大鼠延髓背侧迷走复合体注射ghrelin激活弓状核神经肽Y/刺鼠色蛋白相关蛋白神经元而诱发多食(英文)

Ghrelin是生长素促分泌受体的内源性配体,刺激摄食并增加体重。已有研究证实ghrelin刺激摄食的作用靶点主要是下丘脑弓状核(hypothalamic arcuate nucleus,ARC)内的神经肽Y(neuropeptide Y,NPY)/刺鼠色蛋白相关蛋白(agouti-related peptide,AgRP)神经元。除下丘脑外,脑干尾部迷走复合体具有ghrelin受体,是ghrelin调控摄食活动的另一靶点。本实验旨在验证ghrelin作用于脑干尾部所诱发的摄食增加是否需要下丘脑NPY/AgRP神经元参与。在大鼠延髓背侧迷走复合体(dorsal vagalcomplex,DVC)微量注射20pmol的ghrelin,用摄食自动分析仪测量大鼠的摄食反应,用荧光定量PCR技术测定ARC的NPY/AgRP mRNA的表达水平,同时利用免疫组化技术测定ARC的NPY阳性神经元数量及光密度。结果显示,与对照组(DVC微量注射生理盐水)相比,ghrelin微注射组大鼠摄食量增加,其累积摄食量在注射后2h达最高峰;ARC处NPY/AgRP mRNA的表达水平、NPY免疫阳性神经元的数量及光密度也明显增加,且均在ghrelin注射后2h增高达到高峰。以上结果提示,大鼠DVC注射ghrelin可能通过上行纤维激活弓状核NPY/AgRP神经元,介导大鼠的多食反应。

大鼠前庭核向迷走神经背侧复合体的间接投射

目的:研究大鼠前庭核向迷走神经背侧复合体的间接投射,探索前庭信息向脑干呕吐区传递的神经通路。方法:向前庭神经下核和前庭神经内侧核注入顺行追踪剂菜豆凝集素(PHA-L),向迷走神经背侧复合体注入逆行追踪剂荧光金(FG),用免疫荧光组织化学方法显示PHA-L顺行标记纤维和终末,在荧光显微镜下观察顺行标记PHA-L的纤维和终末与FG逆行标记的细胞重叠区域。结果:在延髓外侧巨细胞旁核和腹外侧区有顺行纤维和终末与逆行标记细胞的重叠。结论:前庭核团可能经外侧巨细胞旁核和腹外侧区向迷走神经背侧复合体有间接投射,为进一步揭示前庭核团与呕吐相关的内脏反应区之间的功能关系提供了形态学基础。

在下丘脑外侧区LHA-迷走神经背侧复合体DVC神经通路上Ghrelin作用的研究进展

Ghrelin是1999年新发现的活性肽,在体内分布广泛,功能多样,在摄食调控方面有重要的作用。关于Ghrelin中枢摄食功能的研究多集中于前脑,而在其中枢下行调控中的作用和机制的研究相对较为缓慢。下丘脑外侧区-迷走神经背侧复合体是一条重要的中枢下行调控的通路。本文较为系统的综述了Ghrelin在这一下行调控通路上作用的研究,以求为解开中枢Ghrelin下行调控的机制提供一定的思路。

α-MSH对大鼠背侧迷走神经复合体胃扩张敏感神经元的作用

目的观察α-促黑色素细胞激素(α-MSH)对大鼠背侧迷走神经复合体(DVC)胃扩张敏感神经元放电频率的调节作用。方法采用多管玻璃微电极记录单个细胞外放电的电生理实验方法,观察大鼠DVC内微量注射α-MSH前后胃扩张敏感神经元放电频率的变化,并以微量注射9g/LNaCl溶液大鼠作为对照。结果在DVC中记录到62个神经元,有35个(56.45%)对胃扩张有反应,其中20个在胃扩张后放电频率增加(t=4.665,P<0.01),15个在胃扩张后放电频率减少(t=4.404,P<0.01),其余27个胃扩张后无反应。在17个给予α-MSH(500nmol/L)胃扩张后放电频率增加的神经元中,有13个微量注射α-MSH后放电频率增加(t=3.215,P<0.01),4个无反应。在11个给予α-MSH(500nmol/L)的胃扩张后放电频率减少的神经元中,有9个微量注射α-MSH后放电频率减少(t=3.393,P<0.01),2个无反应。微量注射9g/LNaCl前后胃扩张敏感神经元放电频率的改变差异无统计学意义。结论α-MSH参与调节DVC内胃扩张敏感神经元的电活动,可能部分地通过此途径参与调节能量代谢和摄食活动。

