荔枝转基因胚性愈伤组织原生质体分离条件的优化

对荔枝品种下番枝转基因胚性愈伤组织原生质体分离条件进行了优化.结果表明:转基因胚性愈伤组织抗性细胞系Q811培养16-18 d后,转入含8 g.L-1纤维素酶Cellu lose R-10和4 g.L-1离析酶M acrease R-10的CPW+130 g.L-1甘露醇酶液中,在(25±2)℃、黑暗条件下,连续振荡(30-40 r.m in-1)10-11 h进行酶解,转基因原生质体产量达到18.2×106个.g-1,存活率达97.5%.

花卉体细胞胚胎发生研究进展

综述花卉体细胞胚胎发生途径、体细胞胚胎发生过程的生理生化变化及其影响因素、体细胞胚胎发生与胚性基因的表达和花卉体细胞无性系变异等方面的研究进展,植物体细胞胚胎发生研究在基因工程体细胞融合、细胞突变体诱导、人工种子、杂种合子胚的挽救、种质保存、苗木快速繁殖等诸多方面有着广阔的应用前景,也是遗传学、转基因工程体系、生理生化、植物发育过程的基因表达和调控、功能基因组研究等方面一个必不可少的新兴研究系统。

表达bar基因的抗除草剂转基因甘薯的获得

用农杆菌介导法将bar基因导入甘薯主栽品种徐薯18的胚性悬浮细胞中,获得了抗除草剂的转基因植株。农杆菌菌株EHA105携带的双元载体pCAMBIA3300上含有bar基因。来自于徐薯18胚性悬浮细胞的直径为0.7～1.3mm的280个胚性细胞团用于遗传转化。共培养3d后,首先在含有2mg/L2,4-D、100mg/LCarb的液体MS培养基中培养1周,然后将胚性细胞团转移到添加2mg/L2,4-D、100mg/LCarb和0.3mg/LPPT的固体MS培养基上进行选择培养。选择8周后,将获得的37个PPT抗性愈伤组织转移到添加1mg/LABA、100mg/LCarb和0.3mg/LPPT的固体MS培养基上,其中的34个愈伤组织诱导得到体细胞胚并发芽形成小植株,共获得了164株拟转基因植株。PCR分析表明,其中的123株为转基因植株。Southernblot和Northernblot分析表明,bar基因稳定整合到转基因植株的基因组中并正确表达。除草剂喷洒试验结果表明,转基因植株具有高度除草剂抗性。