背景荧光猝灭-免疫层析法检测C-反应蛋白

采用背景荧光猝灭-免疫层析法(b FQICA),基于双抗体夹心法原理,将合适浓度的捕获抗体、示踪抗体分别固定在试纸条和微孔内,层析时与样本形成抗体-抗原-抗体的夹心结构,建立了一种操作简便、灵敏度高、抗干扰性强且能快速定量检测C-反应蛋白(CRP)的方法.结果表明,CRP在0.0~100.0 ng/m L浓度范围内与相对荧光强度值(F1/F2)呈现良好的相关性,最低检出限为0.0939 ng/m L,加标回收率为87.69%~111.0%,检测3批试剂的批间和批内相对标准偏差均小于15%,与降钙素原(PCT,20.0 ng/m L)及人血清淀粉样蛋白A(SAA,10.0μg/m L)均无交叉反应.采用该方法与免疫透射比浊法同时测定41例临床血清样本,检测结果相关性良好(r=0.9585,P<0.01),2种方法无显著性差异(P>0.05).

背景荧光猝灭-免疫层析法检测牛奶中卡那霉素的方法建立

目的建立基于背景荧光猝灭-免疫层析技术快速定量检测牛奶中卡那霉素的方法。方法根据卡那霉素抗原和抗体的活性,筛选出卡那霉素抗原和抗体在检测系统中最佳的比例浓度,按照筛选出的最佳检测系统比例进行牛奶样品中卡那霉素浓度测定及完成方法学验证。结果以最佳方法测定牛奶中卡那霉素的浓度,其测定范围为0.2319~60.01μg·L^-1,最低检测限为0.2003μg·L^-1;牛奶样品中高、中、低卡那霉素测定的平均加标回收率分别为98.9%、102.3%、95.9%,RSD为2.36%、4.89%、1.41%。牛奶样品采用本法与国标方法的检测结果无显著性差异(P>0.05)。结论本方法可以确定为一种的检测牛奶中卡那霉素的专属性强、灵敏度高、简便、快速、准确的的新方法。

背景荧光猝灭-免疫层析法定量检测唾液中的安非他明

基于竞争法的胶体金免疫层析原理,将毒品安非他明(AMP)单克隆抗体AMP-mAb标记到胶体金上,制备金标探针;再将AMP完全抗原AMP-BSA和羊抗鼠抗体IgG依次包被到膜面荧光硝酸纤维素(NC)膜的检测线和控制线上,与金标探针等组装制备试纸条;结合全自动干式荧光免疫分析仪创建了背景荧光猝灭-免疫层析法,定量检测唾液中的AMP。AMP浓度在0~400 ng·mL^-1范围内与荧光猝灭信号呈良好的相关性,检出限为0.9 ng·mL^-1,加标回收率为86.66%~99.50%,重复性RSD<13%,10种常见毒品和药品均对检测结果无干扰,与UPLC-MS/MS法检测结果相关性良好。背景荧光猝灭-免疫层析法可以快速定量检测唾液中的AMP,具有良好的相关性、精密度和准确性,操作简便,成本低且仪器便于携带,适于快速现场检测和基层推广。

背景荧光猝灭-免疫层析定量检测尿纤维连接蛋白及膀胱癌辅助诊断的应用

目的:采用基于背景荧光猝灭-免疫层析技术研制的尿纤维连接蛋白(Fn)定量检测卡,建立一种快速、简单、无创的定量检测膀胱癌肿瘤标记物的方法。方法:使用Fn定量检测卡,分别检测尿液样本膀胱癌组50例、健康人组100例、其他部位肿瘤组50例和良性泌尿系统疾病组14例,利用统计分析确定出膀胱癌患者cutoff值、灵敏度、特异度,对检测结果进行LSD-t多重比较显著性分析。结果:在Fn检测结果统计分析中,膀胱癌患者组与其他各组Fn值比较差异均有统计学意义(P<0.05),而其他各组之间两两比较差异均无统计学意义(P>0.05),ROC-Fn曲线中得出cut-off为324.05ng/ml,灵敏度为70.0%,特异度为99.9%。结论:Fn检测卡能定量检测尿液中Fn含量,有较高的专属性,检测速度快,有望成为膀胱癌辅助诊疗的新方法。

基于背景荧光猝灭-免疫层析法黄曲霉毒素B_1检测卡的研制

基于背景荧光猝灭-免疫层析技术研制快速检测食用油中黄曲霉毒素B1的定量检测卡。依据黄曲霉毒素B1抗原和抗体的活性,筛选检测系统中最佳的黄曲霉毒素B1抗原浓度和抗体标记浓度,应用最佳检测系统进行食用油中黄曲霉毒素B1检测的方法学验证和样品测定。最佳检测系统中黄曲霉毒素B1抗原浓度为0.5 mg/m L,黄曲霉毒素B1抗体标记浓度为1.0μg/m L;用于测定食用油中黄曲霉毒素B1的浓度范围为1.3~50.0 ng/m L,RSD均值为0.42%,平均加标回收率为96.3%~103.2%,RSD均值为2.8%(n=9)。使用有样品采用本法与国标方法的检测结果无显著性差异(p>0.05)。本方法专属性强,灵敏度高,可快速、准确的检测食用油中黄曲霉毒素B1。

背景荧光猝灭-免疫层析法检测降钙素原

建立背景荧光猝灭-免疫层析法(bFQICA)定量检测降钙素原(PCT)的方法。利用双抗体夹心法原理,将合适质量浓度的捕获抗体、检测抗体分别固定在试纸条和微孔内,层析时与样本形成抗体-抗原-抗体的夹心结构。测定PCT的质量浓度范围为0. 27~20 ng/mL,检出限为0. 27 ng/mL,加标回收率为94. 0%~94. 6%,试剂的批间和批内相对标准偏差均小于15%,与C-反应蛋白(CRP,10. 0μg/mL)、人血清淀粉样蛋白A (SAA,10. 0μg/mL)均无交叉反应,样本中常见的干扰物在所测定的质量浓度下对PCT定量检测无明显影响,用该方法与90例临床血清样本测得值进行对比,检测结果相关性良好(r=0. 9633,P <0. 01)。

背景荧光猝灭免疫层析测定牛奶中林可霉素

目的:采用背景荧光猝灭-免疫层析法现场快速检测牛奶中林可霉素。方法:采用安装有Simple 1软件系统的背景荧光猝灭免疫分析仪,包括检测卡体系和背景荧光猝灭免疫分析仪,检测卡是其核心部件。基于背景荧光猝灭免疫层析法,建立牛奶中林可霉素的检测方法,制备了可用于快速检测的检测卡,同时进行方法学验证和样品测定。结果:确定检测卡最佳加样量为100μL,最佳反应时间为10 min;检测卡的灵敏度为0.088 ng·mL^-1,线性范围曲线方程Y=-5.000×10^-6X^3+0.000 4X^2+0.001 6X+0.489 2,林可霉素在0.0~60 ng·mL^-1之间呈良好的相关性(r=0.992 6)。检测卡批间差RSD均小于2%;长期重复性试验RSD均小于1%。采用本方法实测牛奶样本,与国标方法检测结果比较,t检验结果 P>0.05,说明采用背景荧光猝灭-免疫层析法和国标法2种方法比较没有显著性差异。结论:本法研制的检测卡专属性强,灵敏度高,在现场10 min内即可快速定量测定牛奶中林可霉素的含量,可应用于生鲜牛奶的质量控制及现场检测。