蒙药牛胆粉与羊胆粉中胆酸类成分的分析测定

胆酸与硫酸加热产生脱水反应,形成共轭双键,在紫外区产生特征吸收峰。用紫外-分光光度法测定了牛胆粉与羊胆粉中胆酸的含量。测定线性范围为0·0033～0·0167mg·mL-1(r=0·9997),加样回收率及RSD分别为98·48%,1·79%,96·46%,2·50%。5批次样品测定表明:牛胆粉中胆酸的含量在40·85%～43·03%之间,羊胆粉在30·88%～32·64%之间。牛胆粉精密度RSD为2·41%,羊胆粉精密度RSD为2·92%。稳定性试验在8h之内测定牛胆粉RSD为0·55%,羊胆粉RSD为0·59%。重复性试验牛胆粉RSD为2·11%,羊胆粉RSD为2·68%。方法简便、快速、便于推广应用,且可有效地控制牛胆粉与羊胆粉的内在质量。

四种动物胆粉中胆酸类成分分析及药理作用比较

目的:采用HPLC法分别测定熊胆粉与猪胆粉、牛胆粉和鸡胆粉的胆酸类成分并进行药理作用的比较。方法:采用HPLC法对胆酸类成分分析。应用Lichrospher C18(4.6mm×250 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.001 mol/L KH2PO4溶液为流动相,梯度洗脱(0～20 min,乙腈30%→30%;20～40 min,乙腈30%→40%;40～70 min,乙腈40%→50%),流速:1.0 ml/min,柱温30℃,DAD检测器,检测波长为215nm。以小白鼠为实验研究对象,利用扭体法,观察四种胆粉的镇痛作用,利用制备二甲苯致炎模型,观察四种胆粉的抗炎作用。结果:①胆酸类成分含量牛胆粉>鸡胆粉>熊胆粉>猪胆粉,四种胆粉中有相同的胆酸类成分,其中熊胆粉与牛胆粉的化学成分更为接近,共有峰重叠率达52.941%,相似度达0.540;②四种胆粉均能有效抑制二甲苯引起的小鼠耳朵肿胀,对炎症的抑制率依次为牛胆粉>熊胆粉>猪胆粉>鸡胆粉;③四种胆粉也能明显减少冰醋酸所致的小鼠扭体次数,延长潜伏期,作用强弱依次为熊胆粉>牛胆粉>鸡胆粉>猪胆粉。结论:熊胆粉与猪胆粉、牛胆粉和鸡胆粉相比较有相同的胆酸类成分,抗炎及镇痛作用接近,该方法为熊胆代用品的寻找提供了依据。

UHPLC-MS同时测定蛇胆川贝液中9种胆酸类成分

目的采用UHPLC-MS同时测定蛇胆川贝液中9种胆酸类成分,分析不同企业、不同批次产品中胆酸类成分的差异。方法采用Thermo Fisher Scientfic Bremen HYPERSIL GOLD(2.1 mm×100 mm,1.9μm)为色谱柱,流动相为0.1%甲酸水溶液-甲醇,梯度洗脱,流速0.2 mL·min^(−1),柱温为40℃。加热电喷雾离子源(HESI)负离子模式,质谱测定数据采用PRM扫描模式。结果9种成分在各自范围内线性关系良好(r≥0.9992),平均加样回收率(95.5±1.52)%~(103.1±3.81)%,RSD 1.1%~5.5%。从19批供试品中共测得牛磺胆酸、牛磺熊去氧胆酸、7-酮-3α,12-α-羟基胆烷酸、牛磺鹅去氧胆酸、牛磺脱氧胆酸钠、胆酸、牛磺石胆酸钠、鹅去氧胆酸、去氧胆酸9种胆酸类成分;其中,牛磺胆酸、牛磺鹅去氧胆酸、牛磺脱氧胆酸钠3种胆酸类化合物在所有批次供试品中均可测出。结论该方法简便稳定,对完善蛇胆川贝液的质量控制和评价方法具有一定参考价值。

基于胆酸类成分的牛胆粉质量控制与掺伪检测研究

目的建立基于胆酸类成分的牛胆粉质量控制方法,对市售牛胆粉的质量进行评价,分析可能存在的摻伪情况。方法建立同时测定牛、羊、猪、鸡、鸭等动物胆粉中胆酸类成分含量的方法,对自制样品与企业收集样品分别进行研究,以自制样品为主要依据,考察牛胆粉与猪、羊等动物胆粉的差异及含量规律,评价企业收集样品的质量及可能存在的掺伪情况。结果建立了HPLC-ELSD法同时测定牛、羊、猪、鸡、鸭等动物胆粉中12种胆酸类成分含量的方法。分析23批自制动物胆粉的测定结果,明确了牛胆粉与其他动物胆粉中胆酸类成分的含量差异;分析23批企业收集牛胆粉样品的测定结果,发现了牛胆粉中可能掺杂羊胆粉、胆酸下脚料两种主要掺伪情况。23批企业收集样品中仅8批符合规定,合格率仅34.8%,品种质量亟须加强提升和监管。结论研究建立的方法可有效控制牛胆粉的质量,识别牛胆粉中可能存在的掺伪情况,为提高牛胆粉的质量标准及加强市场监管提供了参考和依据。

