组蛋白去乙酰化抑制剂诱导羽衣甘蓝小孢子胚状体发生和植株再生

羽衣甘蓝是2年生植物,2年完成1个有性生殖世代,游离小孢子培养是加快其纯合化的有效途径。但是由于羽衣甘蓝小孢子培养的诱胚率低,使其难以育种应用。组蛋白乙酰化是一种重要的表观遗传学机制,影响小孢子发育途径,促进小孢子胚状体发生。本研究分别用不同浓度的组蛋白去乙酰化抑制剂辛二酰苯胺异羟肟酸和曲古菌素A处理羽衣甘蓝红斑鸠的小孢子,以诱导胚状体发生。结果表明,辛二酰苯胺异羟肟酸浓度为0.075μmol/L时,红斑鸠获得最多胚状体,为每个花蕾获得20.24个胚状体,同时直接成苗率也达到最高,为16.07%。曲古菌素A浓度为0~0.150μmol/L时,红斑鸠的胚状体发生率和直接成苗率都降低。适当浓度的辛二酰苯胺异羟肟酸可以促进羽衣甘蓝红斑鸠小孢子胚状体发生和直接成苗率,而0~0.150μmol/L曲古菌素A对羽衣甘蓝红斑鸠胚状体的发生和直接成苗率有抑制作用。

日本落叶松胚状体干化处理对萌发的影响

[目的]提高日本落叶松胚状体的萌发能力,优化日本落叶松良种繁育技术。[方法]本研究根据子叶数量和胚轴形态,对胚状体进行分类,并分别统计其萌发率;利用“滤纸容器法”对类型Ⅰ胚状体进行干化处理,统计其萌发情况。[结果]胚状体分为10种类型。类型Ⅰ胚状体萌发率为4.48%,其余类型胚状体难以萌发。干化处理14 d后,类型Ⅰ胚状体萌发率提高到69.43%,且具有干化响应的胚状体更易萌发。[结论]本研究表明日本落叶松胚状体干化处理后萌发率明显提高,为该物种良种繁育提供依据。

烟草未授粉子房离体培养诱导胚状体的影响因素研究

源于未授粉子房的雌性单倍体在烟草育种利用价值上优于源于花药或小孢子的雄性单倍体,开展烟草未授粉子房的离体培养对烟草单倍体育种具有重要意义。为了建立未授粉子房离体培养技术体系,分别以不同的杂种F1代为试材,采用HW培养基探讨了消毒方法、接种方式、接种密度、无机盐浓度、外源激素配比和琼脂浓度6个关键因素对胚状体诱导的影响。结果表明:花蕾不需剥开花瓣而直接放入0.1%升汞中浸泡8 min,剥开子房壁并横切子房后接种,每个125 mL三角瓶中接种2块子房,培养基中无机盐浓度额外增加60%、附加IAA 0.5 mg/L和6-BA 2 mg/L或者附加KT 2.0 mg/L和2,4-D 0.5 mg/L、琼脂浓度9 g/L有助于对胚状体的诱导。据此进一步完善了烟草未授粉子房离体培养过程中的技术参数。

蝴蝶兰叶片离体培养胚状体的发生及组织学观察

以蝴蝶兰试管苗幼叶为外植体,以1/2MS为基本培养基,研究了不同浓度6-苄基腺嘌呤(6-BA)、腺嘌呤硫酸盐(Ad)、萘乙酸(NAA)及其组合对胚状体发生的影响,同时也探讨了蔗糖浓度及椰汁添加量对胚状体形成的影响。结果表明:细胞分裂素6-BA对胚状体的诱导效果较Ad好,NAA与二者配合使用可提高胚状体的发生率,其最佳浓度组合为6-BA4.0mg/L+Ad2.0～4.0mg/L+NAA1.0～2.0mg/L。蔗糖20～40g/L+椰汁200mL/L有利于胚状体的形成。组织学观察表明,胚状体起源于叶片气孔附近的上表皮细胞或上表皮下方的叶肉组织细胞,为单细胞起源,其发育过程与一般植物胚状体发生发育特征相似,最终发育成为类原球茎。

