SYBR Green Ⅰ法体外评价胆碱衍生物的抗恶性疟原虫活性

目的观察4种胆碱衍生物对恶性疟原虫3D7株的抑制作用。方法用二甲基亚砜（DMSO）溶解MD（N-十二烷基-N-（2-羟乙基）-N,N-二甲基溴化铵）、ED（N-十二烷基-N-（2-羟乙基）-N,N-二乙基溴化铵）、MT（N-十四烷基-N-（2-羟乙基）-N,N-二甲基溴化铵）和ET（N-十四烷基-N-（2-羟乙基）-N,N-二乙基溴化铵）等4种胆碱衍生物,制成10倍浓度梯度（1～10^5μmol/L）的溶液后,分别用RPMI 1640培养基稀释1 000倍。稀释红细胞,使疟原虫感染率为0.3%～0.5%,并用培养基将红细胞压积调至2%。测定板每孔加入20μl含药培养液和80μl恶性疟原虫培养物,用SYBR GreenⅠ法测定胆碱衍生物对疟原虫增殖的抑制作用,并以青蒿素为阳性对照,计算其50%抑制浓度（IC50）。结果青蒿素、MD、ED、MT和ET对恶性疟原虫的抑制作用均随浓度的升高而增强,表现出不同程度的剂量依赖性。MD浓度〉10^3nmol/L时,对恶性疟原虫的抑制率显著增加。ED和ET在高浓度（〉10^4nmol/L）时抑制显著,抑制率均〉95%。MD、ED、MT和ET的IC50值分别为1 620、33.9、116和68.9 nmol/L,均高于青蒿素（5.7 nmol/L,P〈0.05）。结论 4种胆碱衍生物均有一定的体外抗恶性疟原虫活性,但活性低于青蒿素。4种衍生物中,ED对恶性疟原虫3D7株的抑制作用最强。

新型胆碱衍生物的合成及其体外抗疟活性

以N,N-二甲基乙醇胺和N,N-二乙基乙醇胺为初始原料,分别与不同碳链长度的溴代烷烃回流反应合成了6个新型的季铵盐型胆碱衍生物(3a^3f),其结构经UV-Vis,1H NMR和HR-MS表征。初步抗疟活性测试结果表明:3a^3f对恶性疟原虫3D7的增殖均有一定的体外抑制活性,(1-羟基)二乙基正丁基溴化铵(3f)的活性最强[IC50(68.1±6.5)nmol·L-1],但低于青蒿素[IC50(5.7±1.54)nmol·L-1]。