大麦高赖氨酸的遗传选择与研究Ⅱ.大麦的赖氨酸含量与胚比及千粒重的相关

测定了14个皮、裸大麦品种籽粒的赖氨酸含量、胚比（胚干重与籽粒干重的百分比值）和千粒重,并估算了这些性状间的相关性。结果表明,各性状在品种间均存在显著的差异。赖氨酸含量与胚比在皮大麦中存在正相关,胚比大的材料在一定程度上可以作为选择高赖氨酸含量的形态指标,而裸大麦赖氨酸含量与胚比无相关;胚比与千粒重在皮、裸大麦中均呈负相关,低千粒重可作为选择高赖氨酸品种（系）的参考。

橡胶树体胚苗质量调查与分析

天然橡胶是我国重要的战略物资和工业原料,主要来源于橡胶树。橡胶树生长周期长,其苗木质量直接影响天然橡胶产业的发展,橡胶树体胚苗在前期研究中表现一致性好,且具有速生、高产的优势。海南省天然橡胶新型种植材料创新基地是当前规模生产的橡胶树体胚苗的基地,现生产品种有热研73397和热研917。本研究分析比较了热研73397体胚试管苗在2018—2020年间的株高、茎粗、叶片数、主根长等指标的差异性,比较了2020年2个品种各指标的差异性,并对不同年份不同品种进行分级比较,以期阐明橡胶树体胚苗规模生产的情况。结果表明:(1)2018—2020年,热研73397的株高、茎粗、叶片数、主根长度在各区间的比例相当;株高、叶片数、主根长度在3 a间的差异不显著;茎粗在2018和2019年之间差异显著,且3 a均值均在2.00 mm以上,最大值和最小值的差值仅为0.09 mm。(2)2020年,热研73397和热研917体胚苗的株高一致,均值均为8.0 cm,且大部分集中在5.0~10.0 cm,分别占66.13%、66.91%;热研73397和热研917的茎粗范围分别为0.80~4.23 mm、1.13~3.73 mm,均值分别为2.11 mm和2.18 mm,2个品种的茎粗在1.50~3.00 mm之间高度集中,分别占85.94%、83.82%;热研73397和热研917叶片数范围分别为0~6片和1~4片,2个品种叶片数绝大多数为1~3片,分别占88.82%、96.32%,其中热研917叶片数为2片的占比高达52.94%;热研73397的主根长度均值为9.5 cm,而热研917的为9.1 cm,2个品种的主根长度多数集中在8.0~12.0 cm之间,分别占74.12%、79.41%;方差分析结果表明,2020年2个品种的株高、茎粗、叶片数差异不显著,主根长度差异显著(P<0.05)。(3)2018—2020年调查的橡胶树体胚苗中,不同年份不同品种的橡胶树体胚苗,一级苗比例为19%~22%,二级苗比例为56%~62%。据此,规模化生产橡胶树体胚试管苗质量稳定,为橡胶树体胚苗生产工艺的推广应用提供参考。

橡胶树热垦525胚性悬浮细胞系的建立及其胚性能力的维持

易碎胚性愈伤组织和胚性悬浮细胞系都是基因工程和细胞工程的理想受体材料。然而橡胶树(Hevea brasil-iensis)易碎胚性愈伤组织诱导频率低、耗时长,且其胚性能力通常随继代次数的增加而下降甚至完全丧失,限制了相关研究的持续开展。因此,快速获得易碎胚性愈伤组织,建立具有高效体胚发生能力的胚性悬浮细胞系,并尽可能较长时间维持其胚性能力是当前橡胶树基因工程和细胞工程研究的重要内容。本研究以橡胶树热垦525未成熟花药为外植体进行愈伤组织的诱导和胚性悬浮细胞系的建立,分析比较固液2种长期继代方式对维持其胚性能力的影响。结果表明:花药外植体在愈伤诱导培养基中获得的黄色致密初代愈伤组织体胚发生能力低,分散性差,不适合进行悬浮培养。将初代愈伤组织转移至胚性愈伤组织诱导培养基中培养70~80 d后,可观察到有胚性结构的形成和早期体细胞胚发生,同时周围长出鲜黄色小颗粒状易碎胚性愈伤组织。通过常规方法建立的Ⅰ型胚性悬浮细胞系具备胚性细胞的典型特征,体胚发生能力显著高于胚性愈伤组织,但在体胚发生过程中容易重新愈伤化;而通过筛选特定形态的胚性愈伤组织低密度启动悬浮培养建立的Ⅱ型胚性悬浮细胞系,在显微镜下可观察到细胞处在有序的胚性结构中,其体胚发生频率可达100%。在含2 mg/L2,4-D的液体培养中持续继代2 a后细胞明显老化且增殖缓慢,体胚发生能力几近丧失;而在去除2,4-D并添加低浓度脱落酸(0.1 mg/L)和水解酪蛋白(0.5 g/L)的固体培养基上持续继代2 a后,体胚发生能力仍能维持在较高水平。所建立的Ⅱ型胚性悬浮细胞系可为橡胶树遗传转化及原生质体培养等相关研究长期提供优质充足且状态相对稳定的材料来源。

