胆翘注射液急性和亚慢性毒性试验

旨在评价胆翘注射液的毒性,为临床安全用药提供理论依据。以昆明小鼠为研究对象,进行急性和亚慢性毒性试验。在急性毒性试验中,给予小鼠不同浓度的胆翘注射液来测定胆翘注射液的半数致死量和最大耐受量;在亚慢性毒性试验中,小鼠以(10、5、2.5g/kg)不同剂量连续腹腔注射给药28d,在给药第28天观察小鼠的临床体征、体重及饲料利用率、血常规、血液生化指标和病理组织学变化。结果显示,急性毒性试验各剂量组小鼠均无死亡,无法测出LD_(50),最大耐受量为20g/kg。亚慢性毒性试验中用药组小鼠的临床体征、体重及饲料利用率、血常规、血液生化指标与空白组小鼠相比,无显著差异(P>0.05),组织病理学观察,实质器官无异常病变。表明胆翘注射液实际无毒,安全性好。

胆翘注射液体内外抗炎作用的研究

通过建立二甲苯致小鼠耳肿胀的炎症模型和LPS刺激RAW264.7细胞致炎模型,分别研究胆翘注射液的体内外抗炎作用。体内抗炎试验结果表明,0.025、0.05、0.1 g/(kg·BW)的胆翘注射液能够显著降低模型小鼠的耳肿胀率(P<0.01)和血清IL-1β、IL-8、TNF-α含量(P<0.05);体外抗炎试验结果表明,25、50、100μg/m L的胆翘注射液对LPS诱导的RAW264.7细胞分泌促炎因子TNF-α、IL-1β水平具有显著的抑制作用(P<0.05)。综上提示,胆翘注射液具有较好的体内外抗炎作用。

胆翘注射液中主要质量指标成分的定性和定量方法的建立

本试验旨在建立胆翘注射液中主要活性成分的定性和定量分析方法,为制订胆翘注射液的质量标准提供方法学依据。采用薄层色谱法(TLC)对胆翘注射液中胆膏、黄芩提取物、连翘提取物进行定性分析;采用高效液相色谱法(HPLC)对胆翘注射液中胆膏、黄芩提取物进行含量测定。结果显示:TLC斑点清晰,分离度好,阴性样品无干扰;猪去氧胆酸、鹅去氧胆酸、黄芩苷分别在0.125~0.625 mg/mL(R ^(2)=0.9999)、0.125~0.625 mg/mL(R ^(2)=0.9992)、0.075~0.375 mg/mL(R ^(2)=0.9999)范围时,与峰面积呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为100.1%(RSD=0.77%)、100.6%(RSD=0.72%)、101.7%(RSD=1.00%)。本试验建立的定性及定量分析方法操作简便,结果准确可靠,可作为胆翘注射液中胆膏、黄芩提取物、连翘提取物的鉴别及胆膏、黄芩提取物的含量测定方法。

高效液相色谱法测定胆翘注射液中黄芩苷的含量

采用高效液相色谱法测定胆翘注射液中黄芩苷的含量[1]。色谱柱为Agilent Eclipse XDB-C18（5μm,250mm×4.6mm id）,流动相为甲醇—水—冰乙酸（50∶50∶1）,检测波长为274nm,流速1.0mL/min,柱温30℃。在相同的色谱条件下,探讨50%甲醇溶剂、流动相（50∶50∶1）对含量测定的影响,实验结果表明,不干扰黄芩苷含量结果测定（见图1、图2）。黄芩苷在0-100μg/mL浓度范围内线性关系良好R2=0.9999（n=6）,回归方程为y=19.7840X＋4.9103,回收率为97.6%~98.9%,相对标准偏差为0.5%。本方法简单、准确、可行,适用于胆翘注射液中黄芩苷含量测定。