混合型肝细胞癌-胆管癌的诊疗进展

混合型肝细胞癌-胆管癌(cHCC-CCA)是常见的原发性肝癌之一,其同时具有肝细胞癌(HCC)和肝内胆管癌(iCCA)的特征。在临床上,cHCC-CCA较HCC和iCCA更为少见。由于组织来源丰富以及缺乏特异性临床表现,cHCC-CCA的病理诊断和治疗方案选择往往难度加大。目前治疗cHCC-CCA的方法包括手术治疗、局部治疗、辅助治疗等,但不同治疗方法在cHCC-CCA中的应用价值仍有待探讨。随着cHCC-CCA的病理诊断及治疗方案的不断完善,明确其组织来源和表型将有助于进一步优化治疗方案,使患者得到更大获益。

miR-200c/ZEB1/E-cadherin轴在胆管癌转移侵袭中的作用及对胆管癌预后评估的价值

目的:探讨微小RNA-200c(miR-200c)/锌指转录因子(ZEB1)/E-钙黏蛋白(E-cadherin)在胆管癌(HCCA)转移、侵袭中的作用及对HCCA预后评估的临床价值。方法:选取2020年08月至2022年12月间我院收治的胆管癌患者36例为研究对象,同时选取胆管良性疾病患者(胆总管结石或胆管良性狭窄)20例作为对照。采用原位杂交、实时荧光定量PCR检测miR-200c在HCCA患者组织及血清中的表达;生存曲线分析miR-200c表达与总生存期的相关性;Transwell实验检测细胞的迁移及侵袭能力;免疫印迹检测ZEB1及E-cadherin蛋白的表达。体内研究构建裸鼠成瘤实验,采用免疫组化检测ZEB1及E-cadherin蛋白的表达;Tunel技术检测组织中的凋亡情况。受试者工作特征(ROC)曲线评估生物标志物对胆管癌预后的诊断效能。结果:miR-200c低表达于HCCA组织及血清中;生存曲线分析显示,miR-200c表达与患者的总生存期呈正相关性,TNM分期与患者的总生存期呈负相关性;miR-200c mimics抑制了胆管癌细胞的迁移和侵袭能力,并降低ZEB1表达而诱导E-cadherin表达;转染ZEB1逆转miR-200c的作用效应,促进胆管癌细胞的迁移和侵袭特性,抑制胆管癌细胞的凋亡。CA199、CEA和miR-200c联合检测诊断胆管癌预后的ROC曲线下面积为0.892,灵敏度0.8611,特异度0.8000。结论:miR-200c/ZEB1/Ecadherin轴参与胆管癌的转移侵袭;CA199、CEA和miR-200c联合检测对胆管癌预后的诊断效能良好,对临床胆管癌的治疗策略具有重要指导价值。

ERCP与经口胰胆管镜技术置入胆管支架在高位胆管癌中的疗效对比分析

目的探讨经ERCP与经口胰胆管镜技术行胆管支架置入在高位胆管癌中的疗效。方法回顾性分析2021年1月至2023年9月在南阳市中心医院行胆管支架置入的136例高位胆管癌患者临床资料。根据胆管支架置入方式分为ERCP组(86例)和经口胰胆管镜组(50例)。比较两组患者年龄、相关检验指标、住院天数、术后并发症、肝衰竭发生率、黄疸缓解率、支架材质及通畅率等情况。结果所有患者均成功完成手术。两组在术后肝衰竭发生率、黄疸缓解率、不同材质支架在术后并发症及短期通畅率方面对比,无明显统计学意义(P>0.05)。两组患者术后总的并发症比较,差异有统计学意义(t=12.02,P<0.05),其中术后胆道感染、术后出血相比较,ERCP组分别为26.7%、11.6%,明显高于经口胰胆管镜组的10.0%、2.0%(2=5.42,3.94;P<0.05);两组患者平均住院天数比较,经口胰胆管镜组(10.78±2.17)d<ERCP组(12.91±2.96)d,差异有统计学意义(P<0.05);两组患者手术前后肝功能明显改善,相关检验指标下降明显(P<0.05);塑料支架与金属支架在术后并发症及短期通畅率方面对比,无明显差异(P>0.05),在通畅时间>6个月的情况下,金属支架通畅率明显高于塑料支架(P<0.05)。结论经ERCP与经口胰胆管镜技术置入胆管支架对于缓解高位胆管癌临床症状有效,均可提高患者生存质量。其中经口胰胆管镜技术并发症发生率低、恢复快、优势更大,但花费较高;塑料支架对预期生存时间较短的患者有益,金属支架更适用于预期生存时间较长的患者。

