辅助生殖技术中冷冻胚胎移植对双胎发育及妊娠结局的影响

目的探索冷冻胚胎移植(FET)对双胎胎儿发育情况以及妊娠结局的影响。方法纳入2015年1月至2017年12月于广州医科大学附三医院行胚胎移植并成功分娩双胎的孕妇(n=2580)及胎儿,根据出生体重分为双胎发育一致(IT,n=2225)和双胎发育不一致组(DT,n=355),探索FET对不良妊娠结局的影响;根据双胎发育类型分层,探索两组在FET和新鲜胚胎移植中不良妊娠结局的发生风险。结果纳入对象中采用FET的比例为26.4%,DT的发生率为13.8%。与IT相比,DT的小胎更可能出现小于胎龄儿(SGA,P<0.05)。相较于FET(11.1%),新鲜胚胎移植(14.7%)具有更高的DT发生率和SGA发生率。IT中,新鲜胚胎移植为SGA的危险因素。结论FET相对于新鲜胚胎移植具有较低的DT发生风险;且对于IT而言,FET可降低SGA发生风险。该研究可为计划行辅助生殖技术人群的医学咨询提供依据。

人卵丘细胞lncRNA ENST00000502521的表达与胚胎发育的关系

目的：探讨体外受精（IVF）周期人卵丘细胞（CCs）中lncRNA ENST00000502521的表达与卵母细胞成熟及胚胎发育的关系,判断其对体外受精-胚胎移植（IVF-ET）结局的预测价值。方法收集40例首次接受长方案超促排卵患者的卵丘细胞,根据卵丘细胞围绕的卵母细胞受精后胚胎发育情况将卵丘细胞分成两组,优质胚胎组和低质胚胎组,采用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应（qRT-PCR）技术检测两组卵丘细胞中 lncRNA ENST00000502521的相对表达量,分析其与胚胎发育及妊娠结局的关系；采用受试者工作特征曲线（ROC）评价 lncRNA ENST00000502521相对表达量对临床妊娠结局的预测价值。结果 IVF 患者低质胚胎组中 ln-cRNA ENST0000050252表达较优质胚胎组明显增高（ P 〈0．05）,且未妊娠组 lncRNA ENST00000502521相对表达量较妊娠组增高（P 〈0．05）；lncRNA ENST00000502521预测妊娠结局的 ROC 曲线下面积（AUC）为0．71（P 〈0．05,95% CI：0．55-0．87）,灵敏度为84．2%,特异性为61．9%。结论lncRNA ENST00000502521可能参与影响卵母细胞成熟及胚胎发育,可作为一个潜在的分子标志物预测胚胎质量和妊娠结局。

65例双胎发育不一致的临床分析

目的对双胎发育不一致进行临床分析。方法 2006年4月至2011年4月妊娠31周以后在江苏省人民医院分娩的285例双胎,计算两胎儿体重差,≥20%为研究组,<20%的为对照组。比较两组孕妇年龄、产次、受精卵性质、绒毛膜性、胎儿性别、超声脐血流S/D比值、并发症、胎儿结局有无差异。结果研究组中S/D比值之差≥0.3的比例高于对照组,具有明显的统计学意义;发育不一致的双胎受母体并发妊娠期高血压疾病的影响,具有统计学意义。结论双胎发育不一致脐血流S/D比值之差升高与母体并发妊娠期高血压疾病有关。

