微卫星分析法有效证实从母循环中分离的胎儿滋养细胞

羊水穿刺、绒毛活检以及脐带血穿刺是目前唯一可靠的产前诊断染色体异常和单基因缺陷的方法。然而,在取材过程中有造成少数患者流产的可能。因此发展无创伤性产前诊断成为研究热点。有3种类型的胎儿细胞成为胎儿DNA的潜在来源:淋巴细胞,有核红细胞和滋养细胞。母血中胎儿淋巴细胞的主要缺点是在母血中存在的时间较长;有核红细胞因为表达的ABO抗原与母血细胞不相容,可以造成细胞溶解而产生假阴性的结果;滋养细胞唯一的形态、与母血细胞不同的抗原性以及在早孕阶段就存在母循环中这些特点,使其越来越受到重视。一般从母血中分离胎儿滋养细胞采用磁珠包被特异性单克隆抗体和荧光标记的特异性单克隆抗体以及FACS细胞拣选等方法。

母体外周血胎儿滋养细胞及有核红细胞出现频率与孕龄的关系

研究表明孕母血循环中存在胎儿细胞。通过富集胎儿细胞对其进行遗传学分析可能建立起非侵入性的产前诊断方法。本研究旨在探索孕龄与母血中胎儿细胞平均数量的关系,以便决定收获胎儿细胞的最佳时机。

基于子宫颈胎儿滋养层细胞的无创产前检测

目的探索在孕早期利用子宫颈胎儿滋养层细胞进行无创产前诊断的可行性。方法用宫颈刷收集10例自然受孕的孕妇孕早期的子宫颈脱落细胞,利用免疫磁珠分离法(trophoblast retrieval and isolation from the cervix,TRIC),从脱落宫颈细胞中分离出胎儿滋养层细胞,从分离出的阳性细胞中获得胎儿全基因组DNA,利用单细胞基因组扩增技术和低覆盖度全基因组测序检测染色体非整倍体及染色体微缺失/微重复。结果宫颈刷法收集的样本中有3例观察到β-HCG信号表达。3例样本经TRIC法分选后,β-hCG阳性细胞比例增加,利用荧光原位杂交技术可以进行准确的胎儿性别鉴定。选取TRIC法分选的男性胎儿阳性细胞进行高通量测序,结果显示利用TRIC法分选的阳性细胞中有20%为胎儿细胞,说明其捕获的特异性较低。结论利用脱落的子宫颈胎儿滋养层细胞有可能进行胎儿性别和染色体数目异常的检测,但其捕获的特异性需要进一步提高。

产科：正常妊娠

孕早期经宫颈获取胎儿滋养细胞方法的研究；非孕与早孕妇女外周血及宫内膜和蜕膜组织自然杀伤细胞亚群的变化；