PI3Kγ调控肿瘤相关巨噬细胞表型影响胆管癌细胞EMT进程与干性特征

目的探究磷酸肌醇3-激酶γ(phosphatidylinositide 3-kinaseγ,PI3Kγ)调控肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophage,TAM)表型影响胆管癌细胞EMT进程及干性特征的作用。方法利用佛波酯(Phorbol 12-myristate 13-acetate,PMA)和IL-4诱导建立M2型TAM,并使用PI3Kγ抑制剂AS605240进行干预,观察细胞形态变化,免疫细胞荧光染色检测细胞表面M2特异性表型标志物CD163表达情况。建立M2型TAM与人胆管癌细胞系QBC-939共培养体系,分组为对照组、M2组、PI3Kγ抑制剂组,进行对应处理后收集QBC-939细胞,Transwell实验检测细胞迁移与侵袭能力,免疫细胞荧光染色观察细胞内E-cadherin与Vimentin表达,Western blotting检测细胞中E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、MMP2及MMP9蛋白表达,肿瘤细胞成球实验检测细胞干性,Western blotting检测细胞中肿瘤干细胞相关蛋白CD133、OCT4及SOX2蛋白表达。结果经PMA和IL-4诱导后,细胞呈典型M2型形态,CD163荧光强度明显增加,但经PI3Kγ抑制剂干预后,M2型细胞数目明显减少,CD163荧光强度减弱。与M2组比较,PI3Kγ抑制剂组细胞迁移数目与侵袭数目均减少(P<0.05),E-cadherin荧光密度值升高、Vimentin荧光密度值降低(P<0.05),E-cadherin蛋白表达水平上调而N-cadherin、Vimentin、MMP2、MMP9蛋白表达水平均下调(P<0.05),同时,肿瘤细胞成球数量减少(P<0.05),CD133、OCT4及SOX2蛋白表达水平均下调(P<0.05)。结论抑制PI3Kγ能够抑制M2型TAM表型转化,从而抑制胆管癌细胞的EMT进程及肿瘤干性特征,发挥抗癌作用。

光敏剂DCFP-Cl介导的光动力治疗在胆管癌中应用的实验研究

目的:探究光敏剂DCFP-Cl介导的光动力治疗(photodynamic therapy,PDT)对胆管癌细胞系的生物安全性和有效性。方法:人肝胆管癌细胞(RBE)与DCFP-Cl共培养,观察DCFP-Cl在细胞内的荧光成像潜力,引入Mito-Tracker Green观察DCFP-Cl的细胞器靶向性;使用Calcein AM、DCFH-DA试剂盒检测PDT后细胞活性及细胞内单态氧产生情况;使用CCK-8法定量评估DCFP-Cl对细胞的暗毒性、光动力效率;通过FACS法初步探索DCFP-Cl介导光动力的作用机制;构建荷瘤裸鼠模型,进行动态活体荧光成像,观察DCFP-Cl体内荧光成像能力,通过分组治疗,观察DCFP-Cl对活体肿瘤的抑制作用及生物安全性。结果:在RBE细胞内可见DCFP-Cl的红色荧光与Mito-Tracker Green的绿色荧光重叠,皮尔森相关系数为0.78±0.07,呈强相关;接受PDT组,细胞活力检测实验中未见明显绿色荧光,活性氧实验中显示出明显的绿色荧光;在光照下,随着DCFP-Cl浓度梯度增加RBE细胞存活率逐渐降低,IC50为7.12μmol/L;通过FACS分析,DCFP-Cl介导的PDT诱导细胞死亡的方式主要为细胞凋亡,总体凋亡率随辐照时间延长而增加(t=5.726,P<0.05);荷瘤裸鼠通过尾静脉注射DCFP-Cl,2 h后DCFP-Cl开始在肿瘤区域积聚,以8 h聚集效果最佳;分组治疗中,PDT组肿瘤的大小明显小于其他三组(F=26.82,P<0.001),其HE染色中肿瘤细胞膜不完整,TUNEL染色中可见明显的细胞凋亡,且该组裸鼠主要脏器均未受到损害。结论:DCFP-Cl介导的PDT在胆管癌的体内、外实验中均展现了良好的生物低暗毒性、稳定的荧光成像能力和优异的抗肿瘤活性。

