的影响

目的:观察头穴丛刺对阿尔兹海默病(AD)患者胆碱能系统的影响。方法:将36例AD患者随机分为治疗组与对照组,对照组采用口服安理申治疗,治疗组在对照组基础上配合头穴丛刺,连续治疗4周后,观察患者治疗前后血清Ach、Ache、Ch AT的含量的变化。结果:治疗后血清Ach、Ch AT的水平均有所提高,Ache水平有所下降,治疗组与对照组疗后比较具有显著性差异(P<0.05,P<0.01)。结论:头穴丛刺能够调节阿尔兹海默患者的胆碱能系统,可能是通过增加Ach、Ch AT的含量、减少Ache含量,来改善AD患者的症状的。

咖啡因对睡眠剥夺老龄小鼠学习记忆及海马抗氧化能力和胆碱能系统的影响

目的探讨咖啡因对老龄睡眠剥夺小鼠学习记忆及海马抗氧化能力和胆碱能系统的影响。方法昆明种雄性小鼠50只随机分为正常睡眠组、睡眠剥夺模型组和咖啡因低、中、高剂量组(5,10,20 mg/kg),采用小平台水环境法进行睡眠剥夺连续72 h,同时灌胃给药2次/d,正常睡眠组和模型组小鼠在相同时间灌服等体积的生理盐水;各组小鼠每天灌胃1 h后进行Morris水迷宫试验测试学习记忆能力,睡眠剥夺72 h后测定海马组织中和乙酰胆碱含量、和乙酰胆碱酯酶(ACh E)的活力。结果与模型组比较,咖啡因各剂量组小鼠Morris水迷宫定位航行试验逃避潜伏期显著缩短(P<0.05),空间探索试验穿越原平台位置的次数显著增多(P<0.05),小鼠海马组织中ACh E含量增加、MDA含量降低(P<0.05,P<0.01),ACh E和SOD活力增强(P<0.05,P<0.01),GSH-Px活力无明显变化(P>0.05)。结论咖啡因可以改善睡眠剥夺小鼠的学习记忆功能,其机制可能与增强海马抗氧化能力及胆碱能系统功能有关。

成熟DCs固有胆碱能系统及其调控(英文)

目的:探讨成熟树突状细胞(dendritic cells, DCs)是否存在非神经元性胆碱能系统及其调控机制。方法:分离正常小鼠骨髓细胞,体外用细胞因子(IL-4,GM-CSF)诱导、分化为幼稚DCs,细菌脂多糖(LPS)刺激其成熟。光镜观察其形态变化、流式细胞术进行分子鉴定。免疫细胞化学方法、免疫荧光抗体技术、流式细胞术和RT-PCR方法检测DCs烟碱样乙酰胆碱受体亚单位α7(nAChRα7)、胆碱乙酰转移酶(ChAT)和乙酰胆碱酯酶(AChE)。同时,流式细胞术检测美加明(MEC)作用于成熟DCs 12 h前后nAChRα7表达。结果:成熟DCs表达nAChRα7、ChAT、AChE蛋白和mRNA;nAChRα7蛋白主要分布于细胞膜,ChAT和AChE分布于细胞浆。其中AChE蛋白表达强于ChAT(P<0.05),与nAChRα7比较有上升趋势;MEC作用组nAChRα7蛋白表达明显低于无MEC作用组(P<0.05)。结论:成熟DC存在固有胆碱能系统,外源性因素(美加明等)可调节其效应。DCs可能通过胆碱能系统而发挥其神经免疫调节作用。