Fcγ受体在胎盘细胞的分布

目的 检测 Fcγ受体 (Fcγ R)在胎盘组织的分布 .方法 免疫荧光染色法结合普通荧光显微镜观察 .结果 人胎盘滋养层细胞表面存在 Fcγ R ,主要分布于滋养层细胞和绒毛间质细胞 .Fcγ R 主要存在于绒毛间质细胞 .Fcγ R 在胎盘的各层细胞均未检测到 .另外 ,这 3型 Fcγ R在绒毛间隙的母血细胞中也存在 .结论 Fcγ R 分布在不同的胎盘细胞 ,提示可能与其不同功能有关 .

人胎盘细胞滋养细胞(Langhans细胞)的超微结构观察——明细胞与暗细胞

应用电镜研究人胎盘滋养细胞的超微结构,虽早有报道,但对细胞滋养细胞的电子致密度有着完全不同的描写。电子致密度低、淡(多)或高、深(少)。本文对此作了动态的观察。材料和方法:人流和自然产获取人胎盘标本67例。自最后月经带一周计起,以周龄计算。从5周至41周(缺个别周次),每个周次取材2～6例。每份标本取5处;中,晚期胎盘分子面与母面取材。常规电镜标本制备。半薄切片选区,三级终末绒毛。超薄切片。JEM——100CxⅡ电镜观察。照片电子光学放大2.700～40.000倍对比研究。

妊娠期糖尿病胎盘细胞凋亡及其与围产结局的关系

目的 :研究胎盘细胞凋亡在妊娠期糖尿病发生及其与临床结局的关系 .方法 :对 4 0例妊娠期糖尿病 (GDM )患者和 4 0例正常对照孕妇的胎盘组织进行检测 ,用DNA缺口原位末端标记 (TUNE)技术检测细胞凋亡 ,电镜观察凋亡细胞的超微结构 ,免疫组织化学方法 (S -P)检测促 (抑 )凋亡基因Bax/Bcl- 2表达水平 .结果 :妊娠期糖尿病组胎盘细胞凋亡指数及Bax、Bcl - 2阳性率、Bax/Bcl- 2的比率均高于对照组 (P <0 0 5 ) ,妊娠期糖尿病组胎盘细胞凋亡指数与孕妇血糖值和新生儿体重呈正相关 ,对照组胎盘细胞凋亡指数与孕妇血糖值和新生儿体重无相关 .结论 :妊娠期糖尿病组和对照组胎盘中均有一定量的细胞凋亡和Bax ,Bcl- 2的表达 ,妊娠期糖尿病组胎盘细胞凋亡明显增加 ,Bax/Bcl- 2的比值增加 .胎盘细胞凋亡及其调节基因的表达间具有一致性 。

胎盘细胞硝基化损伤与子痫前期/子痫发病关系的研究进展

近年研究发现,胎盘血管内皮细胞内硝基化损伤能够影响胎盘血管的舒缩反应、胎盘细胞增殖、凋亡及侵袭,因而推测,它可能在子痫前期/子痫发病机制中起重要作用。深入研究胎盘细胞硝基化、可能有助于揭示子痫前期/子痫的发病机制。现将这方面的研究进展作一综述。

建立SD大鼠胎盘提取与胎盘细胞培养的实验方法

目的建立SD大鼠胎盘提取及胎盘细胞培养的实验方法,为胎盘细胞的研究奠定基础。方法颈椎离断处死孕期20 d的SD大鼠,提取大鼠胎盘,选取有活性的胎盘组织进行细胞培养,采用倒置显微镜观察细胞形态。结果解剖孕期20 d的SD大鼠可取得胎盘,细胞培养后胎盘细胞贴壁生长,细胞形态为多角形或梭形,边界清楚,细胞核为圆形或椭圆形。结论本实验建立的实验方法切实可行,为胎盘细胞研究提供了具体的实验方法,为胎盘细胞的研究奠定基础。