秋水仙碱及热击与低温诱导对油菜小孢子胚状体成苗率的影响

甘蓝型冬油菜 F1 杂种分离小孢子直接用 5 0 0 mg/ L秋水仙碱处理 15 h,在 NL N - 13培养液中培养 ,并于 32℃和30℃分别热击暗培养 3d和 7d后转入 2 4℃下培养 ,胚胎发生好 ,5周后产生大量正常胚体。将这些发育优异的胚体移入固体 MS培养基后即进行 10 d低温诱导 (2℃ ) ,常温 (2 4℃ )光下培养能很好地萌发并直接、快速地再生植株 ,其萌发胚率和成苗率分别达到 89.3%和 86 .7%与 6 2 .5 %和 5 5 .4 %。

朱顶红离体培养快速繁殖体系及胚状体发生

以朱顶红鳞茎基部鳞片为外植体 ,在MS +NAA 1mg/L +BA 2mg/L培养基上愈伤组织的诱导频率最高 ,为 93 .3 % ,愈伤组织上可以直接生芽 ,生芽频率为 90 .0 %。NAA的诱导效果优于 2 ,4 D ,BA优于KT。愈靠近鳞茎基部愈容易诱导产生愈伤组织和不定芽。愈伤组织继代培养 4次后有胚状体产生。诱导产生的不定芽和胚状体在MS0培养基上可以 1 0 0 %生根。生根后的再生植株移栽到蛭石中 ,浇MS无机盐营养液 ,成活率达 98%以上。不生根直接将不定芽移栽到消毒蛭石中 ,成活率为 85 %以上。

丽格海棠叶片培养胚状体发生和植株再生

利用丽格海棠盆栽植株叶片培养 ,成功地诱导出胚状体并获得再生植株。具体步骤如下 :Ⅰ .在MS +BA 1mg/L +NAA 4mg/L + 2 ,4 D 1mg/L培养基上预诱导 10d ;Ⅱ .在MS +BA 1mg/L培养基上胚性细胞发生胚状体 ;Ⅲ .在MS +IBA 0 .5mg/L培养基上小植株生根。组织切片观察表明 。

甘蓝游离小孢子培养中影响胚状体形成的主要因素

以甘蓝的19个基因型为试材,对影响甘蓝游离小孢子培养诱导胚状体形成的3个主要因素进行了研究。结果表明:供体植株基因型是影响小孢子发生胚状体的关键因素,不同材料之间的诱导频率差异显著;两种激素以不添加6-BA和NAA或只添加6-BA 0.05 mg/L为甘蓝游离小孢子培养的最适激素浓度;高温处理能显著提高小孢子培养的出胚率,供试材料经33℃热激处理后出胚率最高,出胚率高达6.10胚/蕾。

香蕉通过胚状体途径的快速繁殖研究

香蕉花序在含BA0.5毫克/升+NAA0.5毫克/升+2,4-D2.0毫克/升的MS培养基上,雄花可以直接发生胚状体,诱导率为15％左右,花序轴和花苞片则先诱导出愈伤组织,然后分化胚状体。胚状体在含BA3.0毫克/升+NAA0.2毫克/升的MS培养基中同时处于黑暗培养,产生次级胚状体频率达90％以上,分化再生植株频率比光培养提高34.5％,降低培养基离子、激素、碳源浓度,可以加速再生植株成苗。移栽大田种植观察表明,不影响产量的小变异在2％以下。

银杏胚轴、子叶诱导胚状体发生及成苗的研究

Embryonic axis and cotyledon of immature and mature embryos were induced as explants for embryogenesis in Ginkgo biloba. Results showed somatic embryos could be induced only through embryonic axis and cotyledon of immature embryos. MK + NAA 1 mg·L -1 + 6_BA 1 mg·L -1 was the best medium for somatic embryogenesis from embryonic axis, and somatic embryogenesis rate was 45.28%. MK + NAA 1.5 mg·L -1 + 6_BA 1 mg·L -1 was the best medium for somatic embryogenesis from cotyledon, and somatic embryogenesis rate was 12.9%. The growth and development of somatic embryos were promoted by adding 10% coconut milk into MK, and 34.48% somatic embryos could develop into plants.