导致双胎发育不均衡的相关因素及双胎发育不均衡对母婴结局的影响

目的:探讨导致双胎发育不均衡的相关因素及双胎发育不均衡对母婴结局的影响。方法:选取166例双胎妊娠孕产妇作为研究对象。将其中双胎发育不均衡的81例孕产妇设为研究组,将其中双胎发育均衡的86例孕产妇设为对照组。比较两组孕产妇的各项临床指标。结果:研究组中年龄〉30岁的孕产妇占比高于对照组中相应孕产妇的占比,P<0.05;其中孕周≥35周的孕产妇占比高于对照组中相应孕产妇的占比,P<0.05;其中孕前BMI≤25的孕产妇占比高于对照组中相应孕产妇的占比,P<0.05;其中存在妊娠期高血压、妊娠期糖尿病的孕产妇占比均高于对照组中相应孕产妇的占比,P<0.05;其中孕次≥2次的孕产妇占比高于对照组中相应孕产妇的占比,P<0.05;其中胎儿为异性别的孕产妇占比高于对照组中相应孕产妇的占比,P<0.05;其中双胎分型为单绒毛膜双羊膜囊(MCDA)型的孕产妇占比高于对照组中相应孕产妇的占比,P<0.05。经logistics回归分析,孕产妇的年龄〉30岁、孕周≤35周、孕前BMI≤25、存在妊娠期高血压或糖尿病、孕次≥2次、双胎异性、怀有MCMA型双胎是导致双胎发育不均衡的危险因素。研究组孕产妇产后感染、胎膜早破、羊水异常、产后出血及胎儿生长受限、新生儿窒息、高胆红素血症的发生率均高于对照组孕产妇,P<0.05。结论:导致双胎发育不均衡的危险因素是孕产妇的年龄〉30岁、孕周≤35周、孕前BMI≤25、合并妊娠期高血压或糖尿病、孕次≥2次、双胎异性、怀有MCMA型双胎。双胎发育不均衡易引发不良的母婴结局。

刺山柑果风湿止痛凝胶膏对SD大鼠胚胎-胎仔发育的影响

目的:观察刺山柑果风湿止痛凝胶膏对SD大鼠胚胎-胎仔发育的影响。方法:实验设刺山柑果风湿止痛凝胶膏高(117.8 g/m^(2))、中(58.9 g/m^(2))、低(29.5 g/m^(2))剂量组,辅料对照组(辅料帖)和阳性对照组(环磷酰胺),妊娠第6天(GD6)~GD15每天经皮给药1次,阳性对照组于GD12皮下注射环磷酰胺。实验期间观察孕鼠的一般状况、体质量和饲料消耗量;GD20处死孕鼠,取胎仔,检查子宫连胎质量、黄体数、着床数、胎仔质量、胎仔身长、胎仔尾长、活胎数、死胎数、吸收胎数、胎仔性别及外观、内脏和骨骼畸形。结果:刺山柑果风湿止痛凝胶膏各剂量组孕鼠体质量、体质量增量、摄食量、子宫连胎质量、子宫和卵巢的脏器质量及其系数、平均黄体数、着床前丢失率、平均着床数、着床率、平均活胎数、活胎率、死胎率、吸收胎率、胎仔性别比、胎仔的外观异常率、窝均体质量、窝均身长、窝均尾长、骨骼畸形率和内脏畸形率与辅料对照组相比差异均无统计学意义(均为P>0.05)。结论:刺山柑果风湿止痛凝胶膏对SD大鼠胚胎-胎仔发育毒性的未见不良反应水平为117.8 g/m^(2),是临床拟用体表剂量的12倍。在本试验条件下,SD大鼠经皮给予刺山柑果风湿止痛凝胶膏对胚胎-胎仔发育无毒性影响。

