不同年龄组抑郁症模型大鼠脑乙酰胆碱酯酶及乙酰胆碱转移酶活性的变化

目的从生化和形态两个方面探讨不同年龄组抑郁症模型大鼠脑乙酰胆碱酯酶及乙酰胆碱转移酶活性的变化。方法 Sprague-Dawley雄性大鼠,按照年龄分为幼年、成年和中年组共3组,每组20只。采用慢性轻度不可预见性应激刺激(chronic mild unp redictable stress,CMUS)与孤养相结合的方法建立抑郁症动物模型,运用敞箱实验(Open-Field)与糖水消耗量评定大鼠行为学改变,用比色法和免疫组化法测量大鼠大脑皮层、海马区乙酰胆碱转移酶(Choline acetyltransferase,ChAT)与乙酰胆碱酯酶(Acetylcholinesterase,AChE)活性,并用电镜观察大鼠脑海马CA3区超微结构变化。结果造模21 d后,与对照组相比,模型组水平运动得分、垂直运动得分、体重和糖水偏爱度明显降低(P<0.05);与对照组比较,模型组大鼠ChAT与AChE活性均升高(P<0.05);与幼年模型组、成年模型组相比,中年模型组两个酶活性均升高(P<0.05),与幼年模型组相比,成年模型组两个酶活性均升高(P<0.05)。电镜观察结果显示,海马凋亡细胞主要集中在幼年、成年和中年模型组。结论抑郁症模型ChAT与AChE活性升高,并且随着年龄的增长升高尤为显著,胆碱能神经系统与抑郁症发生发展有密切关系。

重症急性胰腺炎大鼠结肠黏膜下神经节一氧化氮合酶阳性神经元及乙酰胆碱转移酶阳性神经元的改变

目的探讨伴有胃肠动力障碍的重症急性胰腺炎(SAP)大鼠结肠黏膜下神经节一氧化氮合酶(NOS)阳性神经元及乙酰胆碱转移酶(ChAT)阳性神经元的改变。方法20只SD大鼠随机均分为假手术组与SAP组,用逆行胰胆管注射牛磺胆酸钠的方法制作大鼠SAP模型。24 h后,测定假手术组与SAP组小肠推进比、结肠蠕动频率、粪便含水量、胰腺病理评分及结肠蠕动频率与NOS、ChAT表达比例相关性分析。制备结肠黏膜下神经节全层标本,运用免疫荧光技术观察两组黏膜下神经节,NOS阳性神经元及ChAT阳性神经元的改变。结果与假手术组相比,SAP组结肠蠕动频率减慢(P<0.01)、小肠推进比减少(P<0.01)、粪便含水量降低(P<0.01),胰腺病理评分增高(P<0.01),其结肠黏膜下神经节中ChAT阳性神经元表达下调(43.85%±13.58%vs 16.27%±6.97%,P<0.05),但NOS阳性神经元无明显改变(22.49%±5.14%vs 24.36%±4.79%,P>0.05)。相关性分析显示ChAT阳性神经元与结肠蠕动频率呈正相关(r=0.738,P<0.01)。结论 SAP伴有胃肠动力障碍,其发病机制可能与ChAT阳性神经元或其他神经元的重塑有关。

100Hz电针刺激对脑组织和脾脏乙酰胆碱转移酶活性的影响

目的观察100Hz电针刺激对脑组织和脾脏乙酰胆碱转移酶活性的影响,初步探讨电针的免疫功能调节作用机制。方法将昆明小鼠24只随机分成对照组、插针不电组和电针组。给予小鼠电针4天后处死,分别检测小鼠血清、延髓、下丘脑和脾脏中乙酰胆碱转移酶(ChAT)的活性。结果与对照组比较,100Hz电针刺激可显著升高小鼠血清、延髓、下丘脑和脾脏中乙酰胆碱转移酶(ChAT)活性(P<0.05)。结论以上结果提示胆碱能抗炎通路可能参与了100Hz电针调节免疫功能的作用。