儿童小脑内胚窦瘤1例

男性患儿,2岁,间断头痛3天;既往无特殊病史及家族史。查体未见明显异常。实验室检查:血清甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)2664 ng/ml。颅脑MRI:右侧小脑半球37 mm×39 mm×35 mm T1WI等-稍低信号占位,边界清晰(图1A),T2WI呈高信号内见条片状混杂低信号及多发小灶样更高信号(图1B),弥散加权成像(diffusion weighted imaging,DWI)呈等信号,表观弥散系数图呈稍高信号;周围见斑片状水肿,小脑蚓部及小脑扁桃体受压向前或前上移位,第四脑室受压变形、出口闭塞,幕上脑室系统扩张;增强后病变明显强化,内见条片状及灶状无强化。

不同基因型甘薯品种胚性愈伤诱导和植株再生试验及福薯604胚性悬浮体系的建立

以福薯604、福菜薯18号、福薯7-6等16个甘薯品种为材料,通过茎尖诱导胚性愈伤,进行愈伤分化再生试验,比较不同基因型品种的愈伤诱导率、愈伤生长状态和植株再生率等的差异,结果表明,胚性细胞的诱导率和再生率因品种的不同而呈现明显差异.试验筛选出诱导率高、胚性愈伤状态好、分化再生率高的品种福薯604,并建立其胚性悬浮体系,测量胚性悬浮细胞的生长量,为甘薯优良品种福薯604遗传转化提供技术支持.

枣幼胚培养后代新品种晚脆蜜的选育

晚脆蜜是六月鲜枣品种的控制杂交后代经幼胚培养技术选育而成的鲜食枣新品种。该品种树体矮化,树冠紧凑,枣头枝节间短,适宜密植栽培。果实长椭圆形,果型较大,平均单果质量为14.7 g。果实硬度大,肉质致密,耐贮性较强。鲜枣可食率95.20%,可溶性固形物含量(w,后同)为28.4%,总糖含量27.5%,酸含量0.383%,维生素C含量3580 mg·kg^(-1)。在山西太谷地区,4月中旬开始萌芽,6月上旬进入盛花期,9月下旬果实成熟,果实生育期110 d左右,属于晚熟类型。早果丰产性能较强,2~3年生枝的枣吊平均结果1.0个,3~5年生树产量6250 kg·hm^(-2)。果实抗裂果能力强,裂果率仅为3.8%。该品种是一个树体矮化、早果丰产、抗裂耐贮、晚熟优质的鲜食品种,具有良好的产业发展前景。

不同酶解程度对留胚米粉理化性质及消化性的影响研究

研究不同酶解程度对留胚米粉理化性质及消化性的影响,以留胚米为原料,制备不同酶解程度的留胚米粉,考察不同酶解程度对留胚米粉的营养成分、色度、粒径、水合特性、糊化特性、红外光谱和体外消化特性的影响。结果表明,留胚米粉经过不同酶解时间处理后,淀粉含量降低,淀粉粒径减小;淀粉结块率先减小后增大,当DE值为19.98%±0.78%时淀粉结块率最低;淀粉分散时间缩短,溶解度增大;酶解米粉中淀粉的峰值黏度、谷值黏度、衰减值、最终黏度、回生值和淀粉黏度到达峰值的时间均显著降低;且淀粉的短程有序性受到破坏;快消化淀粉(RDS)含量显著增加。综上所述,当DE值为19.98%±0.78%时,酶解留胚米粉的综合性质最佳。