氟诺哌齐对新西兰家兔胚胎-胎仔发育毒性及毒代动力学

目的研究氟诺哌齐(fronopezil)对新西兰家兔胚胎-胎仔发育的影响及其伴随毒代动力学,为临床用药提供参考。方法按妊娠顺序将孕兔分为溶媒(1%羟丙基甲基纤维素+1.5%聚乙二醇400水溶液)对照组、环磷酰胺(18 mg·kg^(-1),阳性对照)组及氟诺哌齐3.6,9.0和22.5 mg·kg^(-1)组。溶媒对照组和氟诺哌齐组于妊娠第6~18天(GD6-18)ig给药,环磷酰胺组于GD6-20 ig给药。GD_(28)处死孕兔,检测胚胎-胎仔发育,ELISA检测GD5,GD_(18)和GD_(28)孕兔血清中性激素水平,首末次给药前后采血进行伴随毒代动力学研究,采用高效液相色谱串联质谱法检测血浆、胎仔、胎盘和羊水中的药物浓度。结果氟诺哌齐3.6,9.0和22.5 mg·kg^(-1)对孕兔的体重、增重、摄食量和妊娠结局及胎仔的外观、内脏、骨骼和体格生长发育均未见明显影响;仅在GD_(18)或GD_(28)各剂量组卵泡刺激素、雌二醇和孕酮水平有一定程度波动。伴随毒代动力学研究结果表明,氟诺哌齐可通过胎盘屏障,但在孕兔和胎仔体内无明显蓄积;环磷酰胺组胎仔体重、顶臀长和连胎子宫重均低于溶媒对照组(P<0.01),外观和骨骼均出现畸形。结论氟诺哌齐对新西兰家兔胚胎-胎仔发育毒性的未见有害作用剂量为22.5 mg·kg^(-1),为药效起效剂量的125倍,该剂量下GD_(18)血药峰浓度为1093μg·L^(-1),药时曲线下面积为6650μg·h·L^(-1)。

乌鸡白凤片对大鼠胚胎-胎仔发育的毒性研究

目的研究乌鸡白凤片对大鼠胚胎-胎仔发育的毒性,为临床用药提供参考。方法86只孕鼠随机分为乌鸡白凤片2.5,5,10 g/kg剂量组和溶媒对照组,于妊娠第6天至第17天连续重复灌胃给药,定期进行临床观察、体重和摄食量测定;妊娠第20天解剖,解剖后观察带胎子宫、卵巢以及着床、吸收胎、死胎、活胎、黄体等相关指标,并检查活胎外观、内脏和骨骼。结果乌鸡白凤片各剂量组孕鼠的体重、摄食量、生殖器官、生殖功能指标、外观形态、内脏和骨骼发育等相关指标均未见明显异常改变。结论妊娠SD大鼠母体无不良反应剂量及胎仔无不良反应剂量均为10 g/(kg·d)。

发育不一致性双胎的研究进展

双胎妊娠发生双胎发育不一致并不少见,发育不一致性双胎围生儿早产、畸形、胎死宫内等并发症多,预后较差,临床上若能早期预测并进行相应干预,对改善妊娠不良结局有重要意义。

46例双胎妊娠发育不一致性的母儿结局

目的探讨发育不一致性双胎的母儿结局。方法以双胎胎儿体重差>20%为诊断标准,回顾分析46例发育不一致性双胎(研究组)、192例发育一致双胎(对照组)的临床资料,比较两组孕产妇一般情况、并发症和围产儿预后等方面差异。结果研究组分娩孕周明显低于对照组,孕妇平均年龄、受孕方式、胎儿性别比较无统计学意义(P>0.05)。研究组胎儿畸形、双胎输血综合征的发生率分别为13.0%、13.0%,明显高于对照组的3.12%、1.56%,差异有统计学意义(P<0.05)。研究组新生儿平均体重明显低于对照组,围产儿总死亡率及双胎之一胎死宫内率、新生儿窒息、新生儿高胆红素血症、新生儿进入NICU比率在研究组中均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论发育不一致性双胎妊娠并发症及围生儿患病率和死亡率明显高于发育一致性双胎,及早发现和处理双胎发育不一致,是改善胎儿和新生儿预后的关键。

