孕酮诱导非洲爪蟾卵母细胞生发泡破裂(GVBD)试验方法的优化及干扰物质筛查

非洲爪蟾卵母细胞生发泡破裂(GVBD)是生物学上研究卵细胞成熟过程及其机制的良好模型。由于GVBD受激素的调控,曾有研究将孕酮诱导的非洲爪蟾GVBD试验用于内分泌干扰物的筛查。通过预注射人体绒毛膜促性腺激素(HCG)提高非洲爪蟾卵母细胞对孕酮的敏感性、缩小个体差异,缩短试验时间等优化GVBD试验方法;并选用甲氧氯作为阳性参照物对优化的方法进行验证,最后用此方法研究了米非司酮、来曲唑、咪鲜胺3种化学物质对孕酮诱导GVBD的影响。结果发现,甲氧氯对GVBD的发生具有明显抑制作用,随着剂量的增加抑制作用增强,显示优化方法的可靠性。米非司酮作为孕酮受体拮抗剂,没有表现出抑制GVBD的效应,证明孕酮诱导爪蟾GVBD并非完全由孕酮受体(PR)介导。同时,来曲唑和咪鲜胺对孕酮诱导爪蟾GVBD没有影响,显示此两种物质在孕酮诱导GVBD过程中不具有内分泌干扰作用。

小鼠卵母细胞生发泡破裂前的钙离子波动及分布

用显微操作技术将Ca2 + 特异荧光染料Calcium greenTM 1注射入GV期卵母细胞的细胞质内 ,在激光扫描共聚焦显微镜下观察生发泡破裂前Ca2 + 的时间和空间分布的变化 ,利用Lasersharp软件进行分析 ,发现一种有规律的Ca2 + 波动 ,其波动周期约为 90s .卵母细胞内Ca2 + 的分布并不均匀 ,核膜周围的Ca2 + 浓度最高 ,细胞质中次之 ,而生发泡内部Ca2 +

冻融胚胎移植临床妊娠研究

目的:研究冻融胚胎移植后临床妊娠,并探讨发生卵泡不破裂黄素化(LUF)的周期移植冻融胚胎的可行性。方法:对因盆腔子宫内膜异位症合并双侧输卵管阻塞不孕患者,在自然月经周期行冻融胚胎移植。结果:该周期发生LUF,但子宫内膜为三线型,厚11.5mm,行冻融胚胎移植获得成功。目前孕31周,妊娠在继续中,过程良好。结论:发生LUF的周期,只要子宫内膜发育良好,仍可行冻融胚胎移植。

日本鳗鲡排卵的人工诱导

对日本鳗鲡(Anguillajaponica)卵巢发育的时间与催产率的关系进行研究,对卵母细胞在体内胚泡破裂(GVBD)的发生过程、以及用17α-OHP和17α,20β-DHP诱导日本鳗鲡排卵的方式、时机和催产效果进行观察,结果表明,卵巢发育时间越长,催产率越低。造成催产率低的原因主要是由于日本鳗鲡在卵母细胞成熟后期,雌鳗个体对催产药物敏感性差异较大,催产时机难以掌握。通过采用适合日本鳗鲡卵母细胞的透明液观察GVBD的发生过程,并根据每个个体GVBD的发生速度,制订适宜的催产方案基本解决了上述难题。本实验采用CP、HCG、17α-OHP或17α,20β-DHP混合催产,使其平均催产率由35 4%分别提高到91 9%和93 0%。17α-OHP和17α,20β-DHP的催产剂量为5mg/(500g)和10mg/(500g)。在(21±0 5)℃水温条件下,催产效应时间分别为15～18h和13～16h。

鳗鲡繁殖生物学研究:Ⅵ.鳗鲡17α,20β-双羟孕酮的生成和作用

研究了鳗缅卵泡17α，20β-双羟孕酮的生成和它对卵母细胞胚泡破裂的影响．结果表明，注射鲤鱼脑垂体匀浆液和人绒毛膜促性腺激素可诱导性腺发育成熟鳗闻17α，20β-双羟孕酮的生成并导致排卵，但两者单独或结合使用对鳗鲡700～900μm离体卵泡17α，20β-双羟孕酮的生成没有作用，鳗鲡脑垂体匀浆液则能显著刺激700～900μm高体卵泡生成17α，20β-双羟孕酮。17α-羟孕酮能显著增加鳗鲡700～900μm高体卵泡17α，20β-双羟孕酮的生成．5ng／ml和10ng／ml17α，20β-双羟孕酮分别诱导494％±4．3％和84．3％±5.4％的离休卵泡（700～900μm）发生胚泡破裂，而对600～700μm的高体卵泡胚泡破裂无作用．5ng／ml17α，20β-双羟孕酮在24小时内使90．6％的卵泡发生胚泡破裂。经3或9小时50IU／ml人绒毛膜促性腺激素预孵育后，600～700μm的高体卵泡能对5和10ng／ml的17α，20β-双羟孕酮起反应而发生胚泡破裂。