胆道 125 I粒子支架置入术在不可切除肝外胆管癌中的疗效分析

目的分析胆道125 I粒子支架置入术在不可切除肝外胆管癌中的疗效。方法回顾性分析2015年1月至2023年1月盐城市第三人民医院收治的肝外胆管癌患者64例。根据治疗方法分为观察组34例和对照组30例,对照组采用裸金属胆道支架治疗,观察组采用125 I粒子胆道支架置入术治疗,记录两组的手术时间。治疗1个月后,比较两组患者的血清胆红素、癌胚抗原(CEA)、糖类抗原(CA)19-9、碱性磷酸酶、γ-谷氨酰转肽酶、丙氨酸转氨酶、并发症及不良反应。随访12个月,记录支架通畅时间、中位总生存期(OS)。结果观察组和对照组的手术时间分别为(32.61±10.91)min、(21.09±8.37)min,观察组手术时间长于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,观察组与对照组患者的胆红素水平分别为(20.56±4.02)μmol/L、(27.85±4.16)μmol/L,与治疗前比较,两组胆红素水平均降低,观察组低于对照组(P<0.05)。治疗后,两组患者的CEA、CA19-9水平均降低,观察组低于对照组(P<0.05)。治疗后,两组患者的碱性磷酸酶、γ-谷氨酰转肽酶、丙氨酸转氨酶水平均降低,观察组低于对照组(P<0.05)。观察组和对照组的不良反应发生率分别为14.71%(5/34)、13.33%(4/30),差异无统计学意义(P>0.05)。观察组和对照组的支架通畅时间分别为(10.37±1.06)个月、(6.74±0.81)个月,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。观察组中位OS为12个月,对照组中位OS为9个月。观察组OS高于对照组(P<0.05)。结论125 I粒子支架置入治疗不可切除肝外胆管癌,有助于改善胆道梗阻,延长支架通畅时间,抑制肿瘤标志物表达,安全性良好。

非编码RNA在胆管癌化疗耐药中的作用机制研究进展

胆管癌(Cholangiocarcinoma)作为一种恶性程度高、预后差、手术切除率低的重大疾病,对人类健康构成了严重威胁。对于晚期或无法手术的患者,化疗成为关键的治疗手段。然而,化疗耐药性的问题一直是临床治疗的难题,其背后的机制复杂且涉及多因素。近年来的研究发现,在胆管癌中,非编码RNA的异常表达通过调控细胞凋亡、细胞周期、上皮–间质转化(EMT)以及细胞自噬等关键生物学过程,显著影响肿瘤对化疗药物的敏感性。本综述旨在梳理当前关于非编码RNA在胆管癌耐药性调控中的分子机制的研究进展,并探讨靶向非编码RNA以克服胆管癌耐药性的潜力,旨在为胆管癌的治疗策略提供创新思路,并为开发新的治疗药物奠定理论基础。

MRCP联合DCE-MRI在胆管结石合并胆管癌术前诊断中的应用价值

目的:分析磁共振胰胆管造影(MRCP)联合多期动态增强磁共振扫描(DCE-MRI)在胆管结石合并胆管癌术前诊断中的应用价值。方法:研究对象为96例疑似胆管结石合并胆管癌患者,入院后均进行MRCP联合DCE-MRI,并与手术病理检查结果相对照,总结MRCP+DCE-MRI在胆管结石合并胆管癌术前评估中的应用价值。结果:手术病理检查确诊胆管结石90例(100.0%),MRCP+DCE-MRI检出87例(96.7%),二者相比差异无统计学意义(P>0.05)。手术病理检查检出胆管癌46例(100.0%),MRCP+DCE-MRI检出43例(93.5%),二者相比差异无统计学意义(P>0.05)。手术病理检查检出46例胆管癌患者均存在周围侵犯,检出率100.0%,MRCP+DCE-MRI检出周围侵犯43例,检出率93.5%,二者相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论:在胆管结石合并胆管癌的术前诊断中,MRCP+DCE-MRI联合应用可提升诊断的准确性,为手术治疗提供依据。