AnnexinⅤ/PI法定量检测胎盘细胞凋亡

目的:探讨AnnexinⅤ/PI法检测细胞凋亡较PI法的优越性。方法:三十份正常足月胎盘的滋养细胞标本同时进行AnnexinⅤ/PI法和PI法染色,经流式细胞仪检测分析细胞凋亡的百分数。结果:AnnexinⅤ/PI法和PI法检测的结果分别为3.71±1.86%、0.69±0.48%,二者有显著性差异(P<0.01)。结论:AnnexinⅤ/PI法可检测出细胞早期的凋亡,其灵敏、准确,是目前检测细胞凋亡较好的方法。

子痫前期与胎盘细胞凋亡的研究进展

子痫前期为妊娠期所特有的疾病,是造成围产期孕妇和围生儿死亡的主要原因,是围生医学所要解决的重要课题,其病因尚未明确。近年研究发现胎盘细胞凋亡在子痫前期患者的发病中起着重要作用,细胞凋亡失衡可能为子痫前期患者的病因之一。本文综述了胎盘细胞凋亡在子痫前期患者中的观察、子痫前期与细胞凋亡关系及导致子痫前期患者胎盘细胞凋亡失衡的因素及作用机制。

胎盘细胞与其他胎儿组织间的核型差别

1984年10月25～27日在意大利 Rapallo举行的孕早期诊断的国际专题讨论会上和1985年10月9～12日在 Salt lake city 举行的美国人类遗传学会第36届年会上都提出了绒毛标本(CVS)中的嵌合体在终止妊娠后说明不能反映胎儿的核型。为此作者报告6例细胞遗传学上的差异。材料与方法按 Simoni 等(1983)介绍的直接方法测定绒毛细胞的核型。从两个或更多的平行培养中,至少用10个不同的细胞克隆获得羊水细胞的中期分裂相。用 Q 带作绒毛细胞和羊水细胞的染色体分析,至少要研究10个中期分裂相。作者作出一切努力去证实在产前诊断中发现的全部异常核型。

胎盘间充质干细胞外泌体通过调控NF-κB信号通路抑制矽肺肺纤维化的进展

目的探讨人胎盘间充质干细胞外泌体(hPMSCs-Exo)对二氧化硅(SiO_(2))诱导小鼠肺泡巨噬细胞(MH-S)肺纤维化(PF)的作用机制。方法采用差速超速离心法提取外泌体,采用蛋白质免疫印迹实验(Western blot)、透射电镜、纳米粒径追踪鉴定外泌体。用MTT实验检测24 h不同浓度SiO_(2)干预MH-S增殖细胞活力影响,结合实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测在MH-S细胞中胶原蛋白Ⅰ型(COL-Ⅰ)和α-平滑肌(α-SMA)的表达,选择SiO_(2)最佳刺激质量浓度进行后续实验。将MH-S细胞分为正常对照(Control)组、SiO_(2)组、SiO_(2)+DMSO组、SiO_(2)+PDTC组,SiO_(2)+DMSO+hPMSCs组、SiO_(2)+PDTC+hPMSCs组、SiO_(2)+DMSO+hPMSCs-Exo组、SiO_(2)+PDTC+hPMSCs-Exo组,采用RT-qPCR检测细胞炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α相对转录水平;采用Western blot检测各组NF-κB信号通路及细胞凋亡相关蛋白表达。结果SiO_(2)刺激MH-S细胞后PF相关基因COL-Ⅰ、α-SMA表达增高,炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6表达增加,NF-κB通路被激活,其相关蛋白表达量上调,细胞凋亡因子表达量上调(P均<0.01),促进了纤维化的发生;在加入抑制NF-κB信号通路抑制剂PDTC后,NF-κB通路被抑制,其相关蛋白表达量降低,炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6表达降低,PF相关基因COL-Ⅰ、α-SMA表达减弱,细胞凋亡率降低(P均<0.05),PF的发展被抑制。抑制NF-κB通路后移植hPMSCs细胞和hPMSCs-Exo,PF相关基因表达降低,炎症因子释放减少(P均<0.05),抑制了细胞凋亡,PF的发生被有效干预。结论hPMSCs-Exo可能通过调控NF-κB信号通路来抑制矽肺PF的进展。