组蛋白去乙酰化抑制剂诱导羽衣甘蓝小孢子胚状体发生和植株再生

羽衣甘蓝是2年生植物,2年完成1个有性生殖世代,游离小孢子培养是加快其纯合化的有效途径。但是由于羽衣甘蓝小孢子培养的诱胚率低,使其难以育种应用。组蛋白乙酰化是一种重要的表观遗传学机制,影响小孢子发育途径,促进小孢子胚状体发生。本研究分别用不同浓度的组蛋白去乙酰化抑制剂辛二酰苯胺异羟肟酸和曲古菌素A处理羽衣甘蓝红斑鸠的小孢子,以诱导胚状体发生。结果表明,辛二酰苯胺异羟肟酸浓度为0.075μmol/L时,红斑鸠获得最多胚状体,为每个花蕾获得20.24个胚状体,同时直接成苗率也达到最高,为16.07%。曲古菌素A浓度为0~0.150μmol/L时,红斑鸠的胚状体发生率和直接成苗率都降低。适当浓度的辛二酰苯胺异羟肟酸可以促进羽衣甘蓝红斑鸠小孢子胚状体发生和直接成苗率,而0~0.150μmol/L曲古菌素A对羽衣甘蓝红斑鸠胚状体的发生和直接成苗率有抑制作用。

HCG动态监测诊断冻胚移植胚胎延迟着床1例

人绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin,HCG)由胚胎滋养层合胞细胞分泌,是胚胎或胎儿释放到母亲体内的第一个有效信号,并贯穿整个妊娠过程^([1])。研究表明当β-HCG水平“翻倍”时,80.7%的周期发生活产;当β-HCG水平在卵母细胞回收15天也就是胚胎移植后12天。

两种超排卵剂量鼠胚实验对辅助生殖实验室质控的探讨

目的探讨采用两种超排卵剂量下的鼠胚实验对辅助生殖实验室进行质控的可行性。方法对SPF级昆明雌性小白鼠行腹腔注射孕马血清促性腺激素(PMSG)和绒毛膜促性腺激素(HCG)超排卵,在采用8 IU PMSG+8 IU HCG和16 IU PMSG+16 IU HCG两种不同注射剂量下进行体外受精和体内受精,观察不同剂量、不同受精方式下鼠胚发育的优胚率和囊胚形成率。结果分别实施8 IU PMSG+8 IU HCG超排卵剂量与16 IU PMSG+16 IU HCG超排卵剂量后,雌性小鼠体外受精,鼠胚优胚率分别为90.965%和81.877%,囊胚形成率分别为82.341%和75.081%,差异有统计学意义(P<0.05);雌性小鼠体内受精,鼠胚优胚率分别为93.096%和85.889%,囊胚形成率分别为83.432%和76.994%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论采用两种超排卵剂量下的鼠胚实验对辅助生殖实验室进行质控具有可行性,恰当的超排卵剂量,能获得较高的优胚率和囊胚形成率。

多囊卵巢综合征患者多原核合子的发生对冻胚移植结局的影响

目的比较多囊卵巢综合征(PCOS)人群多原核(PN)合子的发生率对体外受精(IVF)周期胚胎发育情况及冻融胚胎移植(FET)结局的影响。方法回顾性分析2016年1月至2021年12月于南京医科大学附属妇产医院进行IVF治疗的2665例患者资料。根据不孕原因分为PCOS组(N=1295)和对照组(N=1370),比较两组多PN发生率。在PCOS组中进一步仅纳入全胚冷冻并进行FET的患者,排除失访或未到分娩日期的患者,最终纳入999例PCOS患者,根据受精情况分为三个亚组:2PN组547例,低比例多PN组(多PN率≤20%)414例,高比例多PN组(多PN率>20%)38例,比较三个亚组的临床结局。结果PCOS组多PN率高于对照组(P<0.05)。低比例多PN组基础AMH、获卵数、IVF卵子数高于2PN组(P<0.05),可移植胚胎数、囊胚形成率、优质囊胚数低于2PN组(P<0.05),生化妊娠率和活产率低于2PN组(P<0.05)。高比例多PN组获卵数、IVF卵子数低于低比例多PN组(P<0.05),可移植胚胎数、囊胚形成率、优质囊胚数低于2PN组和低比例多PN组(P<0.05),生化妊娠率和活产率低于2PN组和低比例多PN组(P<0.05)。各组间胚胎种植率和临床妊娠率无统计学差异(P>0.05)。结论行FET的PCOS患者多PN发生会降低胚胎质量,影响生化妊娠率和活产率。