胆管癌MR和CT征象分析

目的总结分析胆管癌MR和CT直接征象和间接征象。方法收集整理2019年3月—2022年10月解放军总医院第五医学中心胆管癌手术切除且于术前1周内行MR或CT动态增强扫描检查的病例62例,分析各序列及动态增强扫描影像征象,总结各影像表现的出现率。结果62例患者中病灶大小介于(0.8~8.9)cm×4.2 cm之间,MR检查病灶表现为T1WI高信号4例、等信号2例、低信号36例、不均匀1例,T2WI高信号35例、等信号3例、低信号3例、不均匀2例,DWI序列高信号40例,等信号3例,明显强化19例,轻度强化17例,无强化6例,快进快出型强化19例,持续强化24例,延迟强化11例。CT扫描病灶表现为平扫2例病灶为等密度,3例为稍高密度,14例为稍低密度;碘氟醇动态增强扫描,动脉期轻度强化12例,显著强化4例,无强化3例;门脉期稍高密度7例,稍低密度7例,高密度4例,等密度1例;延迟期稍高密度10例,稍低密度5例,等密度2例,高密度2例。间接征象包括胆管扩张,62例患者中胆管扩张47例,其中枯枝状扩张38例,软藤状扩张3例,枯枝状伴软藤状扩张4例,蚯蚓状扩张2例。结论病灶延迟强化和持续强化及枯枝状胆管扩张是胆管癌MR和CT扫描典型的直接征象和间接征象。

进展期胆管癌患者静脉血栓栓塞症的发生及临床意义

目的分析进展期胆管癌患者静脉血栓栓塞症的发生及临床意义。方法2019年3月至2020年3月泰州市第四人民医院收治的进展期胆管癌患者65例,根据是否发生静脉血栓栓塞症分为发生组(n=35)和未发生组(n=30)。所有患者在入院后接受实验室检查、彩超检查和Caprini量表评估,对两组各项指标进行单因素分析,多因素logistic回归分析进展期胆管癌患者静脉血栓栓塞症发生的危险因素。结果发生组的血小板、D-二聚体和纤维蛋白原水平为(419.4±102.5)×109/L、(2.9±1.3)mg/L、(9.8±2.6)mg/L,高于未发生组的(302.1±25.6)×109/L、(1.8±1.2)mg/L、(7.5±1.8)mg/L,发生组抗凝血酶Ⅲ水平为(72.9±8.5)%,低于未发生组的(98.2±25.8)%,差异有统计学意义(P<0.05)。血小板、D-二聚体、纤维蛋白原、γ-谷氨酰转移酶、抗凝血酶Ⅲ、Caprini>3分、彩超检查阳性是进展期胆管癌患者静脉血栓栓塞症发生的独立危险因素(OR=4.577、4.702、5.018、4.797、5.114、4.674、5.038,P<0.05)。结论血小板、抗凝血酶Ⅲ、D-二聚体、纤维蛋白原、Caprini量表、彩超检查可在一定程度上预测静脉血栓栓塞症的发生。

