马尾松胚乳愈伤组织发生的初步研究

为获取马尾松(Pinus massoniana)单倍体材料,建立其胚乳组织培养体系,对马尾松胚乳不同的消毒方法进行筛选,并分析不同基本培养基、生长调节剂配比和热激处理对愈伤诱导的影响。结果表明,胚乳的最佳消毒方式为75%酒精处理30 s+2%NaClO消毒15 min,外植体污染率为0,死亡率仅为15.56%;生长素可促进愈伤诱导且是必需的;细胞分裂素浸泡种子可代替培养基中的细胞分裂素,并能取得比较好的胚乳愈伤诱导效果,1.0 mg·mL^(-1) 6-BA浸泡30 min处理的效果最佳,在培养基WPM+NAA 2.0 mg·L^(-1)+2,4-D 1.0 mg·L^(-1)+蔗糖30 g·L^(-1)+琼脂7 g·L^(-1)中,愈伤诱导率高达87.78%;培养基DCR+NAA 2.0 mg·L^(-1)+6-BA 1.0 mg·L^(-1)+蔗糖30 g·L^(-1)+琼脂7 g·L^(-1)的胚乳愈伤诱导率最高(68.75%);热激处理可提高胚乳愈伤的诱导率和质量,以相对湿度85%下45℃热激10 min最佳,总愈伤诱导率为66.25%,成团愈伤诱导率达8.75%;增殖培养以培养基WPM+NAA 0.1 mg·L^(-1)+6-BA 2.0 mg·L^(-1)+蔗糖30 g·L^(-1)+琼脂7 g·L^(-1)最佳,增殖率达83.33%。

山核桃胚和胚乳总RNA的提取与cDNA的合成

为了快速高效地提取山核桃胚/胚乳的总RNA,满足后续实验的要求,借鉴Jaakola等的总RNA提取方法,针对山核桃种仁富含油脂及次生代谢物质的特点,对山核桃胚/胚乳总RNA提取的方法进行了改良,这种改良的CTAB法与TRIzol试剂盒法相比,虽然消耗时间较长,但得到的总RNA完整性好,纯度高,所提取的总RNA在体外能成功进行反转录。

林木多倍体诱导的研究进展

概述林木多倍体形成的机制、诱导的途径,以及林木多倍体育种的意义,对林木多倍体育种和应用中存在的问题进行简要分析。

银杏雌配子体发育过程中淀粉和蛋白质的积累与代谢

以20年生银杏核用品种‘佛指’(Ginkgo biloba L.‘Fozhi’)为试材,通过树脂切片对雌配子体发育过程中淀粉和蛋白质形成与代谢进行显微和超微结构观察。结果表明:(1)雌配子体发育过程中,细胞内淀粉和蛋白质的积累呈现规律性变化。表现为受精作用发生前,套细胞、帐篷柱细胞和颈细胞内迅速积累大量淀粉粒,靠近颈卵器周围胚乳细胞中的淀粉粒逐渐被转移而减少。受精作用发生时,套细胞和帐篷柱细胞内淀粉粒代谢迅速,靠近颈卵器周围的胚乳细胞中淀粉粒全部消失,细胞壁呈现皱缩解体现象,颈细胞的细胞壁开始解体。受精作用完成后,套细胞、帐篷柱细胞、颈细胞和颈卵器周围胚乳组织出现相继解体现象;(2)雌配子体胚乳细胞内的淀粉和蛋白质积累可分为胚乳薄壁细胞增殖期、淀粉粒和蛋白质形成期、淀粉粒和蛋白质快速积累期和淀粉粒和蛋白质缓慢积累期;(3)淀粉体由造粉质体发育而来,每个造粉质体可含一到多个淀粉体,以芽孢或中间缢断的方式增殖。蛋白质体存在P1和P2两种形式,其中P1存在于内部的胚乳细胞中,P2存在于外围的糊粉层中。受精作用发生前套细胞、帐篷柱细胞内充满了大量的淀粉体和蛋白质体等营养物质,并分布有较多的线粒体、内质网和小泡等细胞器。