双胎发育不一致的独立危险因素及新生儿期合并症的临床研究

目的探讨双胎妊娠发育不一致的独立危险因素及新生儿期主要合并症。方法收集2011年11月1日至2016年10月31日于北京大学人民医院产科分娩的152例(76对)双胎发育不一致新生儿及552例(276对)双胎发育一致的新生儿资料。比较2组母亲孕期及围生期情况和新生儿期合并症情况,采用Logistic回归分析双胎发育不一致的独立危险因素。结果 1.双胎发育不一致组新生儿胎龄、足月儿发生率、出生体质量均明显低于双胎发育一致组[(35.8±2.5)周比(36.7±1.8)周,48.7%比60.2%,(2 277.1±575.7) g比(2 545.0±413.4) g],差异均有统计学意义(均P<0.05);早产儿发生率、小于胎龄儿发生率、转儿科率明显高于双胎发育一致组(51.3%比39.9%,40.8%比13.2%,46.1%比26.8%),差异均有统计学意义(均P<0.05)。2.双胎发育不一致组新生儿窒息、新生儿呼吸窘迫综合征、新生儿肺炎、新生儿呼吸暂停、支气管肺发育不良等呼吸系统合并症及新生儿脓毒症、新生儿颅内出血发生率均明显高于双胎发育一致组(6.6%比2.5%,7.2%比3.1%,5.3%比1.3%,9.2%比3.3%,3.9%比0.9%,3.3%比0.7%,4.6%比0.7%),差异均有统计学意义(均P<0.05)。3.双胎发育不一致新生儿中低体质量组出生体质量明显低于高体质量组[(1 926.7±414.1) g比(2 618.7±504.6) g],小于胎龄儿发生率、转儿科率、新生儿颅内出血发生率明显高于高体质量组(65.8%比6.6%,56.6%比35.5%,9.2%比0),差异均有统计学意义(均P<0.05)。4.Logistic回归分析显示,妊娠期高血压病(OR=2.127,95%CI:1.392~3.253)及妊娠期糖尿病(OR=1.684,95%CI:1.112~2.552)是双胎发育不一致的独立危险因素。结论母妊娠期高血压病及妊娠期糖尿病为双胎发育不一致的独立危险因素,双胎发育不一致新生儿期合并症发生率高,应重视及加强对双胎发育不一致新生儿尤其是低体质量儿的胎儿期及新生儿期监护及干预。

大鼠恒温能力和产热的胎后发育

本文通过胎后各龄大鼠急性暴露于不同试验温度时的体温动态变化,显示大鼠体温调节的胎后发育有阶段性。同时表明肝线粒体的呼吸速率、氧化磷酸化及呼吸控制率等功能在胎后也有个发育过程。肝线粒体发育成熟时期,正是机体恒温能力迅速发展的阶段。推测肝线粒体的成熟可能是体温调节发育的细胞机制之一。褐色脂肪细胞色素氧化酶和α-磷酸甘油氧化酶活力的变化,表明褐色脂肪在大鼠新生儿阶段的体温调节中具有重要作用。

胎肺发育中相关活性物质的表达及其调控意义

目的 观察表皮生长因子受体 (EGFR)、转化生长因子 β(TGF β)和甲状腺转录因子 1(TTF 1)在胎肺发育过程的表达 ,探讨它们的生物活性作用及相互之间的调控意义。 方法 应用免疫组织化学方法 ,检测EGFR、TGF β(β1 、β2 、β3)和TTF 1因子在小鼠胎肺组织中的表达 ,用TIGER图像分析系统 ,对TTF 1表达强度进行定量分析。 结果 胎肺发育的早期 ,EGFR定位于近端支气管上皮 ,TTF 1表达于远端支气管上皮细胞核内 ;而TGF β1 、β2 和 β3的表达定位基本一致 ,呈区域性分布于近端支气管上皮。到发育的中、后期 ,EGFR和TTF 1因子定位于肺泡上皮细胞 ,呈强表达 ,TGF β则主要存在于间质 ;图像分析结果显示 :在胎肺发育过程 ,TTF 1阳性细胞的平均光密度 (AA)呈逐渐增加 ,而体积 (VOL)和体积积分光密度 (VIA)却逐渐减小。 结论 EGFR、TGF β和TTF 1因子在胎肺不同发育阶段具有不同表达特征 ,表明可能发挥着不同的功能 ,它们对支气管树的构筑。

布氏田鼠胎后发育过程中褐色脂肪组织和肝脏的产热特征

为探讨布氏田鼠胎后恒温能力的发育过程,本文测定了1、5、9、17、21、33和41日龄幼体的褐色脂肪组织(BAT)和肝脏的重量、线粒体蛋白含量和细胞色素c氧化酶(COX)的活性。布氏田鼠胎后发育期间BAT增补明显,主要表现为重量的增加和单位组织重量COX活性的升高等,属典型的晚成型发育特征。布氏田鼠胎后发育过程中BAT和肝脏产热特征的变化与幼体的产热特点和恒温能力的发育是相一致的。