基于倾向性评分匹配的腹腔镜与开腹手术治疗肝内胆管癌疗效的初步分析

目的初步分析腹腔镜手术与开腹手术治疗肝内胆管癌(intrahepatic cholangiocarcinoma,ICC)的疗效。方法回顾性分析我科2010年9月~2023年3月84例ICC接受手术治疗的临床资料,腹腔镜组45例,开腹组39例,通过倾向性评分匹配,最终34对数据成功匹配,比较2组手术时间、术中出血量、清扫≥6枚淋巴结比例、R0切除率、并发症、术后住院时间、生存率及复发等。结果腹腔镜组术中出血量明显少于开腹组(中位数:250 ml vs.750 ml,Z=-3.406,P=0.001);腹腔镜组清扫≥6枚淋巴结比例与开腹组比较差异无统计学意义(5.9%vs.17.6%,χ^(2)=1.275,P=0.259);腹腔镜组与开腹组R0切除率差异无显著性[88.2%(30/34)vs.82.4%(28/34),χ^(2)=0.469,P=0.493]。腹腔镜组总并发症发生率17.6%(6/34),显著低于开腹组47.1%(16/34)(χ^(2)=6.719,P=0.010);2组严重并发症率均为2.9%(χ^(2)=0.000,P=1.000)。腹腔镜组术后住院时间明显缩短(中位数:7 d vs.10 d,Z=-3.021,P=0.003)。腹腔镜组中位总生存期60.6月,明显长于开腹组15.9月(log-rank χ^(2)=5.788,P=0.016);腹腔镜组中位无复发生存期26.4月,明显长于开腹组7.6月(log-rank χ^(2)=4.532,P=0.033)。结论腹腔镜肝切除术治疗ICC具有出血量少、并发症发生率低、术后住院时间短、生存期延长等优势,R0切除率、充分淋巴结清扫率与开腹手术相当。

射频消融与外科手术在富动脉血供肿块型肝内胆管癌中的疗效对比

目的探讨射频消融与外科手术在富动脉血供肿块型肝内胆管癌(IMCC)治疗中的效果差异。方法回顾性分析2014年9月至2020年4月丽水市中心医院和广西医科大学第一附属医院经病理证实且在磁共振增强扫描中呈现富动脉血供的IMCC患者的临床资料。按根治方法分为手术组(n=24)及介入组(n=13),采用t检验和Mann-whitney U检验比较两组临床、病理及影像学资料,采用Kaplan-Meier分析和对数秩检验进行组间生存率分析。结果两组患者的术前临床一般资料、实验室检查结果、病灶的术前影像表现、术后肿瘤病理分化程度等资料的对比差异均无统计学意义(均P>0.05)。介入组术后总并发症发生率低于手术组[38.5%(5/13)vs 91.7%(22/24),Z=-3.432,P=0.001]。随访0.6~109.3个月,期间手术组死亡7例、存活17例、复发12例,平均生存时间82.2个月,总生存率(OS)为70.8%,无瘤生存率(RFS)为37.2%,1、3、5年生存率分别为91.7%、79.2%、70.8%,1、3、5年复发率分别为13.6%、40.9%、50.4%;介入组死亡4例、存活9例、复发7例,平均生存时间84.7个月,OS为67.3%,RFS为44.9%,1、3、5年生存率分别为100.0%、84.6%、67.3%,1、3、5年复发率分别为15.4%、46.2%、55.1%;两组OS(χ^(2)=0.002,P=0.969)与RFS(χ^(2)=0.009,P=0.923)差异均无统计学意义。结论射频消融与外科手术对富动脉血供IMCC具有相似的治疗效果。

光动力疗法在胆管癌诊疗中作用机制研究进展

胆管癌是一种罕见但危险的肿瘤,具有早期诊断率低、预后不良等特点,临床上手术切除是根治胆管癌的有效手段,但术后复发率高,而放化疗、介入治疗疗效尚不尽满意。光动力疗法利用光敏剂和激光进行肿瘤治疗,在胆管癌应用中已取得了初步成效,但关于光动力疗法对癌细胞的作用机制还需要深入研究。本文通过对光动力疗法在胆管癌治疗中免疫治疗、血管生成抑制、抗氧化剂及热休克蛋白等机制,以及对光动力疗法联合靶向药物/放射治疗联合作用做一综述,旨在为临床上胆管癌的治疗提供理论依据参考,以期为临床上胆管癌的综合治疗提供安全、有效的治疗手段。

