绵羊卵母细胞体外核成熟抑制及其对胚胎发育潜力的影响

本研究旨在探讨次黄嘌呤 +dbcAMP或IBMX +dbcAMP对绵羊卵母细胞体外成熟的可逆性抑制作用 ,以及这种抑制作用对卵母细胞胚胎发育潜力的影响。自绵羊卵巢分离卵丘 -卵母细胞复合物进行体外培养 ,培养基中分别加入或不加入上述抑制剂。培养 6h后各组取部分卵母细胞固定染色检查卵母细胞核成熟情况 ;将其余的卵母细胞分别移入无抑制剂的成熟培养基中继续培养 18h后 ,再次检查各组卵母细胞核成熟情况 ,并进行体外受精和胚胎培养。结果表明 :次黄嘌呤 +dbcAMP或IBMX +dbcAM都分别能使 6 0 %以上的绵羊卵母细胞抑制在GV期。这种抑制是可逆性的 ,去除抑制剂后卵母细胞能恢复减数分裂 ,并加快由GVBD到MⅡ的成熟过程。各处理组受精率、卵裂率和囊胚发育率与对照组相比无显著性差异 ,表明卵母细胞的胚胎发育潜力没有受损。上述物质对卵母细胞成熟的可逆性抑制可用于研究卵母细胞成熟及其胚胎发育潜力的调节机制。

IVF-ET中观察胚胎早期卵裂预测胚胎发育潜力的研究

目的：探讨通过观察胚胎早期卵裂预测胚胎发育潜力,以期得到较好的临床妊娠结局。方法：对117个IVF、IC-SI周期,1 169个胚胎在受精24~28h的早期卵裂及后期发育情况进行观察,并根据早期卵裂情况将胚胎分为早期卵裂组、未早期卵裂组和原核（PN）未消失组,最终结合早期卵裂,第2天（D2）、第3天（D3）胚胎评分等情况选择适合移植的胚胎进行移植,共移植102个周期。同时对优胚率、妊娠率、种植率等指标进行比较。结果：①早期卵裂组D3优胚率高于其它两组（P〈0.05）;②全部移植早期卵裂胚胎组和全部移植未早期卵裂胚胎组的生化妊娠率高于全部移植PN未消失胚胎组（P〈0.05）,但临床妊娠率差异无统计学意义（P〉0.05）;③移植2~3个优胚与移植1个优胚和1~2个非优胚的周期妊娠率和种植率差异无统计学意义（P〉0.05）,但都高于未移植优胚周期（P〈0.01）。结论：观察胚胎早期卵裂可有效预测胚胎发育潜力,有利于挑选适合移植的胚胎,从而获得较高的妊娠率,但对临床妊娠率的影响不明显,临床妊娠率主要取决于优胚率。

不同年龄不孕患者卵泡液游离DNA和血管内皮生长因子含量对胚胎发育潜力的影响分析

目的探讨卵泡液中游离DNA(cfDNA)、血管内皮生长因子(VEGF)含量在预测不孕患者胚胎体外培养发育潜力的价值。方法选取2018年12月~2020年4月在本院接受辅助生殖技术助孕的94例周期患者,收集患者取卵日的卵泡液,进行cf DNA、VEGF含量检测及收集患者胚胎发育质量数据,以年龄≥35岁为研究组(n=44)、年龄<35岁为对照组(n=50),进行统计分析。结果研究组卵泡液cf DNA含量明显高于对照组,差异有统计学意义(P <0.05);研究组卵泡液VEGF含量高于对照组,但差异无统计学意义(P> 0.05);研究组胚胎发育质量中继续培养囊胚形成率、优质囊胚率均明显低于对照组,差异有统计学意义(P <0.05);两组间正常受精率、可利用胚胎率、卵裂期优质胚胎率比较,差异无统计学意义(P> 0.05)。结论卵泡液cf DNA含量影响囊胚的形成及质量,对胚胎发育潜力有预测价值;卵泡液VEGF含量对胚胎发育潜力没有明显的影响。

不同冷冻保护剂和冷冻方法对小鼠胚胎发育的影响

目的评价不同冷冻保护剂和不同冷冻方法对小鼠2-细胞胚胎发育的影响。方法采用丙二醇(PROH)、乙烯乙二醇(EG)、二甲基亚砜(DMSO)和甘油(G)4种不同冷冻保护剂,慢速冷冻、Vit-Master玻璃化冷冻两种冷冻方式冷冻小鼠2-细胞胚胎,观察胚胎的成活率。结果采用慢速冷冻方式冷冻小鼠2-细胞胚胎时,以PROH为冷冻保护剂的胚胎成活率、囊胚形成率、囊胚孵出率显著高于以DMSO、G为冷冻保护剂的结果(P<0.05),而以DMSO、G、EG为冷冻保护剂的结果比较差异无显著性意义(P>0.05);采用Vit-Master玻璃化冷冻方式冷冻小鼠2-细胞胚胎时,以EG为冷冻保护剂的胚胎成活率、囊胚形成率、囊胚孵出率显著高于以PROH、DMSO、G为冷冻保护剂的结果(P<0.05),而以PROH、DMSO、G为冷冻保护剂的结果比较差异无显著性意义(P>0.05)。结论PROH是慢速冷冻小鼠2-细胞胚胎理想的冷冻保护剂;EG是Vit-Master玻璃化冷冻小鼠2-细胞理想的冷冻保护剂,有可能替代慢速冷冻法。