樱花远缘杂交胚抢救技术

【目的】为提高樱花杂交育种效率,对樱花远缘杂交胚离体培养进行胚抢救。【方法】以迎春樱桃为母本,华中樱桃、尾叶樱桃、钟花樱桃为父本进行远缘杂交,对不同时期的坐果率进行统计,确定杂交种胚败育时期;对不同时期杂交胚进行萌发实验,确定杂交胚抢救适宜时间。以1/2MS培养基为基本培养基,添加不同浓度的6-BA、KT和NAA混合物以研究植物生长调节剂对种胚萌发及幼苗生根的影响;将胚抢救苗分别接种到MS、1/2MS、WPM培养基中,研究其根系生长情况;以泥炭、珍珠岩(1∶1),椰糠、珍珠岩(1∶1),黄土、珍珠岩(1∶1)3种基质栽植胚抢救苗,筛选适合胚抢救苗移栽基质。【结果】以迎春樱桃为母本的杂交组合中,胚败育发生时间在授粉后15 d;胚抢救适宜的时间在授粉后25 d;诱导杂交胚萌发的适宜基本培养基为1/2MS培养基;诱导胚抢救苗生根的适宜培养基为WPM培养基;不同杂交组合的杂交胚萌发和胚抢救苗生根需要的植物生长调节剂配比不同;幼苗适宜移栽基质为泥炭、珍珠岩(1∶1),成活率95%以上。【结论】该技术对于樱花远缘杂交获得新种质资源有良好的效果,能明显提高樱花远缘杂交育种的成功率,对樱花育种意义重大。

甜樱桃与中国樱桃杂种的胚抢救及杂种鉴定

以甜樱桃为母本 ,中国樱桃为父本 ,进行种间杂交 ,建立了杂种胚抢救技术体系 ,并对部分杂种进行了鉴定。结果表明 :(1)母本中 ,‘养老’坐果率最高 ,‘养老’在授粉 4周后胚发生败育 ,而‘那翁’与‘红灯’则是在第 3周后败育 ;(2 )最佳萌发与生长培养基为 1/ 2MS +BA 2mg/L +IAA 1mg/L +维生素C 10mg/L ,最佳继代增殖培养基为 1/ 2MS +BA 2mg/L +IAA 1mg/L +NAA 0 1mg/L +维生素C 10mg/L ,最佳生根培养基为 1/ 2MS +IBA 0 2mg/L +维生素C 10mg/L ;(3)S allelespecificPCR。

桃远缘杂种的获得及杂种胚抢救技术

以桃为母本,与经过处理的李、杏花粉进行远缘杂交,成功地对杂种幼胚进行了胚抢救,并对部分杂种进行了分子鉴定。研究表明,在以‘雨花露’为母本的杂交组合中,杂种胚的败育发生于授粉后第7周,而以‘中华寿桃’为母本的杂交组合中,杂种胚的败育开始于授粉后第8周;以早熟桃品种‘雨花露’为母本的杂种胚PF(胚长/种子长)值为0.5时幼胚萌发率仅为6.7%,而以晚熟品种‘中华寿桃’为母本的杂种胚PF值为0.5时幼胚萌发率却大于50%;适宜场强的静电场处理父本花粉后可显著提高杂种胚培苗多丛芽诱导增殖效率,而父本花粉经过60Coγ射线照射后得到的胚培苗,多丛芽诱导效果较差,组培苗长势较弱;在胚抢救技术体系中,杂种胚最佳萌发及生长培养基为1/2MS+6-BA4mg.L-1+IBA0.5mg.L-1,胚萌发及分化率达90%;最佳多丛芽诱导及增殖培养基为MS+6-BA1.0mg.L-1+IBA1.0mg.L-1,最佳生根培养基为MS+IAA0.5mg.L-1+NAA0.2mg.L-1;SSR技术对杂种鉴定结果表明,所获杂种为真杂种。

胚抢救在果树育种上的研究及应用

本文综述了胚抢救在培育早熟桃、杏新品种,无核葡萄以及柑橘三倍体等果树新种质,克服果树远缘杂种不育、枣胚败育等方面所取得的成绩。同时对影响胚培养成功的因素如外植体、胚龄、培养基、培养及移栽条件等进行了探讨,最后初步提出了今后的研究方向。

胚抢救技术在果树上的应用

胚抢救技术在果树早熟、无籽、三倍体类型育种及获得远缘杂种、阻止胚早期退化和缩短育种周期等方面具有重要作用。对胚抢救技术在果树作物育种中的应用及取得的成绩作了综述，并对胚抢救中应注意的几个问题，如适宜的培养时期、营养及环境条件作了简介，同时初步提出了果树胚抢救技术存在的不足及今后的研究方向。