胆管癌免疫相关基因的筛选及预后模型构建

目的:基于生物信息学构建胆管癌免疫相关预后模型。方法:首先基于癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas, TCGA)下载胆管癌(cholangiocarcinoma, CCA)的转录组测序(RNA-seq)数据,和从ImmPort网站下载的免疫相关基因(immune-related genes, IRGs)取交集。接着通过“DESeq2”R包进行差异分析,进一步用批量单因素COX、LASSO回归筛选基因,将得到的7个基因和临床信息一起进行多因素COX分析,构建胆管癌预后模型。使用Kaplan-Meier(K-M)生存曲线、风险因子关联分析、受试者工作特征曲线(receiver operator curve, ROC)进行验证,绘制列线图(Nomogram)。然后,研究模型风险评分和患者临床特征的相关性,并对差异基因进行富集分析。最后,探究高低风险组的免疫特征以及药物敏感性。结果:筛选出3个免疫相关基因(GDNF、FGF11、LCN2)和年龄一起构建预后模型,模型一致性指数(C index value)为0.8。高风险组患者的预后差,免疫细胞浸润程度高,免疫检查点基因表达高,高危免疫亚型占比大,免疫治疗有效率及抗肿瘤药物敏感性低。结论:该研究构建的免疫相关预后模型能够有效预测胆管癌患者的预后以及免疫相关特征和药物治疗有效性。

FZD7、GAL-8在肝内胆管癌中的表达及其与临床病理特征和预后的关系

目的分析肝内胆管癌(ICC)中卷曲同源蛋白7(FZD7)、半乳糖凝集素8(GAL-8)的表达及其与临床病理特征和预后的关系。方法选取2017年4月—2020年4月榆林市第一医院肿瘤科诊治的ICC患者84例作为研究对象,患者均进行根治性手术。采用免疫组织化学法检测癌组织和癌旁组织FZD7、GAL-8蛋白表达;Spearman秩相关分析FZD7与GAL-8的相关性;Kaplan-Meier法分析FZD7、GAL-8表达对ICC患者生存预后的影响;Cox回归分析ICC的预后影响因素。结果ICC癌组织中FZD7、GAL-8阳性率分别为73.81%(62/84)、71.43%(60/84),高于癌旁组织的4.76%(4/84)、7.14%(6/84),差异有统计学意义(χ^(2)=83.950,72.770,P均<0.001);ICC中FZD7与GAL-8表达呈正相关(r s=0.745,P<0.001);低分化程度、有淋巴结转移、TNM分期Ⅲ期的ICC癌组织中FZD7、GAL-8阳性率高于高中分化、无淋巴结转移、TNM分期Ⅰ~Ⅱ期(FZD7:χ^(2)/P=8.221/<0.001,6.097/0.014,13.014/<0.001;GAL-8:χ^(2)/P=7.207/0.007,5.555/0.018,11.760/0.001)。FZD7阳性组3年总生存率为32.26%(20/62),低于阴性组的68.19%(15/22)(Log rankχ^(2)=8.723,P=0.003);GAL-8阳性组3年总生存率为28.33%(17/60),低于GAL-8阴性组的75.30%(18/24)(Log rankχ^(2)=24.310,P<0.001)。TNM分期Ⅲ期、低分化程度、淋巴结转移、FZD7阳性、GAL-8阳性是影响ICC患者预后的独立危险因素[HR(95%CI)=1.614(1.215~2.145),1.516(1.219~1.884),1.916(1.315~2.791),1.826(1.222~2.729),1.737(1.237~2.438)]。结论ICC癌组织中FZD7、GAL-8表达上调,两者均参与ICC肿瘤进展,是评估ICC患者预后的肿瘤标志物。