基于YOLOv8的疫苗胚蛋活性视觉检测

胚蛋活性检测对疫苗生产的质量与安全至关重要。传统机器视觉检测方法严重依赖人为设计的特征提取算法,对图像质量和环境条件要求高,检测结果稳定性和容错性差,导致实际检测过程中的通用性受到限制,为克服这种缺陷,该研究提出一种基于改进YOLOv8的疫苗胚蛋活性检测模型。采用自主设计图像采集装置,采集孵化10~11 d的胚蛋图像,通过几何变换、颜色调整、图像增强等方式构建并扩充数据集;采用Shuffle Net V2替换YOLOv8模型的骨干网络,在保持准确率的同时显著减少了计算复杂度,能更好地部署到嵌入式设备中;在YOLOv8颈部网络的卷积层后添加动态蛇形卷积层,通过其自适应地聚焦于细长和迂回的局部结构,准确地捕捉管状结构的性质特征,从而提高胚蛋检测的准确率;使用EIOU(embedding intersection over union)损失函数,用于适应研究中边界框对齐和形状相似的场景,构建了符合试验中胚蛋图像的网络模型,以实现疫苗胚蛋活性快速、无损、批量检测。试验结果表明,改进YOLOv8模型精确率、召回率、平均精度均值(m AP_(50-95))分别达99.2%、98.2%、96.9%,对比原始YOLOv8模型分别提高了2.0、0.3、1.5个百分点,模型计算复杂度与推理时间相较与原模型分别降低60.9%、60.5%。说明此模型可以更好地实现疫苗胚蛋活性无损检测,为自动化批量检测提供理论依据。

腹腔镜下输卵管开窗取胚术配合甲氨蝶呤对输卵管妊娠患者宫内妊娠率的影响

目的探讨腹腔镜下输卵管开窗取胚术配合甲氨蝶呤治疗输卵管妊娠的效果。方法120例输卵管妊娠患者分为两组,对照组给予甲氨蝶呤治疗,实验组给予腹腔镜下输卵管开窗取胚术配合甲氨蝶呤治疗,比较两组的治疗效果。结果治疗后,实验组的总有效率高于对照组,月经恢复时间、包块消失时间、腹痛消失时间及住院时间均短于对照组,宫内妊娠率高于对照组(P<0.05)。结论腹腔镜下输卵管开窗取胚术配合甲氨蝶呤治疗输卵管妊娠患者可以提高宫内妊娠率,安全性高。