氯胺酮对新生大鼠海马乙酰胆碱酯酶和乙酰胆碱转移酶的影响

目的探讨氯胺酮对新生大鼠学习记忆和海马乙酰胆碱酯酶(AchE)、乙酰胆碱转移酶(ChAT)的影响。方法 80只7 d龄大鼠随机分为C、K1、K2、K3组,每组20只。C组给予生理盐水2 ml;K1组单次腹腔注射氯胺酮80 mg/kg,K2、K3组分别按同等剂量注射2、3 d。末次给药后1 d各组处死10只、余大鼠至21 d龄行Morris水迷宫实验。迷宫实验后检测海马AchE和ChAT水平。结果水迷宫结果:C组与K1组比较、K2组与K3组比较差异均无统计学意义;K2、K3组较C、K1组潜伏期延长且穿越平台次数减少(P<0.05)。酶测定:8 d龄,各组间差异有统计学意义(P<0.05)。27 d龄,C组与K1组比较、K2组与K3组比较差异均无统计学意义,K2、K3组较C、K1组差异有统计学意义(P<0.05)。结论氯胺酮引起新生大鼠空间辨别记忆能力下降,可能与海马胆碱能系统有关;单次给药能引起短期内海马胆碱能系统变化,而重复给药则会导致较长时间的影响。

老年大鼠股骨颈骨折术后神经营养因子、乙酰胆碱转移酶及突触素的改变

目的探讨老年大鼠股骨颈骨折术后对血清胶质细胞系来源的神经营养因子(GDNF)、乙酰胆碱转移酶(CHAT)及海马内突触素蛋白表达的影响。方法 SD老年大鼠35只随机分为三组:空白组(K组,n=7)、对照组(D组,n=14)、手术组(S组,n=14)。D、S组根据处理时间不同各分2个亚组,D1、D3、S1、S3组(每组7只)。酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清GDNF、CHAT浓度,HE染色检测海马组织病理变化,免疫组化检测海马内突触素蛋白的表达。结果 S组血清GDNF、CHAT浓度均降低,与K组、D组相比差异显著(P<0.05);HE染色显示D组和S组神经细胞缺失,形态改变;免疫组化结果表明D组和S组突触素表达较K组明显下降(P<0.01,P<0.05)。结论老年大鼠股骨颈骨折术后大鼠的空间学习记忆能力下降可能与血清GDNF、CHAT浓度降低,海马内突触素蛋白表达下调有关。

6-羟多巴损伤黑质导致迷走神经背核乙酰胆碱转移酶和酪氨酸羟化酶表达变化

目的观察6-羟多巴(6-hydroxydopamine,6-OHDA)损伤大鼠黑质后迷走神经背核(dorsal motor nucleus ofthe vagus,10N)中乙酰胆碱转移酶(choline acetyltransferase,ChAT)和酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)含量的变化。方法 16只SD大鼠根据随机数字表分为6-OHDA大鼠组和对照组。6-OHDA大鼠组双侧黑质(substantia nigra,SN)内注射6-OHDA,对照组双侧SN内注射等体积的生理盐水。6周后断头取脑,Nissl染色观察SN和10N中的Nissl小体,免疫荧光和免疫印迹检测SN内TH和10N内ChAT与TH的表达。结果与对照组比较,6-OHDA大鼠组SN内TH阳性细胞数量从(54±5)个减少至(13±2)个(P<0.05),蛋白表达水平从0.62±0.13降低至0.34±0.11(P<0.05),10N中ChAT阳性细胞数量从(37±3)个减少到(26±5)个(P<0.05),TH阳性细胞数量从(6±3)个增加到(13±2)个(P<0.05),背侧延髓内ChAT的蛋白表达水平从0.07±0.02下降至0.05±0.02(P<0.05),TH蛋白表达水平从0.08±0.05增高到0.13±0.04(P<0.05)。结论 6-OHDA大鼠10N中ChAT和TH表达变化可能与帕金森病患者的胃排空障碍存在一定的联系。