胎盘部位滋养细胞肿瘤的临床病理诊断及一例误诊误治分析

随着我国生育政策的推进,医疗卫生部门及各级医院对于孕产妇及胎儿健康的关注程度随之加强。当前,婚检、唐氏筛查、大排畸等各种孕检、产检虽已基本普及,但仍有部分较为少见的围生期疾病初期症状不明显,且无较多临床影像学资料参考,导致误诊、漏诊,延误病情,如胎盘部位滋养细胞肿瘤(PSTT)。该疾病鲜少有文献资料研究,且临床表现无特殊性,为增进妇产科、肿瘤科临床相关医学从业者对此疾病的认知,提高诊治效率、准确度,本文报告了1例误诊、误治PSTT患者情况,分析讨论了PSTT的发病机制、临床特点、影像学表现、实验室检查和病理诊断标准、鉴别诊断要点、治疗和预后以及误诊原因,以期增加临床医生对该病的了解,提高警惕,防止误诊、误疗。

旋转生物反应器内球形体培养对人胎盘间充质干细胞炎症因子分泌的影响

背景:生物反应器内球形体培养是既能维持间充质干细胞干性又能大规模扩增的体外培养方法,明确其对干细胞免疫调节作用的影响有利于指导临床应用。目的:探讨旋转生物反应器内球形体培养对人胎盘间充质干细胞炎症因子分泌的影响。方法:从人胎盘组织中分离培养人胎盘间充质干细胞,分别进行二维培养和旋转生物反应器培养,利用倒置相差显微镜、免疫组化染色和CCK-8实验观察细胞形态与增殖能力,RT-qPCR和流式荧光法检测多种炎症因子基因表达与蛋白分泌量。结果与结论:①旋转生物反应器内培养的人胎盘间充质干细胞聚集成多细胞球形体,数量与体积逐渐增加;②苏木精-伊红染色可见旋转生物反应器内培养4 d的人胎盘间充质干细胞在球形体内分布均匀,形态正常;③免疫组化染色显示球形体内有大量人胎盘间充质干细胞的细胞核Ki-67阳性;④CCK-8实验结果显示,生物反应器内球形体培养的人胎盘间充质干细胞活力显著高于二维培养的细胞;⑤RT-qPCR和流式免疫荧光法检测结果显示,旋转生物反应器内球形体培养的人胎盘间充质干细胞中白细胞介素1β、白细胞介素4、白细胞介素6、白细胞介素8、白细胞介素10、白细胞介素17、肿瘤坏死因子α和干扰素α的基因表达量和蛋白分泌量显著高于二维培养的细胞;⑥结果表明,旋转生物反应器内球形体培养能显著提高人胎盘间充质干细胞分泌多种炎症因子的能力,加强人胎盘间充质干细胞的免疫调节作用。

芹菜素调节AMPK/mTOR通路对子痫前期胎盘滋养细胞自噬的影响研究

目的探究芹菜素对子痫前期(preeclampsia,PE)胎盘滋养细胞自噬的影响及可能的作用机制。方法取人绒毛膜滋养层HTR-8/Svneo细胞,采用缺氧复氧1 h(hypoxic-reoxygenation 1 h,H1R1)诱导建立PE细胞模型,并通过MTT法检测芹菜素对HTR-8/Svneo细胞毒性的影响。取对数生长期的HTR-8/Svneo细胞,分为对照组、H1R1组、腺苷酸活化蛋白激酶(adenosine monophosphate-activated protein kinase,AMPK)激活剂阿卡地新(acadesine,AICAR)组(1 mmol/L)、芹菜素低剂量组(10μmol/L)、芹菜素高剂量组(20μmol/L)、芹菜素+AICAR组(芹菜素20μmol/L+AICAR 1 mmol/L)。采用MTT法检测细胞活力;透射电子显微镜观察细胞自噬情况;划痕实验和Transwell小室实验检测细胞迁移、侵袭能力;Western blot法检测细胞AMPK/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)通路和自噬、侵袭相关蛋白的表达。结果与对照组比较,10、20μmol/L芹菜素对HTR-8/Svneo细胞增殖有促进作用(P<0.05)。与对照组比较,H1R1组细胞在24、48、72 h时细胞活力、划痕愈合率和穿膜细胞数、N-钙黏蛋白(N-cadherin)表达、p-mTOR/mTOR比值显著降低(P<0.05),微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ(microtubule-associated protein 1 light chain 3-Ⅱ,LC3Ⅱ)/微管相关蛋白1轻链3-Ⅰ(microtubule-associated protein 1 light chain 3-Ⅰ,LC3Ⅰ)比值、Beclin-1和E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达、p-AMPK/AMPK比值显著升高(P<0.05),自噬小体数量增多(P<0.05);与H1R1组比较,芹菜素低、高剂量组细胞活力、划痕愈合率和穿膜细胞数、N-cadherin表达、p-mTOR/mTOR比值显著升高(P<0.05),LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值、Beclin-1和E-cadherin表达、p-AMPK/AMPK比值显著降低(P<0.05),自噬小体数量减少(P<0.05);与芹菜素高剂量组比较,芹菜素+AICAR组细胞在24、48、72 h时细胞活力、划痕愈合率和穿膜细胞数、N-cadherin表达、p-mTOR/mTOR比值显著降低(P<0.05),LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值、Beclin-1和E-cadherin表达、p-AMPK/AMPK比值显著升高(P<0.05),自噬小体数量增多(P<0.05)。结论芹菜素能增强滋养细胞的侵袭能力,改善PE,其作用机制可能与抑制AMPK/mTOR通路介导的胎盘滋养细胞过度自噬有关。