化瘀杀胚汤联合甲氨蝶呤治疗异位妊娠的疗效及对TGF-β/Smad2/3蛋白水平和microRNA-30d-5p表达量的影响

【目的】探讨化瘀杀胚汤(由丹参、赤芍、桃仁、蜈蚣、紫草、天花粉、三七等中药组成)联合甲氨蝶呤治疗异位妊娠疗效及对患者TGF-β/Smad2/3蛋白水平和microRNA-30d-5p表达量的影响。【方法】将104例异位妊娠患者随机分为观察组和对照组,每组各52例。对照组给予甲氨蝶呤联合米非司酮治疗,观察组在对照组的基础上加用化瘀杀胚汤治疗,连续用药3 d并随访观察1个月。比较2组患者保守治疗成功率、血β人绒毛膜促性腺激素(β-HCG)水平恢复正常时间以及异位妊娠包块吸收时间、治疗后输卵管完全通畅率与不通畅率,观察2组保守治疗成功患者治疗前后血清TGF-β/Smad2/3蛋白水平和microRNA-30d-5p相对表达量的变化情况。【结果】(1)观察组的保守治疗成功率为94.23%(49/52),明显高于对照组的71.15%(37/52),差异有统计学意义(P<0.05)。(2)与对照组比较,观察组的血β-HCG恢复正常时间及包块吸收时间均明显缩短,差异均有统计学意义(P<0.01)。(3)观察组治疗后的输卵管完全通畅率为55.77%(29/52),明显高于对照组的21.15%(11/52);不通畅率为19.23%(10/52),明显低于对照组的59.62%(31/52),差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。(4)与治疗前比较,2组保守治疗成功患者治疗结束1个月后的TGF-β/Smad2/3蛋白水平和microRNA-30d-5p相对表达量均明显降低(P<0.05或P<0.01);与对照组比较,观察组治疗结束1个月后的TGF-β/Smad2/3蛋白水平和microRNA-30d-5p相对表达量均明显降低,差异均有统计学意义(P<0.01)。(5)2组患者的不良反应均以胃肠道不适为主,观察组的不良反应发生率为25.00%(13/52),明显低于对照组的46.15%(24/52),组间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。【结论】化瘀杀胚汤联合甲氨蝶呤治疗异位妊娠,可有效提高药物保守治疗的成功率,有助于包块的吸收以及输卵管通畅,能有效降低患者的TGF-β/Smad2/3蛋白水平及microRNA-30d-5p的相对表达量,且药物安全性较高。

功能留胚米乳饮料配方优化及其稳定性研究

以留胚米和脱脂奶粉为主要原料,利用菊粉和低聚果糖开发零添加蔗糖的功能留胚米乳饮料。以感官评价等为指标,采用单因素试验研究米水比、低聚果糖添加量、脱脂乳粉添加量和菊粉添加量对留胚米乳品质的影响,并采用正交试验进一步优化工艺配方。结果表明,最优工艺配方为米水比1∶8(g∶g),脱脂乳粉添加量3.0%(为米乳饮料质量百分比,下同),低聚果糖添加量1.0%,菊粉添加量2.5%,复合稳定剂(卡拉胶∶黄原胶=3∶2)添加量0.1%。在该条件下得到的米乳饮料pH值为5.9,蛋白质含量为0.95%,还原糖含量为3.62%,总糖含量为9.50%,多糖为6.21%,固形物含量为15.00%,黏度为82.67 mPa·s。米乳饮料呈乳白色轻度浑浊液、均一细腻、口感顺滑饱满、酸甜适中,有淡淡的米香味和奶香味。

携带BRCA2胚系突变的肺癌和乙状结肠癌双原发肿瘤1例

报道1例罕见的同时性肺癌和乙状结肠癌的双原发肿瘤病例。该患者具有致病性BRCA2胚系突变,经含铂双药、免疫及抗血管治疗的综合治疗4个周期后,2处病灶均达到病理完全缓解。该结果表明,综合治疗方案在处理此类双原发肿瘤病例中具有有效性,且可为未来类似病例的治疗决策的制定提供新的思路。此外,本文重点讨论了BRCA胚系突变家系患者的定期筛查及相关药物治疗疗效及前景。

抗性湿地松体细胞胚的发育、成熟及萌发

为加快抗松针褐斑病湿地松体细胞胚胎发生技术的产业化应用进程,本文研究了肌醇浓度、脱落酸(ABA)及其添加方式、基本培养基、聚乙二醇(PEG-6000)浓度、琼脂糖种类及浓度、活性炭浓度、液体悬浮培养等因素对抗性湿地松体细胞胚的发育、成熟及萌发的影响。结果表明:添加8 g/L肌醇较适宜,过高浓度的肌醇则不利于湿地松体细胞胚发育;ABA可以采用高压灭菌;基本培养基、ABA、PEG-6000互作对湿地松体细胞胚的成熟影响很大,基本培养基以LP为最佳,ABA的最适浓度为10m g/L,PEG-6000以添加25、50 g/L为宜;在湿地松体细胞胚的成熟培养过程中,PEG-6000的浓度不能高于100 g/L;在湿地松体细胞胚的成熟培养基中,添加60 g/L蔗糖最合适;湿地松体细胞胚的成熟培养基中添加0.5 g/L或1 g/L的活性炭较适宜;培养基状态对体细胞胚的高频率诱导具有一定的影响,悬浮培养以100 mL三角瓶装培养液30 mL、摇床转速130 r/min为宜,液体转固体时吸取培养液1 mL为宜;未建立成熟的体细胞胚发生体系前,以采用固体培养为佳。最佳成熟培养基、激素及部分添加物组合为LP+10 mg/L ABA+50 g/L PEG-6000+60 g/L蔗糖+1.0 g/L活性炭。