电针对去卵巢大鼠学习记忆及海马乙酰胆碱转移酶的影响

目的研究电针对去卵巢大鼠学习记忆和海马乙酰胆碱转移酶的影响。方法采用卵巢切除大鼠模型,造成低雌激素记忆障碍,去势2 w后进行电针刺激,连续治疗3个月。Morris水迷宫测试空间学习记忆能力,竞争性抑制酶免疫分析法(ELISA)检测血清雌二醇(E2)浓度,Western印迹检测乙酰胆碱转移酶(CHAT)蛋白的表达量。结果与假手术组比较,模型组大鼠逃避潜伏期时间明显延长,跨越平台次数明显减少(P<0.01),与模型组比较,电针组治疗后逃避潜伏期缩短,跨越平台次数增加(P<0.01);与假手术组比较,模型组大鼠血清E2浓度显著降低(P<0.01),与模型组比较,电针组和假电针组血清E2浓度显著升高,电针组升高更明显(P<0.01);与假手术组比较,模型组大鼠海马CHAT蛋白表达显著降低(P<0.01),与模型组比较,电针组CHAT蛋白表达显著升高(P<0.01)。结论电针能够提高去卵巢大鼠学习记忆能力,其机制可能与升高体内雌激素从而调节脑内CHAT的表达有关。

端脑发育过程中放射状胶质细胞表达乙酰胆碱转移酶

目的:为在端脑发育中胆碱能神经元是否来源于放射状胶质细胞寻找实验证据,以分析胆碱能神经元发生与神经干细胞分化之间的关系。方法:实验于2002-03/2003-01在组织胚胎学教研室细胞培养室和免疫组化实验室完成。采用荧光激活细胞分类技术确定大鼠胚胎胆碱能神经元发生的时间,然后对胚胎14d大鼠端脑实施冠状切片,波形蛋白(放射状胶质细胞标志性蛋白)和乙酰胆碱转移酶(胆碱能神经元的标志性蛋白)免疫组织化学双重染色,以证实放射状胶质细胞是否表达乙酰胆碱转移酶。结果:流式细胞术检测胚胎12d大鼠端脑细胞乙酰胆碱转移酶荧光免疫反应阳性细胞表达率为22.49%;胚胎14d大鼠端脑背侧脑室区和端脑腹侧侧神经节隆起脑室区存在同时表达波形蛋白和乙酰胆碱转移酶细胞群。结论:①大鼠胆碱能神经元开始发生时间是胚胎12d。②放射状胶质细胞具有神经干细胞性质,它不断地进行不对称分裂,产生胆碱能表型的成神经细胞,即胆碱能前体细胞。③放射状胶质细胞在神经元发生期进行不对称分裂的同时已经决定了它所产生神经细胞的表型,合成神经递质乙酰胆碱。

大鼠脑发育临界期甲低和长期低碘对各脑区乙酰胆碱转移酶活性的影响

对低碘甲低大鼠的海马、大脑皮层、前脑基底和小脑胆碱乙酰胆碱转移酶(CHAT)活性分别在出生后20天、30天、40天、60天、80天进行了观察。结果显示,在脑发育临界期,甲状腺激素缺乏可使胆碱能神经元的发育和成熟明显落后。

大鼠重组中枢型乙酰胆碱转移酶单克隆抗体的制备(英文)

利用分子生物学方法制备了大鼠中枢型乙酰胆碱转移酶（ｃＣｈＡＴ）的单克隆抗体并利用免疫组织化学等方法进行了检测。以大鼠纹状体ｃＤＮＡ 为模板，扩增出长度为７１５ ｂｐ 的大鼠ｃＣｈＡＴ 基因片段（含外显子６～１０）。将该片段克隆到ｐＧＥＭ－Ｔ 载体中进行测序，将碱基序列正确的ｃＣｈＡＴ ｃＤＮＡ 片段定向插入ｐＭ ＡＬ－ｃ２ 载体中，构建成表达载体。利用ＤＮＡ测序对连接部位的阅读框架进行分析，未出现移码突变。将表达载体转化大肠杆菌并经诱导表达了分子量为６９ ｋＤａ 的融合蛋白，其大小与用表达载体的氨基酸序列所推导的分子量一致。用纯化后的融合蛋白作为抗原免疫Ｂａｌｂ／ｃ 小鼠，并获得了Ｍ ａｂ６７６ 克隆。利用Ｗ ｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ方法对其进行分析表明该克隆能识别大鼠脑组织提取物中分子量为６２ ｋＤａ 的蛋白成分，这与大鼠脑中ＣｈＡＴ 分子量的大小一致。利用此单克隆抗体进行免疫组织化学反应的阳性结构见于纹状体、苍白球、Ｂｒｏｃａ氏斜角带核、无名质、内侧隔核以及脑干的脑神经运动核等胆碱能神经元的聚集区。上述结果表明本研究所制备的单克隆抗体具有识别大鼠ｃＣｈＡＴ 的特异性。