芦笋花药培养胚状体诱导条件优化的初探

为建立一种效率较高的芦笋花药培养诱导胚状体的机制,实验以TH IELIM F1为试材,利用正交实验设计L16(45)探讨以MS为基本培养基附加NAA、6-BA、2,4-D、蔗糖、谷氨酰胺等五种因素对芦笋花药培养诱导胚状体的影响。结果表明:NAA是影响芦笋花药培养中诱导胚状体的主要因素,其次是6-BA、蔗糖,而2,4-D、谷氨酰胺的影响较弱。芦笋花药培养诱导胚状体的最优组合是0.01 mg/L NAA、2.0 mg/L 6-BA、1.0 mg/L 2,4-D、50 g/L蔗糖、0 mg/L谷氨酰胺。

甘蔗茎尖胚状体脱毒苗快繁技术研究

以茎尖为供体诱导胚状体分化成苗,完善与改进甘蔗脱毒健康种苗生产技术。以甘蔗新台糖22号为材料,比较茎尖胚状体、茎尖与腋芽3种分化成苗繁育方法在不同时期接种、不同激素水平下的组培苗增殖速度、苗素质及脱毒效果。结果表明,组培苗繁殖速度以茎尖胚状体分化苗最快,增殖5代后扩繁2 589倍,茎尖297倍,腋芽104倍,培养基以6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.01～0.1 mg/L增殖效果最好;组培苗质量与繁殖速度相反。本试验中出现不正常生长的苗有白化苗、细弱小苗、玻璃化苗、疯长苗等4种,茎尖胚状体苗发生率1.77%,茎尖苗1.56%,腋芽苗0.31%;不同处理间组培苗生根及移栽成活率差异不显著,生根率茎尖胚状体苗75.3%、茎尖苗76.9%、腋芽苗76.6%,移栽成活率茎尖胚状体苗94.8%、茎尖苗95.4%、腋芽苗95.1%,生根培养基以NAA 7.5 mg/L+ABA2.5 mg/L最好;去除甘蕉宿根矮化病(RSD)、花叶病方面,以茎尖胚状体苗最好,RSD去除率95%、花叶病去除率100%,茎尖苗RSD去除率70%、花叶病去除率75%,腋芽苗未能去除RSD、花叶病。说明应用茎尖胚性细胞再生植株,脱毒效果好,繁殖速度快,可克服目前脱毒苗生产中试管苗扩繁量小、成本高的难题。

茄子花药培养诱导胚状体成苗

以10个茄子F1为试材进行花药培养，通过对茄子花药培养过程中基因型、激素配比、预处理等条件进行研究，建立了茄子花药培养诱导胚状体成苗体系。研究表明，基因型对茄子花药培养胚状体的诱导影响很大，10个基因型中只有2个诱导出了胚状体。低温（5～6℃）处理2d是茄子花药培养诱导胚状体的最适低温预处理条件。其胚状体诱导的最适培养基是Ms＋2，4-D1．0mg／L＋KT1．0mg／L＋3％蔗糖。在无激素的1／2MS上生根获得完整再生植株。

长寿花胚性愈伤组织的诱导及胚状体再生

研究了长寿花胚性愈伤组织的筛选,胚状体的诱导发生、发育过程及植株再生。经过对外观及细胞学观察,看出外观质地疏松、颗粒状的淡黄色愈伤组织细胞圆形且形状规则,是胚性愈伤组织。诱导胚性愈伤组织的最适培养基为:MS+2,4-D 2 mg·L-1+BA 0.2 mg·L-1;胚状体的诱导培养基为MS+BA 2 mg·L-1+NAA 0.2 mg·L-1+活性炭4 g·L-1+蔗糖30 g·L-1,胚状体诱导率可达185个·g-1胚状体;胚状体的再生培养基为MS+蔗糖30 g·L-1。利用石蜡切片对胚状体的发生过程进行了观察。