补肾安胎冲剂含药血清对复发性流产小鼠胎盘滋养细胞功能、血管内皮生长因子及其受体表达的影响

目的观察补肾安胎冲剂含药血清对复发性流产(RSA)小鼠胎盘滋养细胞功能、血管内皮生长因子(VEGF)及其受体VEGF-R1、VEGF-R2表达的影响,探讨其治疗RSA的作用机制。方法RSA模型小鼠(CBA/J×DBA/2)和正常妊娠小鼠(CBA/J×BALB/c)分离培养胎盘滋养细胞,将细胞分为正常对照组(正常妊娠小鼠胎盘滋养细胞+空白血清)、模型组(RSA小鼠胎盘滋养细胞+空白血清)和补肾安胎冲剂组(RSA小鼠胎盘滋养细胞+最佳浓度补肾安胎冲剂含药血清),CCK8法检测胎盘滋养细胞增殖活力,流式细胞术检测细胞周期,RT-qPCR检测细胞VEGF、VEGF-R1、VEGF-R2 mRNA表达,Western blot检测细胞VEGF、VEGF-R1、VEGF-R2蛋白表达。结果与正常对照组比较,模型组胎盘滋养细胞增殖活力明显降低(P<0.05),S期细胞比例明显减少,G2/M期细胞比例明显增加(P<0.05),VEGF、VEGF-R1、VEGF-R2mRNA和蛋白表达明显降低(P<0.05);与模型组比较,补肾安胎冲剂组胎盘滋养细胞增殖活力明显增加(P<0.05),S期细胞比例明显增加,G2/M期细胞比例明显减少(P<0.05),VEGF、VEGF-R1、VEGF-R2mRNA和蛋白表达明显升高(P<0.05)。结论补肾安胎冲剂含药血清可增强RSA小鼠胎盘滋养细胞增殖活力,上调VEGF及其受体VEGF-R1、VEGF-R2表达,促进母胎界面血管新生,从而提高妊娠成功率。

保守手术治疗的10例Ⅰ期胎盘部位滋养细胞肿瘤病例报告及文献复习

背景与目的:胎盘部位滋养细胞肿瘤(placental site trophoblastic tumor,PSTT)是罕见的妇科恶性肿瘤,由于PSTT在子宫内独特的浸润方式和对化疗不敏感特性,全子宫切除是首选的手术方式。本研究旨在探讨Ⅰ期PSTT患者保守手术治疗的可行性和安全性。方法:纳入2015年1月-2021年12月复旦大学附属妇产科医院收治的Ⅰ期PSTT病例,同时分别以“placental site trophoblastic tumor”和“case”、“胎盘部位滋养细胞肿瘤”和“例”为关键词在PubMed和中国知网(CNKI)中检索1990年1月-2021年12月发表的接受保守手术治疗的Ⅰ期PSTT个案报道和系统病例报告,收集患者的临床病理学资料,并进行回顾性分析。结果:共纳入复旦大学附属妇产科医院收治的符合标准的病例10例,中位年龄为27岁,最常见的症状为不规则阴道出血(70.0%),中位诊断距离前次妊娠时间间隔(interval since antecedent pregnancy,ISAP)为14.5个月,中位β-绒毛膜促性腺激素(β-human chorionic gonadotrophin,β-hCG)水平为124.51 mU/mL,病灶直径为0.8~8.0 cm。复旦大学附属妇产科医院收治的10例患者经初始治疗后均获得完全缓解,平均随访时间为48.1个月,均未复发。3例患者治疗后自然受孕,其中2例足月妊娠分娩,1例因计划外妊娠行人工流产。文献复习PSTT病例显示出类似的临床病理学分布特征和疾病转归。结论:保守手术可以作为部分Ⅰ期PSTT患者的一种替代治疗方法,但需更多研究提供证据。