亲本品种对樱桃远缘杂交亲和性及胚抢救的影响

以3个甜樱桃品种为母本,3个中国樱桃品种为父本进行了种间远缘杂交,并对所得到的杂种成功地进行了胚抢救,探讨了不同亲本品种对大樱桃远缘杂交亲和性及其胚抢救的影响。结果表明,(1)不同杂交组合的坐果率差异显著,在同一母本的杂交组合中,均以五莲红樱桃作父本的杂交组合坐果率最高(≥4.14%);而以红灯为母本与3个父本品种杂交的平均坐果率高于那翁和先锋为母本的相同杂交组合的平均坐果率;(2)不同亲本品种的杂种胚萌发生长率与多丛芽增殖系数存在显著差异,其中在参试的3个父本品种中,以五莲红樱桃表现最好;(3)经过生根培养,已经成功地将一批杂种胚培苗移栽到大田。

胚抢救技术在核果类果树育种上的应用

胚抢救技术在核果类果树早熟品种育种及获得远缘杂种、阻止胚早期退化、提高早熟品种种子萌发率和缩短育种周期等方面具有重要作用。对胚抢救技术及其在核果类果树育种上的应用、注意问题进行了综述。

利用胚抢救技术获得沙田柚×枸橼杂交后代及其SRAP检测

【目的】为了获得沙田柚×枸橼杂交苗,【方法】以沙田柚为母本,枸橼为父本进行杂交育种,利用胚抢救技术获得杂种后代,并利用SRAP分子标记对亲本和子代的DNA进行扩增,分析亲本与杂交种之间扩增条带的差异。【结果】结果表明,最终获得27株杂交后代,引物组合Me6-Em5和Me10-Em12可鉴定其中5株为有性后代。【结论】MT+GA3(1 mg.L-1)培养基适合沙田柚×枸橼杂交胚抢救,利用SRAP标记可鉴定出杂交子代,可为以后利用BSA法构建抗感病池寻找柑橘抗溃疡病相关基因打下基础。

东方百合系内杂交授粉技术与胚抢救技术研究

研究了东方百合系内杂交授粉技术及胚抢救技术。结果表明:(1)在组合‘Justina’בShela’中,采用柱头直接授粉,花粉管在花柱中向下定向生长,在子房中向胚珠定向生长;采用切花柱授粉,花粉管在花柱切口及子房中发生不同程度无向性生长;残留花柱越长,进行胚珠定向的花粉管数量越多,获得的饱满种子越少,采用柱头直接授粉获得的饱满种子最多。(2)采用柱头直接授粉对东方百合系内56个组合进行杂交实验,仅1个组合未获得饱满胚珠、3个组合获得胚珠少于10个,其余52个组合获得大量饱满胚珠,初步表明此法可作为东方百合系内杂交通用授粉技术。不同胚抢救技术试验结果显示,授粉约70d后采用切胚珠接种比胚珠直接接种的杂种胚萌动快、萌发率高,而且前者的胚抢救效率也明显高于授粉40d后的"剥胚式接种"。研究认为,授粉约70d后采用"切胚珠接种"可作为东方百合系内杂交通用胚抢救技术。

幼胚发育阶段对次郎柿胚抢救效果的影响

迄今对柿幼胚培养的最佳时期尚不完全明确。以完全甜柿品种次郎(Diospyros kaki Thunb.cv.Jirou)为试材,探讨了幼胚发育阶段对胚抢救效果的影响。结果表明,(1)授粉后40d幼胚处于球形胚期,50d处于心形或鱼雷形期,60d之后处于子叶形胚期;(2)接种授粉后40d幼胚的萌发率(29.3%)显著低于其它时期,其后不同取胚时期的萌发率均为100%,差异不显著;(3)接种授粉后60d幼胚的成苗率(92%)显著高于其它时期,再生植株苗高和生根数与其它时期无明显差异。因此,心形期至子叶期阶段是完全甜柿品种次郎幼胚的最佳培养时期,萌发率和成苗率分别为100%和86%～92%。该时期较前人报道的柿幼胚培养时期提早10￣20d。