植物胚状体发生过程中主要代谢产物变化动态研究进展

从植物胚状体形成过程中生理生化变化角度 ,综述了国内外尤其是近 2 0年来该方面的最新研究进展。重点论述了该过程中的碳水化合物含量、氨基酸、蛋白质、核酸、植物激素、酶活性等与胚状体的发生发育关系密切的主要代谢物质的动态变化及其对胚状体发生的影响。对胚状体形成过程中生理生化变化研究前景做了展望 。

低温诱导对组培川贝母胚状体成苗的影响

组培川贝母 (FritillariaCirrhosaD .Don)的胚状体经低温处理不同的时间 ,随后转入无激素的MS培养基中培养 ,发现低温处理 4 0d的胚状体成苗率最高 .对过氧化物酶的活性及其电泳图谱的研究发现 ,在低温处理及随后的培养过程中 ,过氧化物酶的活性、表达量及谱带数(特别是B区酶带 )已发生明显的变化 .C区酶带的出现 。

灵发素对三七胚状体发生及其成苗的影响

以MS为基本培养基 ,加入适量的 2 ,4 D和灵发素 (LFS) ,于暗处培养 ,三七茎段愈伤组织可诱导出胚状体 ,2～ 3个月内发生机率可达 90 %左右。MS +2 ,4 D 1 5mg/L +LFS 2mg/L于光下培养 ,约有 30 %以上的胚状体能发育成健壮的全苗。

几种影响羽衣甘蓝小孢子胚状体成苗的因素

羽衣甘蓝成熟小孢子胚转到固体培养基上可直接萌发成苗。成苗率与基因型、培养基成分和培养温度有关。MS+1.0%琼脂+3%蔗糖是适宜的成苗培养基;100MG·L-1活性炭对鱼雷形胚成苗起促进作用;10℃低温培养10D可提高成苗率。

不同因素对黄瓜未受精子房胚状体诱导的影响

以黄瓜未受精子房为试材,研究了激素种类、暗培养、温度等对启动雌核发育和胚状体诱导的影响,旨在探讨建立黄瓜未受精子房培养获得再生植株的技术体系。结果表明,未授精子房预培养阶段,25℃下暗培养1 d,启动雌核发育的反应率最高可达91.3%;TDZ浓度对启动雌核发育的影响与温度有关:相同TDZ浓度下,25℃比35℃更适合启动雌核发育;25℃条件下,启动雌核发育的最适TDZ浓度为0.02 mg/L,反应率可达90.1%;35℃热激处理中,启动雌核发育的最适TDZ浓度为0.06 mg/L,反应率为61.1%;胚状体诱导阶段,培养基中添加1.0 mg/L6-BA时,平均每子房产胚量最高,为10.53个。

蓝莓离体叶片胚状体高效发生及其组织学观察

以高灌蓝莓试管苗叶片为外植体、以改良WPM为基本培养基，研究了外源激素TDZ、ZT及其组合对离体叶片胚状体发生的影响，同时也探讨了蔗糖浓度、水解酪蛋白、椰汁等对胚状体发生、丛芽形成的影响。结果表明：不同浓度的外源激素TDZ、ZT及其组合对胚状体的发生频率、丛芽的形成和生长起重要作用；蔗糖浓度对胚状体的发生及丛芽的生长影响较大，而添加有机质则对胚状体的发生及丛芽的生长没有明显影响。适合高灌蓝莓叶片胚状体发生及成苗的培养基为WPM＋TDZ 0．04mg／L＋ZT 0．25～2．0mg／L＋蔗糖20～40g/L，而培养基WPM＋ZT 0．5—1．0mg／L＋蔗糖20g/L适合于丛芽继代生长。组织学观察表明，蓝莓叶片胚状体发生主要起源于叶上表皮细胞和部分叶肉细胞，可能为多细胞起源，历经多细胞原胚、原球胚、梨形胚、心形胚、子叶胚等发育阶段，并能直接发育成苗。