人胎盘间充质干细胞治疗小鼠变应性鼻炎的有效性研究

目的探讨人胎盘间充质干细胞(human placenta derived mesenchymal stem cells,HP-MSCs)对变应性鼻炎(AR)小鼠的治疗效果。方法将32只BALB/c小鼠随机平均分为4组(表示为:致敏/激发/治疗):对照组(PBS/PBS/PBS),对照+HP-MSCs组(PBS/PBS/HP-MSCs),AR+PBS组(OVA/OVA/PBS),AR+HP-MSCs组(OVA/OVA/HP-MSCs)。建立卵清蛋白(OVA)联合氢氧化铝诱导的小鼠AR模型,在造模的第20天尾静脉注射0.2 ml PBS或HP-MSCs。评估各组小鼠AR鼻部症状变化;血涂片瑞氏染色观察外周血中嗜酸性粒细胞比例;酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定外周血Ig E、Ig G1水平及鼻黏膜白细胞介素4(IL-4)、IL-5、IL-13水平。结果AR+HP-MSCs治疗组AR组小鼠AR行为症状学评分显著减轻(6.25±0.89vs.3.38±0.74,P<0.001);外周血嗜酸性粒细胞比例明显降低[(1.63±1.03)%vs.(4.13±2.57)%,P<0.05];外周血Ig E、Ig G1水平明显降低[(36.89±2.34)ng/ml vs.(57.23±2.81)ng/ml,(21.35±0.80)ng/ml vs.(27.23±0.55)ng/ml,P均<0.05];鼻黏膜IL-4、IL-5、IL-13水平降低[(229.64±12.23)pg/mlvs.(364.17±18.81)pg/ml;(48.70±3.87)pg/mlvs.(68.36±6.88)pg/ml;(41.27±2.48)pg/ml vs.(60.60±4.75)pg/ml,P均<0.05]。结论静脉注射HP-MSCs可以有效治疗小鼠AR,为进一步治疗人AR提供新思路与理论基础。

胎盘间充质干细胞外泌体对大鼠全脑缺血再灌注保护作用及机制的研究

目的明确胎盘间充质干细胞来源外泌体对大鼠全脑缺血再灌注的保护作用效应并探索可能的机制。方法在胎盘间充质干细胞中分离获得外泌体。采用改良Pulsinelli四血管闭塞法在Wistar大鼠中建立全脑缺血再灌注模型。将大鼠随机分为3组,分别为假手术组、模型组及外泌体治疗组,于给药治疗后,在24、48和72 h时间点测量脑组织含水量和Evans blue染色量,并采用Western-blotting确定脑组织中Caveolin-1和ZO-1的水平。结果本研究成功分离胎盘间充质干细胞,并分离获得了其来源的外泌体,该外泌体能够被磷钨酸染色,尺度分布为50~200 nm,且表达CD63c不表达GM-130a。在48和72 h时,治疗组脑组织水含量相较于模型组有显著下降,且治疗组与假手术组相比在72 h无显著差异。EB染色的结果与水含量的结果相似,但是在72 h仍高于假手术组。Western-blotting和免疫组化显示外泌体能够升高Caveolin-1和ZO-1的水平。结论胎盘来源外泌体能够通过调节Caveolin-1和ZO-1的水平改善全脑缺血再灌注的严重程度,可能是在老年患者中治疗缺血再灌注一种潜在方案。