下丘脑外侧区胃泌素神经元对大鼠胃缺血-再灌注损伤的作用

目的 :观察下丘脑外侧区 (lateralhypothalamicarea,LHA)对胃缺血 再灌注损伤 (gastricischemia reperfu sioninjury ,GI RI)的影响 ,并对LHA的调控通路进行了初步分析。 方法 :采用夹闭大鼠腹腔动脉 30min ,松开动脉夹血流复灌 6 0min的GI RI模型 ,用电和化学刺激、电损毁和核团微量注射等方法。 结果 :(1)电或化学刺激LHA均显著加重GI RI;(2 )背侧迷走复合体 (dorsalvagalcomplex ,DVC)内微量注射五肽胃泌素后 ,对GI RI的效应与电刺激一致 ;(3)电解损毁双侧DVC或DVC内微量注射胃泌素受体阻断剂丙谷胺均可取消电刺激LHA加重GI RI的作用 ;(4)切断膈下迷走神经后电刺激LHA ,GI RI则减轻。 结论 :LHA具有加重大鼠GI RI的作用 ;LHA的这种作用可能是因电或化学刺激后 ,激活了其中的胃泌素能神经元 ,经其下行投射纤维释放胃泌素作用于DVC神经元上的胃泌素受体 ,并通过迷走神经介导 ,从而影响GI RI。

下丘脑外侧区内注射五肽胃泌素对大鼠胃缺血-再灌注损伤的影响

目的观察大鼠下丘脑外侧区(lateral hypothalamic area，LHA)内注射五肽胃泌素(pentagastrin，G5)对大鼠胃缺血-再灌注损伤(gastric ischemia-reperfusion inimy，GI-RI)的影响。方法核团微量注射法，采用夹闭大鼠腹腔动脉30min，松开动脉夹血流复灌60min的GI-RI模型。结果①LHA内微量(0．5μl)注射G50．1、0．5、2．5ng后行胃缺血-再灌注(GI-R)，其胃粘膜损伤面积分别较溶剂对照组增加41．3％、79．11％(P<0．01)和115．59％(P<0．01)，且有剂量-效应依赖关系。②背侧迷走复合体(dorsal vagal complex，DVC)内微量(0．5μl)注射G52．5ng后GI-R，其胃粘膜损伤面积比DVC内注射等量溶剂后GI-R组增加69．15％(P<0．01)。结论LHA内注射G5对GI-RI具有加重作用，其作用机制可能是由于激活了LHA的胃泌素神经元，通过下行投射纤维作用于DVC神经元的胃泌素受体而起作用。

弥漫性颅脑外伤对DVC及内脏活动的作用

目的观察弥漫性脑损伤(DBI)大鼠延髓内脏带(MVZ)中背侧迷走神经复合体(DVC)的神经元放电频率的变化以及观察内脏活动的变化,为临床防治DBI引起的并发症提供理论依据。方法在成功建立DBI大鼠模型基础上,应用电生理学方法,观察DBI发生后1h、2h、6h、12h、24h,大鼠MVZ中DVC神经元放电频率的变化以及DBI大鼠心率、呼吸频率和胃电活动的变化。结果DBI1h,DVC神经元放电频率、胃电、心率和呼吸频率开始出现变化;DBI2h,上述指标出现较为显著的变化,呈现第一次变化高峰。DBI6h时其变化与DBI2h时相类似;而在DBI12h时,上述指标呈现第二次更为显著的变化高峰,直至DBI24h时仍然呈现相对高水平的改变,但较DBI12h时为低。结论DBI发生后,MVZ的DVC中神经元的激活是导致内脏活动发生改变的原动力。

奥氮平多靶点激活H1R-AMPK通路导致药源性肥胖

抗精神病药物所致肥胖是长期困扰临床医师和患者的一大难题。本项目研究奥氮平"多靶点"导致肥胖的共同通路。用蛋白质免疫印迹法在奥氮平肥胖大鼠模型中检测急性及短期奥氮平给药对下丘脑内侧基底部(Medial basal hypothalamus,MBH),室旁核和迷走神经复合体(Dorsal vagal complex of brainstem,DVC)内组胺H1受体(H1 receptor,H1R)-腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)通路的调控规律,分析其与肥胖的关系。单次奥氮平给药未增加动物摄食,但显著激活MBH及DVC内H1R-AMPK信号通路,奥氮平给药3d增加动物摄食及体重,同时激活H1R-AMPK信号通路。AMPK磷酸化与动物体重呈显著正相关。奥氮平多靶点激活H1R-AMPK信号通路,该通路激活早于肥胖的发生,是动物肥胖的关键原因,多靶点抑制该通路对治疗奥氮平所致肥胖有重要意义。