沉默信息调节因子2在胆管癌中的表达及其对可切除胆管癌患者预后的预测价值

目的:探究沉默信息调节因子2(SIRT2)在胆管癌组织中的表达、潜在作用机制及临床意义,并构建可切除胆管癌患者生存预测模型。方法:首先,通过癌症基因图谱和基因表达综合数据库分析SIRT2在胆管癌组织与正常组织中的表达差异,并通过基因集富集分析(GSEA)探讨SIRT2在胆管癌中的潜在机制;其次,免疫组织化学染色检测研究者队列胆管癌组织中SIRT2的表达,并分析SIRT2表达与胆管癌患者临床病理特征和预后的关系。最后,基于COX回归分析结果构建胆管癌术后患者预后列线图预测模型,使用校准曲线及时间依赖性的受试者工作特征曲线(ROC)对列线图模型进行评价,并与美国癌症联合委员会(AJCC)第八版TNM分期预测效果进行比较。结果:公共数据库中SIRT2 mRNA在胆管癌组织中显著过表达,免疫组织化学染色发现SIRT2蛋白在胆管癌组织中表达高于癌旁组织(均P<0.05)。GSEA结果显示,SIRT2高表达可能影响了多种代谢相关信号通路,如脂肪酸代谢、氧化磷酸化、氨基酸代谢等。SIRT2表达与血清三酰甘油水平、肿瘤大小、淋巴结是否转移相关(均P<0.05)。生存分析结果显示,SIRT2高表达患者较低表达患者总生存期显著缩短(P<0.05)。单因素回归分析结果显示,肿瘤分化程度、TNM分期、是否接受后续治疗、SIRT2表达与胆管癌患者预后相关(均P<0.05);多因素回归分析结果进一步证实,TNM分期和SIRT2表达是胆管癌患者总生存期的独立预测因素(均P<0.05)。基于SIRT2构建的胆管癌术后患者列线图生存预测模型C指数为0.675,第1、2、3年的时间依赖性ROC曲线下面积分别为0.879、0.778、0.953,与AJCC第八版TNM分期系统相比具有更好的预后预测价值。结论:可切除胆管癌患者肿瘤组织中SIRT2高表达并与患者不良预后相关,基于SIRT2构建的胆管癌术后患者的预后列线图模型可能比TNM分期系统具有更好的预测作用。

IDH1基因在肝内胆管癌细胞HuCCT1增殖与迁移中的作用及其初步机制

目的探讨异柠檬酸脱氢酶1(IDH1)在肝内胆管癌(iCCA)细胞HuCCT1增殖与迁移中的作用及其可能的分子机制。方法采用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建IDH1基因敲除的HuCCT1细胞(HuCCT1^(IDH1-/-));CCK-8法和克隆形成实验检测IDH1野生型HuCCT1(HuCCT1^(WT))细胞和HuCCT1^(IDH1-/-)细胞的增殖能力;细胞划痕和Transwell实验检测细胞的迁移和侵袭能力;Western blotting检测细胞上皮间质转化(EMT)相关蛋白E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、Wnt3a、β-连环蛋白(β-catenin)的表达水平。生物信息学方法分析上述两种HuCCT1细胞的转录组测序结果,Western blotting验证转录组信息通路相关蛋白的表达。结果与HuCCT1细胞比较,HuCCT1^(IDH1-/-)细胞增殖和克隆形成数目明显减少(P<0.05),阻滞在G_(2)/M期细胞的比例明显增加(P<0.01),划痕愈合率明显降低(P<0.01),迁移细胞数目(P<0.001)和侵袭细胞数目(P<0.05)明显减少;q RT-PCR检测结果显示,HuCCT1^(IDH1-/-)细胞IDH1、Vimentin、MMP-9和调控G_(2)/M期增殖相关基因Cyclin A2、Cyclin B1及CDK1 mRNA表达水平降低(P<0.05),编码E-cadherin的CDH1 mRNA表达水平升高(P<0.01);Western blotting检测结果显示,HuCCT1^(IDH1-/-)细胞中E-cadherin表达水平升高(P<0.05),N-cadherin、Vimentin及MMP-9蛋白表达水平降低(P<0.05)。转录组测序结果显示,HuCCT1^(WT)与HuCCT1^(IDH1-/-)存在1476个差异表达基因(DEGs);基因本体论(GO)分析显示上述DEGs显著富集在炎症反应、细胞信号转导和细胞代谢等生物学过程;KEGG通路分析显示上述DEGs显著富集在Wnt、MAPK、Rap1、Hippo、TNF等与肿瘤细胞增殖和侵袭转移密切相关的信号通路。Western blotting验证结果显示,与HuCCT1^(WT)比较,HuCCT1^(IDH1-/-)细胞Wnt信号通路的Wnt3a和β-catenin蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论IDH1基因参与调控iCCA细胞HuCCT1的迁移、侵袭及EMT过程,其机制可能与激活Wnt/β-catenin信号通路有关。