甜柿幼胚抢救体系优化研究

柿杂种败育现象严重阻碍了甜柿杂交育种进展,幼胚抢救技术可有效地克服这个障碍。以甜柿富有、晚御所、太秋的幼胚为材料,开展培养基、柿品种、取胚时间4因素3水平正交试验。并在此基础上,以太秋幼胚为材料,开展了取胚时间、培养基成分的单因素试验。结果表明:1)影响柿幼胚抢救的因素影响依次为培养基、取胚时间、柿品种、培养条件;2)花后45~55 d取胚抢救,胚苗成苗率极低,此后,随着胚龄增大,胚培苗成活率逐渐提高,但花后77 d取胚时,胚苗成苗率略有回落,因此长三角地区柿幼胚抢救的最适取胚时间为:花后62~69 d;3)胚苗在不同培养基中的发育状态、成苗率、苗高、生根数上均出现差异,1/2MS+ZT(0.4 mg/L)+IBA(0.2 mg/L)+活性炭(3 g/L)+蔗糖(70 g/L)培养基中培苗发育良好,培养45 d后,成苗率为0.88,平均苗高为3.52 cm,平均生根数为2.52。

奥迪亚无核葡萄胚抢救技术研究

以奥迪亚无核葡萄为试材,对其果实发育及胚抢救技术进行了研究。结果表明:花后49 d是奥迪亚无核葡萄幼胚抢救的最佳时期;NN69+NAA 0.2 mg/L+GA 0.4 mg/L+BA 0.5 mg/L是奥迪亚无核葡萄的最佳胚抢救培养基,其胚发育率达到76.67%,胚萌发率达到26.67%;低温培养可促进其幼胚的发育。

早熟葡萄胚抢救技术研究

针对早熟葡萄育种中胚发育不全的问题,以京秀×87-1等5个杂交组合的杂交胚为材料,采用L25 (55)的正交试验设计,进行了早熟葡萄胚抢救技术研究。结果表明,影响各个组合早熟葡萄杂交后代成苗率最重要的因素是取胚时期,其他的因素对成苗率的影响大小因基因型而异。筛选出了早熟葡萄胚挽救的最优培养时期、相对较优的基本培养基成分及几种激素浓度,积累了一批胚抢救杂交试材。

‘玛瑙红’樱桃胚败育观察及胚抢救技术体系的建立

【目的】建立高效稳定的‘玛瑙红’樱桃胚抢救成苗技术。【方法】以‘玛瑙红’樱桃幼胚为材料,对不同发育时期的种胚进行解剖学观察和萌发实验,确定种胚败育时期和最佳胚抢救时间,设置不同植物生长调节剂配比研究其对种胚萌发及幼苗增殖的影响,确定最佳培养基配方。【结果】幼胚大规模败育发生在盛花期后30 d,最佳胚抢救时间为盛花期后25 d。胚萌发最佳培养基为MS+0.5 mg·L^(-1)TDZ+0.5 mg·L^(-1)6-BA+1.0 mg·L^(-1)IBA,萌发率达70%。幼苗增殖最佳培养基为MS+0.5 mg·L^(-1)TDZ+0.1 mg·L^(-1)6-BA+1.5 mg·L^(-1)IBA+0.5 mg·L^(-1)GA_3,增殖系数为5.45。幼苗经诱导生根后移栽至营养土中,成活率达90%。【结论】建立了‘玛瑙红’樱桃胚抢救技术体系,为‘玛瑙红’樱桃及其他核果类果树有效利用胚抢救技术解决杂交育种问题提供参考。

植物的胚抢救

综述了开展胚抢救的背景、目的以及胚抢救技术的发展、培养需求和应用领域,提出胚抢救作为一种育种手段不仅可以拓宽杂交范围,还可抢救即将败育的胚,缩短育种周期,具有广阔的发展前景。

败育型葡萄胚抢救技术及胚败育机理研究进展

综述早熟葡萄、无核葡萄和三倍体葡萄胚抢救技术及胚抢救机理研究进展,分析了胚抢救技术存在的缺陷与不足,提出了几个胚抢救机理可研究方向。

冰糖橙×枸橼杂交后代的胚抢救及杂种鉴定

为获得冰糖橙×枸橼的合子苗,以抗柑橘溃疡病枸橼为父本,以高感病品种冰糖橙为母本进行杂交,利用胚抢救技术获得杂交后代,然后利用筛选出的SSR引物对亲本和子代的基因组DNA进行PCR扩增,分析并鉴定杂交后代中的合子苗。结果表明:在最终获得的359株杂交后代中,利用SSR标记能鉴定出合子苗12株。

胚抢救在无核葡萄育种上的应用

该文综述了胚抢救在培育无核葡萄育种中取得的成绩,同时对影响胚抢救成功的因素——品种、培养基中的激素配比、胚龄及接种时期、胚珠处理方法和加入活性炭进行了探讨。