在胚胎发育中第三脑室室管膜细胞表达乙酰胆碱转移酶

目的在研究胚胎14天(E14)大鼠端脑放射状胶质细胞与胆碱能前体细胞的关系时发现,第三脑室室管膜细胞和侧脑室脉络丛上皮细胞均表达胆碱能神经元标志性蛋白,即乙酰胆碱转移酶(Choline acetyltransferase,ChAT)。方法E14大鼠端脑冠状连续切片,采用免疫组织化学染色法,分别对放射状胶质细胞标志性蛋白,即波形蛋白(Vi men-tin)和乙酰胆碱转移酶进行免疫组织化学染色。结果E14大鼠端脑室管膜细胞呈单层衬于第三脑室,在背中侧的室管膜细胞由单层增殖为复层。上皮基底部与邻近组织分界不清,这些细胞的游离面胞质呈乙酰胆碱转移酶免疫反应阳性,在邻近的第三脑室周围局部形成乙酰胆碱转移酶阳性细胞群。在相邻切片的同一区域内复层室管膜细胞波形蛋白免疫反应阴性。结论第三脑室背中侧室管膜细胞作为神经干细胞分裂、增殖,产生胆碱能前体细胞,并向第三脑室周围组织迁移,形成基底前脑神经核团的Ch5,Ch6胆碱能神经细胞群。

中药海尔福对铝中毒小鼠模型大脑的乙酰胆碱转移酶活性的影响

目的研究中药海尔福复方提取液对铝中毒小鼠模型大脑形态学变化及乙酰胆碱转移酶活性的影响。方法用氯化铝拌饲料喂养小鼠3个月,建立拟老年痴呆症(阿尔茨海默病)模型,造模2个月后,分成3组:实验1组、实验2组、模型组,另设第4组为正常组,用2种不同剂型的海尔福复方提取液中药制剂对实验1组、实验2组灌胃1个月治疗。模型组和正常组作为对照组,用等体积蒸馏水代替。实验结束,取小鼠血清,处死小鼠后取大脑做成10%的脑匀浆。测定脑匀浆的乙酰胆碱转移酶(Ch AT)、乙酰胆碱酯酶(Ach E)活性、铝含量和血清胆固醇含量,部分大脑送病理检查。结果实验1组、实验2组、模型组和正常组依次为Ch AT(U/g组织湿重)各组比较P<0.01,差异有统计学意义;Ach E各组比较(U/mg·prot),P>0.05,差异无统计学意义;血清胆固醇(mmol/L),与模型组比较,P<0.01,差异有统计学意义;脑铝含量(μg/L),与模型组比较,P<0.05,差异有统计学意义。脑病理检查结果,正常对照组:大脑皮质及海马区神经细胞、神经胶质细胞无变性、坏死,组织结构及层次未见显著改变。模型组:大脑皮质及海马区神经细胞、神经胶质细胞弥漫性变性、坏死、核固缩及微小软化灶形成。实验1组、实验2组,比模型组病变程度较轻。结论铝中毒模型组脑乙酰胆碱转移酶活力明显低于正常组、铝含量明显高于正常组、大脑皮质及海马区神经细胞变性、坏死,实验组明显改善。