Cx43基因在人类及小鼠胎心发育中的时空表达规律

目的 检测Cx4 3在人类和小鼠的胚胎心脏的表达 ,了解该基因在心脏发育过程中的表达规律。方法 选取人类 6～ 18孕周正常胚胎或胎儿心脏 6 3例 ,小鼠孕龄 9 5～ 16 5d胚胎心脏 6 4例 ,采用免疫组化法显示Cx4 3基因在心脏的表达。结果 早期人类胚胎心脏中 ,Cx4 3在心室肌中没有表达 ,心房肌表达微弱 ,原始小梁网中表达很高 ,随着胚胎发育 ,在心房和心室的表达逐渐增强 ,小梁网的表达在胚胎 13～ 14周达到高峰。室间隔的肌部表达量较弱 ,膜部室间隔不表达。房室瓣和大动脉根部管壁Cx4 3没有明显表达。除了在大动脉管壁表达不同 ,小鼠胚胎心脏表达规律与人类基本相同。结论 Cx4 3对于胚胎心脏的发育至关重要。

甲磺酸胺银杏内酯B冻干粉针的大鼠胚胎-胎仔发育毒性和遗传毒性实验研究

目的：检测甲磺酸胺银杏内酯B的生殖毒性和遗传毒性。方法：甲磺酸胺银杏内酯B100、50、25mg·k^-1于大鼠妊娠第6～15天连续尾静脉注射给药，观察孕鼠饮水、摄食、生长等一般状况。每周称重2次，妊娠第20天处死孕鼠，记录各项检查结果。采用Ames试验、中国仓鼠肺成纤维细胞染色体畸变试验和小鼠骨髓微核试验观察其遗传毒性。结果：供试品高、中、低剂量用药组母体未出现临床中毒症状。高剂量组和中剂量组吸收胎数、骨骼畸形与溶剂对照组相比有显著差异（P〈0．05），低剂量组与溶剂对照组相比未见统计学差异。各剂量组胎鼠身长、尾长和体重均未见明显改变（P〉0．05）。高剂量组中未见内脏畸形。供试品在每皿50～5000μg剂量范围内，未观察到回复突变菌落数明显增加。药物终浓度为800、400、200μg·ml^-1时，染色体畸变试验结果为阴性。小鼠静脉注射本品260、130和65mg·kg^-1剂量，骨髓嗜多染红细胞微核数未见明显增加。结论：在本试验条件下，甲磺酸胺银杏内酯B对大鼠母体一般状况和子代发育均安全的剂量为25mg·k^-1；未见本品有潜在的遗传毒性。

兔胚胎-胎仔发育毒性试验中环磷酰胺给药方式的探讨

目的探讨环磷酰胺不同给药途径、给药剂量对妊娠家兔胚胎及胎仔的影响,以确定诱导胎兔畸形最佳的给药方式。方法孕兔分为生理盐水对照C组、静脉注射Y1组(15 mg/kg)、皮下注射低剂量Y2组(20 mg/kg)和皮下注射高剂量Y3组(30 mg/kg),各组均在GD10~13(受孕当天为GD0)分别按相应途径给药。GD28解剖,检查黄体数、着床数、连胎子宫重、吸收胎率;取胎仔,检查胎仔性别、身长、尾长、活胎数、死胎数,并按要求进行外观畸形、内脏畸形和骨骼畸形的检查。结果环磷酰胺静脉注射组及皮下注射低剂量组孕兔胎仔均出现了畸形,两组外观畸形率分别为30.77%和95.65%,骨骼畸形率分别为7.69%和73.91%,内脏畸形率分别为20.51%和47.83%。皮下注射高剂量组吸收胎发生率为100%。结论孕兔在GD10~13皮下注射环磷酰胺20 mg/kg可用作家兔胚胎-胎仔毒性发育试验的阳性给药方法。该方法给药周期短,操作方便,吸收胎少,胎仔畸形率高,可为同行选择合适的兔胚胎-胎仔发育毒性阳性模型提供依据。