枣幼胚培养后代新品种——晚脆蜜

“晚脆蜜”是六月鲜枣品种的控制杂交后代经幼胚培养技术选育而成的鲜食枣新品种。2023年12月通过山西省林木品种审定委员会审定,良种编号:晋S-SV-ZJ-014-2023。该品种果实较大,长椭圆形,纵径3.37 cm,横径2.56 cm,平均单果重14.7 g。果肩平,果顶稍突出,果点小而密。果实硬度大,肉质致密。鲜枣可食率95.2%,可溶性固形物含量28.4%,可溶性糖含量27.5%,酸含量0.383%,维生素C含量3580 mg/kg。果核中大,长纺锤形,种仁饱满,含仁率较高。种子倒纺锤形,红褐色。

不同质量浓度Cu^(2+)和Ag^(+)对大麦成熟胚组培特性的影响

【目的】探究不同质量浓度Cu^(2+)和Ag^(+)对大麦成熟胚组培特性的影响。【方法】以Bowman、北青7号和光头大麦的成熟胚为材料,研究不同质量浓度Cu^(2+)和Ag^(+)对大麦成熟胚愈伤诱导率、长根率、长芽率、褐化率、绿化率、再分化率和愈伤湿质量的影响。【结果】Bowman、北青7号和光头大麦成熟胚的7种组培特性间存在不同程度差异。与对照相比,0.75 mg/L Cu^(2+)可减少10.43%的成熟胚长根、7.48%的成熟胚长芽、8.24%的愈伤组织褐化、20.74 mg的愈伤湿质量;4.00 mg/L Ag^(+)可提高6.47%的愈伤组织诱导率,可减少9.08%的成熟胚长根、7.96%的成熟胚长芽和9.67%的愈伤褐化;0.75 mg/L Cu^(2+)和4.00 mg/L Ag^(+)对愈伤细胞转绿、愈伤增殖和再分化均无抑制。【结论】适宜质量浓度的Cu^(2+)和Ag^(+)可有效抑制大麦成熟胚长根、长芽和愈伤组织褐化,Ag+还可有效提高愈伤诱导率;在基于MS培养基的大麦成熟胚愈伤组织诱导和再分化培养中,Cu^(2+)和Ag^(+)的适宜质量浓度分别为0.75和4.00 mg/L。研究结果可为构建大麦成熟胚的愈伤诱导及其再分化技术体系提供理论支持。

不同贮藏年限对红砂种子生理特性及胚结构的影响

以室温贮藏条件下0~4 a的红砂(Reaumuria soongorica)种子为试验材料,通过测定不同贮藏年限红砂种子的萌发指标、生理指标及种胚显微结构,探究红砂种子在贮藏老化过程中种子活力及其生理和显微结构的变化特征。结果表明:随着贮藏年限的增加,红砂种子芽长、萌发率、萌发势、发芽指数、活力指数和含水量逐渐降低,超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性、可溶性糖(soluble sugar,SS)和可溶性蛋白(soluble protein,SP)含量呈先升高后降低的趋势,丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量逐渐上升。红砂种子萌发指标与MDA含量呈显著(P<0.05)负相关,与SS、SP呈正相关。当年采收的种子,胚部细胞排列紧密,贮藏3~4 a的种子胚部细胞排列散乱,木质化程度加深着色效果明显,并伴随子叶逐渐缩小的现象。综上认为,红砂种子含水量、MDA和SP含量可较为准确地反映其活力,且红砂种子活力变化的节点在2~3 a之间。在实际生产中,建议选择采收后室温贮藏1 a的种子为播种材料。