天A1中药对穹隆-海马伞切断模型大鼠脑内乙酰胆碱转移酶和脑源性神经生长因子的影响

目的:利用穹隆-海马伞切断模拟制作大鼠痴呆模型,观察天A1中药对模型大鼠脑内乙酰胆碱转移酶(cholineacetyltransferas,ChAT)和脑源性神经生长因子(brain-derivedneurotrophicfactor,BDNF)的影响。方法:健康雌性Wistar大鼠,随机分为模型组、天A1治疗组和对照组,每组各5只。模型组和治疗组动物切断双侧穹隆-海马伞后,分别用生理盐水和中药煎剂灌胃,对照组不切断海马伞并正常喂养。4周后灌注固定动物,显微镜下进行海马CA1区、皮质、杏仁核、Meynert核ChAT和BDNF免疫组化阳性细胞计数,观察天A1中药治疗效果。结果:对照组比较,模型组大鼠脑内海马CA1区、皮质、杏仁核、Meynert核各区ChAT犤(6.76±2.51),(3.96±0.86),(2.36±1.23),(4.88±4.92)个犦和BDNF犤(4.3±0.99,8.3±0.28),(6.4±4.51),(6.6±4.51)个犦阳性神经元数均显著减少(P均<0.01);天A1治疗组大鼠脑内各区ChAT阳性细胞数为(34.76±5.56),(50.96±7.55),(24.92±1.92),(29.36±12.27)个和BDNF(46.8±5.54),(57.6±6.32),(51.4±7.96),(49.3±7.47)个阳性神经元数与对照组比较,差异无显著性意义(P>0.05),而与模型组比较,均明显著增加,差异有非常显著性意义(P<0.01)。结论:天A1中药制剂对穹隆-海马伞切断大鼠的胆碱能神经元具有保护作用。

胰淀素作用于背外侧被盖核胆碱乙酰转移酶神经元调节小鼠体重

胰淀素(amylin)作用于背外侧被盖核(lateral dorsal tegmental nucleus,LDT),诱导减肥和抑食效应,并激活背肩胛棕色脂肪组织(interscapular brown adipose tissue,IBAT)产热。多种食欲激素受体与胆碱乙酰转移酶(choline acetyltransferase,ChAT)神经元共同定位于LDT中,以调节饱腹感和能量消耗。然而,LDT的ChAT神经元是否参与胰淀素介导的体重调节作用尚待探索。作者拟通过免疫荧光检测小鼠LDT中原癌基因蛋白(c-Fos)和ChAT神经元的表达,逆行示踪技术确认LDT的下游神经核团,神经元损伤试验分析胰淀素作用的神经机制。结果显示:腹腔注射胰淀素显著降低小鼠体重,并显著促进LDT和臂旁核(PBN)中c-Fos和ChAT神经元表达。ChAT和神经型一氧化氮合成酶(nNOS)神经元在LDT、PBN和迷走神经背侧核(DMV)中共表达。逆行示踪试验证明LDT向PBN神经元发送神经投射。此外,损伤LDT和PBN神经元可降低胰淀素的减肥效果。LDT是连接PBN的能量平衡调节中枢,ChAT神经元参与介导胰淀素的体重调节过程。

血清胆碱乙酰转移酶与中青年股骨颈骨折切开复位内固定术后股骨头坏死的关系

目的 观察血清胆碱乙酰转移酶(ChAT)与中青年股骨颈骨折切开复位内固定术后股骨头坏死的关系。方法 采用回顾性研究,收集2020年1月至2022年9月于中国人民解放军陆军第七十二集团军医院接受切开复位内固定治疗的83例中青年股骨颈骨折患者的临床资料,根据其术后6个月是否发生股骨头坏死分为发生组(20例)、未发生组(63例)。比较血清ChAT和基线资料,使用logistic回归分析明确血清ChAT和相关指标与术后股骨头坏死的关系,采用受试者操作特征(ROC)曲线评估血清ChAT与相关指标对患者术后股骨头坏死的预测价值。结果 发生组血清ChAT、一氧化氮(NO)水平低于未发生组(P<0.05)。多因素logistic回归分析显示,血清ChAT(OR=0.811,95%CI:0.716~0.918)与NO(OR=0.845,95%CI:0.732~0.976)是股骨颈骨折患者术后股骨头坏死的影响因素(P<0.05)。ROC曲线显示,血清ChAT对股骨颈骨折患者术后出现股骨头坏死具有良好的预测价值,曲线下面积为0.760;NO对患者术后出现股骨头坏死的预测价值较低,曲线下面积为0.679。结论 血清ChAT、NO是股骨颈骨折患者术后出现股骨头坏死的影响因素,且血清ChAT对其术后出现股骨头坏死具有良好的预测价值。