腹腔镜肝门部胆管癌根治术8例临床体会

目的探讨腹腔镜肝门部胆管癌根治术的可行性。方法回顾性分析2019年6月至2023年11月7例以及2024年1月1例于南京医科大学附属淮安第一医院行腹腔镜肝门部胆管癌根治术的共8例患者的临床资料,分析患者临床资料、手术情况及术后恢复情况。结果8例行腹腔镜肝门部胆管癌根治术的患者中,2例术前行经皮经肝胆管穿刺引流(PTCD)减轻黄疸,复查肝功能提示总胆红素降至80μmol/L以内后手术。Bismuth分型:Ⅰ型2例,Ⅱ型3例,Ⅲa型1例,Ⅲb型2例。手术方式:5例行腹腔镜肝门部肿瘤切除术,2例行腹腔镜肝门部肿瘤+左半肝+尾状叶切除术,1例行腹腔镜肝门部肿瘤+右半肝+尾状叶切除术。中位手术时间375(270~720)min,中位出血量350(200~800)mL,中位淋巴结清扫数7(3~11)个,R0切除率100%。术后8例患者平均引流管留置时间(11.0±2.5)d,平均镇痛时间(4.0±0.8)d,平均禁食时间(2.7±1.0)d,中位住院时间17(15~25)d,平均住院费用(7.8±2.2)万元。3例出现围手术期并发症,1例腹腔感染,1例A级胆瘘,1例上消化道出血,均经保守治疗后病情稳定,顺利出院。随访至2024年3月,中位随访时间16(2~48)个月。6例患者存活,2例因术后复发死亡,患者中位生存时间34个月。结论本临床中心的初步研究表明,通过精准的术前评估,腹腔镜肝门部胆管癌根治术是安全可行的。

敲低TROAP基因对胆管癌细胞系增殖和迁移能力的影响

目的:探究Trophinin相关蛋白(Trophinin-associated protein,TROAP)基因沉默对人胆管癌细胞系RBE细胞增殖和迁移能力的影响。方法:培养人胆管癌细胞系RBE,并对其分别转染阴性对照序列和TROAP干扰序列,分别命名为si-NC组和siTROAP组。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)和平板克隆形成实验检测细胞增殖能力;流式细胞术检测细胞凋亡率;细胞划痕实验和Transwell法检测细胞迁移和侵袭能力;蛋白质印迹实验(Western blot)检测RBE细胞中上皮间充质化(EMT)相关蛋白E-cadherin、N-cadherin,PCNA以及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax和caspase-3的相对表达量。结果:与si-NC组细胞相比,si-TROAP组细胞增殖率降低,克隆个数降低,细胞凋亡率升高,迁移和侵袭能力降低(P<0.05)。与si-NC组细胞相比,si-TROAP组细胞E-cadherin蛋白相对表达水平升高,N-cadherin蛋白相对表达水平降低,Bax和caspase-3蛋白相对表达水平升高,Bcl-2和PCNA蛋白相对表达水平降低(P<0.05)。结论:TROAP基因是RBE细胞潜在的致癌基因,TROAP基因沉默可降低人胆管癌细胞系RBE细胞增殖和迁移能力,并通过缓解上皮间质转化来发挥效应。

肝内胆管癌临床诊治现状

肝内胆管癌(Intrahepaticcholangiocarcinoma,ICC)是指起源于二级胆管及其分支上皮的腺癌,其发病率仅次于肝细胞癌(Hepatocellular carcinoma,HCC),是第二常见的原发性肝癌[]。过去四十年间,ICC的发病率在全世界范围内呈显著上升的趋势,其中亚洲地区的发病率增长尤其明显,我国的ICC发病率平均每年升高11.1%[2]。在一些东南亚国家如泰国等,ICC的发病率甚至超过了HCC[3]。ICC具有发病隐匿、进展迅速以及治疗效果差等特点,恶性程度极高[4]。