基于^(1)H-NMR结合LC-MS技术分析熊胆粉及常见胆类中药中的胆酸类成分

目的 建立基于核磁共振氢谱技术(^(1)H-NMR)结合液质联用技术(LC-MS)的分析方法,阐明熊胆粉中胆酸类成分组成,找出熊胆粉与其他常见胆类中药中的差异性成分。方法 利用^(1)H-NMR非靶标分析熊胆粉及其他常见胆类中药的化学成分组,通过信号归属表征熊胆粉中胆酸类成分组成,以^(1)H-NMR图谱分段积分后峰面积为变量进行多元统计分析。利用LC-MS对熊胆粉及其他常见胆类中药中10个胆酸类成分(胆酸、熊去氧胆酸、猪去氧胆酸、鹅去氧胆酸、牛磺熊去氧胆酸、牛磺鹅去氧胆酸、甘氨熊去氧胆酸、甘氨猪去氧胆酸、牛磺胆酸、甘氨胆酸)进行含量测定,并以含量为变量进行多元统计分析。结果 基于^(1)H-NMR图谱及多元统计分析发现胆酸类成分为胆类中药的主要成分,也是熊胆粉与其他常见胆类中药的主要差异性成分。结合文献及对照品比对,从熊胆粉中初步鉴定出7个胆酸类成分。进一步结合LC-MS含量测定结果和多元统计分析验证熊胆粉与其他常见胆类中药的主要差异性胆酸类成分为熊去氧胆酸、鹅去氧胆酸、牛磺熊去氧胆酸和牛磺鹅去氧胆酸。结论 熊胆粉与其他常见胆类中药的胆酸类成分存在显著差异。与其他胆类中药相比,熊胆粉中熊去氧胆酸、鹅去氧胆酸及其牛磺型结合胆酸含量较高。^(1)H-NMR技术具有对化学成分组全面、快速分析的优势,可与LC-MS检测相互补充,共同应用于中药复杂体系成分分析和代谢组学的深入研究。

蛇胆汁及相关制剂质量控制方法研究进展

蛇胆汁为名贵中药材之一,具有清热解毒的功效,中医临床应用广泛。但因其价格昂贵、资源有限,市场掺伪、掺假、冒充替代等非法谋利的行为较多,导致蛇胆汁药材市场秩序较为混乱。现有的检测手段和分析方法专属性较差,无法对市场上掺伪造假的蛇胆汁药材及相关制剂进行真伪鉴定和质量评价。通过总结国内外文献,对蛇胆汁的化学成分、药理作用、现有标准及质量控制等研究现状进行综述,并在蛇胆汁专属性分析方面提出建议,为蛇胆汁及相关制剂的质量标准研究提供参考。

HPLC-Q-Orbitrap-MS法分析大鼠血浆中六神丸醇提物的入血成分及其代谢产物

目的:应用高效液相色谱-静电场轨道阱高分辨质谱(HPLC-Q-Orbitrap-MS)技术对六神丸醇提物在大鼠血浆中的入血极性成分及其代谢产物进行分析。方法:采用乙腈沉淀蛋白法进行样品前处理,在C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm)上,以乙腈-0.2%甲酸水溶液为流动相梯度洗脱,在电喷雾正负离子同时采集的模式下分别获得六神丸乙醇提取物、空白血浆和含药血浆样品的液相色谱-质谱信息。结果:通过质谱数据、对照品比对,初步鉴定了9个原型入血成分和19个代谢产物,其中蟾蜍二烯内酯类成分以去乙酰化、羟基化和异构化代谢产物为主,胆酸类成分以与甘氨酸结合产物为主,同时存在脱氧和羟基化产物。另发现血浆中的6种氨基酸在给药后含量显著增加。结论:本研究建立的HPLC-Q-Orbitrap-MS分析方法能有效地鉴别六神丸醇提物在体内的极性代谢成分群,为六神丸醇提取物的抗肝癌药效物质及其作用机制研究提供科学依据。

蛇胆药材及其成方制剂质量控制方法研究

目的对蛇胆及其他动物胆中胆汁酸成分进行研究,建立蛇胆药材及其成方制剂的质量控制方法。方法以乙腈-甲醇及10 mmol·L-1乙酸铵为流动相体系进行梯度洗脱,以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,采用液相色谱质谱联用技术对蛇胆及其他动物胆中胆汁酸成分进行定性鉴别及定量分析,通过胆汁酸的成分分析结果对蛇胆药材及其成方制剂中蛇胆的检查及含量测定方法进行优化,建立适合的质量控制方法。结果建立的检查方法专属性强,含量测定方法适宜,牛磺胆酸钠在0. 302~9. 053μg之间线性关系良好,r=0. 999 3,重复性实验及准确度实验结果良好,RSD均<3. 0%,适合蛇胆药材及其成方制剂的质量控制。结论建立的质量控制方法能够安全、有效的保证蛇胆药材及其成方制剂的质量,保证用药安全。