溶血磷脂酰胆碱酰基转移酶1在肿瘤中作用的研究进展

溶血磷脂酰胆碱酰基转移酶1作为磷脂胆碱代谢途径中的关键代谢酶,可通过脱酰基-再酰化来介导磷脂酰胆碱的合成,使细胞膜磷脂组成成分发生改变,导致细胞膜骨架发生重塑。溶血磷脂酰胆碱酰基转移酶1可通过加速肿瘤细胞膜磷脂成分的改变、或与表皮生长因子受体、细胞周期相关等肿瘤驱动基因相互作用影响肿瘤细胞的增殖、迁移和侵袭,以及肿瘤细胞的耐药性,促进肿瘤的发展。

溶血磷脂酰胆碱酰基转移酶1在恶性肿瘤中的机制研究进展

溶血磷脂酰胆碱酰基转移酶1(lysophosphatidylcholine acyltransferase 1,LPCAT1)是LPCAT家族成员之一,作为磷脂代谢途径中的关键酶,其在乳腺癌、结直肠癌、前列腺癌、肝癌、胃癌和食管癌等多种恶性肿瘤中呈异常表达,并与肿瘤恶性增殖、迁移和侵袭密切相关。LPCAT1已被多项研究证实其可以作为一种具有泛癌特性的恶性肿瘤潜在的早期诊断生物学标志物以及治疗靶点。该文就LPCAT1在恶性肿瘤中的作用机制相关研究进展作一综述。

空间学习记忆引起脑内胆碱乙酰转移酶活性的变化

空间学习记忆引起脑内胆碱乙酰转移酶活性的变化△左萍萍刘娜陈纪君张世仪（中国医学科学院基础医学研究所，中国协和医科大学基础医学院，北京１００００５）已有资料表明，中枢乙酰胆碱是参与学习记忆的重要神经递质。主要证据是Ｍ－胆碱受体阻断剂（如东莨菪碱和阿托品...

周围神经端侧吻合后乙酰胆碱转移酶变化

目的建立一种测定乙酰胆碱转移酶（ＣｈＡＴ）的方法，以定量研究神经端端吻合与端侧吻合后神经再生能力。方法：实验显露大白鼠胫神经及腓神经，并在腓神经分支处以远０．５ｃｍ处切断。端侧吻合组在胫神经上行外膜开窗，造成５ｍｍ×５ｍｍ外膜缺损，然后将腓神经在此处与胫神经作端侧吻合。端端吻合组使腓神经切断后直接作端端吻合。术后１～３个月分别测定切断端以远ＣｈＡＴ活性，并在３组之间作比较，即（１）端端吻合组，（２）端侧吻合组，（３）非吻合组及正常对照组。结果端侧吻合３个月后ＣｈＡＴ活性是正常对照组的一半。组织学显示端侧吻合与端端吻合组均显示有大量有髓纤维存在。结论这些结果提示端侧吻合后具有ＣｈＡＴ活性证实神经端侧吻有可能为临床治疗神经撕脱伤及大段缺损提供一条途径。

溶血磷脂酰胆碱酰基转移酶3调控内皮细胞激活

目的探究溶血磷脂酰胆碱酰基转移酶3(Lyso-PL Acyltransferases 3,LPCAT3)在湍流(Oscillatory Flow,OSS)介导的内皮细胞激活中的作用。方法于2020年11月—2023年6月济宁市第一人民医院分离5只C57BL/6雄性小鼠的主动脉弓(AorticArch,AA)及胸主动脉(ThoracicAorta,TA),用于提取mRNA检测LPCAT3的表达。将原代内皮细胞随机分为对照组(Static)和研究组(OSS),检测LPCAT3的mRNA水平。同时,敲减LPCAT3,验证血管细胞黏附因子-1(Vascular Cell Adhesion Molecule 1,VCAM-1)、细胞间黏附因子-1(Intercellular Adhesion Molecule 1,ICAM-1)的mRNA表达。结果与胸主动脉(1±0.42)相比,小鼠主动脉弓LPCAT3的mRNA相对表达水平(2.03±0.5)明显上调,差异有统计学意义(P<0.05)。与研究组mRNA的相对表达水平(2.72±0.72)(3.04±0.56)相比,OSS+siLPCAT3组其VCAM-1及ICAM-1表达明显降低为(1.31±0.4)(1.81±0.51),差异有统计学意义(P均<0.05),这意味着抑制内皮细胞LPCAT3能够明显减少湍流介导的炎症因子的表达。结论LPCAT3能够调控湍流介导的内皮细胞激活。