桦褐孔菌多糖对弓形虫感染孕鼠生殖器官及其胎鼠发育的影响

为探讨桦褐孔菌多糖对弓形虫感染孕鼠生殖器官及其胎鼠发育的影响,采用弓形虫RH株感染雌性性成熟小鼠,以蒿甲醚为阳性对照组,桦褐孔菌多糖为试验组,并设立阴性组和模型组。观察孕鼠胎儿的死胎数、体重、体长等发育指标,同时记录剖检前各组孕鼠死亡数和受孕数,并对孕鼠的生殖器官进行病理组织观察。经统计分析,桦褐孔菌多糖组与模型组在孕鼠死亡率和受孕率方面差异极显著(P<0.01);在死胎率、活胎鼠平均体重、活胎鼠平均体长方面差异也极显著(P<0.01);而两药物组仅在受孕率方面显著差异(P<0.05),其孕鼠生殖器官的病理组织仅呈轻微的炎症变化。表明桦褐孔菌多糖对弓形虫感染孕鼠的胎鼠发育具有保护作用;并可明显缓解弓形虫感染对孕鼠生殖机能的损害。

活血消异方对子宫内膜异位症大鼠胎仔围产期发育毒性的初步研究

目的评价活血消异方对子宫内膜异位症模型大鼠胎仔—围产期发育毒性的影响。方法采用改良同种异体移植法建立子宫内膜异位症模型大鼠,设空白组、模型组及假手术组,并以低剂量(每毫升1.8 g 生药)、高剂量(每毫升3.6 g 生药)的活血消异方灌胃,妊娠第20天处死部分大鼠,观察各组胎鼠数量、体质量、身长、尾长以及畸形情况;另有部分孕鼠自然分娩后比较各组子代断乳后存活率、畸形率及离乳后子代体质量、成年后生育力等。结果孕20 d模型组大鼠平均胎鼠数量明显少于其他各组(P<0.05);活血消异方高、低剂量组平均胎鼠数明显高于模型组(P<0.05);模型组胎鼠体质量、身长、尾长与空白组、假手术组比较,差异无统计学意义(P>0.05);中药组胎鼠体质量、身长、尾长略低于空白组及模型组(P<0.05);各组胎仔骨骼均未出现缺失和畸形。离乳前各组子代大鼠体格发育正常,断乳后子代畸形率、死亡率、存活率之间无明显差异(P>0.05);中药低、高剂量组子代断乳后体质量高于空白组、假手术组、模型组(P<0.05)。结论子宫内膜异位症疾病本身对大鼠妊娠能力有一定影响,但对大鼠胎仔及围产期发育无明显毒性;活血消异方组胎鼠体质量、身长、尾长略低于空白组及模型组,可能与胎鼠数量较多有关;且中药高、低剂量组胎鼠均无外观畸形及骨骼畸形,离乳时体格发育正常,子代大鼠断乳后无明显体质量偏低,提示活血消异方对大鼠胎仔及围产期发育并无明显毒性,但仍需进一步实验验证。

环维黄杨星D对大鼠胚胎-胎仔发育毒性的实验研究

目的:在器官发生期对怀孕大鼠连续给予环维黄杨星D,观察是否有母体毒性和胚胎毒性。方法:环维黄杨星D2、1、0.1mg/kg于妊娠第7～17d连续尾静脉注射给药,观察孕鼠饮水、摄食、生长等一般状况。每周称重2次,妊娠第20d处死孕鼠,记录黄体数、胎盘重、着床数、死胎数、活胎数、胎仔性别及体重等,观察活仔外观异常。各窝1/2胎仔作骨骼畸形检查,另1/2胎仔作内脏检查。结果:环维黄杨星D2mg/kg组,母体出现中毒症状,对胎鼠身长、体重均有影响,肾脏畸形发生率高,但对胎儿骨骼发育影响较小。环维黄杨星D1mg/kg组的着床总数、活胎数、子宫总重、胎盘重量均有明显改变。结论:环维黄杨星D对母体一般状况和子代发育均安全的剂量为0.1mg/kg。